豫医无毛小鼠生殖及乳腺功能观察

目的：研究皮肤无毛对豫医无毛雌鼠的生殖、乳腺功能的影响。方法：将无毛雌性小鼠与正常小鼠交配，统计胎次，妊娠，胎产子数，离乳数，离乳率。并与有毛雌鼠比较。结果：无毛雌鼠卵巢发育正常，乳腺发育基本正常，但泌乳能力差异很大，功能正常的只有30％，与有毛雌鼠相比，无毛雌鼠妊娠率（23％－70％），胎产子数（5．3－6．8）、离乳数（0－1．5只）及离乳率均低（0－26％），幼鼠死亡率高（74．6％－100％）。结论：皮肤无毛导致无毛小鼠泌乳能力、生产繁殖能力降低。     

豫医无毛小鼠乳腺功能的初步研究

为研究豫医无毛小鼠中无毛雌鼠的乳腺功能 ,采用与正常雄鼠交配的方法 ,通过与有毛雌鼠比较 ,证明无毛雌鼠卵巢的发育是正常的 ,乳腺的发育基本正常 ,但乳腺的泌乳能力差异很大 ,功能正常的只有 30 % ,是幼鼠死亡率高的直接原因 ,同时 ,随着增龄 ,无毛雌鼠的妊娠率也随之下降     

豫医无毛小鼠无毛基因的比较生物学分析

目的:分析豫医无毛小鼠与其他物种间无毛基因组成的差异.方法:采用RT-PCR方法对豫医无毛小鼠无毛基因的cDNA序列进行克隆测序,并借助生物信息学分析技术对小鼠、大鼠、猴和人的无毛基因及其所编码的氨基酸序列进行比较生物学分析.结果:获得了豫医无毛小鼠无毛基因的全长4 014 bp的cDNA序列 (GenBank 登录号:AY547390).豫医无毛小鼠与国内外报道的2种小鼠、大鼠、猴、人等5种动物的核苷酸同源性分别为99.9%、99.7%、94.3%、 81.7%、 81.8%,氨基酸同源性分别是99.8%、99.7%、94.5%、79.8%、80.0%.结论:无毛基因是一个高度保守基因,不同物种间具有高度同源性.     

豫医无毛小鼠无毛基因部分DNA序列分析

目的：探讨豫医无毛小鼠的无毛基因突变情况.方法：采用PCR方法扩增豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列,并进行克隆测序,将测序结果与国外公布的小鼠、大鼠及人无毛基因的cDNA序列做同源性比较和分析,确定该鼠无毛基因的特异性.结果：克隆测序结果为一923 bp的片段,相当于Genbank上公布的小鼠无毛基因cDNA序列的3 150～3 565 bp位置,包含4个外显子（外显子13～16）及3个内含子（内含子13～15）;与本室以前所测昆明小鼠无毛基因部分DNA序列100%同源,其外显子部分共416 bp,可编码138个氨基酸,与国外公布的小鼠、大鼠、人的无毛基因核苷酸同源性分别为100%、95%、84%,氨基酸同源性分别为100%、97.8%、84%.结论：①克隆定序了豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列;②排除了豫医无毛小鼠无毛基因的突变发生于本段序列的可能;③无毛基因在哺乳动物体内同源性很高,应属保守基因,其蛋白质产物可能在一些基本的调节途径中起重要作用,推测豫医无毛小鼠的无毛基因可能也位于14号染色体.     

豫医无毛小鼠眼睑超微结构观察

胞内出现由染色质形成的新月形凋亡小体并伴有空泡.结论:YYHL眼睑的结构变化导致其视力下降;YYHL眼睑皮肤毛囊细胞凋亡是导致其眼睑无毛的主要原因.     

豫医无毛小鼠眼球组织学观察

目的:观察豫医无毛小鼠眼球组织学的结构,探讨豫医无毛小鼠视物能力差的原因.方法:取豫医无毛小鼠及昆明小鼠各5只,于室温(20～28 ℃)饲养,饲养期间观察2组小鼠眼睑、眼球外观,12周后采用颈椎脱臼法处死小鼠,取眼球组织进行HE染色观察.结果:豫医无毛小鼠仔鼠时期眼睑外观正常,12周龄时眼睑及皮肤有许多油脂黏附,头侧、眼睑及体侧出现皱纹和褶痕,眼睑松垂,眼球变混浊,视物能力、敏感性及行动性均降低.昆明小鼠饲养期间眼睑及眼球无明显变化.豫医无毛小鼠角膜、视网膜、睫状体组织学结构与昆明小鼠相比无明显差异.结论:豫医无毛小鼠眼球的组织学结构与昆明小鼠相同,其视物能力差可能是由眼睑松垂所致.     

