两系裸小鼠繁育的初步结果

前文已报导本实验室建立的SPF动物室的设备条件以及对裸小鼠繁育管理方法。本文报导二种不同基因背景裸小鼠BALB/CA/JCL-nu/nu及Swiss-DF nu/nu,在SPF条件下繁育研究的初步结果,供国内有关单位参考。材料与方法 BALB/CA/JCL-nu/nu繁殖鼠分别于81年4月及9月二次自日本引进,前者为三对纯合子(nu/nu)裸小鼠(日本肿瘤研究所池川哲郎博士赠送),后者为7只雌性杂合子(nu/ )。Swiss-DF-nu/nu于81年11月自美国引进(Roswell Park Memorial InstituteMurphy,D.教授赠送)即3雄nu/nu,1雌     

裸基因对小鼠胸腺发育的影响

分别对7、14、21、28、35、60、90日龄的BALB/c-nu/nu、BALB/c-nu/+和BALB/c-+/+三种基因型小鼠的胸腺进行检查。结果发现BALB/c裸小鼠(nu/nu)缺乏胸腺,杂合子小鼠(nu/+)的胸腺重量和胸腺皮质厚度均明显低于纯合子正常小鼠(+/+)。提示突变小鼠胸腺的表现型受裸基因及基因型的控制。     

同源导入近交系绿色荧光裸小鼠Foxn1nu.B6-CAG-EGFP/SU的建立

目的建立一个能稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)的裸小鼠近交新品系,供包括人脑胶质瘤在内的所有人类肿瘤移植实验用。方法将雌性C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)转基因小鼠和雄性Foxn1nu裸小鼠,按同源导入方法进行杂交和回交,用荧光手电筒和匹配的眼镜、多功能活体成像仪、荧光显微镜对是否表达EGFP进行鉴别,传至F10后进行遗传学检测。结果所建品系命名为Foxn1nu.B6-CAGEGFP/SU(Soochow University),14个遗传生化位点中13个表型与BALB/c(Foxn1nu)吻合,唯Pep3(肽酶-3)的电泳为b型,而标准的BALB/c近交系为a型;外周血淋巴细胞占全部有核细胞15%,T淋巴细胞仅占0.3%,与亲本的Foxn1nu一致。结论成功地建立了一个既与亲本C57BL/6-Tg N(CAG-EGFP)-样稳定表达EGFP,又与Foxn1nu裸小鼠(BALB/c背景)一样具有T细胞缺乏的荧光裸小鼠新品系-Foxn1nu.B6-CAG-EGFP|SU,Pep3为b型是有别于Foxn1nu裸小鼠的生化遗传标记位点。     

应用空气层流室繁育裸小鼠——1982～1988年的研究结果

在2间面积为2×4×2.4M~3的空气层流室内繁育裸小鼠。室温25±2℃,相对湿度40～60％。1982～1988年共生产裸小鼠13466只,其中BALB/CA/JCL-nu/nu 5116只,swiss-DF-nu/nu8350只。BALB/CA/JCL-nu/+及swiss-DF-nu/+母鼠平均每窝产仔分别为6.0～7.4只及6.8～7.9只,断乳率分别为71.4～87.7％及72.1～87.6％。目前每月产量为200多只,两者的平均生产指数为2.4～3.3。大多数寿命超过10个月,最长达18个月。对nu/nu及同窝nu/+各2只进行微生物学检查。4种主要致病菌均为阴性。3只小鼠检出绿脓杆菌,1只小鼠检出大肠埃希氏菌。3种病毒均为阴性。体内外寄生虫也为阴性。我们应用裸小鼠已建立7个人癌移植瘤,并开展了免疫结合物及癌基因的实验治疗研究。     

裸小鼠稳产高产的经验

介绍裸小鼠生产过程中严格执行科学管理、控制微生物污染、选配营养合理的全价颗粒饲料、加强选种与育种、适当采用nu/nu(?)×nu/nu(?)的配种方式等保持裸小鼠稳产高产的经验     

