氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管间质TGF-β1和α-SMA的影响

目的研究血管紧张素ⅡⅠ型受体拮抗剂(AT_1RA)——氯沙坦对链脲佐菌素(STZ)大鼠肾小管间质转化生长因子-β_1(TGF—β_1)和平滑肌肌动蛋白(α—SMA)表达的影响。方法用Wistar大鼠建立STZ诱导的糖尿病(DM)大鼠模型,设正常对照组(A),糖尿病组(B)和糖尿病 氯沙坦治疗组(C)。用免疫组化方法检测肾小管问质TGF—β_1和α—SMA蛋白的表达,RT—PCR检测TGF-β-1mRNA。结果TGF—β_1和α—SMA在DM大鼠肾小管间质的表达较正常对照组显著升高(P＜0．05),C组与同期B组相比明显降低(P＜0．05)。结论氯沙坦能降低糖尿病大鼠肾小管间质TGF—β_1和α—SMA的表达,缓解肾小管间质病理损害。     

曲尼司特对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1和SGK1表达的影响

目的探讨曲尼司特对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制。方法雄性SD大鼠60只,随机均分为4组:正常对照组、模型组、低剂量及高剂量曲尼司特治疗组。后3组均一次性给予链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg尾静脉注射建立糖尿病大鼠模型。正常对照组给予等量柠檬酸缓冲液尾静脉注射;模型组不再给药;低、高剂量曲尼司特组于造模后1 w分别给予曲尼司特100 mg·kg-1·d-1和400 mg·kg-1·d-1。造模后8 w处死大鼠,免疫组化检测肾间质组织中的TGF-β1及SGK1表达;Masson染色观察肾间质绿染面积。结果与正常大鼠相比,糖尿病模型大鼠的血糖、尿蛋白定量、肾重/体重、肌酐清除率明显升高(P<0.05);经过曲尼司特处理后,以上指标均有下降,尿蛋白定量、肾重/体重、肌酐清除率下降(P<0.05),且高剂量组与低搅量组相比,尿蛋白定量下降(P<0.05)。Masson染色可见模型组肾间质内大量胶原纤维增生,肾小球局灶性节段性硬化,而曲尼司特组上述改变均有减轻。免疫组化示TGF-β1及SGK1表达趋势一致,正常对照组均低于其他组(P<0.01),曲尼司特组低于模型组,高剂量曲尼斯特组低于低剂量组(P<0.05)。结论曲尼司特能改善糖尿病大鼠的生化指标,下调TGF-β1和SGK1表达,发挥抗纤维化的作用。     

厄贝沙坦对早期糖尿病肾病患者血TGF-β1的影响

早期糖尿病肾病患者66例,随机分为对照组(30例)、厄贝沙坦组(36例),进行3个月临床观察,两组患者均于治疗前后测UAER及血TGF-β1浓度。结果①对照组治疗前后UAER及血TGF-β1差异无统计学意义。②厄贝沙坦组治疗后UAER及血TGF-β1较治疗前显著下降(P<0.05)。③血TGF-β1与UAER呈正相关(r=0.674,P<0.01)。结论(1)血TGF-β1可能在糖尿病肾病发病中起重要作用。(2)厄贝沙坦可能降低血TGF-β1起到肾脏保护作用。     

缬沙坦联合丹参对糖尿病大鼠肾脏病理结构及TGF-β1表达的影响

目的 应用缬沙坦联合丹参对糖尿病肾病(DN)大鼠模型进行干预,观察其对肾小球平均体积、肾毛细血管基底膜平均厚度及肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨两药联用的肾保护作用及可能的机制.方法 应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病(DM)大鼠模型,随机分为4组正常对照组、模型组、缬沙坦组、缬沙坦与丹参联合治疗组(联合组).8 w后观察各组血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAE)、尿β2微球蛋白排泄率(β2-MG)等变化.光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球的平均体积、电镜观察并测定肾小球毛细血管基底膜平均厚度.免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达.结果 与对照组相比,模型组及各给药组大鼠血糖、HbAlc、Ccr、UAE、β2-MG均显著上升(P＜0.01);肾小球平均体积、毛细血管基底膜平均厚度均显著扩大(P＜0.01);肾组织中TGF-β1的蛋白质表达显著上调(P＜0.01).缬沙坦和(或)丹参干预后,上述上调指标除血糖、HbAlc外均被显著抑制(P＜0.05或0.01),联合组优于缬沙坦组(P＜0.05).结论 缬沙坦联合丹参对DM大鼠具有改善肾脏病理结构的肾保护作用.其机制可能与其下调肾组织中TGF-β1的表达有关.     

