肝康冲剂抑瘤作用观察及机理探讨

观察肝康冲剂对动物移植性肿瘤Ｓ１８０、Ｈ２２的抑瘤作用，并对肝康冲剂的作用机理进行了探讨。结果显示：肝康冲剂对Ｓ１８０、Ｈ２２具有一定的抑瘤作用，其作用机理与提高荷瘤小鼠的免疫功能，阻滞Ｇ０／Ｇ１期细胞进入Ｓ期有关     

活髓片对化疗小鼠骨髓细胞周期及DNA含量的影响

用流式细胞仪（ＦＬＯＷＣＹＴＯＭＥＴＲＹ、ＦＡＣＭ）对白减模型小鼠服用活髓片（ＨＳＰ）后的骨髓细胞周期及ＤＮＡ含量进行了探讨和分析，并与茜草双酯等组进行比较，结果发现：活髓片组（ＨＳＰ）的Ｇ２／ｍ期的细胞大大提高于其它各组（Ｐ＜００１），加速Ｓ期细胞向Ｇ２／ｍ期细胞转化，同时能提高Ｇ０／Ｇ１期细胞（Ｐ＜００１），促进细胞增值及ＤＮＡ的合成     

消积饮对Lewis肺癌细胞周期影响的实验研究

目的：探讨消积饮对Lewis肺癌生长的作用机制,方法：将Lweis肺癌细胞接种在C57BL／6小鼠皮下,把小鼠随机分成消积饮组,替和氟组和生理盐水组,分别给预消积饮,替加氟和生理盐水灌胃,每d1次,21d后停药,测定各组小殷的皮下瘤重并计算抑瘤率以及运用流式细胞仪分析观察各组小鼠肿瘤细胞细胞周期各时相分布的情况,结果：消积饮组的皮下瘤重较生理盐水组低（P＜0．01）,抑瘤率是43．09％,消积饮组的肿瘤细胞G0／G1期细胞比例增高,S期细胞比例降低（P＜0．01）,呈现明显的G０／G1期阻滞现象,结论：消积饮通过促使肿瘤细胞发生Ｇ０／Ｇ１期阻滞,阻断细胞ＤＮＡ合成而抑制Ｌewis肺癌生长。     

榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-16A3的抗肿瘤作用及对细胞周期的影响

榄香烯可明显抑制ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３ 细胞的增殖,杀伤肿瘤细胞,榄香烯对Ｇ０／Ｇ１ 期细胞无明显作用,主要作用于Ｓ 期,阻止由Ｓ 期进入Ｇ２／ Ｍ 期,从而抑制肿瘤生长;可在Ｇ０／Ｇ１ 期前出现一个凋亡特异的ＡＰ峰     

中药乳宁Ⅱ号对人乳腺癌MCF—7细胞株体内外生长的影响

为验证中药乳宁Ⅱ号对乳腺癌的治疗作用，本文选用人乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７作为研究对象，观察乳宁Ⅱ号对其体内外生长的影响。结果表明，含中药乳宁Ⅱ号的药物血清法在培养液中浓度为２０％和３０％时对ＭＣＦ－７的体外生长的抑制率达２４．４％、２４．２％（Ｐ〈０．０５），流式细胞仪检测结果说明其机理可能是抑制癌细胞的ＤＮＡ合成，阻滞癌细胞于Ｇ０／Ｇ１期，减少Ｓ期比率；同时用中药乳宁Ⅱ号灌饲ＭＣＦ－７荷瘤裸小鼠的     

天花粉蛋白诱导肝癌Ⅱzz瘤株凋亡的实验研究

目的：探讨天花粉蛋白（TCS）诱导肝癌Ⅱzz瘤株凋亡的作用机制。方法：呆用不同浓度的TCS处理细胞后，用流式细胞仪检测肝癌细胞Ⅱzz瘤的凋亡率及细胞周期分布。结果：50μmol／L、100μmol／L的TCS能诱导肝癌细胞Ⅱzz瘤凋亡，凋亡率与剂量呈正相关；Ⅱzz随药物浓度及作用时间变化。细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：TCS具有一定的抗肝癌作用，其机制与促讲肝癌细胞凋亡及抑制癌细胞增殖有关。     

