11β-羟化类固醇脱氢酶1促进3T3-L1前脂肪细胞分化机制

目的 探讨11β-羟化类固醇脱氢酶1（11β-HSDl）促3T3-L1前脂肪细胞分化机制及其在肥胖中的作用。方法 采用油红染色观察脂滴堆积情况;采用Western blot方法检测11β-HSD1的表达。应用氢化可的松刺激模型,采用实时定量PCR观察11β-HSD1和糖皮质激素受体（GR）表达的变化。应用实时定量PCR检测脂肪细胞分化标志基因的变化。结果 （1）油红染色显示脂滴堆积随着小鼠前脂肪细胞（3T3-L1）细胞分化过程逐渐增加。（2）在3T3-L1前脂肪细胞分化模型中（0、2、4、6、8d）,11β-HSD1蛋白水平是上调的,证实1113-HSDl蛋白分子量为34000。（3）11β-HSD1及GR的mRNA表达在分化过程中是上调的。（4）11β-HSD1对氢化可的松的刺激是时间和浓度依赖的,而氢化可的松的刺激对GR影响不大。（5）脂蛋白脂肪酶（LPL）、脂肪酸合成酶（FAS）、脂肪酸结合蛋白（aP2）在分化过程中明显上升,前脂肪细胞因子-1（Pref-1）在分化早期升高,在分化后期明显下调。结论 11β-HSDl通过受体前调节作用促进前脂肪细胞分化,参与肥胖的发生。     

11_β-羟基类固醇脱氢酶抑制剂的临床应用

近年来,有研究发现11β-羟基类固醇脱氢酶可能参与了以2型糖尿病、肥胖、胰岛素抵抗、高血压等为主要表现的代谢综合征的病理生理过程,选择性的11β-羟基类固醇脱氢酶抑制剂很有可能成为治疗糖尿病、肥胖症等疾病的新药。本文就11β-HSD的作用1、1β-HSD抑制剂种类与作用等作一综述。     

速尿对大鼠肾11β—羟基类固醇脱氢酶活性的抑制作用与其低血钾的相关性

目的：研究速尿对大鼠11β－羟基类固醇脱氢酶活性的抑制作用与低血钾的相关性。方法：SD大鼠给予速尿40,100和250mg/kg单次灌胃,或10,20和100mg/kg连续灌胃20d,每天两次,HPLC法测定尿中脱氢皮质酮（A）与皮质酮（B）的比率及肾皮质微粒体酶对皮质酮的转化率评定肾11β－羟基类固醇脱氢酶活性。结果：速尿（40,100,250mg/kg)单次或（10,20,100mg/kg)连续灌胃,大鼠尿中A／B分别降低了29．0％,58．6％,60．9％（0－2h)和14．4％,36．0％,44．9％。皮质酮的转化率降低了29％,33％,37％和6％,17％,23％,速尿（20,100mg/kg）连续给药组血钾显著降低（P＜0．01）。血钾的降低与皮质酮的转化率及尿中A／B值的变化成正相关。结论：速尿对11β－羟基类固醇脱氢酶活性的抑制可能是其引起低血钾的另一个重要的基本生化机制。     

α-甘草酸对豚鼠肾11β-羟基类固醇脱氢酶活性的影响

目的　探讨α-甘草酸对豚鼠肾脏11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-OHSD2 )的抑制作用。方法　运用微粒体酶分析技术,观察α-甘草酸减小微粒体酶对底物皮质醇的转化率,并测定酶的动力学常数。结果　α-甘草酸能够减小微粒体酶对底物皮质醇的转化率,和阴性对照、β-甘草酸相比,差异均有显著性意义;动力学常数V_max=15.25nmol/mg .h ,K_m=1.31μmol/L ,K_i=(209.2±17.1) μmol/L。结论　α-甘草酸能够抑制豚鼠肾脏11βOHSD2 ,但和β甘草酸相比,作用较弱     