地龙2号对大鼠肝纤维化α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究地龙2号对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响.方法采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,52只雄性Wistar大鼠随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和地龙2号小剂量组,8周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况.结果与模型组相比,地龙2号组肝纤维化程度明显减轻,α-SMA、TGF-β1、及TIMP-1蛋白表达均显著降低,MMP-13表达显著升高.结论地龙2号抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA、TGF-β1、TIMP-1蛋白表达并促进MMP-13蛋白表达有关.     

氯沙坦对糖尿病肾病患者尿中转化生长因子β1的影响

目的 探讨2型糖尿病肾病患者尿转化生长因子(TGF)β1的状况及氯沙坦对抗纤维化的影响.方法 检测33例2型糖尿病肾病患者氯沙坦(50 mg/d×8周)治疗前后24小时尿蛋白、尿肌酐,尿TGFβ1和肌酐水平.尿TGFβ1的检测用ELISA法.20例健康志愿者的尿液标本作为对照组.结果 与对照组比较,患者尿TGFβ1明显升高,随肾小球滤过功能损害的加重,尿TGFβ1排出增加,治疗前、治疗后尿TGFβ1浓度明显下降(P＜0.001).尿TGFβ1浓度变化与尿蛋白变化具有相关性(P＜0.01).结论 随肾功能损害的加重,2型糖尿病肾病患者肾脏纤维化加重, 氯沙坦通过降低2型糖尿病肾病患者TGFβ1水平发挥抗肾脏纤维化作用,尿TGFβ1减少可能是病情缓解的早期表现,这一表现可先于蛋白尿的变化.     

灵芝多糖对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子-β1和Ⅳ型胶原的影响

目的探讨灵芝多糖对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的影响。方法用不同浓度的灵芝多糖加入高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中测不同时间TGF-β1、Col-Ⅳ蛋白的表达。结果高糖可使系膜细胞TGF-β1、Col-Ⅳ的表达明显增加(P<0.01),而灵芝多糖干预后TGF-β1、Col-Ⅳ表达降低,并呈剂量依赖性(P<0.01)。结论灵芝多糖可抑制高糖环境下肾小球系膜细胞的TGF-β1、Col-Ⅳ过度表达,并呈剂量依赖性,这可能是其延缓及减轻糖尿病肾病的初步机制。     

针刺联合糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/CTGF/MMP-9的影响

目的探讨针刺联合糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法选取54只SPF级SD雄性大鼠,从中随机选出8只为正常对照组,余下大鼠进行糖尿病肾病(DN)模型复制,即一次性大鼠尾静脉注射现配链脲佐菌素,随机将成模后大鼠分为模型组、厄贝沙坦组、糖克煎剂组(中药组)、针刺组和针刺联合糖克煎剂组(针药联合组)。观察大鼠一般情况,测定体质量、血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC);HE染色、Masson染色和糖原染色(PAS),观察肾组织形态学的改变;Western blot分别检测肾脏组织中TGF-β1、MMP-9、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、CTGF和TIMP-1的蛋白表达水平。结果与模型组相比,针药联合组、糖克煎剂组和厄贝沙坦组体质量、肾质量/体质量比、24 h尿蛋白、BUN、SCr、TG、TC明显改善,针药结合效果更显著,针刺组轻微改善。TGF-β1及CTGF蛋白表达水平降低明显,通过调整MMP-9的蛋白表达下调TIMP-1的表达,加快CollafenⅠ水解。针药联合组肾脏表达TGF-β1、CTGF、TIMP-1较糖克煎剂组或厄贝沙坦组下降明显,MMP-9表达增多。针药联合组比糖克煎剂组、厄贝沙坦组疗效更为显著。结论针刺联合糖克煎剂相对于糖克煎剂组治疗效果明显,能有效调控TGF-β1、MMP-9和CTGF的表达从而减轻肾小球硬化,降低蛋白尿排量,使肾功能得到保护,糖尿病肾病的进展被延缓。     

