原发性肝癌患者介入治疗前后血清GPC3水平检测的临床价值

目的:了解原发性肝癌(hepatocellar carcinoma,HCC)介入治疗前后GPC3的浓度变化和临床价值.方法:采用ELISA法检测HCC、肝硬化、正常人血清GPC3浓度.结果:51例HCC患者、16例肝硬化患者、正常人组血清GPC3浓度分别为(3 939.72±2 801.92)、(619.08±542.80)和(534.24±500.20)pg/mL,前者与后二者比较差异有统计学意义(P<0.05),但其表达与血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)无显著相关性;32例HCC患者介入治疗后高转移复发倾向组血清GPC3浓度为(4 418.00±3941.96)pg/mL,低转移复发倾向组血清GPC3浓度为(534.44±910.56)pg/mL,二者比较差异有统计学意义(P<0.05);缓解组、稳定组、恶化组血清GPC3浓度分别为(571.64±288.72)、(2 521.76±2340.76)、(4 812.84 4-1 858.64)pg/mL,3组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:GPC3在HCC患者血清中的检出率高,特异性强,其表达与AFP无相关性,联合应用AFP及GPC3可提高诊断的灵敏度.GPC3与肿瘤复发转移、治疗效果有关.     

外周血γ-谷氨酰转移酶mRNA-H亚型与甲胎蛋白对原发性肝癌诊断及肝外转移意义的比较

目的　探讨外周血γ 谷氨酰转移酶 (GGT)mRNA H亚型及甲胎蛋白 (AFP)的表达与原发性肝癌 (HCC)诊断及肝外转移的关系。方法　以逆转录 聚合酶链反应方法检测HCC及对照组外周血GGTmRNA H亚型 ;运用放射免疫测定法检测外周血AFP水平。结果　 65例肝癌中 ,GGTmRNA H亚型阳性率为 46.2 %。小肝癌AFP阳性率 (3 0 .0 % )明显低于大肝癌 (75 .6% ) ;其余各组AFP阳性率无差异 (P >0 .0 5 ) ;有肝内转移 (82 .1% )、门静脉癌栓 (86.4% )及远处转移组(90 .0 % )其外周血GGTmRNA H亚型阳性率显著高于无肝内转移 (18.9% )、门脉癌栓 (2 5 .6% )及远处转移组 (3 8.2 % ) (P <0 .0 5 )。血清AFP值的高低与肝癌患者外周血GGTmRNA H的阳性率两者差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　检测HCC患者外周血细胞GGTmRNA H亚型表达对估计有无血行播散和远处转移有临床实用价值。对血清AFP值低或阴性患者进行周围血GGTmRNA H测定可以显著提高肝癌诊断的敏感性和特异性     

肝癌病人外周血及骨髓AFP mRNA的检测及意义

目的 通过检测AFP mRNA在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC)病人外周血和骨髓中的表达，探讨AFP mRNA作为HCC微转移指标的可能性。方法 建立敏感的巢式逆转录聚合酶链反应体系（Nested-RT-PCR)，检测71例HCC、36例肝硬化、9例肝血管瘤、11例肝转移瘤、30例正常对照外周血AFP mRNA和19例HCC、15例血液病骨髓AFP mRNA。结果 71例HCC外周血中38例AFP mRNA表达阳性（53．5％），肝硬化、肝血管瘤、肝转移瘤和正常对照均为阴性。HCC外周血AFP mRNA检出率与血清AFP值无明显相关（P＞0．05），而与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移、肝外转移等临床参数有明显相关（P＜0．05）。19例HCC骨髓中9例AFP mRNA表达阳性（47．4％），15例血液病为阴性。骨髓AFP mRNA检出率与血清AFP值、肝内转移无明显相关（P＞0．05），与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝外转移明显相关（P＜0．05）。外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性（P＜0．05）。结论 血循环AFP mRNA可作为CC微转移的早期检测指标。HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达与复发转移显著相关，且HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性，联合检测有助于提高结论的可靠性。     

肝癌患者外周血AFP mRNA表达的临床意义

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)患者外周血AFP mRNA表达在血行播散中的意义.方法:抽取30例HCC患者外周静脉血5ml,应用RT-PCR对血中AFP mRNA进行扩增检测,并与各对照组比较.结果:30例HCC患者中,AFP mRNA的阳性率为46.7%(14/30);AFP mRNA的表达阳性率与肝癌TNM分期、肿瘤大小、有无门脉癌栓及有无肝外转移有显著的相关性(P＜0.05),而与血清AFP水平无关(P＞0.05).结论:AFP mRNA是反映原发性肝癌患者血中是否存在肝癌细胞的灵敏指标.     