抗癌方对HepG2人肝癌细胞株P53蛋白表达的影响

目的观察抗癌方对ＨｅｐＧ２人肝癌细胞株Ｐ５３蛋白表达的影响，以探讨其抗癌作用机理。方法采用ＭＴＴ法分析抗癌方对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２细胞生长的影响。结果抗癌方能明显抑制ＨｅｐＧ２的生长，对ＨｅｐＧ２细胞的半数生长的抑制剂量（ＩＣ５０）为１ｍｇ／ｍｌ。ＬＳＡＢ方法观察发现抗癌方能诱导ＨｅｐＧ２细胞株从相当弱到非常强的比较致密的细胞核染色，且低浓度（０．１ｍｇ／ｍｌ）Ｐ５３蛋白表达诱导作用强于高浓度（１ｍｇ／ｍｌ），几乎将近５０％的细胞出现Ｐ５３蛋白高表达。提示：抗癌方诱导ＨｅｐＧ２Ｐ５３蛋白高达表，可能为其杀伤ＨｅｐＧ２细胞株、诱导其凋亡的机制之一。     

槲皮素对免疫功能及DNA合成的影响

槲皮素ｉｐ５０、１００ｍｇ／ｋｇ能显著增强ＳＲＢＣ诱导的小鼠迟发型超敏反应，抑制Ｓ１８０瘤细胞ＤＮＡ的合成。槲皮素ｉｐ１００ｍｇ／ｋｇ还能明显增强ＣｏｎＡ诱导的大鼠脾淋巴细胞增殖，并对抗强的松龙所致此反应的抑制，促进小鼠溶血素的形成     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达作用

目的：探讨复方活血汤（简称中药）对免疫诱导的再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法：建立免疫诱导的再障小鼠模型，喂饲１００％复方活血汤每次０２ｍｌ，每日２次，第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族（ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９，α４β１；又称ＶｅｒｙＬａｔｅＡｎｔｉｇｅｎｓ，ＶＬＡ家族）及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组（Ｐ＜００５），且与正常组无明显差异；中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组（Ｐ＜００１）；而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于再障组（Ｐ＜００１）。结论：复方活血汤能增强免疫再障小鼠骨髓造血细胞粘附分子ＣＤ４９ｄ和细胞周期蛋白Ｄ２的表达，促进造血细胞的增生。     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子 …

目的：探讨复方活血汤对免疫诱导的再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法;建立免疫诱导的再障小鼠模型,喂饲１００％复方活血汤每次０．２ｍｌ,每日２次,第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组,且与正常组无明显差异;中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组;而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于     

去甲斑蝥素杀伤HeLa细胞机制研究

目的研究去甲斑蝥素(NCID)杀伤肿瘤细胞的机制。方法用流式细胞光度术测量 NCTD 对细胞 DNA 复制的作用;用同步化 HeLa 细胞检测 NCTD 作用的时相性;间接免疫荧光显示胞质微管结构的改变及与 M 期阻滞、细胞死亡的相关性。结果 NCTD 不抑制细胞 DNA 复制,不杀伤 G_1期、S 期细胞;5、10μg/ml时,使胞质微管改变、M 期阻滞、畸形率升高,强烈杀伤 HeLa 细胞。2μg/ml 时,不杀伤细胞,仅促进增殖。结论 NCTD 具有刺激细胞增殖和杀伤肿瘤细胞的双向作用,并呈剂量依赖性。临床应用须达到足够剂量方有抗癌效果。     

