间期细胞遗传学及其在实体瘤分子诊断和发病机制研究中的应用

间期细胞遗传学即以标记的核酸探针用原位杂交的方法在完整细胞核中观察染色体的畸变。荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）不仅在基因组物理制图上立下汗马功劳,随着比较基因组技术的进展,人类基因组全部基因的分离克隆,基因表达谱的发展,将在实体瘤的染色体畸变诊断以及分子机制研究方向发挥更大的用途。间期细胞遗传学也将连接分子遗传学和细胞病理学的桥梁学科。     

间期细胞遗传学及其在实体瘤分子诊断和发病机理研究中的应用

间期细胞遗传学即以标记的核酸探针用原位杂交的方法在完整细胞核中观察染色体的畸变。荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）不仅在基因组物理制图上立下汗马功劳，随着比较基因组技术的进展，人类基因组全部基因的分离克隆，基因表达谱的发展，将在实体瘤的染色体畸变诊断以及分子机制研究方面发挥更大的用途。间期细胞遗传学也将成为连接分子遗传学和细胞病理学的桥梁学科。     

91例急性非淋巴细胞白血病的细胞遗传学研究

为探讨急性非淋巴细胞白血病患者细胞遗传学改变,对９１ 例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ） 的骨髓染色体进行了检查,对染色体畸变,特别是特异性染色体畸变以及染色体畸变发生率作了研究,结果有６７．０％ 的患者有染色体异常改变,其中结构异常占４３．９ ％ ,数目异常占２３ ．１％ 。Ｍ２、Ｍ３、Ｍ５、Ｍ４ 畸变比率最高,共占染色体畸变总数的９０ ．２ ％ ,Ｍ１、Ｍ７ 次之,Ｍ６ 较少有染色体畸变,此畸变与ＡＮＬＬ的细胞类型常带有一种特异的对应关系。同时对不同时期的染色体核型作了动态观察,表明染色体核型动态检查对于观察ＡＮＬＬ的病情及指导治疗和判断预后都有一定的价值。并对ＡＮＬＬ 的细胞遗传学与ＦＡＢ分型、免疫分型间的关系作了探讨,表明形态学、免疫学、细胞遗传学对ＡＮＬＬ分型是不可分割的一个整体。     

Giemsa显带后的染色体原位抑制杂交

G显带技术在识别中期染色体和染色体结构重排方面得到广泛地应用。然而,对非常小的结构畸变和标记染色体的特征分析仍常有困难。因此,用流式分离的单个染色体的λDNA文库做为探针的染色体原位抑制(CISS)杂交法,已作为一种辅助研究方法应用于临床细胞遗传学中。     

中国东北地区人群中不良孕产夫妇的细胞遗传学分析

目的 观察染色体异常在中国东北地区不良孕产夫妇中的分布类型及其与不良孕产的关系。方法 对来自辽宁省生殖健康重点实验室的2158对不良孕产夫妇进行细胞遗传学分析，普通G显带方法分析细胞核型，必要时采用C或R显带方法。结果 在2158对不良孕产夫妇中发现染色体异常137例，异常率为3.17%。其中数目异常3例，结构畸变134例。结构畸变中分别为相互易位90例，罗伯逊易位34例，倒位9例，缺失1例，经中国医学细胞遗传学国家培训中心（湖南）鉴定，43例为国内外首次报道。染色体异态378例，异态率8.76%。结论 在中国不良孕产夫妇中发生的染色体异常主要是染色体结构畸变，异常类型复杂、多样，其中染色体相互易位和罗伯逊易位所占比例最大，并呈现出随着流产次数的增加染色体异常率也增加的趋势。同时，染色体异态在不良孕产夫妇中发生率较高。细胞遗传学分析是不良孕产夫妇病因诊断的一个重要指标。     

流产胎儿中的13-三体

在自然流产胎儿中常见许多类型的染色体异常,而在新生儿人群中却少见或见不到,因此流产对研究染色体畸变特别有用。1976,4～1985,5作者在夏威夷Honolulu产科医院完成了一系列自然流产的细胞遗传学检查,主要目的是调查研究由于染色体畸变产生的生殖耗损,决定染色体畸变的双亲来源和研究不同类型的细胞遗传学畸变的流行病学。常染色体三体在自然流产胎儿中是最常见的染色体畸变。在自然流产胎儿中除1号和9号外,常染色体三体均有报道,但在新生儿中只有三种三体被发现,13号染色体就是     

