Intermedin在两肾一夹高血压大鼠中的表达

目的 观察Intermedin(IMD)在两肾一夹(2-kidneyl-clip,2KlC)高血压大鼠肾脏和腹主动脉中的变化及其意义.方法 采用2KlC复制肾性高血压大鼠模型,随机分为正常组、模型组.分别测定平均颈动脉压(mCAP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力变化最大速率(LV±dp/dtmax),左心重与体重比值(LVM/BW)及右肾重与左肾蓖比值(RK/LK).免疫组化法检测IMD的水平.结果 模型组大鼠mCAP和LVEDP比正常组升高48.23%、340%(P均<0.01),LV+dp/dtmax和LV-dp/dimax降低51.26%和24.65%(P均<0.01),LVM/BW以及RK/LK升高36.77%(P<0.05)、26.35%(P<0.01);与正常组比较模型组肾脏和腹主动脉IMD的含量分别增加了26.15倍和4.80倍(均P<0.01).结论 肾性高血压大鼠引起肾脏和腹主动脉IMD蛋白表达增加,其变化可能参与了肾性高血压的发病过程.     

肾性高血压大鼠动脉功能重构及K^＋通道开放剂的作用

目的探讨肾陛高血压大鼠动脉功能重构及K^＋通道开放剂的作用。方法40只SD大鼠,随机分为四组,A组为对照（假手术组）,其余3组通过“两肾一夹”（2K1C）方法制成肾性高血压模型,分别为B：2K1C组,C：吡那地尔组,D：吡那地尔＋优降糖组。术后3周通过灌胃途径予以C、D相应药物干预。术后每周检测各组大鼠血压。术后6周处死,分别取四组大鼠左股动脉、腹主动脉,行离体动脉环试验,观察对氯化钾（KCl）、去甲肾上腺素（NE）、硝酸甘油（NTG）的反应变化。结果1周后大鼠血压开始升高（P〈0．05）,3周达高峰（P〈0．01）,心率无明显变化（P〉0．05）。经灌胃途径予以相应药物处理3周后观察结果。6周后C组血压较B组降低（P〈0．05）,D组血压较C组升高（P〈0．05）。股动脉及腹主动脉收缩反应,B组对KCl、NE的收缩反应较A组增强（P〈0．05）,对硝酸甘油的舒张反应减弱（P〈0．05）。C组对KCl、NE的收缩反应较B组减弱（P〈0．05）,对硝酸甘油的舒张反应增强（P〈0．05）。结论Katp通道开放剂吡那地尔可减弱肾性高血压动脉功能改变,提示K^＋通道在RHR血管功能重构中可能发挥一定作用。     

自拟宝肾方对糖尿病大鼠肾组织VEGF表达的影响及其疗效

目的：探讨自拟宝肾方对糖尿病大鼠肾组织血管内皮生长因子VEGF表达的影响及其疗效．方法：采用腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型．随机分为正常对照组（C组）、糖尿病模型组（D组）和宝肾方治疗组（DB组）．给药8wk后,观察各组大鼠血糖（BG）、体质量（BW）、肾质量／体质量（KW／BW）、血尿素氮（BUN）、胆固醇（CHO）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAER）,行肾组织HE染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组化方法分析肾组织VEGF蛋白的表达情况．结果：D组各生化指标与C组存在明显差异（P〈0．01）;DB组较D组KW／BW降低（P〈0．05）,Ccr明显升高（P〈0．01）,BUN,CHO,UAER明显降低（P〈0．01）．D组较C组肾组织VEGF蛋白表达明显升高（P〈0．01）;DB组较D组肾组织VEGF蛋白表达降低（P〈0．05）．结论：宝肾方对糖尿病大鼠肾功能具有保护作用,其机制可能是调节肾组织VEGF的表达,从而减轻肾脏病理损害,发挥其保护作用．     