豫医无毛小鼠无毛基因突变部位的定位和分析

目的:研究豫医无毛小鼠(YYHL)突变的分子机制.方法:对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对扩增片段克隆后测序,并与Mus muscnlus进行同源性分析.结果:共测出YYHL DNA序列1 824bp和昆明小鼠DNA序列1816 bp,其不同之处有27处,变异方式包括插入、缺失和点突变.其中在12外显子中有一无义突变(G→A),导致该部位由编码色氨酸的UGG转变为终止密码子UGA.结论:YYHL无毛性状的产生可能与基因组的变异有关.     

豫医无毛小鼠无毛基因DNA原位PCR检测

目的：探讨原位PCR技术对检测基因组变异的有效性。方法：应用原位PCR检测豫医无毛小鼠皮肤和脾的石蜡组织切片，并以健康昆明小鼠皮肤和脾的石蜡组织切片、PCR反应液不加Taq DNA聚合酶、不加引物和引物不带生物素作为对照。结果：豫医无毛小鼠皮肤和脾石蜡组织切片中检测到清晰的杂交信号，而且杂交信号位于细胞核内；4组对照均未出现杂交信号。结论：原位PCR在基因组变异检测方面实用、有效。     

豫医无毛小鼠无毛基因部分内含子突变研究

目的 研究豫医无毛小鼠突变的分子机制。方法 对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对二者扩增片段克隆后测序,对结果进行比较,以确定豫医无毛小鼠无毛基因的特异性程度。结果 本实验共测出豫医无毛小鼠DNA序列1746bp和昆明小鼠DNA序列1733bp,两者不同之处有32处,均位于内含子,突变形式包括插入、缺失和点突变。结论 无毛性状的产生可能与内含子中的插入、缺失和点突变有关。     

豫医无毛小鼠封闭群的生物学特性

目的：对培育的豫医无毛小鼠封闭群的生物学特性进行研究。方法：以昆明小鼠作对照,分别对不同日龄豫医无毛小鼠的体重、体长及脏器重进行测定。测交实验测定突变基因的类型。一般组织学方法研究其皮肤结构,并观察描述了无毛小鼠的脱毛规律。结果：无毛小鼠生长发育迟缓,寿命缩短,且皮肤组织学结构变化显著,突变基因经测交试验证实为常染色体上的单一隐性基因。结论：无毛小鼠有别于裸鼠和昆明小鼠,具有独特的生物学特性。     

豫医无毛小鼠与昆明小鼠部分血液生化特性的比较研究

目的：比较豫医无毛小鼠与昆明小鼠血液生化特性有无差异。方法：测定总蛋白（ＴＰ）、白蛋白（ＡＬ）、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、γ 谷氨酰转肽酶（γ ＧＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）均采用卫生部临床检验中心推荐的常规微量检测方法。结果：豫医无毛小鼠ＡＬ和ＡＬＴ测定值显著高于昆明小鼠（Ｐ＜００５）。结论：豫医无毛小鼠具有某些独特的生化特性。     

豫医无毛小鼠染色体G带核型分析

分析了豫医无毛小鼠的22个骨髓细胞G显带核型,并以正常昆明小鼠做对照,两小鼠G显带标本均能观察到显示大带和小带的两种带型细胞,根据其带型能区分各号染色体,两种小鼠大带带型基本相同。     

豫医无毛小鼠中期染色体标本中无毛基因的原位PCR检测

目的确立豫医无毛小鼠无毛基因的原位PCR荧光检测方法。方法应用原位PCR的方法对豫医无毛小鼠中期染色体标本的无毛基因进行检测，并设立PCR反应液中无Taq DNA聚合酶、无引物、无bIo-11—dU/TP等进行多组对照。结果染色体标本上出现1—2个黄绿色的扩增信号，而对照组则无。结论本实验为以后进行该基因的精确染色体定位打下了良好基础。     

豫医无毛小鼠末梢血T淋巴细胞酯酶染色法的观察

目的：观察豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚群与正常昆明小明鼠有无差异。方法：用α醋酸萘酯酶法（ＡＮＡＥ）对豫医无毛小鼠进行了末梢血Ｔ淋巴细胞及其亚群的观察。结果：１月龄和２月龄豫医无毛小鼠Ｔ淋巴细胞总数和Ｔ抑制细胞数无显著差异，Ｔ辅助细胞数高于正常昆明小鼠，但６月龄无毛小鼠与正常昆明小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚群无明显差异。结论：豫医无毛小鼠６月龄后Ｔ淋巴细胞及其亚群趋于正常，与正常昆明小鼠无显著差异。     