银杏达莫注射液对实验性2型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的 探讨银杏达莫注射液对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏转化生长因子(TGF)-β1表达的影响,从而探讨银杏达莫注射液对DN的治疗作用.方法 选取实验大鼠60只,以高热量饲料加小剂量链脲佐菌素(STZ)建立DN大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、DN组和治疗组(每组各10只),观察各组大鼠一般情况及24 h蛋白尿、血糖、肾脏病理改变;采用免疫组化法检测TGF-β1的表达.结果 糖尿病组表现为大量蛋白尿、肾组织病理损害、TGF-β1高表达,与正常组有显著差异;治疗组24 h尿蛋白与正常组相比显著增高,与DN组相比有显著降低,肾组织病理损害明显减轻,TGF-β1表达高于正常组,低于ND组,差异显著.结论 银杏达莫注射液可以通过降低TGF-β1表达对2型糖尿病DN大鼠肾脏起到保护作用,延缓DN发展.     

TGF-β1/p38MAPK通路在介导单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的 探讨TGF-β1/p38MAPK信号传导通路在老年单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化过程中的作用.方法 将老年SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、SB203580治疗组.分别至UUO术后第3、7、14天处死,取梗阻侧肾脏,观察病理改变;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾小管上皮细胞中转化生长因子(TGF)-β1、p-p38、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达情况.结果 与假手术组比较,模型组及治疗组TGF-β1、p-p38MAPK 、α-SMA的表达显著升高(P＜0.05);而与模型组相比较,治疗组TGF-β1、p-p38MAPK、α-SMA的表达显著降低(P＜0 05).TGF-β1、p-p38MAPK和α-SMA三者的表达呈正相关(TGF-β1与p38MAPK之间r1=0.745,P＜0.05;p-p38MAPK与α-SMA之间r2=0.659,P＜0.05;TGF-β1与α-SMA之间r3=0.770,P＜0.05).结论 TGF-β1/ p38MAPK通路的激活可上调肾小管上皮细胞α-SMA的表达,促进上皮细胞转分化,并可能是调控UUO大鼠肾间质纤维化主要信号通路之一.     

白屈菜红碱对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的:探讨白屈菜红碱对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝脏组织转化生长因β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法:用四氯化碳皮下注射, 同时联合营养控制和饮用100 mL/L乙醇复合法制备SD大鼠肝纤维化模型, 在实验第4周末, 肝纤维化模型建立(2期肝纤维化形成), 然后用低、中、高剂量白屈菜红碱(0.2、0.6、2.0 g/L)治疗, 同时实验设立病理模型组、空白对照和阳性对照(INF-γ)组. 给药8 wk后, 采用免疫组织化学检测各组大鼠肝脏组织TGF-β1和α-SMA的表达.结果:各剂量白屈菜红碱组肝脏TGF-β1和α-SMA表达明显低于病理模型组(TGF-β1:6.08±2.35, 4.31±2.10, 4.7±1.70 vs 9.33±3.08; α-SMA:3.75±1.76, 3.23±1.42, 3.20±1.17 vs 6.67±2.29, 均P <0.01), 而与INF-γ组比较无明显差异(4.23±2.24, 3.38±1.39, 均P >0.05).结论:白屈菜红碱能降低四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型肝脏组织TGF-β1和α-SMA.     

柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子-β1和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 研究柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子(TGF)-β1和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达的影响,以探讨柴胡皂苷防治酒精性肝病的机制.方法 SD大鼠45只随机分为正常组、模型组、柴胡皂苷保护组,利用白酒灌胃辅以高脂饲料制备大鼠肝损伤模型,同时给予柴胡总皂苷(200 mg/kg)保护,每天一次,连续8w,8 w末处死全部大鼠.测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理形态学改变,检测肝组织TGF-β1和α-SMA的表达.结果 和模型组比较,柴胡皂苷能明显降低大鼠血清ALT、AST活性,减少肝细胞坏死和纤维组织增生;模型组肝组织中TGF-β1和α-SMA表达呈强阳性,给予柴胡皂苷后TGF-β1和α-SMA的表达明显降低.结论 柴胡皂苷对酒精性肝病具有一定的预防作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1信号通路对肝星形细胞的活化,保护肝细胞的结构和功能,抑制细胞外基质在肝脏的分泌和沉积.     

甲珠对肝纤维化大鼠α-SMA和TGF-β1表达的影响

目的: 研究甲珠对肝纤维化大鼠α-肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子.β1(TGF-β1)表达影响,并探讨其抗纤维化机制.方法: 采用400 mL/L CCL4 sc,制备肝纤维化模型并以高[2.0 g/(kg·d)],中[1.0g(kg·d)],低剂量[0.5 g/(kg·d)]甲珠干预,测定各组肝功能、血清TGF-β1,免疫组织化学法检测肝组织α-SMA、TGF-β1表达,RT-PCR检测α-SMA、TGF-β1 mRNA 的表达.结果: 甲珠各组较模型组肝功能明显改善,丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶显著降低.总蛋白及白蛋白显著升高,胆红素降低;血清TGF-β1显著降低;高,中,低甲珠剂量组肝组织α-SMA及TGF-α1 mRNA 表达.染色面积比.灰度值与模型组相比均有显著性意义(α-SMA:9.21±1.12、12.63±2.42、14.23±1.57 vs 16.32±2.14.P<0.01、P<0.01、P<0.05;TGF.131 mRNA:5.58±0.80、8.62±1.16、11.92±1.35 VS 14.57±1.59.P<0.01、P<0.01、P<0.01),(α-SMA染色面积比:9.21%±1.29%、12.63%±1.44%、14.23%±1.41%vs 16-32%±1.75%.P<0.01、P<0.01、P<0.05;TGF-β1染色面积比:5.3 1%±0.70%、8.37%±1.09%、11.92%±1.42%VS 14.47%±1.48%,P<0.01、P<0.01、P<0.01),(α-SMA灰度值:91.29±9.53、99.55±11.83、107.18±12.06 VS 116.44±12.97.P<0.01、P<0.01、P<0.05;TGF-β1灰度值:89.96±9.64、1 06.92±13.90、110.50±12.91 vs 127.13±14.88,P<0.01、P<0.01、P<0.05).结论: 甲珠对CC14诱导的实验鼠肝纤维化有良好的抑治作用.     

2型糖尿病模型大鼠肾小管上皮细胞中TGF-β1的表达及与肾功能的关系

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在链脲佐菌素(STZ)介导2型糖尿病(T2DM)大鼠肾小管上皮细胞中表达的变化，揭示TGF-β1在糖尿病肾损伤中的作用及与肾功能的关系。方法 通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量STZ的方法，制作T2DM模型大鼠，应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测12、24w肾小管上皮细胞中TGF-β1的表达。结果 免疫组化显示：糖尿病组肾小管上皮细胞胞浆中TGF-β1表达增强，并且呈时间依赖性。流式定量结果与免疫组化结果一致。结论 TGF-β1在T2DM大鼠肾小管上皮细胞中表达随时间延长逐渐增加并与肾功能呈正相关。     

MMPs/TIMPs、TGF-β1、细胞外基质与糖尿病肾病

转化生长因子β1可刺激系膜细胞外基质(ECM)蛋白的合成,抑制基质金属蛋白酶的酶解活性,并增加其抑制剂组织型金属蛋白酶抑制剂的活性,从而促进ECM的沉积,在糖尿病肾病的发生发展中具有重要作用.     