千层纸素A内皮依赖性舒张大鼠离体血管的作用

目的：研究千层纸素A对离体大鼠胸主动脉的血管舒张作用及其内皮依赖性作用机制。方法：分离wistar大鼠的胸主动脉,采用离体大鼠胸主动脉环张力测定法检测千层纸素A对1Mmol／L去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）或60mmol／L氯化钾预收缩的大鼠离体胸主动脉环的舒张效应,并观察去内皮或用一氧化氮合酶抑制剂N-硝基L-精氨酸甲酯（NG-nitro-Largininemethylester,LNAME）预处理后千层纸素A舒张血管作用的变化。结果：千层纸素A（10、100μmol／L）可以舒张NE（1μmol／L）和氯化钾（60mmol／L）预收缩的内皮完整的离体血管,10、100μmol／L药物浓度组与溶剂对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;对去内皮血管的舒张作用显著低于内皮完整的血管（P〈0．05,P〈0．01）;终浓度为100μmol／L的L—NAME可以显著降低100μmol／L千层纸素A的舒血管作用,加入L—NAME组-9不加入抑制剂组比较差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：千层纸素A可通过内皮依赖的一氧化氮途径发挥舒张血管的作用。     

两肾-夹肾性高血压大鼠血浆中Intermedin含量的变化

目的观察两肾—夹（2-kidney1-clip,2K1C）肾性高血压大鼠血浆中Intermedin（IMD）含量的变化。方法将雄性SD大鼠随机分成正常组对照组和2K1C高血压模型组各20只,采用2K1C复制肾性高血压大鼠模型,检测心功能、左心重与体重比值（LVM/BW）。用放射免疫学方法检测IMD和血管紧张素Ⅱ（angiotensin,AngⅡ）的含量。结果与正常组相比,模型组大鼠心功能抑制,LVM/BW比值及血浆中IMD和AngⅡ的含量升高。结论两肾—夹大鼠血浆中IMD和AngⅡ含量升高,可能通过增加血循环中IMD的浓度调节血压以及对抗高AngⅡ的升血压作用。     

磷脂酰肌醇3激酶途径在哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的：观察哮喘大鼠肺组织中p-Akt、p-p70^s6k含量变化,探讨磷脂酰肌醇3-激酶（P13K）信号转导途径在哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖中的作用。方法：SPF级健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组（C组）、哮喘组（A组）和wortmannin干预组（W组）,每组12只。以卵蛋白（OVA）致敏和激发的方法制备大鼠慢性哮喘模型。观察各组大鼠气道炎症和细胞浸润情况;以图像分析软件测定气道壁厚度（Wat）及气道平滑肌层厚度（Wam）;以Westernblot法检测肺组织p-Akt及p-p70^s6k表达情况。结果：①A组大鼠War、Wam大于C组（P〈0．01）;W组大鼠War、Wam小于A组（P〈0．01）,大干C组（P〈0．01）。②A组p-Akt及p-p70^s6k。含量均高于C组（P〈0．01）;W组低于A组（P〈0．01）,但高于C组（P〈0．01）。③p-Akt蛋白含量与Wam／Pbm呈显著正相关（r=0．779,P〈0．01）;p=Akt蛋白含量与P—p70^s6k蛋白含量呈显著正相关（r=0．803,P〈0．01）。结论：哮喘大鼠肺组织中P13K／Akt／p70^s6k途径激活,抑制该途径可减轻哮喘大鼠ASMC增殖。     

磷酸二酯酶在鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用

目的观察磷酸二酯酶（PDE）1和PDE3亚型在大鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用。方法采用RT-PCR检测PDE1和PDE3亚型mRNA的表达。将大鼠胸主动脉制备成2—3mm的血管环,苯肾上腺素（PE）诱导血管环收缩后,分别用特异性PDE1抑制剂IC86340和PDE3抑制剂milrinone处理去除内皮组和保留内皮组的血管环,测定两组舒张血管的作用。结果①PDE1A、PDE1B、PDE1C、PDE3A和PDE3B亚型mRNA在大鼠胸主动脉均有表达。②在保留内皮组和去除内皮组,IC86340均舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）;并且对去除内皮组的舒张作用小于保留内皮组（P〈0．01）。③在保留内皮和去除内皮组,milrinone均可舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）;但milrinone在低浓度时（1&#215;10^-6.5～1&#215;10^-6mol／L）,去除内皮组舒张血管的作用大于保留内皮组（P〈0．05）,而高浓度（1&#215;10^-5.5 ～1&#215;10^-5mol／L）时两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PDE1和PDE3亚型mRNA在大鼠胸主动脉表达并参与血管张力的调节。PDE1部分通过血管内皮依赖的机制调节血管张力,PDE3则通过内皮非依赖的途径调节血管张力。     