Bloom氏综合征和DNA修复酶

常染色体隐性遗传疾病Bloom氏综合征细胞遗传学的异常表现很独特,而且变化很多,存在多种细胞核型、普遍的SCE率变化、染色体断裂等。对它的遗传物质基础研究发现,多种DNA修复酶的缺陷可能是染色体异常的直接原因,特别是DNA连接酶Ⅰ的缺陷和人类尿嘧啶DNA糖基酶的异常。对DNA连接酶Ⅰ的研究,还提示将其结构基因尽快克隆化,将对修复酶异常疾病的病因学研究产生重大影响。     

外周血中单个细胞染色体畸变的遗传学分析

目的对外周血中单个细胞染色体畸变的畸变类型及其临床表现进行遗传学分析。方法采用外周血常规培养法,培养72h后收获制片,G显带,读片及染色体核型分析,以每30~100个分裂相中找到1个异常染色体核型作为单个细胞染色体畸变的诊断标准。结果13例外周血单个细胞染色体畸变的畸变类型可分为平衡易位、倒位、缺失、重复及X染色体单体等,主要临床表现包括性发育异常、死胎流产及肢体畸形等。结论在遗传咨询中,对单个细胞染色体畸变的临床意义不可忽视,具有这种异常的个体生育后代时应做产前诊断。     

Fanconi贫血的细胞遗传学研究

作者对５例Ｆａｎｃｏｎｉ贫血患者的外周血淋巴细胞染色体的自发畸变及ＭＭＣ诱变后的染色体畸变进行了观察，发现其自发染色体畸变可见裂隙、断裂、内复制、ＳＣＥ频率增高等，经ＭＭＣ诱变后染色体畸变率明显升高，出现三射体、四射体等异常结构，ＳＣＥ频率骤增。作者认为ＦＡ的细胞遗传学研究为ＦＡ的临床诊断提供了重要的指标     

癌症病人末梢血淋巴细胞中自发性染色体畸变

最近,在细胞遗传学研究中发现一些类型的肿瘤病人有恒定和特异的染色体畸变。这提示在恶性病变开始时染色体改变的基础性作用。有报道大约98％的人和动物肿瘤有染色体结构和/或数目畸变,如染色体畸变率高,也具有预测价值。为了证实     

单个细胞染色体畸变的遗传学分析及实验对策

目的对外周血中单个细胞染色体畸变的类型及其临床表现进行遗传学分析并探讨相应对策。方法取两种培养基,采用外周血常规培养法,培养72h后收获制片,G显带,进行核型分析,以每30～100个分裂相中找到1个异常染色体核型作为单个细胞染色体畸变的诊断标准,并比较两种培养基中出现单个细胞染色体畸变的比例。结果26例外周血单个细胞染色体畸变的畸变类型可分为平衡易位,不平衡易位,倒位,缺失及性染色体数目异常等;主要临床表现包括性发育异常,不良生育史及病残等;两种培养基中出现单个细胞染色体畸变的比例有显著性差异。结论在遗传咨询中,单个细胞染色体畸变有一定的临床意义,具有这种异常的个体生育后代时可考虑做产前诊断;染色体制备要严格控制条件,使用有正规批号的培养基。     

产科诊断性超声安全性的研究进展

随着超声诊断在产科应用范围迅速扩大，诊断超声的安全性日益受到广泛关注。国外的大量工作基本上是离体实验、动物实验及流行病学调查，我国则利用计划生育的特殊条件，率先开展了临床研究，为国际诊断超声的发展，作出重要贡献。一、超声波的遗传学效应随着超声诊断在临床的广泛应用，遗传学效应是其安全性研究的重点内容之一。（一）细胞水平的遗传学效应染色体畸变率（CAR）、微核率（MR）、妹染色单体交换率（SCE）是目前公认的反映细胞水平DNA损伤的最佳指标。Macintosh1970年报道超声波能诱发染色体畸变，引起广泛关注。此后众…     

~3HTdR诱导乳鼠肺肝混合培养细胞的恶性转化及其染色体分析

对新生乳鼠肺、肝来源的原代混合培养细胞,在每ml培养液中加入0.1μci的~3HTdR进行诱导。受~3HTdR作用组细胞能长期存活,接种于免疫抑制动物形成纤维肉瘤,证明发生了恶性转化。埘恶性转化细胞进行染色体分析,见有长臂染色体、中着丝点染色体等稳定型畸变,以及染色体断片、单体断裂等非稳定型畸变,说明~3HTdR对DNA的损伤,是导致细胞染色体畸变,进而发生恶性转化的重要原因。非稳定性畸变在多次传代的转化细胞中仍然存在,说明微量~3HTdR可能残留于DNA中,持续对细胞造成损伤。     