α-甘草酸对豚鼠肾11β-羟基类固醇脱氢酶活性的影响

目的　探讨α 甘草酸对豚鼠肾脏 11β 羟基类固醇脱氢酶 (11β OHSD2 )的抑制作用。方法　运用微粒体酶分析技术 ,观察α 甘草酸减小微粒体酶对底物皮质醇的转化率 ,并测定酶的动力学常数。结果　α 甘草酸能够减小微粒体酶对底物皮质醇的转化率 ,和阴性对照、β 甘草酸相比 ,差异均有显著性意义 ;动力学常数Vmax=15 .2 5nmol/mg .h ,Km=1.31μmol/L ,Ki=(2 0 9.2± 17.1) μmol/L。 结论　α 甘草酸能够抑制豚鼠肾脏 11β OHSD2 ,但和 β 甘草酸相比 ,作用较弱     

11β-羟类固醇脱氢酶2活性抑制对大鼠血管内皮功能的影响

目的 观察11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSDase2)活性抑制对大鼠血管内皮功能的影响.方法 将24只雄性SD大鼠分为普通饲料对照组和甘草次酸(GA)组,饲喂6周,后经颈动脉测血压、取血测量血中11β-HSDase2活性、内皮素(ET-1)及一氧化氮(NO)的含量;取胸主动脉作离体血管环张力实验,并测定主动脉中ET-1和NO的含量.结果 GA组大鼠血压为(172.90±6.08) mm Hg,明显高于对照组(143.40±9.52) mm Hg(P＜0.01); 而血浆11β-HSDase2活性由0.48±0.09降低为0.29±0.12(P＜0.05),对乙酰胆碱的舒张反应减退[最大舒张百分比由(101.71±4.73)%降至(81.94±3.51)%,P＜0.01],对去甲肾上腺素的收缩反应增强[最大收缩反应由(1.02±0.07) g/mg增至(1.32±0.07) g/mg,P＜0.01],主动脉和血浆中ET-1含量增加,而NO含量减少.结论 11β-HSD2活性抑制可通过改变血管内皮功能使血压升高.     

小剂量丹墨胶囊对大鼠组织中11β-羟基类固醇脱氢酶基因表达的影响

目的考察低剂量丹墨胶囊对11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD）基因表达的影响．分析丹墨胶囊与糖皮质激素相互作用的具体机制。方法雄性SD大鼠连续14d灌胃给予丹墨胶囊0．216g／kg后,定量RT-PCR法测定大鼠肝、肾、胸腺、脾、脂肪、肌肉、心脏、肺、小肠、睾丸等组织11β—HSDl、11β-HSD2基因表达。结果丹墨胶囊显著诱导肝脏组织11β-HSDl基因表达,显著抑制大鼠心脏、肺、脾、肌肉、胸腺组织11β-HSDl的基因表达,但对肾脏、脂肪、睾丸、脑、小肠组织的11β-HSDl基因表达无明显影响;抑制心脏、脾、肌肉组织11β-HSD2基因表达,对肝脏、肾、脂肪、睾丸、肺、脑、小肠和胸腺组织的11β-HSD2基因表达无明显影响。结论丹墨胶囊可诱导大鼠肝脏组织中11β-HSDI基因表达,影响糖皮质激素体内活化。     

川崎病11β-羟基类固醇脱氢酶与促炎性细胞因子的变化及意义

目的:探讨11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)与促炎性细胞因子在川崎病(KD) 发生、发展中的变化及意义。方法:应用Real-time PCR检测KD患儿急性期及治疗后外周血单核细胞内11β-HSD mRNA的表达,应用免疫印迹方法检测11β-HSD 蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测血浆IL-17A和IL-6水平。结果:病例组患儿治疗前外周血单核细胞内11β-HSD1 mRNA表达水平及IL-17A和IL-6水平分别为7.13±0.79、(43.40±5.20) pg/ mL、(68.30±6.26) pg/ mL,较正常对照组1.00±0.07、(24.30±2.26) pg/ mL、(30.04±2.86) pg/ mL明显升高( P <0.01),而治疗后结果分别为3.43±0.52、(27.30±2.50) pg/ mL、(38.30±3.50)pg/ mL,均较治疗前明显下降(P<0.01);治疗前11β-HSD2 mRNA表达水平为0.32±0.05,明显低于正常对照组1.00±0.06(P<0.01),治疗后水平为0.82±0.04, 较治疗前明显升高(P<0.01)。免疫印迹检测11β-HSD蛋白表达水平的结果 分析与11β-HSD mRNA表达水平结果分析一致。结论:KD急性期11β-HSD、促炎性细胞因子在调节KD炎症反应中发挥着重要作用。     