天麻钩藤饮对肾血管性高血压大鼠醛固酮和血管紧张素Ⅱ的影响

目的：观察天麻钩藤饮对肾血管性高血压大鼠醛固酮（aldosterone,ALDO）和血管紧张素Ⅱ（angiotension Ⅱ,AngⅡ）的影响。方法：将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组和天麻钩藤饮组,每组12只。模型复制后第5周开始给药,连续治疗8周。然后观察各组大鼠左室质量（left ventricular mass,LVM）、左室质量指数（lef tventrieular mass index,LVI）和心肌组织胶原（colloid,Coll）浓度,同时检测各组大鼠血浆和心肌组织中AngⅡ和ALDO水平。结果：12周后模型组大鼠的LVM、LVI和Coll均明显高于假手术组（P〈0．05,P〈0．01）;卡托普利组和天麻钩藤饮组大鼠的上述指标均有显著降低（P〈0．01）,而两药之间没有显著性差异（P〉0．05）。模型复制12周后,模型组大鼠血浆和心肌ALD0和AngⅡ水平显著高于假手术组（P〈0．01）;卡托普利显著降低血浆和心肌AngⅡ水平（P〈0．05）,而对血浆和心肌ALD0水平则无显著性影响（P〉0．05）;天麻钩藤饮则同时降低了血浆和心肌ALD0和AngⅡ水平（P〈0．05,P〈0．01）。结论：天麻钩藤饮能够缓解和逆转左室肥厚和心肌纤维化,其作用可能与降低血浆和心肌局部ALDO、AngⅡ水平有关。     

充血性心力衰竭大鼠心肌及海马组织GSK-3β表达的变化

目的：探讨充血性心力衰竭大鼠心肌及海马区GSK-3β的变化。方法：将25只成年雄性SD大鼠随机分为正常组（5只）、假手术组（10只）和模型组（10只）,采用腹主动脉部分缩窄术建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型。术后l、2、4、8周应用超声心动图动态监测左室舒张末期内径（LVEDd）、舒张末期室间隔厚度（IVSd）和左室后壁厚度（LVPwd）;计算心肌重量指数[心重／体重（HW／BW）、左室重／体重（LVW／BW）];免覆组织化学染色法检测大脑海马区GSK-3β和P-GSK-3β表达变化,结果：模型组LVEDd、1VSd、INPWd高于正常组和假手术组,且呈时间依赖性上升趋势（P〈0．01）,模型组心肌重量指数与正常组和假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。模型组心肌和海马组织p-GSK-3β灰度值明显高于假手术组（P〈0．01）。结论：压力超负荷性心力衰竭发生过程中,大脑海马区p-GSK-3β表达量明显增高,GSK-3β活性明显下降。     

Apelin-13对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响及其信号转导途径

目的研究心血管活性肽Apelin-13对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响,并探讨其信号转导途径。方法将雄性SD大鼠随机分为对照组（n=17）和Apelin-13组（n=15）,建立在体大鼠心肌缺血-再灌注模型,对照组在再灌注前5min给予生理盐水颈静脉注射,Apelin-13组给予0．1mg／kgApelin-13颈静脉注射,用伊文思蓝和TTC双重染色法测定心肌梗死区（IS）面积和缺血危险区（ARR）面积,计算IS面积占ARR面积的百分比（IS／ARR）;TUNEL法测定心肌细胞凋亡;Western blotting法检测ERKl／2蛋白的表达。结果Apelin-13组的IS／AAR和心肌细胞凋亡指数均显著低于对照组[（38．33&#177;12．95）％vs（52．61&#177;11．00）％,（0．21&#177;0．02vs0．31&#177;0．05]（P〈0．05）;Apelin-13组P—ERK1／2的表达较对照组明显增加（1．15&#177;0．16vs0．63&#177;0．07）（P〈0．05）。结论Apelin-13具有心肌保护作用,能够缩小心肌梗死面积,减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与ERK1／2 MAPK激酶途径激活有关。     

逍遥软胶囊总挥发油对SD大鼠离体胸主动脉环的作用

目的：观察逍遥软胶囊总挥发油及当归、薄荷单味药材挥发油对sD大鼠离体胸主动脉环的作用。方法：采用大鼠离体胸主动脉环灌流,静息张力2．5g,观察总挥发油及当归、薄荷单味药材挥发油对氯化钾（KC1）或苯肾上腺素（PE）预收缩的作用。结果：总挥发油能明显舒张由KC1、PE预收缩的大鼠主动脉环,其血管舒张作用并不依赖血管内皮,0．01％总挥发油最大舒张分别达95．8％±2．3％、55．5％±4．0％。终浓度0．01％当归挥发油、0．01％薄荷挥发油也均能抑制KC1和PE诱导血管环的收缩,但作用强度有不同,对KC1预收缩舒张分别为84．7％±3．9％、27．3％±4．6％,对PE预收缩的舒张分别为52．0％4±3．2％、47．8％±3．1％。结论：逍遥软胶囊总挥发油及当归、薄荷单味药材挥发油对离体血管环具有舒张作用。     

葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的影响

目的：观察葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的影响。方法：雄性SD大鼠80只,体质量180～220g,建立“二肾一夹”大鼠肾性高血压模型,将模型复制成功的大鼠随机分为4组。用血压测定仪测定给予葛根提取物前后大鼠尾动脉压的变化,并观察葛根提取物对高血压大鼠血清一氧化氮（nitricoxide,NO）含量的影响。结果：与模型组比较,葛根提取物组大鼠血压显著降低（P〈0．05,P〈0．01）;而血清NO水平显著升高（P〈0．01）。结论：葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的降低作用可能与升高血清NO水平有关。     

复方降压1号对两肾一夹大鼠的降压作用及其毒性

目的:研究复方降压1号口服给药对两肾一夹大鼠的降压作用及毒性。方法:采用两肾一夹(2K1C)法复制肾血管性高血压大鼠模型,取32只造模成功的大鼠随机分为复方降压1号高低剂量(0.6g/kg、0.2g/kg)组、尼群地平(0.001g/kg)组和模型对照组(蒸馏水5ml/kg),另设假手术组(蒸馏水5ml/kg)。按上述设定剂量每日灌胃给药1次,连续4周,每周测量血压和体重,4周后测定血脂、右肾湿重、肾功能和尿酸含量。采用分组法测定小鼠口服半数致死量(LD50)。结果:复方降压1号高低剂量组和尼群地平阳性组大鼠血压明显降低(P<0.05或P<0.01),其高剂量组降压作用较尼群地平组强(P<0.05),而对血脂、肾功能、尿酸和右肾湿重及其系数无明显影响。小鼠灌胃给药的LD50为18.066g/kg,按体重和动物系数计算约为成人量的643倍和72倍。结论:复方降压1号能明显降低两肾一夹大鼠的血压,其高剂量组降压效果强于尼群地平,对血脂、肾功能和尿酸无明显影响;其小鼠口服毒性较小。     

两肾-夹高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2的表达

目的：观察两肾-夹（2K1C）高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2（ACE2）蛋白和mRNA的表达。方法：30只雄性Wister大鼠随机分为2组,对照组和2K1C高血压组各15只。鼠尾容积法测定术前、术后1周、4周、8周的血压变化。8周后,免疫组化法检测肾脏ACE2蛋白表达,放射免疫分析法测定心肌组织AngⅡ水平,逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法检测肾脏ACE2 mRNA表达。结果：①2K1C组术后血压明显高于术前和对照组（P〈0．01）;②与对照组相比,高血压模型组心肌局部AngⅡ浓度显著升高（P〈0．01）;③高血压模型组ACE2蛋白和mRNA表达较对照组明显降低（均P〈0．05）。结论：2K1C高血压大鼠心肌局部AngⅡ浓度升高,肾脏组织ACE2蛋白和mRNA表达降低,这可能是两肾-夹高血压大鼠血压发生的机理之一。     

异鼠李素对大鼠主动脉环的舒张作用

目的：研究异鼠李素（Iso）对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用,并探讨其可能的舒张机制。方法：采用累计加药法,观察Iso、槲皮素（Que）和硝普钠对大鼠主动脉血管环的舒张作用,以及内皮一氧化氮合酶（eNOS）选择性抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）、鸟苷酸环化酶（GC）抑制剂亚甲蓝（MB）、前列腺素（PGs）抑制剂吲哚美辛（Indo）、ATP依赖钾通道（KATP）选择性抑制剂格列本脲（GLY）对Iso舒张去甲肾上腺素（NE）收缩的胸主动脉环的影响。结果：Iso（1100μmol/L）与Que（1100μmol/L）对离体大鼠内皮完整胸主动脉环均有浓度依赖性的舒张作用,且Iso与Que的舒张效应没有明显差异（P〉0.05）,两者均在10-4mol∕L时舒张作用达到100%。Iso与Que最大舒张反应的半数有效浓度（EC50）分别为4.26×10-5mol/L,4.28×10-5mol/L,两者的EC50无明显差别（P〉0.05）。Iso和硝普钠相比,对内皮完整胸主动脉环的舒张能力显著减少（P〈0.01）。Iso在低浓度（1～30μmol/L）的舒张作用内皮完整组明显强于去内皮组（P〈0.05）,而在高浓度（60100μmol/L）时,去内皮组与保留内皮组的舒血管作用无显著性差异（P〉0.05）。L-NAME、MB及Indo均可以部分阻断Iso的舒血管作用,与对照组比有统计学意义差异（P〈0.05）,而GLY不能阻断Iso的舒血管作用,与对照组比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：异鼠李素对离体大鼠动脉环可产生浓度依赖的舒张作用,异鼠李素在低浓度时舒血管作用具有内皮依赖性,而在高浓度时,为非内皮依赖性机制。异鼠李素舒血管机制可能与内皮NO/GC/cGMP途径以及环氧合酶途径有关,与ATP激活钾通道无关。     