TGF-β1与糖尿病肾病

糖尿病肾病 (DN)是直接危害糖尿病患者生命的慢性并发症之一。迄今为止其发病机制尚未完全明了。目前 ,越来越多的研究表明 :转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )可能在 DN的发病机制中占有重要地位 ,因此 ,对 TGF- β1 与 DN关系的研究有可能为诊治 DN提供新思路。一、TGF- β1 及其受体的生物学特征TGF- β在哺乳动物体内主要存在着 TGF- β1 、β2 、β3三种同分异构体。TGF- β1 的基因为 10 0 kb。内源性蛋白酶如呋林蛋白酶(furin)调控产生的 12 .5 KDa的 TGF- β单体以二硫键形成有功能的同源二聚体。各异构体的生物学特性基本…     

TGF-β1诱导的上皮-间充质转化与糖尿病肾病

糖尿病肾病(DN)肾间质纤维化的初始环节之一是肾小管上皮-间充质转化(EMT),而转化生长因子-β1(TGF-β1)是EMT发生的重要诱导因子.了解DN中肾小管上皮细胞EMT的发生及过程,探讨Smad7、C-肽、TGF-β1抗体、组蛋白去乙酰化酶抑制剂和血管紧张素受体抑制剂在DN中的作用,将为DN治疗提供新的思路.     

PGD2对小鼠肺成纤维细胞TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨前列腺素D2(PGD2)对小鼠肺成纤维细胞TGF-β1/Smads信号通路的影响,为哮喘气道重塑提供分子研究基础。方法采用随机分组的方法,分别采用不同浓度的PGD2受体抑制剂Laropiprant(0.3、1、3、10、30μmol/m L)不同时间(12、24、48、72、96 h)作用于肺成纤维细胞,采用MTT法检测Laropiprant对于细胞生长的抑制作用。设正常对照组、Laropiprant 0.3μmol/m L组、1μmol/m L组、3μmol/m L组、10μmol/m L组、30μmol/m L组,每组加入PGD2刺激剂TGF-β2(2.5 ng/m L)培养24 h后,再加入相应浓度的Laropiprant刺激24 h,分别用PCR法和Western blotting法检测细胞TGF-β1、Smad3以及Smad4的表达。结果加入TGF-β2(2.5 ng/m L)处理24 h后,随着Laropiprant的浓度增加,细胞TGF-β1、Smad3以及Smad4的mRNA及蛋白表达与正常对照组相比呈下降趋势(P均<0.05)。不同浓度的Laropiprant作用于细胞不同时间后,细胞生长抑制率随Laropiprant浓度增高和作用时间延长呈上升趋势,Laropiprant在浓度达到1μmol/L,作用时间为24~96 h时,细胞生长抑制率明显提高。结论L-929小鼠肺成纤维细胞中PGD2可能通过调节TGF-β1/Smads信号通路引起气道重构。     

氯沙坦对实验性糖尿病大鼠尿白蛋白排泄的影响

目的 观察血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦（ｌｏｓａｒｔａｎ）对糖尿病大鼠白蛋白排泄的影响。方法 雄性ＳＤ大鼠分为正常对照组（ＮＣ）、糖尿病对照组（ＤＣ）、糖尿病氯沙坦治疗组（ＤＬ）和糖尿病培哚普利治疗组（ＤＰ）。检测各组第４、８、１２、１６周尿白蛋白排泄变化。结果 ＤＬ组较ＤＣ组尿白蛋白排泄显著下降（Ｐ〈０．０１）,和ＤＰ组比较无显著性差异。结论 血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦能有效降低糖尿病大鼠尿白蛋白的排泄。     

不同浓度胰岛素对HK-2细胞TGF-β1表达的影响

目的观察不同浓度胰岛素对HK-2细胞TG-β1表达的影响.方法将不同浓度的胰岛素加入培养的HK-2细胞中,用ELIS法测培养液上清液中 TGF-β1蛋白浓度,RT-PCR法测HK-2细胞中TGF-β1mRNA表达水平.结果低浓度胰岛素不影响TGF-β1表达;高浓度胰岛素在不增加TGF-β1mRNA表达的情况下可增加HK-2细胞TGF-β1蛋白分泌.结论高浓度胰岛素可能在翻译后水平上调HK-2细胞TGF-β1表达,这种作用可能参与了糖尿病肾病肾间质纤维化过程.