人心肌肌凝蛋白轻链的提纯及其抗体的制备

从人心肌中提纯的肌凝蛋白轻链(myosin-light chain,M-LC),SDS聚丙烯酰胺凝胶电脉呈三条蛋白带。经DEAE-纤维素柱层析出现三个峰。免疫白兔产生的抗血清,琼脂双扩散鉴定有一条沉淀线;亲和层析,用盐酸胍解离下一个抗体蛋白峰。     

抗人心肌肌凝蛋白轻链Ⅰ单克隆抗体的制备和鉴定

以人心肌肌凝蛋白轻链I免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与NS-1细胞融合,经过筛选、克隆化和再克隆已获得3-D_3、2-D_9、1-E_(10)和2-E_(10)等4个分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经免疫酶标和放免方法测定抗体工作滴度为1:1万。流动式荧光密度计检测NS-1、小鼠脾和杂交瘤细胞DNA的含量,结果表明杂交瘤细胞的DNA含量相当于NS-1和小鼠脾细胞DNA含量之和。杂文瘤细胞传代半年以上稳定地分泌特异性的单克隆抗体。用两个单抗进行了抗原双决定簇的放免測定,并制备了高效价的小鼠腹水。     

心肌肌凝蛋白轻链—1的免疫组化研究

为了研究心肌肌凝蛋白轻链－１（ＣＭＬＣ－１）组织特异性的特点，并对其构型在心肌发育过程中的表达规律以及不同哺乳动物ＣＭＬＣ－１构型的生化规律进行探讨，应用抗人心室肌ＣＭＬＣ－１，单克隆抗体（ＭｃＡＢ）对成人和不同胎龄胎儿的心肌和其它组织，不同种属哺乳动物的心肌进行了免疫组织化学研究。结果发现：成人心室肌，慢性骨骼肌均发生强烈反应，成人心房，胎儿心室肌发生交叉反应，而其它组织加快骨骼肌，平滑肌以及肌     

梗塞心肌摄取锝标抗心肌肌凝蛋白轻链mAb 99Tcm-AMLCA的影响因素

目的: 探讨注射锝标抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体(99Tcm-AMLCA)后不同时间,梗死时间和梗死区域对大鼠梗死心肌摄取99Tcm-AMLCA的影响. 方法: 大鼠静脉注射99Tcm-AMLCA 7.4 MBq,观察不同注射时间(2, 4, 8, 24 h),不同梗死时间(心梗后6, 12 h, 1～14 d)和不同梗死区域(梗死中央、周边的内层心肌和外层心肌)对梗死心肌/正常心肌发射性比的影响. 结果: 注射后2 h梗死心肌开始摄取99Tcm-AMLCA,梗死心肌/正常心肌发射性比是1.67±0.96, 4～8 h摄取逐渐增加,24 h达到高峰,梗死心肌/正常心肌发射性比是4.38±0.80. 心肌梗死后6 h～14 d,梗死心肌均有很强的99Tcm-AMLCA摄取,心梗后5 d摄取最强,梗死心肌/正常心肌发射性比是3.82±0.67;梗死中央区内层心肌的放射性摄取比值是4.52±0.60,外层心肌是3.32±0.58两者具有统计学显著意义(P<0.01). 结论: 急性心肌梗死大鼠梗死心肌特异性地摄取99Tcm-AMLCA迅速持久,不受心梗时间影响,梗死中央区内层心肌摄取最强,为99Tcm-AMLCA亲梗死心肌显像临床应用提供了实验依据.     

心肌肌凝蛋白轻链—1与其血清浓度检测的临床意义

心肌肌凝蛋白轻链－１与其血清浓度检测的临床意义武强综述李小鹰审校关键词心肌梗塞；心肌肌凝蛋白；综述中国图书资料分类法分类号Ｒ５４２．２心血管疾病如心肌梗死（ＡＭＩ）等严重威胁人类的健康和生命。人们一直探寻判断心肌细胞损伤灵敏特异的诊断指标。近年来，心...     

心肌肌凝蛋白轻链－1与心功能调节

心肌肌凝蛋白轻链─１与心功能调节武强综述李小鹰审校关键词心脏疾病；心肌肌凝蛋白；心功能；综述中国图书资料分类法分类号Ｒ３６３．２１心功能调节的分子生物学是通过改变基因表达的调节机制，引起心肌蛋白质量和数量的改变，这是心肌细胞对心脏构型的不均一性和心肌...     

抗人心肌肌凝蛋白单克隆抗体亲梗死心肌显像的临床应用

抗人心肌肌凝蛋白单克隆抗体亲梗死心肌显像的临床应用武强综述李小鹰审校关键词心肌肌凝蛋白；单克隆抗体；心脏疾病；综述中国图书资料分类法分类号Ｒ５４１随着溶栓治疗和经皮腔内血管成形术（ＰＴＣＡ）在急性心肌梗死治疗中的广泛应用，判断不可逆损伤心肌的方法越来...     