哌嗪脲类选择性11β-羟基类固醇脱氢酶1抑制剂的设计、合成及生物活性研究

目的设计合成哌嗪脲类化合物,以期寻找具有较好体外11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)选择性抑制剂。方法以2-氨基金刚烷胺和苄基哌嗪为主要起始原料,经亚硝基化、还原、缩合、脱苄基和取代反应合成目标化合物;采用均相时间分辨荧光法测试目标化合物体外对11β-HSD1的抑制活性;对优选化合物进行体外11β-HSD2筛选试验,评价化合物的特异选择性。并测定了优选化合物在小鼠体内的降皮质醇能力。结果与结论合成19个未见文献报道的哌嗪脲类化合物,其结构经~1H-NMR和MS谱确证;体外抑酶活性实验表明,部分化合物具有较好的11β-HSD1抑制作用(0.1~0.3μmol·L~(-1)),且均具有良好的选择性抑制作用;体内生物活性试验显示化合物12a和12q具有显著降低小鼠血浆皮质醇的作用(分别降低41%和54%),合成的哌嗪脲类化合物具有进一步研究的价值。     

84例原发性高血压患者和健康志愿者肾11β-HSD活性的测定与比较

目的:比较我国原发性高血压患者肾11β-HSD活性与健康志愿者有无差别,并为进一步寻找11β-HSD缺陷患者奠定基础.方法:应用HPLC梯度洗脱法测定50例原发性高血压患者和34例健康志愿者尿中氢化可的松和可的松的比值,以比较其肾11β-羟化类固醇脱氢酶(11β-HSD)活性的差异.结果:高血压患者尿氢化可的松与可的松比值为0.71±0.41,对照组比值为0.59±0.18.结论:本研究组中高血压患者与健康志愿者肾11β-HSD活性无显著差别(P>0.05).高血压组中有一例患者氢/可比值为2.72±0.21(n=3),其原因有待于进一步研究.     

甘草酸等化合物对两种豚鼠肾11β-羟基类固醇脱氢酶活性影响的差异

目的：证明甘草酸等化合物抑制花、白两种豚鼠肾11β-羟基类固醇脱氢酶的作用存在差异。方法：运用微粒体酶分析技术，测定加入甘草酸等化合物后，两种酶对底物皮质醇的转化率，并比较两的差异。结果：加入甘草酸等抑制剂后，花豚鼠的酶对底物皮质醇的转化率明显高于白豚鼠。结论：花、白豚鼠的肾11β-羟基类固醇脱氢酶对甘草酸等抑制剂的敏感性存在显性差异。     

BVT-14225通过抑制11β-羟基类固醇脱氢酶1还原活性促进神经干细胞增殖和迁移

目的探讨BVT-14225(BVT)通过抑制11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)的还原活性对神经干细胞(NSC)增殖、分化和迁移的影响。方法取孕15 d SD胎大鼠的大脑皮质,分离培养原代NSC,采用免疫荧光染色法对NSC标志物巢蛋白和性别决定基因相关转录因子2(Sox2)进行染色,鉴定原代细胞;逆转录聚合酶链反应及核酸凝胶电泳法检测11β-HSD1 mRNA在NSC上的表达。细胞随机分为5组:细胞对照组(培养48 h)、溶剂对照组(0.1%DMSO孵育48 h)、DHC模型组(DHC 10.0μmol·L^-1处理48 h)、BVT对照组(BVT 10.0μmol·L^-1处理48 h)和BVT干预组(BVT 10μmol·L^-1处理1 h后再给予DHC10.0μmol·L^-1,继续处理48 h)。5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖试剂盒检测NSC的增殖能力;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞毒性;超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)检测11β-HSD1酶的还原活性;Wes...     