5-羟基癸酸盐对低氧肺动脉高压大鼠肺血管重建的影响及其机制

目的：探讨线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂（5-羟基癸酸盐,简称5-HD）对慢性低氧肺动脉高压大鼠肺动脉血管重建的影响及其机制。方法：雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、低氧＋PBS组、低氧＋5-HD组（5mg·kg^-1·d^-1）（n=8）。采用常压间断低氧法建立大鼠低氧肺动脉高压模型。大鼠在慢性低氧1周后,每天皮下注射5-HD一次,共3周,对照组置于同一实验室内。4周后右心导管法检测肺动脉平均压（mPAP）,颈总动脉插管测颈动脉平均压（mCAP）,称取右室（RV）和左室＋室间隔（LV＋S）的重量,以RV/（LV＋S）比值比来反映右心室重量的变化。光镜下结合图像分析软件测定肺小动脉相对中膜厚度（PAMT）,透射电镜观察肺细小动脉超微结构的变化,免疫组织化学染色检测肺小动脉平滑肌骨架蛋白α-actin表达,反映肺血管重建情况。酶标仪法检测肺组织匀浆Caspase9、Caspase3酶活性,反映肺血管凋亡情况。结果：①低氧＋PBS组mPAP、RV/（LV＋S）、PAMT、α-actin含量显著高于正常组（P〈0.05）;低氧＋5-HD组mPAP、RV/（LV＋S）、PAMT、α-actin含量显著低于低氧＋PBS组,但高于正常组（P〈0.05）,mCAP三组间差异无显著性;②透射电镜显示低氧＋PBS组肺小动脉内皮细胞肿胀,竖状突起,凸向管腔,与基底膜相连处有大量空泡,内弹力板高度扭曲,粗细不均匀,部分区域结构不清甚至断裂,胶原纤维增多,中膜平滑肌细胞增生、肿胀。低氧＋5-HD组内皮细胞形态规则,中膜平滑肌层变薄,胶原纤维明显减少,弹力板基本正常;③低氧＋5-HD组大鼠肺小动脉平滑肌细胞胞浆线粒体Caspase9酶活性、Caspase3酶活性显著低于正常组,但显著高于低氧＋PBS组（P〈0.05）。结论：①肺动脉平滑肌细胞线粒体凋亡途径在低氧所致肺动脉高压肺动平滑肌层重构中起重要作用。②5-HD可能有逆转慢性低氧引起的肺血管重建的作用。     

肾性高血压大鼠主动脉对血管活性物质反应的性别差异

目的:探讨肾性高血压大鼠主动脉对血管活性物质反应的性别差异.方法:雄性与雌性SpragueDawley大鼠,用二肾一夹(2K1C)方法复制肾性高血压模型.术后随机分4组:雄性假手术、雄性2K1C、雌性假手术、雌性2K1C组,4 w后测定血压和左心室重/体重,并取胸主动脉进行离体血管环实验.结果:术后4w,与假手术组比较,2K1C组平均动脉压显著升高,左心室重/体重比显著增大,主动脉对乙酰胆碱(Ach)的舒张反应明显减弱,对NE和高钾溶液的收缩反应明显增强.在假手术组,雄性与雌性大鼠术后4 w上述各项指标改变差异无显著性.在2K1C组,与雌性大鼠相比较,雄性大鼠的改变更为明显.结论:2K1C肾性高血压的发展过程中,主动脉对血管活性物质的反应存在性别差异.