心肌肌凝蛋白重链和心力衰竭关系的研究进展

对心肌肌凝蛋白的理化特性以及与心力衰竭发生有关的几种心血管疾病的关系进行综述并阐明心肌肌凝蛋白参与心力衰竭的发生,可作为预测早期心力衰竭发生的指标。     

心肌肌球蛋白轻链的双相非竞争性ELISA吸附分析及其临床初步应用

应用特异抗体建立了人心肌肌球蛋白轻链的双相非竞争性酶联免疫吸附分析。该法灵敏度为0.lng/孔,批内及批间变异系数分别为2.7％～9.2％和3.7％～19.1％,回收率近100％(高剂量组10ng/孔),工作范围0.1～10ng/孔。用该法检测了11例急性心肌梗塞病人入院后2周的血清样品,并调查了20例正常健康人血清样品,结果所有急性心梗病人血清样品在一定时间内心肌肌球蛋白轻链水平增高。大多数病人(9例)初次升高后1～2d达正常水平,以后又升高5～9d。轻链高峰在入院后第2.2±1,2d(第一峰)和7.1±1.9d(第二峰)出现,峰值分别是45.7±33.5ng/ml和62.2±32.9ng/ml,高水平肌球蛋白轻链在病人血中保持11±3.4d。然而,在健康人血清中未见有可测量的轻链存在。     

人心肌肌球蛋白的提取、纯化轻链成份的制备及其理化性质

采用比较简便、有效的提取方法,从150g人心肌中得到660mg肌球蛋白粗品,经DEAE-Sephadex A-50纯化后得到纯肌球蛋白320mg,比活力达5.05u/mg蛋白,酶活力回收36％。进一步以纯肌球蛋白制得电泳纯的心肌肌球蛋白轻链,并以之免疫新西兰兔而获得抗人心肌肌球蛋白轻链的抗血清。抗血清具有较好的特异性,亲和常数为1.16×10~9M~(-1);当稀释度为1:2000时,可用于酶联免疫吸附分析。此外,还测定了心肌肌球蛋白及其轻链成份的理化特性和酶反应动力学特征。     

人心肌肌球蛋白轻链的提取、纯化和电泳分析

用一种简便有效的方法，从１３０ｇ成人心室肌中先提职心肌肌球蛋白纯品３１８ｍｇ，再从中进一步分离和纯化得到肌球蛋白轻链１８ｍｇ。纯化肌球蛋白轻链的核酸含量＜０．０１％，基本不含有肌动蛋白、原肌球蛋白、肌钙蛋白及其它蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，人肌球蛋白轻链１和轻链２的分子量为２４ｋＤ和２０ｋＤ。纯化猪心肌球蛋白的Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性为０．４６μｍｏｌＰｉ／ｍｇ／ｍｉｎ，其分离后的轻链亚基则无此活性。本文对人和猪的心室肌肌球蛋白轻链的电泳行为进行了分析。     

心肌急性损伤肌球蛋白轻链激酶酶促反应动力学研究

以内毒素休克狗作为急性心肌损害的动物模型，从心肌中提纯肌球蛋白轻链（ＭＬＣ）和肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ），根据酶动力学分析法研究急性损害对ＭＬＣＫ活性的影响。结果发现在此种状态下狗心肌ＭＬＣＫ活性显著降低，推测ＭＬＣＫ活性降低导致可磷酸化轻链（ＰＬＣ）磷酸化的磷酸酶相对占优势，磷酸化型Ｐ－ＬＣ向去磷酸化型转变。     

肌球蛋白轻链激酶和肌球蛋白轻链9基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究肌球蛋白轻链激酶（MYLK）及肌球蛋白轻链9（MYL9）在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达情况及其与NSCLC临床特征的关系。方法采用荧光定量PCR方法检测60例NSCLC组织、癌旁组织和60例正常肺组织中MYLK mRNA和MYL9 mRNA的表达情况,并分析癌组织MYLK mRNA及MYL9 mRNA表达值与临床分期的相关性。结果 MYLK mRNA、MYL9 mRNA在癌组织中的表达量明显低于癌旁组织及正常肺组织（P均〈0.05）,癌旁组织和正常肺组织中MYLK mRNA、MYL9 mRNA表达量无统计学差异（P均〉0.05）。在癌症患者中,淋巴结转移组MYLK mRNA及MYL9 mRNA的相对表达量比无淋巴结转移组高（P〈0.05）。腺癌组织与鳞癌组织MYLK mRNA及MYL9 mRNA的相对表达量无统计学差异（P〈0.05）。MYLK mRNA与MYL9 mRNA的表达呈正相关（P〈0.001）,MYLK mRNA及MYL9 mRNA表达与肿瘤临床分期呈正相关（P〈0.05）。结论 NSCLC组织中MYLK mRNA和MYL9 mRNA表达均明显低于癌旁组织及正常组织,MYLK mRNA及MYL9 mRNA的表达与临床分期呈正相关。     