冰茶栓对星形胶质细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的:应用血清药理学观察冰茶栓(BCS)对体外培养星形胶质细胞(Astrocyte AST)增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:原代培养SD乳鼠大脑皮层AST,将纯化后的细胞经免疫细胞化学鉴定后,随机分为药物组(高、中、低剂量)和对照组,加入相应血清共培养48h后,MTT比色法观察AST的增殖情况,流式细胞仪检测AST的凋亡率和细胞周期的变化。结果:MTT结果显示,冰茶栓高、中剂量组较空白血清组细胞数量明显减少(P<0.01,P<0.05),低剂量组与空白血清组比较无显著差异;流式细胞仪检测结果显示,冰茶栓组细胞凋亡比例较对照组明显增加(P<0.01);冰茶栓组G1期细胞比例较对照组明显提高(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例较对照组明显降低(P<0.01)。结论:冰茶栓对体外培养的星形胶质细胞增殖具有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡,抑制其由G1期向S期和G2/M期的转化。     

当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡的实验研究

目的从细胞凋亡的角度探讨当归多糖(APS)抑制白血病细胞增殖的机制。方法体外培养白血病细胞株K562,培养时添加25 mg/L、250 mg/L、2 500 mg/L当归多糖,分别于第2,4,6天,取细胞用台盘蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术分析细胞周期分布;免疫组织化学检测bcl-2抗凋亡基因的表达。结果细胞生长曲线显示25~2 500 mg/L的当归多糖对白血病细胞株K562有显著抑制作用,且呈剂量效应关系。流式细胞术结果显示250 mg/L作用后S,G2+M期K562细胞数减少,G0/G1期细胞增多。APS诱导细胞后bcl-2明显降低(P<0.05)。结论APS对白血病细胞株K562细胞的增殖具有显著抑制作用,APS通过阻止K562细胞进入S期而抑制其DNA合成,bcl-2表达降低可能是APS诱导白血病细胞凋亡重要途径之一。     

人参多糖体外诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的实验研究

目的研究人参多糖体外对人非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的作用。方法应用MTT法、流式细胞仪、Annexin V-PI双标、Hoechest荧光染色、TUNEL法等多种方法,体外研究人参多糖对A549细胞的凋亡作用；采用免疫组化的方法,观察药物作用后bcl-2表达的变化。结果人参多糖对A549细胞生长具有抑制作用,并有促凋亡效应；对细胞周期的影响表现为G_0/G_1期的阻滞,未见bcl-2表达的下调。电镜和Hoechst、TUNEL法都可观察到凋亡形态学的改变。结论人参多糖可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,这有可能是人参多糖抗肿瘤作用机制之一,其凋亡的发生与bcl-2的表达无明显关系。     

四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡影响的初步研究

目的:初步探讨不同浓度四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响。方法:采用流式细胞仪PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究不同浓度四味肝泰软胶囊作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果:各浓度四味肝泰软胶囊均可以调节G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而起到抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且这种诱导效应具有明显的时间-剂量-效应关系。结论:四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA的合成和诱导细胞凋亡有关。     

Effects of Coptidis Rhizoma on Cell Cycle, DNA Damage, and Apoptosis in L929 Murine Fibroblast Cells

Objective Coptidis Rhizoma(CR), a widely used traditional Chinese herbal medicine, is commonly believed to be non-toxic. However, little is known about its cytotoxicity and relevant mechanisms at cellular and genetic levels. The present study was conducted to explore the cytotoxicity of CR and its mechanisms related to cell cycle arrest, DNA damage, cell apoptosis, and mitochondrial membrane potential in L929 murine fibroblast cells. Methods The cells were cultured and treated with different concentration of CR aqueous extract for 24 h. Cell viability was determined by CCK-8 method, morphological changes, and mitochondrial membrane potential were observed with an inverted microscope, cell cycle and cell apoptosis were examined by flow cytometry and DNA damages were detected by comet assay. Results Our results showed that cell viability was significantly decreased in a dose-dependent manner when concentration was higher than 0.2 mg/m L. A concentration above 1 mg/mL altered the cells morphology. Each DNA damage indicator score increased in the groups with the concentration of above 0.1 mg/mL. Cells at G_2/M phase, cell apoptosis and mitochondrial membrane potential changed in the 2 mg/m L group. Conclusion Overall, our study suggests that CR at a high dosage exhibits cytotoxicity on L929 cells, which is likely to be the consequences of cell cycle arrest, DNA damage, cell apoptosis and mitochondrial membrane potential reduction.     