同源导入近交系绿色荧光裸小鼠

目的 建立一个能稳定表达EGFP的裸小鼠近交新品系,供包括人脑胶质瘤在内的所有人类肿瘤移植实验用。方法 将♀C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)转基因小鼠和♂Foxn1nu裸小鼠,按同源导入方法进行杂交和回交,用荧光手电筒和匹配的眼镜、多功能活体成像仪、荧光显微镜对是否表达EGFP进行鉴别,传至F10后进行遗传学检测。结果 所建品系命名为 Foxn1nu.B6-CAG-EGFP/SU (Soochow University),14个遗传生化位点中13个表型与BALB/c（Foxn1nu）吻合,唯Pep3（肽酶-3）的电泳为b型,而标准的BALB/c近交系为a型;外周血淋巴细胞占全部有核细胞15%,T淋巴细胞仅占0.3%,与亲本的Foxn1nu一致。结论 成功地建立了一个既与亲本C57BL/6-TgN(CAG-EGFP)－样稳定表达EGFP,又与Foxn1nu裸小鼠（BALB/c背景）一样具有T细胞缺乏的荧光裸小鼠新品系- Foxn1nu.B6-CAG-EGFP｜SU ,Pep3为b型是有别于Foxn1nu裸小鼠的生化遗传标记位点。     

micro-CT法观测雌性小鼠股骨骨参数的分析

目的 利用小动物CT（micro-CT）收集正常雌性BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠股骨的影像学数据.方法 BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠各15只,雌性,10～12周龄,取股骨后用micro-CT进行扫描,将得到的数据进行系统分析.结果 成功收集了正常雌性BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠股骨的CT影像学数据.通过数据分析,发现两者在皮质骨相对骨体积上具有显著差异,在骨小梁相对骨体积、骨表面积与组织体积比值和骨密度也有显著差异.结论 micro-CT可以对雌性小鼠股骨的各项参数进行定量分析.     

BALB/c系裸小鼠移植人白血病细胞后外周血相的变化

裸小鼠是一种先天性T淋巴细胞缺陷的实验动物。自1969年在探小鼠体内移植人恶性肿瘤获得成功以来,已广泛用于肿瘤学、免疫学、内分泌学及遗传学等领域的研究。1980年以来,国内使用裸小鼠进行实验日益增多,但关于裸小鼠造血系统的特点尚少报道。为此,我们观察了目前国内常用的BALB/c系裸小鼠的外周血相,同时还观察了移植人T淋巴细胞性白血病及粒细胞性白血病细胞后的荷瘤小鼠血相的变化。材料及方法 1.实验动物:①正常BALB/c-nu/nu裸小鼠32只,雌雄各半,体重14～18g,②正常 BALB/c     

BALB/c裸小鼠心、肝、肺脏8种矿物质元素含量的研究

目的对SPF级BALB／c裸小鼠心、肝、肺脏矿物质元素含量的研究。方法采用电感偶合等离子体发射光谱法（ICP-AES）测定BALB／c裸小鼠纯合子（nu／nu）的心、肝、肺等脏器矿物质元素Zn、Cu、Fe、Ca、Mg、Mn、P、S的含量。结果BALB／c裸小鼠心、肝、肺脏器矿物质元素Zn、Mg、Mn、P、S含量雌、雄之间比较差异具有显著性，心、肝、肺等脏器矿物质元素zn、Cu、Ca、Mg、Mn、P、S含量比较差异具有显著性，BALB／c雌、雄裸小鼠心、肝、肺等脏器矿物质元素含量排列顺序一致。结论矿物质元素在BALB／c裸小鼠心、肝、肺脏的分布呈现出一定的规律，性别对裸小鼠心、肝、肺脏的某些元素含量存在一定的影响。     

人上颌窦低分化鳞癌裸鼠移植瘤模型的建立

作者报道人上颌窦低分化鳞癌裸小鼠移植瘤模型的建立。实验动物为BALB/C ATCL—un/nu系裸小鼠,由中国医学科学院实验动物研究中心提供,本室繁育成功。1～2月鼠龄,雌雄兼用。接种的瘤细胞为本院第一附     

