原位PCR技术及其应用

目的：阐述原位PCR技术的基本原理，进展，应用及存在问题。方法：通过检索国内，外相关文献，归纳整理，结合实践操作经验，展开分析，结果：原位PCR技术是一种特异性，敏感性较高的靶序列检测定位技术，作为研究基因信息和细胞，染色体等的形态信息的有力工具，尤其是专用原位PCR仪在医学研究（医学检验，病理学领域）上的广泛应用，结论：原位PCR技术的应用推广及研究深入，也存在其技术应用不完善之处。     

Taqman荧光探针技术检测结核分枝杆菌

目的：比较Taqman荧光探针技术与常规PCR电泳技术检测结核分枝杆菌的灵敏度及特异性，评价Taqman荧光探针技术（Taqman技术）检测临床标本中结菌的应用价值。方法：应用细菌培养法，常规PCR电泳技术与Taqman技术检测300份临床结核病患者痰标本及50份非结核呼吸系统疾病患者痰标本。结果：细菌培养法检测结核阳性率为112/300；常规PCR电泳技术检测结核菌阳性率为169/300，特异性96%；Taqman荧光探针技术检测结核菌阳性率为141/300，特异性100％。结论：Taqman荧光探针技术是一种全新的PCR分子杂交模式，集PCR扩增、荧光探针杂交、荧光检测一体化，在单一管内完成，简便、快速、防污染、敏感性高、特异性强，是结核病辅助诊断的有效方法。     

含内标的荧光PCR—荧光定量PCR

1.前言 PCR技术应用于体外基因检测是临床诊断学上的一项重大突破,但由于传统的PCR检测易污染、假阳性率高等原因,被国家明令禁止使用于临床检验。为了克服传统PCR的上述缺点,发挥它早期、快速诊断的优点,近年来,发展了多种将传统PCR技术与其它技术结合起来的新型PCR技术,最成功的有PCR与ELISA结合的PCR-ELISA技术和PCR与荧光检测结合的荧光PCR技     

通用模板信号扩增技术（UT—FCR）

PCR是最常用的分子生物学诊断技术，但常用的PCR都存在种种不足，制约了其在临床的应用。通用模扳信号扩增技术(UT-PCR)解决了传统PCR核酸模扳质量容易引起的假阴性以及难以实现多基因／多位点同时检测两大难题。UR—PCR具有灵敏度高、特异性强、假阴性低，并能实现高通量检测，在临床诊断和科学研究中有广泛的应用空间。     

PCR技术与PCR生物芯片

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)技术已在分子生物学和医学诊断等方面得到广泛的应用，形成了一种新的技术体系。PCR生物芯片作为实现PCR技术的一种重要工具有广阔的应用前景。本论述了PCR技术的原理、特点及应用和PCR生物芯片的研究进展。     

免疫PCR技术的研究进展

PCR技术是一种基因扩增技术，它具有快速、灵敏、特异的特点，已成为分子生物学和基因工程中的一个强有力的工具。1992年美国加州大学分子生物学家Sano等将免疫反应与PCR相结合建立了免疫PCR技术。该技术比ELISA的敏感度至少提高几个数量级，实现了免疫分析方法的一大突破，显示了良好的应用前景。现就免疫PCR技术的研究进展作一综述。     

荧光定量PCR在医学诊断中的应用

实时荧光定量PCR(Real time fluorescent quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。该技术通过荧光信号的积累来实时监测整个PCR进程,使PCR扩增和终产物检测全部处在封闭的条件下进行,从而具有实时监测、无污染、快速、灵敏、精确、特异等特点,极大地克服了原有PCR技术的不足。目前该技术已经广泛应用于肿瘤学、遗传学、免疫学、微生物学、寄生虫学和基因治疗等领域。     

结核分枝杆菌ERIC—PCR分型技术的建立

目的建立结核分枝杆菌ERIC—PCR分子生物学分型技术，并应用于临床分离菌株的流行病学调查。方法以肠杆菌科基因间重复序列（Enterbacterial repetitive interemc consensus，ERIC）为引物，对临床分离的结核分枝杆菌DNA进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后得到指纹图并进行分析。结果122株临床分离株产生42种不同的指纹图，密切接触者指纹图相同或相似，指纹图谱与患者年龄、菌株的耐药性及耐药种类有关。结论ERIC—PCR是结核分枝杆菌分子流行病学调查的有效技术。     

PCR技术在医学中的应用

PCR技术(多聚酶链反应Polymerase Chain Reactionn简称PCR)诞生于1985年，由美国Ce-tus公司的Saiki等研究成功。问世以来，以其简便、快速、敏感、特异等特点受到医学界普遍重视．被誉为里程碑式的分子生物学技术，列为90年代生物技术十大热点之首．及1989年世界重大科技进展之一。目前其广泛应用于人类遗传病的基因诊断、产前诊断，病原微生物的检验．肿瘤分子遗传掌的研究，性别鉴定，器官移植配型．法医鉴定，     

