以咖啡因为代谢探针测定细胞色素P450 CYP2A6活性

细胞色素P450CYP2A6（CYP2A6）是体内重要的药物代谢酶之一，主要在肝脏表达，约占肝脏细胞色素P450酶的5％。CYP2A6参与抗肿瘤药（环磷酰胺和异环磷酰胺）、麻醉药（氟烷和甲氧氟烷）、前致癌物（黄曲霉素B1、亚硝胺盐等）、环境化合物（汽油醚）及烟草中尼古丁的代谢。CYP2A6活性与这些物质的疗效或毒性以及一些肿瘤的易感性密切相关，测定CY1Y2A6活性有助于预测药物疗效、预防药物毒副反应及肿瘤病因调查。     

银杏叶片对人药物代谢酶CYP2A6、XO和NAT2活性的影响

目的探讨银杏叶片对人肝脏药物代谢酶CYP2A6、XO和NAT2活性的影响,预测银杏叶片与常用药物的相互作用,指导临床合理用药.方法以咖啡因作为药物代谢酶CYP2A6、XO和NAT2的探针药物,以反相高效液相梯度洗脱法测定30名受试者服用银杏叶前后人尿液内咖啡因5种主要代谢物的相对含量,采用代谢物的比率分别评价人肝脏药物代谢酶CYP2A6、XO和NAT2活性的变化.结果受试者服药前CYP2A6、XO和NAT2平均活性为0.227±0.076、0.723±0.060和0.447±0.172;服用银杏叶片28d后CYP2A6、XO和NAT2平均活性为0.227±0.072、0.728±0.074和0.391±0.147;服药前后酶CYP2A6、XO的活性无显著性差异,酶NAT2的活性有显著性差异.结论银杏叶片可能不会影响其他经CYP2A6、XO酶代谢的药物临床疗效,但是可以影响与之合用经NAT2代谢的药物临床疗效.     

测定咖啡因代谢物评价 N-乙酰转移酶、CYP1A2和黄嘌呤氧化酶活性

目的是对中国人N-乙酰化酶(NAT2)、CYP1A2酶和黄嘌呤氧化酶(XO)的活性进行分析。120名健康志愿者饮用3杯咖啡后于4～5h留尿,用HPLC方法测定尿中5种咖啡因主要代谢物浓度,即5-乙酰胺基-6-甲酰胺基-3-甲基尿嘧啶(AFMU)、1-甲基黄嘌呤(1X)、1-甲基尿酸(1U)、1,7-二甲基尿酸(17X)、1,7-二甲基黄嘌呤(17U)。其中N-乙酰化酶活性用AFMU/1X或AFMU/(AFMU+1X+1U)表示;CYP1A2酶活性指标采用(AFMU+1X+1U)/17X或AFMU+1X+1U)/17U;XO酶活性指标采用1U/1X或1U/(1X+1U)。结果表明,N-乙酰化酶活性呈两态分布,慢代谢者占16.7%,CYP1A2和XO酶活性呈对数正态分布,其代谢比值与国外文献报道一致。提示通过测定咖啡因代谢物比值,可以进行NAT2酶、CYP1A2酶和黄嘌呤氧化酶活性分析。     

泮托拉唑对人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2和XO活性影响的研究

目的:探讨泮托拉唑对人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2和XO活性的影响,预测泮托拉唑与常用药物的相互作用,指导临床医师合理用药。方法:以咖啡因作为药物代谢酶CYP1A2、NAT2和XO的探针药物,以反相高效液相梯度洗脱法测定30名受试者服用泮托拉唑前后人尿液内咖啡因5种主要代谢产物的相对含量,采用代谢物的比率分别评价人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2和XO活性的变化。结果:受试者用药前CYP1A2、NAT2和XO平均活性为3.37±1.22、0.50±0.09、0.49±0.09;服用泮托拉唑7 d后CYP1A2、NAT2和XO平均活性为3.50±1.23、0.48±0.12、0.48±0.13;服药前后3种酶活性没有显著性差异(P>0.05)。结论:泮托拉唑对人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2和XO活性无明显影响,泮托拉唑可能不会影响与之合用的需经CYP1A2、NAT2和XO代谢的药物临床疗效。     