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨肝癌相关的新基因BC047440在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测36例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC047440 mRNA的表达，并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组，分析其与肿瘤病理变化的关系。〖KG(*8〗结果：36例HCC中BC047440基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2594±0.0928和0.0942±0.0443,差异有极显著性意义（P<0.01）;过高表达组与较高表达组相比较，前者肝癌直径较大，门静脉受侵较严重，差异有显著性（P<0.05）。结论：BC047440基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。     

PCNA、p53及CyclinB1 mRNA在兔肝内胆管结石胆管组织中的表达

目的通过检测PCNA、p53及和CyclinB1 mRNA在兔肝内胆管结石胆管组织中的表达,探讨肝内胆管结石发生的分子机制。方法建立肝内胆管结石动物模型,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测30例胆管结石兔和20例正常兔胆管组织CyclinB1 mRNA的表达水平,采用免疫组织化学法检测胆管组织PCNA和p53的表达,应用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡情况。结果胆管结石兔胆管组织PCNA表达阳性率40%,明显高于对照组0,两者相比差异有统计学意义(P<0.01),胆管结石兔胆管组织p53表达阳性率0,对照组p53表达阳性率0,两者相比差异无统计学意义(P>0.05),胆管结石兔胆管组织CyclinB1 mRNA表达水平(0.436±0.133)与正常对照组(0.178±0.085)比较差异有统计学意义(P<0.01),胆管结石兔胆管G1/S期细胞比例(50.11±6.34)%,与正常组(75.23±5.29)%比较差异有统计学意义(P<0.05),G2/M期细胞比例(35.59±4.68)%,与正常组(15.35±3.76)%比较差异有统计学意义(P<0.05),胆管细胞增殖指数(18.87±1.66),与正常组(5.32±0.41)比较差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡率(15.24±0.87)%,与正常组(2.33±0.36)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCNA、p53及CyclinB1mRNA表达与肝内胆管结石生物学行为密切相关,胆管细胞大量增殖在肝内胆管结石形成中发挥重要作用,但细胞增殖与恶性细胞的无限增殖有根本的区别。     

HLJ1基因在肝细胞癌组织中的表达及其生物学意义

目的:探讨HLJ1基因在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其生物学意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测32例HCC组织及其对应的癌旁肝组织（PLCT）中HLJ1基因的mRNA表达水平;分析HLJ1与肝硬化、HCC的结节数目、静脉浸润、分化程度和肝外转移等临床病理特征的关系。结果:HCC组织中HLJ1 mRNA的表达水平显著性低于PLCT［（1.18±0.82）vs.（1.92±1.15），P＜0.05）］，其HLJ1 mRNA低表达组(n=18)和高表达组(n=14)在静脉浸润（P=0.001）和细胞分化程度（P=0.010）方面差异显著，而在性别、有无肝硬化、结节数目和肿瘤直径等因素的组间差异无显著性（P>0.05）。结论:HLJ1在HCC中表达显著性下调;HLJ1有可能参与HCC的细胞分化和侵袭转移。     

RhoC基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨RhoC基因与肝细胞癌 (HCC)的发生发展和侵袭转移的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)在半定量水平检测 2 5例HCC及其相对应的癌旁肝组织和 4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中RhoCmRNA的表达 ;同时采用PCR产物单链构象多态性 (PCR SS CP)银染法检测RhoC基因的突变情况。结果本组 2 5例HCC中RhoCmRNA的表达较癌旁肝组织高 ,其光密度比值分别为 1 8± 1 1和 1 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中的RhoCmRNA的表达较相对应的肝内肝癌病灶高 ,其光密度比值分别为 3 3± 0 5和 2 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;将 2 5例HCC分为RhoC基因过表达组和高表达组后发现 ,过表达组中肝癌细胞分化较差 ,静脉受侵严重 ,且以结节性肝癌居多 (P <0 0 5 ) ;而 2 5例HCC经PCR SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。结论RhoC基因与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关 ,且可能是通过表达升高而非突变发挥作用。     