热休克因子1基因剔除小鼠的遗传特征及基因型分析

为观察热休克因子 1基金剔除小鼠的遗传特征和基因型 ,摸索获得较多纯合子的繁殖技术 ,建立 3组繁殖组合方式 :1野生型♂×野生型♀组 ;2杂合子♂×杂合子♀组 ;3纯合子♂×杂合子♀组 ,并比较各组子代的基因型。结果表明 ,杂合子♂×杂合子♀组和纯合子♂×杂合子♀组 ,获得纯合子子代分别为 1 0 .8%和 2 2 .0 %。纯合子♂×杂合子♀组每胎产仔数 ( 4 .3只 /胎 )较野生型♂×野生型♀组 ( 6.5只 /胎 )及杂合子♂×杂合子♀组 ( 6.4只 /胎 )少。通过 HSF1剔除鼠的不同繁殖方法的比较及遗传特性观察 ,揭示了获得较多纯合子 HSF1剔除小鼠的繁殖技术。     

~3H-TdR掺入法测定NHG-1脾淋巴细胞转化功能

本文报告用~3H-TdR掺入法测定本室的NC系正常裸小鼠和荷人脑胶质瘤裸小鼠(NHG-1)的脾淋巴细胞转化功能。结果提示:正常的纯合子(nu/nu)T细胞缺乏,B细胞功能均正常;杂合子(nu/ )的T和B细胞功能均正常;荷瘤鼠(NHG-1,30代)除了T细胞缺乏,B细胞功能亦受到抑制。     

检测小鼠迟发型超敏反应的足垫肿胀试验

足垫肿胀(FPE)试验可作为测定小鼠迟发型超敏反应的一种方法。我们用 FPE 试验测定了免疫正常的 CFW 系小鼠和免疫缺陷的裸鼠(BALB/c/nu/nu)的迟发型超敏反应,并观察了足垫仲胀的发生和消长过程。     

SPF级BALB/c裸小鼠的生产管理与质量控制

SPF级裸小鼠的饲养及质量控制涉及多方面的环节和工作。生产管理及质量控制效果,直接影响动物的数量和质量。我中心2007年开始,逐步建立了规范的SPF级BALB/c裸小鼠生产繁育体系。裸小鼠生产繁育至今,数量和质量得到较好的保证。本文通过介绍我中心SPF级BALB/c裸小鼠的设施、种群、饲养管理及质量控制的具体做法和经验体会,为SPF级BALB/c裸小鼠相关繁育和研究提供参考和借鉴。     

非近交系615/PBI-beige/nude小鼠免疫学功能的初步研究

非近交系615/PBI-beige/nude小鼠(以下简称615-bg/nu)是一种T和NK细胞功能联合缺陷型动物,其主要遗传背景来源于国内培育的近交系小鼠615/GI。它是以615/PBI-nu和615.B6—bg为亲本动物,采用杂交-内交和回交-内交等5个不同交配步骤培育而成。初步研究表明,该615-bg/nu小鼠脾细胞对ConA诱导的增殖反应,与非beige裸鼠相近,而其自然杀伤(NK)细胞活性(9.2±2.4％)明显低于615-nu裸小鼠(39±4.8％)和BALB/C-un裸小鼠(32±4.6％)(P<0.01)。此外,我们发现在beige和非beige小鼠,其脾细胞的NK活性都有随其nu基因数目增加而升高的趋势,这表明杂合状态下的nu基因亦可使小鼠的NK活性增高。这种低NK活性的T细胞缺陷动物模型——615-bg/nu的育成,为肿瘤免疫学和实验肿瘤学的研究工作提供了一种极有价值的新实验材料。     

人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠移植瘤的性别差异

目的 研究性别对人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠成瘤及移植瘤生长趋势的影响.方法 18只4~6周龄BALB/C裸小鼠雌雄各半,按照性别分成雌雄两组,每组9只,将全部裸小鼠肩胛部接种处于对数生长期且浓度为1.0×107/mL的HepG2细胞0.2 mL,10 d后观察两组的成瘤情况并测量肿瘤体积.结果 雌性组成瘤模型4只,成瘤率为44.44%;雄性组成瘤模型9只,成瘤率为100.00%,差异有统计学意义(P=0.029);造模成功的移植瘤体积走势图显示移植瘤生长速度雄性组大于雌性组.结论 人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠成瘤率及移植瘤生长速度有明显的性别差异.     