咖啡因5种主要代谢物的反相高效液相色谱法测定

为保证应用咖啡因代谢探针的正确性,建立了反相高效液相色谱测定尿中咖啡因代谢物的方法。采用日本岛津 Shim Pack CLC-ODS柱(5μm),以甲醇—乙腈—0.05%醋酸(12∶1∶87)为流动相,咖啡因和它的13种代谢物及内标均能良好分离。重点对其中5个主要代谢物AFMU,1U,1X,17U,17X进行了测定。结果表明这5种代谢物回收率均在87%以上,日内和日间误差均小于3%,显示了方法的稳定性。并对120例志愿者尿中5种主要代谢物浓度进行了测定,为进一步评价多种药物代谢酶活性创造条件。     

银杏叶片对人药物代谢酶CYP1A2与NAT2活性的影响

（1. ［摘要］目的探讨银杏叶片对人肝脏药物代谢酶CYP1A2和N 乙酰基转移酶（NAT2）活性的影响,预测银杏叶片与常用药物的相互作用,指导临床合理用药。方法以咖啡因作为药物代谢酶CYP1A2、NAT2的探针药物,以反相高效液相梯度洗脱法测定30例受试者服用银杏叶前后尿液内咖啡因5种主要代谢物的相对含量,采用代谢物的比值分别评价人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2活性的变化。结果受试者服药前CYP1A2、NAT2平均活性分别为2.976±1.428,0.447±0.172;服用银杏叶片28 d后CYP1A2、NAT2平均活性分别为3.021±1.318,0.391±0.147;服药前后CYP1A2的活性差异无显著性,NAT2的活性差异有显著性。结论银杏叶片对人药物代谢酶CYP1A2活性无明显影响,但是对NAT2的活性有明显影响;银杏叶片可能不会影响其他经CYP1A2酶代谢的药物临床疗效,但是可以影响与之合用经NAT2代谢的药物临床疗效。     

用咖啡因作探药,快速测定人体细胞色素P—450CYP1A2酶的活性

AIM: To develop a rapid HPLC method for the determination of cytochrome P-450 CYP1A2 activity. METHODS: A 300-microL plasma was prepared by extraction with 5-mL chloroform/isopropanol (9:1), and beta-hydroxyletheophylline was added as internal standard (IS). Samples were separated on an ODS column by a gradient elution system, of which mobile phase consisted of 0.05% acetic acid, acetonitrile, and methanol. The compounds of interest were monitored at 282 nm by UV detector. RESULTS: No potential interfering peaks were found. Paraxanthine (17X), IS and caffeine (137X) were rapidly eluted with baseline resolution, and their retention time was less than 13 min. The detection limits of both 17X and 137X were 0.1 mumol.L-1. Linear relations ranged over 1-100 mumol.L-1 and 1-200 mumol.L-1 with correlation coefficient of 0.9999 and 0.9987, respectively, for 17X and 137X. The coefficients of variation were within 6% for 17X, and 10% for 137X. The average recoveries for both compounds were ranged from 96% to 108%. CONCLUSION: This method is sensitive and rapid, and can be used for population studies of CYP1A2.     

咖啡因探针法测定正常人肝脏药物代谢酶CYP1A2活性

目的:建立咖啡因4种主要代谢物含量的测定方法,探讨咖啡因代谢物在药物代谢酶CYP1A2活性评价中的意义。方法:采用反相高效液相梯度洗脱法测定尿液内咖啡因代谢产物5—乙酰氨基—6—甲酰氨基—3—甲基尿酸(AFMU)、1—甲基尿酸(1U)、1—甲基黄嘌呤(1X)和1,7—二甲基尿酸(17U)的相对含量,计算代谢物比率(AFMU+1X+1U)/17U,绘制频数分布直方图,评价CYP1A2活性。结果:受试者代谢物比率平均值为4.27,呈正态分布。结论:本方法简便、准确、快速,适合于尿液中咖啡因代谢物的测定及CYP1A2活性的研究。     

高效液相色谱法测定尿中咖啡因主要代谢物浓度

本文建立了测定尿中咖啡因5种主要代谢物（AFMU、1X、1U、17X、17U）浓度的高效波相色谱法。尿样用硫酸铵饱和后加氯仿及异丙醇混合液（85：15）提取2次，空气流吹干，蒸馏水溶解进样。以ShimPackC18为固定相，甲醇-动腈-0．05％醋酸（10：1：89）为流动相，扑热息痛为内标，流速为1．2ml／min，在280um处定量检测。本法精确稳定可靠。用此方法测定了120名健康志愿者口服咖啡后的尿样，对人体内N-乙酰化转移酶和CYP1A2酶活性作了初步分析。     