肝癌患者血清中聚糖蛋白3检测的临床意义

目的 探讨血清聚糖蛋白3(GPC3)在肝癌研究中的临床应用价值.方法 应用生物素-链霉亲和素系统亲和力高的特点建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测681份不同人群血清中的GPC3.结果 (1)肝硬化组(42.9%)、肝癌组(41.4%)、肝癌复发组(61.1%)患者血清GPC3阳性率与正常人组(4.1%)及乙肝组(8.6%)差异有统计学意义(P<0.01);肝细胞型肝癌组(HCC)血清GPC3阳性率(45.9%)高于胆管细胞型肝癌组(ICC)(20.9%)(P<0.05);HCC组中直径≤3 cm的小肝癌及AFP≤20μg/L的肝癌血清中GPC3阳性率分别为36.0%、41.9%;AFP≤<20μgs/L且直径≤3 cm的小肝癌患者血清GPC3阳性率为44.4%(4/9).(2)联合血清AFP及GPC3,可将单独应用AFP时提示肝癌复发从77.7%提高到88.9%.(3)结肠癌肝转移病例血清中GPC3的阳性率为28.6%.(4)手术切除术前及术后2～16 d内HCC患者血清中GPC3的变化多样.(5)24例HCC组织GPC3阳性20例,其中血清GPC3阳性率为50%.结论 血清中GPC3的测定作为一种新的肿瘤标志物在肝癌的诊断特别是早期诊断、提示复发、转移及评价手术治疗效果中可能均有一定的意义.     

肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白mRNA与单核细胞端粒酶活性检测

目的探讨外周血甲胎蛋白(AFP)mRNA和外周血单核细胞(PBMC)端粒酶活性的检测在肝细胞癌(HCC)诊断中的意义。方法采用巢式逆转录PCR(Nest RT-PCR)法检测HCC、肝脏良性肿瘤、慢性肝病患者及正常人外周血的AFP mRNA表达,聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)检测PBMC的端粒酶活性。结果 (1)AFP mRNA在HCC外周血中阳性率为73.3%(22/30),在肝脏良性肿瘤、慢性肝病患者及正常人外周血中无表达(分别为0/10,0/30,0/30),(均P0.001)。(2)HCC患者PBMC端粒酶活性的阳性率(93.3%,28/30)显著高于肝脏良性肿瘤患者(40%,4/10)和慢性肝病患者(6.7%,2/30)及正常人(0),(分别P0.01,0.001,0.001)。(3)外周血AFP mRNA与HCC PBMC的端粒酶活性表达呈显著正相关(r=0.6742,P0.05)。结论 AFP mRNA是外周血HCC细胞的特异性标志物;端粒酶活性的检测具有更高的敏感性;两者的联合检测具有重要的临床意义。     

肝癌及癌旁肝组织中caveolin 1表达及其意义

摘要：目的探讨肝癌及癌旁肝组织中caveolin 1蛋白和mRNA的表达及其意义。方法利用免疫组化和原位杂交技术检测10例正常肝组织和50例肝癌及其癌旁肝组织中caveolin 1蛋白和mRNA的表达，并分析其与肝癌生物学行为的关系。结果肝细胞癌（HCC）中caveolin 1蛋白和mRNA表达的细胞主要为血管内皮细胞，其表达强度与HCC的分化程度无关。癌旁肝组织中caveolin 1蛋白和mRNA阳性信号多位于肝窦内皮细胞、肝星状细胞、血管内皮细胞和增生的胆管上皮细胞。caveolin 1蛋白和mRNA在肝硬化及不典型增生的癌旁组织的肝细胞中呈强表达。在胆管细胞性肝癌组织中，癌细胞和血管内皮细胞均呈强阳性。caveolin 1蛋白和mRNA在胆管细胞性肝癌中表达强度显著高于HCC；HBsAg和AFP阳性的肝癌患者的表达强度明显低于阴性患者。结论 HCC中caveolin 1蛋白和mRNA低表达或表达缺失可能是HCC较胆管细胞性肝癌恶性程度高、生长快和易发生转移的重要原因；检测caveolin 1表达有可能作为鉴别HCC和胆管细胞性肝癌的有用指标之一。     