人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的建立

目的:探讨建立人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的方法. 方法:培养人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD细胞,取对数生长期细胞分别接种于4周龄SCID鼠和60Co照射 (1 Gy) 后1 d 的BALB/c裸小鼠;选用成瘤BALB/c裸小鼠的瘤块移植入另一批4周龄BALB/c裸小鼠胁部皮下(组织块接种法).观察各组动物肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线;肿瘤组织行常规病理H-E染色并镜检. 结果:60Co照射后1 d裸小鼠成瘤时间约6～8周,SCID鼠组约3～4周,组织块接种法移植2周后裸小鼠瘤体较明显,3组动物的成瘤率均为100%;成功绘制出肿瘤生长曲线,肿瘤均呈进行性生长;病理检查示各组移植性横纹肌肉瘤与人体肿瘤标本所见类似.结论:成功建立了裸小鼠和SCID鼠人眼眶横纹肌肉瘤模型,组织块接种法可以缩短BALB/c裸小鼠成瘤时间,为进一步研究人眼眶横纹肌肉瘤奠定了基础.     

提高腹水瘤单克隆抗体产率的方法

以小鼠致敏的脾细胞与骨髓瘤细胞融合而获得的杂交瘤细胞株,在组织相容的小鼠体内可迅速生长而形成腹水瘤,并可分泌特异性单克隆抗体(McAb)。一只荷瘤小鼠可产生10～20mgMcAb,其代价仅相当于从培养上清液中分离等量单克隆抗体的一小部份。这类杂交瘤大多数来源于BALB/c系小鼠的骨髓瘤细胞及脾细胞。作者报道用BALB/c系小鼠与一种远交系小鼠杂交,繁育出体形大而价格便宜的杂交一代(F_1),用以产生腹水瘤,并制备特异性单克隆抗体。用60日龄雄性BALB/c系小鼠与同龄的封闭群SW/HPB系雌性鼠同居10天。该BALB/c系雄鼠可再与另外的SW/HPB系雄鼠交配。幼鼠21日龄断奶。定期测定BALB/c系和(BALB/c×SW/HPB)F_1小鼠的体重增长。对两种性别的F_1小鼠所产生的腹     

清洁级BALB/c小鼠生物学指标的建立

目的:建立清洁级BALB/c小鼠的正常生理、血常规及生化等指标。方法:分别选用6周、12周、18周、30周的清洁级BALB/c小鼠雌雄各20只,检测动物的主要生物学指标(生长曲线、脏器系数、大小肠长度、血常规及生化指标)结果:雄性动物体重增长趋势比雌性动物快,随着年龄的增加脏器系数中大部分数值雌性偏高雄性。相同年龄的BALB/c小鼠血常规中LY、MO、GR雌性比雄性明显增加,且雌性雄性有明显差异(P<0.05)。在相同年龄中BALB/c小鼠的生化ALP、CHOL、HDL-CHOL雄性比雌性偏高,且有明显差异(P<0.05)。     

突变系无毛小鼠近交系的繁殖性能观察

目的：观察突变系无毛小鼠近交系的繁殖性能，找出最佳保种方式。方法：从21代到29代分别采用无毛纯合子雄性与有毛杂合子雌性、无毛纯合子雌雄、无毛纯合子雌雄、有毛杂合子雄性与无毛纯合子雌性4种酱方式，对其生产胎数、胎平均产仔数、离乳数、无毛小鼠的生产机率等进行观察统计。结果：前2种交配方式，生育小鼠中均有无毛小鼠，生产胎数以2或3胎为主，平均产仔数和平均离乳率无明显差异，但无毛纯合子雄性与有毛杂合子雌性交配，无毛小鼠的生产机率明显高于有迁杂合子雌雄交配（P＜0.01）。后2种酱方式，无毛纯合子雌性受孕较难，即使受孕，所产仔鼠于生后不久全部死亡，无一存活至离乳日龄。结论：无毛突变系的繁殖保种最好采取无毛基因纯合的雄性（具有繁殖力）和有毛杂合的雌性交配。