某些黄酮类和三萜皂苷类化合物对豚鼠肾的11β-羟化类固醇脱氢酶的抑制作用(英文)

目的:研究某些生物黄酮和三萜皂苷对豚鼠肾皮质11β羟化类固醇脱氢酶(11β-OHSD)的抑制作用.方法:肾皮质微粒体制备中加入氢化可的松,NADP,triton DF-18和被研究的化合物分别经37℃,1 h孵育,在HPLC梯度洗脱条件下,测定氢化可的松成为可的松的转化率来表示11β-OHSD的活性.结果:甘草酸、柚皮素、非瑟素、大黄素对11β-OHSD抑制的IG_(50)分别为254,336,470,527 μmol·L~(-1).齐墩果酸抑制此酶的IC_(50)值为黄芪甲苷的两倍.柚皮素对此酶的抑制是竞争性的.结论:柚皮素、非瑟素、大黄素等类似甘草酸,它们对肾皮质的11β-OHSD有不同程度的抑制作用.     

提高甾体微生物11β—羟化的酶活性

以犁头霉３．６５及其突变菌株为试验菌株，通过细胞稀释，添加硫酸镁、吐温８０、青霉素以及其他方法，进行微生物１１β－羟化的５Ｌ发酵试验。改进后氢化可的松的产率可提高１２．１％。如以ＵＶ－８４突变菌株为试验菌株，则产率提高１３．４％。     

噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶抑制药三维定量构效关系研究

摘 要 目的：通过构建噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶（11β-HSD）抑制药的三维定量构效关系(3D QSAR)模型,用于其结构改造及发现具有更高生物活性的11β-HSD抑制药。方法: 基于骨架叠合的模式,采用比较分子力场分析（CoMFA）的方法,构建噻嗪类衍生物定量构效关系模型,并用分子对接的方法对已构建的3D QSAR模型进行验证。结果: 得到了高精度的11β-HSD抑制药的3D-QSAR模型（CoMFA:q²=0.346,r²=0.850;其中q²为交叉验证系数,r²为非交叉验证系数）。结论:本文构建的3D QSAR模型可为11β-HSD抑制药骨架各个位点的化学修饰,实施定向合理设计,为开发新型抗2型糖尿病药物提供理论基础。     

钩吻素子对坐骨神经慢性束缚损伤模型大鼠脊髓3α-羟化类固醇脱氢酶表达的影响

目的观测在钩吻素子治疗CCI大鼠NPP过程中脊髓3α-HSD的表达动态变化规律。方法:在大鼠CCI诱导的NPP模型上,于术后第3天开始,皮下注射给予钩吻素子(0.28,1.4,7 mg·kg-1)连续7 d,以免疫组织化学方法,观测脊髓3α-HSD蛋白水平的动态变化;以Realtime-PCR法测定脊髓3α-HSD基因表达水平的动态变化。结果免疫组织化学方法显示,3α-HSD在脊髓灰质均有分布;与sham组相比,CCI组、钩吻素子(7,0.28 mg·kg-1)大鼠脊髓背角3α-HSD蛋白表达随术后时间延长有上升趋势,其中钩吻素子(7 mg·kg-1)治疗组和CCI组相比,术后第9天脊髓3α-HSD蛋白表达的升高具有显著性差异,并且持续至第13天(停药后4 d)。Realtime-PCR显示,治疗组大鼠3α-HSD mRNA表达随术后时间延长逐渐增强趋势。CCI大鼠钩吻素子(7 mg·kg-1)给药治疗后,术后第4天3α-HSD mRNA表达就有显著提高;术后第6天CCI组、钩吻素子(7,0.28 mg·kg-1)治疗组的3α-HSD mRNA表达均显著提高,但钩吻素子(7,0.28 mg·kg-1)治疗组与CCI组相比无显著差异;术后第9、13天,与Sham组相比,CCI组、钩吻素子(7,0.28 mg·kg-1)治疗组的3α-HSD mRNA表达均进一步显著提高,其中钩吻素子(7 mg·kg-1)治疗组与CCI组、钩吻素子(0.28 mg·kg-1)治疗组相比均有显著差异。结论钩吻素子抗NPP作用可能与上调脊髓3α-HSD酶表达有关。