黑色素瘤抗原-3基因在肝细胞癌中的研究

目的 检测黑色素瘤抗原－３（ｍｅｌａｎｏｍａ ａｎｔｉｎｅｇ－３,ＭＡＧＥ－３）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,探计用ＭＡＧＥ－３基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗在理论上的可行性。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ方法对４５例ＨＣＣ患者癌组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－３ ｍＲＮＡ表达情况进行研究,对３例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物中目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定     

GPC-3 mRNA与GGT联合检测诊断AFP阴性原发性肝细胞肝癌

目的：探讨外周血单核细胞磷酸肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）mRNA联合血浆γ-谷氨酰转肽酶（GGT）检测诊断甲胎蛋白（AFP）阴性原发性肝细胞肝癌（HCC）的价值。方法：采用RT-PCR方法分别检测39例AFP阴性HCC患者、39例非HCC肝病患者及40例健康自愿者外周血单核细胞GPC-3 mRNA的表达;用全自动生化分析仪检测39例AFP阴性HCC患者血浆GGT水平（>58 U/L为阳性）,分析两者单独和联合检测阳性率的差异。结果：39例HCC患者外周血单核细胞GPC-3 mRNA表达检出率为62%（24/39）,而在非HCC的肝病患者及健康对照者外周血单核细胞中GPC-3 mRNA表达均为阴性,特异度达100%;39例HCC患者血浆GGT升高阳性率80%（31/39）。GPC-3 mRNA联合GGT检测的阳性率95%,明显高于两者单独检测的阳性率（均P<0.05）。结论：AFP阴性HCC患者外周血单核细胞中GPC-3 mRNA有较高的特异性表达,GPC-3 mRNA联合GGT检测有助于AFP阴性的HCC早期发现。     

CT9和CT10基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测肿瘤睾丸抗原CT9和CT10基因mRNA在肝细胞癌（HCC）中的表达情况。方法用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法对HCC病人的癌组织和相应癌旁组织及对照（肝硬化和正常肝组织）中CT9和CT10mRNA的表达进行了检测,随机选取每一种抗原RT-PCR呈阳性的产物4例进行DNA序列测定,结合AFP、抗HCV、HgsAg、肿瘤直径、分化程度等临床指标进行分析。结果56例HCC病人中,CY9、CT10基因mRNA阳性率分别是51．8％（29／56）和44．6％（25／56）,至少表达一种CTA者达66．1％（37／56）,表达两种者为30．4％（17／56）;电泳显示PCR产物与阳性对照大小一致;而癌旁组织中仅有CT9基因nRNA表达为阳性,阳性率为7．1％（4／56）,但表达强度明显弱于在癌组织中的表达,进一步的病理检查未发现CY9表达呈阳性的癌旁组织中有癌细胞。所测10例肝硬化和10例正常肝组织均未检测到CT9和CT10的表达。DNA测序结果表明RT-PCR产物确为CT9和CT10cDNA。CT9和CT10的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性（P〉O．05）。而在部分AFP正常（〈25ng／L）HCC病人中存在CT9和CT10基因的表达。结论CT9和CT10基因在HCC中呈高比例、高特异表达,为HCC免疫治疗提供了新的理想靶位;CT9和CT10同时在HCC中表达,为应用以这些肿瘤抗原为基础的多价瘤苗治疗HCC提供了实验依据。     

肝癌病人手术期间不同部位血液AFP mRNA定量检测及其意义探讨

目的 研究肝细胞性肝癌(HCC)病人手术期间不同部位血液甲胎蛋白信使核糖核酸(AFP mRNA)的水平变化，分析其与临床病理学特征和复发转移的关系。方法 18例HCC和6例非HCC肝肿瘤病人，于切除肿瘤前后抽取门静脉、肝静脉和外周静脉血各5m1，肝炎、肝硬化病人各10例取外周血5m1。应用TaqMan实时定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测AFP mRNA水平。结果 术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为72．2％，特异性为76.9％，准确率为75．0％。HCC病人术后各部位血液AFP mRNA水平明显高于术前相应部位水平。血液AFP mRNA水平与肿瘤大小、分化程度、有无肝内播散、包膜完整性以及血清AFP浓度均无关，而有门静脉癌栓的病人术后肝静脉血AFP mRNA水平明显高于无癌栓者。术后2个月内复发者，术后门静脉和外周静脉血AFP mRNA水平明显高于末复发者。结论 TaqMan实时定量RT—PCR法检测HCC病人血液AFP mRNA有较高的敏感性和特异性。手术可能促进部分HCC细胞和肝细胞脱落入血。动态监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发有预测价值。     