荧光定量PCR在医学诊断中的应用

实时荧光定量PCR(Real time fluorescent quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。该技术通过荧光信号的积累来实时监测整个PCR进程,使PCR扩增和终产物检测全部处在封闭的条件下进行,从而具有实时监测、无污染、快速、灵敏、精确、特异等特点,极大地克服了原有PCR技术的不足。目前该技术已经广泛应用于肿瘤学、遗传学、免疫学、微生物学、寄生虫学和基因治疗等领域。     

实时荧光PCR和RT—PCR方法检测登革病毒的比较研究

目的通过2种检测登革病毒方法的比较，以提高检测登革病毒的灵敏度和特异性。方法利用Taqman MGB技术，根据登革病毒3’端非编码区的一段高度保守序列，设计登革1～4型荧光PCR通用引物和TaqmanMGB探针，以登革热毒株作为标准，以乙脑毒株作对照，建立实时荧光PCR检测登革病毒的快速方法。并对10份ELISA法检测阳性的临床血清标本进行RT—PCR及荧光PCR扩增。结果RT—PCR检测10份临床血清标本，2份阳性，阳性率为20％。实时荧光PCR检测登革病毒与乙脑病毒无交叉反应，检测10份临床血清标本，5份阳性，阳性率为50％。从RNA提取到检测结果仅需4h。结论Taqman MGB实时PCR检测方法快速、敏感性高、特异性强，可作为登革病毒的快速检测方法，应用于登革热的临床早期诊断。     

实时荧光定量PCR技术理论研究及其在医学方面的应用

实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)是在传统PCR定性技术基础上发展起来的核定量技术。它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知     

应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良

目的：应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良（DMD／BMD）基因缺失和杂合子，方法：根据DMD／BMD外显子缺失的多发位点，建立一个多重PCR体系，在不同的PCR条件下对23例DMD／BMD的患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选，单链构象多态性（SSCP）／异源双链分析，连锁标记分析，限制性片段长度多态性（RFLPs)分析及微卫星分析。结果；23例先证者中有14例为基因缺失，2例为基因重复，40例家系中女性亲属为杂合剂，结论：利用此PCR体系，可准确地检测出DMD／BMD的基因突变，可靠地筛选携带者并 对其家系进行正确的分析。     

浅谈实验室与临床的交流合作

近年来,随着现代医学科学技术的迅猛发展,大量新技术、新设备、新方法 应用于临床实验室,如新的免疫标记技术、PCR技术、生物芯片技术、床边快速检验技术等逐渐应用于临床。实验室实现了“四化”,即仪器自动化、试剂多样化、     

实验诊断技术的进展与医学伦理——论聚合酶链反应实验诊断技术的临床应用与伦理道德

通过对聚合酶链反应实验诊断技术（PCR技术）在临床应用中所存在的技术问题和伦理道德问题的分析，提出了规范应用此项技术的重要性及解决问题的几点对策。     

基于PCR技术的现代分子生物学操作在中药鉴定中的应用

全文着重介绍了以聚合酶链式反应（PCR）技术为支撑的现代分子生物学技术,包括随机扩增多态性DNA（RAPD）技术、ISSR—PCR技术、PCR—RFLP技术、mRNA差异显示技术、基因测序技术及基因芯片技术在中药鉴定中的应用,指出现代分子生物学技术的蓬勃兴起将极大地推动中药鉴定的发展。     

聚合酶链反应技术的临床应用

目的总结聚合酶链反应技术的临床应用。方法自1998年至2004年采用PCR反应技术对9种病原体DNA测定。结果所有检测结果均准确可靠，为临床提供了很好的诊断结果，指导了治疗用药。结论PCR技术操作简单，结果准确可靠，检测快速，范围广，对疾病的诊治起到积极的促进作用。     

荧光探针定量PCR技术

PCR技术是通过对基因的选择性片段进行体外高效扩增,实现目的基因的检测。荧光探针定量PCR(FQ-PCR)是一种新的基因定量检测技术,国外文献多用“实时定量PCR(real time quantitative PCR)”或“TaqMan PCR(以美国PE公司商标命名)”。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针,巧妙地把核酸扩增(PCR)、杂交及光谱技术结合在一起,从而实现了对目的基因的准确定量检测,正发展成为临床实验诊断的常规技术。     

PCR结合反相膜杂交在淋病诊断中的应用

目的 探讨PCR结合反相膜杂交用于临床诊断淋病的可行性。方法 以培养法为金标准，对PCR电永地和PCR反相膜杂交法进行了比较研究。结果 PCR反相膜杂交特异性高，灵敏度是PCR电泳法的40倍。结论 PCR反相膜杂交技术不仅可以提高PCR特性、敏感性、且操作简单、无污染，适合临床开展。     

沙门菌PCR检测技术应用进展

沙门菌是引起食物中毒的主要致病菌之一,其传统检测方法包括选择性培养、生化鉴定等步骤,耗时长、灵敏性差,很难满足快速检测要求。聚合酶链反应（PCR）技术是近年来广泛应用于食品中沙门菌快速检测的方法之一,其检测目的基因多种多样,主要包括属特异性引物基因、血清群特异性引物基因与血清型特异性引物基因。本文主要概述PCR技术应用于沙门菌检测的各种目的基因,并简要介绍常规PCR、多重PCR及实时定量PCR等技术的应用。