刺五加皂苷脂质体的制备及对肝癌移植瘤的抑制作用

目的:制备刺五加皂苷脂质体并研究其对肝癌移植瘤的抑制作用。方法:采用薄膜分散-超声法制备刺五加皂苷脂质体并检测其理化性质,用流式细胞仪检测此载药脂质体对HepG2肝癌细胞周期和凋亡的影响,并观察刺五加皂苷脂质体荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果:所制备的脂质体封率为63.43%,刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组均使肝癌细胞G0/G1期和S期比例明显下降,并观察到细胞凋亡,高剂量刺五加皂苷脂质体组荷瘤小鼠的抑瘤率(62.21%)显著高于低剂量组(45.23%)和游离刺五加皂苷组(46.16%,P均<0.05),而低剂量刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组无明显差异(P>0.05)。结论:刺五加皂苷脂质体能抑制肝癌细胞Hep G2增殖和诱导细胞凋亡,对小鼠肝癌移植瘤的生长有明显抑制作用。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

清毒饮、养正片影响白血病K562细胞增殖周期、细胞凋亡的实验研究

目的:观察清毒饮、养正片诱导人白血病细胞株K562细胞凋亡及对细胞增殖周期的作用;探索其时效关系,为临床提供选择最佳用药时机的实验基础.方法:制备含清毒饮、养正片药物血清,建立相应的培养体系,加入含药小鼠血清,培养K562细胞株;分别于培养12、24、36、48、72h收集细胞,固定、染色、上流式细胞仪进行细胞周期、细胞凋亡的检测.结果:人白血病K562细胞株存在有自然凋亡,正常小鼠血清无诱导该细胞凋亡的作用;清毒饮、阿糖胞苷具有诱导细胞凋亡的作用,且随着培养时间的延长凋亡率愈加明显.清毒饮对K562细胞周期的影响,还表现出明显的时间依赖性;随着培养时间的延长,当细胞出现明显凋亡时,细胞株S期显著下降,G0/G1期升高,提示清毒饮和清毒加养正合剂都可引起K562细胞株的G0/G1期阻滞,对凋亡的敏感性增强.结论:清毒饮能抑制K562细胞增殖、促进细胞分化、诱导细胞凋亡,提示该中药复方具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应,这也是中药复方协同化疗药物治疗白血病在增效减毒方面的关键机制;清毒饮对K562细胞发生细胞毒作用,是通过抑制其细胞周期S期、将其阻滞于G1期,并通过促进K562细胞凋亡实现的,其作用强度与时间呈密切正相关.     

胃康复组方对小鼠S180实体瘤的抑制及其凋亡诱导作用

目的：研究胃康复组方对小鼠S180实体瘤的抑制，探讨其诱导细胞凋亡作用。方法：造模S180荷瘤小鼠，随机分为5组，胃康复组方按525，350，175 mg·kg^-1·d^-1剂量灌胃给药，造模对照组采用生理盐水灌胃给药，阳性药物组腹腔注射25 mg·kg^-1·d^-1环磷酰胺，连续处理10 d；考察胃康复组方的抑瘤作用，并采用流式细胞仪和DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡、细胞周期分布和凋亡相关基因蛋白表达。结果：胃康复组方显著抑制小鼠S180实体瘤的生长，可诱导肿瘤细胞凋亡，阻滞细胞周期在G₀-G₁期，其凋亡率呈现量效依赖关系；可使S180细胞中p53，bax基因表达上调，bcl-2基因表达下调。结论：胃康复组方具有明显的抗肿瘤作用，通过促进p53，bax基因表达和抑制bcl-2基因表达，诱导肿瘤细胞凋亡。