应用限制性内切酶研究染色体畸变产生的分子机理

为研究染色体畸变形成和DNA双链断裂的关系,作者选择了几种专一性限制性内切酶,包括产生钝双链的EcoRV,PvuⅡ、SmaⅠ和产生粘性末端的NunⅡ、AsuⅡ、BamHⅠ。将这些酶导入经失活的仙台病毒渗透的中国地鼠卵巢细胞(CHD)和小鼠成纤维细胞(PG19)。观察了它们在不同细胞周期诱发染色体畸变的能力,以及DNA修复抑制剂对内切酶诱发畸变的影响。在第一组实验中,用限制性内切酶处理G1或S期细胞。在不同酶浓度下,EcoRV产     

特纳综合征患者Y染色体序列的检测

目的观察特纳综合征患者Y染色体序列出现的频率。方法研究本院23位有特纳综合征且知情同意的患者,其中,细胞遗传学是通过培养外周血淋巴细胞进行染色体核型分析,每个病人分析100个核型。基因组DNA是通过提取外周血淋巴细胞DNA,通过聚合酶链式反应扩增基因序列DYZ1、DYZ3、ZFY和SRY。结果细胞遗传学分析显示其中9位病人(39.2%)是45,X的核型,14位病人(60.8%)是嵌合的核型。8.7%(2/23)的病人被发现有Y染色体序列。这个比率与之前报道的近似。在细胞遗传学分析中并没有发现有Y染色体片段,但是通过淋巴细胞DNA分析却发现有Y染色体特异性序列。结论PCR技术显示2位特纳综合征病人(8.7%)有Y染色体序列,而其细胞遗传学分析均存在标记染色体。     

30例男性生殖系统发育异常的细胞遗传学研究

目的应用细胞遗传学技术探讨男性生殖系统发育异常与染色体畸变的关系.方法采用外周血培养制备染色体标本对30例男性生殖系统发育异常患者进行染色体核型分析.结果 30例男性生殖系统发育异常患者中47,XXY 10例;46,XX 1例,46,XY,del(Y)(q11)1例,46,XY,Y=18 1例,结论染色体畸变是男性生殖系统发育异常的重要原因之一,对男性生殖系统发育异常患者进行细胞遗传学检查是很有必要的.     

用FISH技术检测肝癌及喉癌细胞系染色体畸变

目的探讨肝癌及喉癌细胞系染色体畸变。方法选用９种染色体特异性探针，分别对肝癌及喉癌细胞系的染色体进行荧光原位杂交检测。结果在两种细胞系中，这些探针均呈现异常的杂交信号。肝癌细胞系中主要是结构畸变，而喉癌细胞系中染色体数目畸变占主要地位。两种细胞系中染色体畸变所涉及的范围极广，而且畸变类型极为复杂。结论与常规的细胞遗传学分析方法比较，荧光原位杂交技术具有快速、准确、灵敏等优点，可以用于肿瘤细胞染色体畸变的检测     

Bloom综合征患者体内染色体不稳定的依据:脱落细胞中微核数目增加

肿瘤发生与染色体畸变相关的证据最初来自对染色体断裂综合征的细胞遗传学研究.该疾病个体的细胞在体外培养时,其染色体断裂和重排率均明显增高.这种染色体改变在Bloom综合征(BS)、Fanconi贫血和共济失调性毛细血管扩张症中都是自发产生的,而在着色性干皮病中则由特殊的DNA损伤物质诱发.由于该类患者恶性肿瘤的发病风险远高于正常人,所以人们推论这类患者体内细胞同样具有染色体不稳定的特点,对此已获得一些间接证据,但迄今缺乏直接证据.本文报道了检查口腔粘膜、尿     

筛选常染色体畸变

近20年来,人类细胞遗传学飞速发展,发现了人类细胞遗传方面的许多异常,从而给人类遗传学与畸形学开辟了新的天地。先天性畸形患者可进行染色体研究。但为所有的畸形患者作染色体分析法检查,目前还办不到。如有筛选常染色体畸变的方法,将有助于决定有否进行该种检查的必要。近十年来,作者对于具有先天性畸形,智力低下和皮纹嵴图型(Dermatoglyphicpatterns)异常的患者作细胞遗传学检查。     

染色体易位及其在骨和软组织肉瘤诊断上的应用

研究表明,许多恶性肿瘤存在细胞遗传学异常,最常见的是梁色体结构畸变,包括染色体易位、倒位、缺失、重复、插入以及环状染色体和等壁染色体等。染色体易位是染色体异常最常见的一种表现形式,常见于淋巴造血系统恶性肿瘤及内和软组织肉瘤中。由于染色体易位具有肿瘤类型特异性,为非随机性异常,它对肿瘤的诊断具有重要意义。