模拟失重影响大鼠比目鱼肌梭内外肌纤维肌球蛋白重链的表达

【目的】探讨模拟失重条件下大鼠比目鱼肌梭外肌纤维和梭内肌纤维肌球蛋白重链表达的变化。【方法】采用免疫组织化学技术 ,检测模拟失重条件下大鼠比目鱼肌梭内肌纤维及梭外外肌纤维对单克隆抗体NOQ7.5 .4.D和MY32的免疫反应性。【结果】经历模拟失重的大鼠比目鱼肌Ⅰ型纤维 (对NOQ7.5 .4.D呈阳性反应 )的构成比减少 ,Ⅱ型纤维 (对抗体MY32呈阳性反应 )的构成比增加。模拟失重 3d ,7d ,14d ,30d组Ⅰ型肌纤维分别占 86 96 % ,84 91% (P <0 0 1) ,6 9 14%(P <0 0 1) ,6 6 0 7% (P <0 0 1) ;Ⅱ型纤维分别占 16 14% ,18 2 1% (P <0 0 1) ,31 0 8% (P <0 0 1) ,32 15 % (P <0 0 1)。核袋纤维对NOQ7.5 .4.D的免疫反应性增强 ,核链纤维无改变 ,呈阴性反应 ;核袋纤维对MY32的免疫反应性减弱 ,核链纤维对MY32的反应增强。【结论】模拟失重除影响肌梭外肌纤维MHC的表达、引起肌纤维类型转换外 ,还导致梭内肌纤维MHC表达表型发生改变。     

血清Kappa与Lambda轻链的检测在恶性肿瘤中的表达

目的探讨血清中Kappa和Lambda轻链在恶性肿瘤患者中的表达情况。方法采用免疫比浊法对80例恶性肿瘤患者和20例健康体检者血清中Kappa和Lambda轻链进行检测。结果肝癌组患者血清中κ和λ值均显著高于健康对照组,且差异有统计学意义(P0.01);而κ/λ比值与健康对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。胃癌、肺癌、乳腺癌、食道癌、大肠癌组患者血清中κ、λ、κ/λ比值分别与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论血清中Kappa和Lambda轻链的测定,可作为原发性肝癌的诊断指标和对患者免疫功能的监测。     

肌球蛋白轻链激酶抑制剂的临床应用前景

目的：探索肌球蛋白轻链激酶（ ＭＬＣＫ） 抑制剂的作用机制及其与临床某些疾病的关系。方法：综述了国内外近年来对ＭＬＣＫ及其抑制剂的研究情况。结果：ＭＬＣＫ的活性与某些临床疾病的发生密切相关，而广泛存在多种植物中的ＭＬＣＫ抑制剂抑制ＭＬＣＫ的活性，具有抗癌，抗病等多种生理功能。结论：ＭＬＣＫ抑制剂的研究从一个方面揭示了某些药物的作用机理，将对体外筛选此类化合物提供一种有用的研究途径。     

肌球蛋白轻链的调节及其对肿瘤细胞增殖、转移的影响

肌球蛋白作为一种超家族蛋白质,是细胞骨架的重要组成部分,通过各种调节因子对其轻链磷酸化和去磷酸化的调节,参与了几乎所有的细胞生理、病理过程,尤其在肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移中发挥重要作用。到目前为止,肿瘤的发生、发展机制还不是十分清晰,对肌球蛋白轻链的调节及其与肿瘤相关性的研究,将有助于阐明肿瘤的发生、发展机制,为肿瘤的靶向治疗提供依据。     

四种小檗胺衍生物对钙调素诱导的肌球蛋白轻链激酶的抑制作用

本文叙述了肌球蛋白(MLC)及其激酶(MLCK)与磷酸二酯酶(PDE)的制备。以已知的CaM拮抗剂三氟啦嗪(TFP)为对照,检测了小檗胺(E_0)及其衍生物(E_1、E_5、E_6)对MLCK和PDE活力的影响。结果TFP和E_0及其衍生物E_1、E_5、E_6对CaM诱导的MLCK活力抑制的IC_(50)值分别为34,40(抑制25%),99,19和8μmol/L,对PDE抑制的IC_(50)值依次为2.8,9.8,8.0,0.8和0.53μmol/L。E_0经结构衍生化后,化合物E_6对二酶均有明显的抑制作用,且各化合物抑制强度有平行关系。