高效液相色谱法测定力克舒中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量

目的 :建立力克舒胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的高效液相色谱测定方法。方法 :采用CLC ODSC18柱 ,甲醇 0 .0 5mol·L-1磷酸二氢钾溶液 三乙胺 (2 0∶80∶0 .2 ,磷酸调 pH3.2 )为流动相 ,检测波长 2 10nm ,流速为 1.0ml·min-1。结果 :对乙酰氨基酚线性范围为 2 4～ 2 40mg·L-1,平均回收率为 99.6 % ,RSD为 0 .8% (n =5 ) ;咖啡因线性范围为 2～ 16mg·L-1,平均回收率为 99.2 % ,RSD为 2 .2 % (n =5 )。结论 :方法简便 ,结果准确 ,可用于本制剂的含量测定和质量控制。     

高效液相色谱法测定痰咳净片中咖啡因的含量

目的 建立以高效液相色谱法测定痰咳净片中咖啡因的含量的方法.方法 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05 mol.L-1枸橼酸溶液-乙腈(79:21)(用三乙胺调节pH值至4.0)为流动相;检测波长为290 nm,进样量为20μl.结果 咖啡因浓度在50～600 mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为99.0%(RSD=1.1%,n=6).结论 本方法简单、快速、准确,稳定,重现性好.     

HPLC测定人血清中咖啡因浓度

目的 :建立了反相HPLC测定人血清中咖啡因浓度的方法。方法 :甲醇 水为流动相 ,茶碱为内标 ,紫外2 54nm处检测。结果 :线性范围 2 .5～ 4 0 μg/ml,日内RSD为 1 .2 8%～ 3.78% ,日间RSD为 2 .1 8%～ 3.56% ,方法平均回收率为 99.86% ,最低检测浓度为 1 0 0ng/ml。结论 :此法具有操作简便、省时、分离度好等特点 ,可用于咖啡因临床药动学和药效学研究     

白藜芦醇对小鼠实验性胃黏膜损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对小鼠实验性胃黏膜损伤的保护作用。方法制备小鼠无水乙醇型、阿司匹林型、吲哚美辛型胃黏膜损伤模型,测定胃黏膜损伤面积;测定血清中丙二醛和超氧化物歧化酶含量。结果白藜芦醇（25,50,100mg·kg^-1, ig）可剂量依赖性地抑制小鼠实验性胃黏膜损伤。白藜芦醇可使阿司匹林致小鼠胃黏膜损伤过程中血清中升高的丙二醛含量降低,可使降低的超氧化物歧化酶水平回升。结论白藜芦醇对小鼠实验性胃黏膜损伤具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

高效液相色谱法测定氨咖甘片中咖啡因及氨基比林的含量和溶出度

目的:建立同时测定氨咖甘片中咖啡因及氨基比林的含量和溶出度的高效液相色谱分析方法.方法:采用ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(45:55),检测波长285 nm,流速:1.0 mL·min-1.采用外标法分别测定咖啡因和氨基比林的含量及溶出度.结果:标准曲线的线性范围为咖啡因0.01～0.20 g·L-1,氨基比林0.06～0.95 g·L-1.加样回收率咖啡因为99.5%～100.7%,氨基比林为98.4%～100.0%.结论:本方法快速、可靠、简单、灵敏,适用于该制剂的质量分析检验.     

HPLC法测定茶中茶氨酸、茶碱与咖啡因的含量

目的建立测定茶中茶氨酸、茶碱与咖啡因含量的方法,并测定其在不同茶中的含量。方法茶叶采用水作为溶剂加热回流提取,采用高效液相色谱法及梯度洗脱法。结果①茶氨酸对照品在0.026 4～1.762 0mg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好(r=0.999 7);精密度的RSD值为0.98%(n=6);测得平均加样回收率为98.96%,RSD值为1.01%(n=5)。②茶碱对照品在0.014 3～0.954 0mg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8);精密度的RSD值为1.21%(n=6);测得平均加样回收率为98.43%,RSD值为0.74%(n=5)。③咖啡因对照品在0.077 6～5.168 0mg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6);精密度的RSD值为1.03%(n=6);测得平均加样回收率为99.43%,RSD值为0.91%(n=5)。④茶氨酸、茶碱与咖啡因含量(mg.g-1)范围分别为0.46%～12.70%,0.53%～32.78%和8.78%～24.12%,平均含量分别为6.08%,10.43%,19.04%。结论该方法简便易行,可用于茶叶的质量控制。