Smac和Survivin基因在肝癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨Smac和Survivin在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及两者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系。方法免疫组织化学法检测50例肝癌组织、20例癌旁组织和15例正常肝组织中Smac和Survivin蛋白表达情况。逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测Smac和SurvivinmRNA表达情况。结果50例HCC标本中表达Smac有21例(42.0%),而除2例癌旁组织外,其他癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Survivin在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有46例、2例和0例表达;50例肝癌组织中Smac阳性率为40.0%(20/50),肝癌组织和非肝癌组织中Smac的表达差异具有统计学意义,Survivin在肝癌组织、癌旁组织和正常组织中阳性率分别为90.0%(45/50)、10.0%(2/20)和0%(0/15),肝癌组织和非肝癌组织中Survivin的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环。     

GPC3 mRNA在甲胎蛋白阴性肝癌中的表达及其意义

目的 探讨GPC3基因在甲胎蛋白阴性肝癌中的变化及其临床意义。方法 应用印迹法（Northern)杂交检测48例肝癌组织及其相应的癌旁肝细胞内GPC3mRNA表达的变化,其中肝细胞癌41例、肝内胆管细胞癌4例、大肠癌肝转移2例和肝局灶性结节增生1例,并结合各组织标本的病理学特点进行分析。结果 41例甲胎蛋白阴性肝细胞癌中,有30例肝癌组织可测出GPC3mRNA的表达（73.17%),而癌旁组织中均不表达。直径＞5cm的大肝癌GPC3的表达率显著高于直径≤5cm的小肝癌,低分化肝癌GPC3 的表达率显著高于高分化的肝癌。GPC3的表达与患者的年龄、性别、包膜完整性、癌栓形成、肝内转移及乙肝病毒感染状况均无明显相关性。GPC3mRNA在非肝细胞肝癌组织内均不表达。结论 GPC3mRNA在AFP阴性肝癌中特异性表达,可作为原发性肝癌的一个新的基因标志。GPC3mRNA在肝癌的发生发展中有重要作用。     

肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。　结果　 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。　结论　HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 ,为HCC免疫治疗提供了新的潜在靶位     

Canalicular immunostaining of neprilysin (CD10) as a diagnostic marker for hepatocellular carcinomas.

Neprilysin (CD10) is expressed in both normal and neoplastic liver tissue, where it exhibits a characteristic canalicular pattern (CD10can) similar to the one observed when antibodies cross-react with biliary glycoprotein I (p-CEA). The aim of this retrospective study was to investigate the use of CD10can in differentiating between hepatocellular carcinomas (HCCs; 63 specimens) and nonhepatocellular carcinomas (non-HCCs) metastatic to the liver (non-HCC; 25 specimens). Immunostaining was performed with antibodies directed against CD10, p-CEA, and alpha-fetoprotein (AFP). Albumin mRNA was detected by nonradioactive in situ hybridization (ISHalbumin). In the HCC group a canalicular staining pattern for CD10 was found in 43 (68.3%) specimens. AFP was found in 15 (23.8%) specimens, and a canalicular staining pattern for p-CEA was present in 60 (95.2%) specimens. ISHalbumin was performed in 35 HCC specimens and showed labeling of tumor cells in 30 (85.7%) specimens. In the non-HCC group, CD10can, and p-CEA, immunostaining for AFP and labeling for ISHalbumin were confined to non-neoplastic liver tissue. Sensitivity and specificity were, respectively, 68.3% and 100% for CD10can, 23.8% and 100% for AFP, 95.2% and 100% for canalicular p-CEA, and 86.4% and 100% for ISHalbumin. Our results demonstrate that canalicular staining for CD10 is a highly specific marker of hepatocytic differentiation. Although it does not differentiate between benign and malignant lesions, CD10can is clearly useful in differentiating between HCC and non-HCC.