血清标志物在肝纤维化诊断及病情进展监测中的意义

目的进一步探讨肝纤维化进展与血清标志物水平变化的相关性。方法应用放射免疫、生化和化学发光的方法检测30例正常人和60例肝纤维化患者血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV-C型胶原(IV-C)、Ⅲ型前胶原(PCIII)、肝胆酸(CG)、脯氨酸肽酶(PLD)、单胺氧化酶(MAO)、Ⅰ型前胶原羧端肽原(PICP)八项标志物的水平。结果轻度肝纤维化患者血清HA、IV-C、PCIII、CG的水平明显高于正常人(P<0.01),中度肝纤维化患者血清HA、LN、IV-C、PCⅢ、CG、PICP的水平明显高于正常人(P<0.01),重度肝纤维化患者血清HA、LN、IV-C、PCⅢ、CG、PLD、MAO、PICP的水平都显著高于正常人(P<0.01)。结论血清HA、LN、IV-C、PCⅢ、CG、PLD、MAO、PICP八项指标的联合检测在肝纤维化的诊断中有一定的应用价值,对监测纤维化进展有重要的价值。不同肝纤维化程度与血清这八项标志物均有一定的相关性,但八项血清标志物作为肝纤维化的诊断标准进而取代肝穿病理组织检查的“金标准”有待进一步研究。     

小鼠原位肝移植模型的建立

目的　建立小鼠原位肝移植模型 ,探讨建模中的手术技巧。方法　采用同系C5 7BL雄性小鼠 ,双袖套法建立小鼠原位肝移植模型 ,共完成 4 0例。结果　手术成功率达到 85 % ,受体长期存活率 (>10 0d)约为 70 % ,移植肝功能保持良好。结论　该模型制作手术成功率高 ,是一种理想的肝移植实验研究模型。     

生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响

目的:观察生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响。方法:复制小鼠中毒性肝纤维化模型,生三七粉灌胃6周,检测全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等血液流变学参数,并行肝脏病理组织切片检测。结果:与空白对照组比较,肝纤维化模型组小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显增高(P<0.05,P<0.01),生三七治疗后小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显降低(P<0.05,P<0.01);肝脏病理组织切片显示使用生三七后,肝纤维化程度有明显改善。结论:生三七可降低血液粘度,延缓肝纤维化的发展。     

慢性肝炎肝纤维化血清学指标与肝穿刺病理的关系

目的 探讨慢性肝炎肝纤维化血清学指标与病理之间的关系。方法 收集423例慢性肝病患者肝穿刺标本,同时检测血清学纤维化指标（PⅢP,CⅣ和HA）水平。结果 231例慢性肝炎的病理标本的炎症活动度分级（Grade）与纤维化程度分期（Stage）基本相对应;血清PⅢP、CⅣ和HA水平随着肝内纤维化程度的加重而递增,且与纤维化程度呈正相关,将三者综合考虑,则敏感性和特异性分别为88．7％和71．4％。血清PⅢP、CⅣ和HA水平与病理分级也表现为正相关。3项指标在12例肝硬化患者中均高于S4组,但仅HA一项有显著性差异（P＜0．05）。结论 血清PⅢP、CⅣ和HA水平均是反映肝脏纤维化程度的良好指标,有较好的诊断价值,三者联合检测更能准确地判断肝纤维化。炎症与纤维化及血清学指标密切相关,提示炎症可能有促进纤维化的作用。     

蛇床子素对小鼠酒精性脂肪肝的治疗作用

目的观察蛇床子素对小鼠酒精性脂肪肝的治疗作用并初步探讨其作用机制。方法建立小鼠酒精性脂肪肝模型后,分别以蛇床子素不同剂量（10～40 mg/kg）给予治疗6周,然而测定小鼠血脂、肝脂及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）含量,同时观察肝脏的病理变化。结果经蛇床子素处理过的小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）水平和肝组织中TC、TG和MDA的含量明显低于模型组（P〈0.05或0.01）,同时肝组织中的SOD含量明显高于模型组（P〈0.05或0.01）。肝组织形态学评估表明,蛇床子素显著减少了肝脂质的沉积。结论蛇床子素对小鼠酒精性脂肪肝有较好的治疗作用,其作用机制可能与其增加机体的抗氧化能力有关。