有2型糖尿病家族史的非肥胖青少年血浆Ghrelin水平变化的影响因素

目的探讨有T2DM家族史且BMI正常的青少年空腹血浆中Ghrelin水平的变化及相关影响因素。方法80名13-15岁BMI正常青少年，根据有无糖尿病家族史分为糖尿病家族史阳性组（FHD＋）和糖尿病家族史阴性组（FHD-）。测量身高、体重及血压，检测FPG、血脂、空腹真胰岛素（FTI）及Ghrelin水平。结果FHD＋组BMI、FPG、FTI和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）高于FHD-组（P〈0．05），空腹Ghrelin水平低于FHD-组（P〈0．01）。Ghrelin与FPG（r=-0．456，P〈0．01），FTI（r=-0．183，P％0．05）和HOMA-IR（r=-0．237，P〈0．01）呈负相关。以Ghrelin为因变量，行多元线性回归显示，FPG（β=-354．435，P〈0．01）和FHD（β=-176．468，P〈0．01）为独立危险因素。结论有T2DM家族史的BMI正常的青少年已存在空腹Ghrelin水平的降低，FPG的升高和糖尿病家族史可能是Ghrelin水平降低的相关因素。     

脂联素、内肥素和IL-6水平与2型糖尿病胰岛素抵抗关系的研究

摘要：目的探讨2型糖尿病（T2DM）胰岛素抵抗（IR）与血清脂联素（AN）、内肥素（Visfati）和IL-6水平的关系。方法ELISA法测定45例健康对照（对照组）、46例T2DM（T2DM组）患者血清AN水平、Visfati,夹心免疫法测定IL-6水平。结果与对照组比较,T2DM组的BMI,FBG,2hPBG,FINS,HbA1c,IRI（HOMA-IR）,ISI,HDL,TC,LDL,AN,Visfati、腰围、TG和IL-6水平有统计学差异（P〈0．01,〈0．05）;血清IRI（HOMA-IR）与AN（r=-0．610,P〈0．01）和IL-6（r=-0．645,P〈0．01）呈负相关,与Visfati呈正相关（r=0．445,P〈0．01）。血清AN与Visfati呈负相关（r=-0．568,P〈0．01）;Visfati与IL-6呈负相关（r=-0．441,P〈0．01）;与IL-6正相关（r=0．428,P〈0．01）。结论血清AN、Visfati和IL-6水平与T2DM IR相关联,可作为预测T2DM IR的因子。     

2型糖尿病外周血内皮祖细胞增殖、分化及细胞周期变化

目的观察2型糖尿病（T2DM）患者外周血内皮祖细胞（EPC）增殖、分化能力及细胞周期分布。方法T2DM患者（DM组）和非T2DM患者（Con组）各20例，离心法获取外周血单个核细胞，培养7天后，鉴定EPC，检测EPC增殖能力、EPC分化及细胞周期分布。结果DM组外周血EPC数量及增殖能力明显降低；EPC数量、增殖能力与HbA1c水平和DM病程呈负相关；EPC表达CD14^＋、CD64^＋明显高于Con组，而表达vWF^＋明显低于Con组；EPC在S期的比例明显减少，在G0／G1期的比例增高。结论T2DM患者外周血EPC数量减少、增殖能力受损、向内皮细胞系分化减少。     

糖尿病肾病患者血清可溶性CD14水平与血糖、血脂的关系

目的探讨糖尿病肾病（DN）患者血清可溶性CD14（sCD14）水平与血糖、血脂的关系。方法将2型糖尿病（T2DM组）患者分为DN组、非DN组,采用ELISA法检测其与健康者（对照组）的血清sCD14,并分析血清sCD14水平与空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、肌酐（sCr）、TC、TG、HDL、LDL的关系。结果T2DM组血清sCD14、FPG、HbA1c明显高于对照组（P均〈0．01）,但两组sCD14与FPG均无相关性（P〉0．05）。DN组血清sCD14水平与HbA1c、LDL呈显著正相关（β=2．89、5．26,P均〈0．05）,与sCr呈显著负相关（β=-0．29,P〈0．05）;非DN组与其均无相关性（P均〉0．05）。结论血清sCD14水平与DN之间存在某些相关性,HbA1c、sCr和LDL是DN的危险因素。     

2型糖尿病患者外周血基质细胞衍生因子1水平与大血管病变的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者外周血基质细胞衍生因子1（SDF-1）水平与大血管并发症的关系。方法测定55例无微血管并发症的T2DM患者和26名健康对照者外周血中SDF-1水平、内皮祖细胞（EPCs）数量、EPCs表面SDF1的受体CXCR4表达率。糖尿病患者分单纯糖尿病组、大血管病变组。结果SDF1水平和EPCs数量对照组、单纯糖尿病组、大血管病变组依次降低（P〈0．0S或0．01）;单纯糖尿病组、对照组、大血管病变组CXCR4表达率依次降低（P〈0．05或0．01）;SDF-1水平与EPCs数量成正相关（r=0．327,P〈0．05）,颈动脉内膜中层厚度与SDF-1、EPCs负相关（r=-0．342、0．298,P〈0．05）。结论T2DM患者外周血中SDF-1／CXCR4轴的变化与大血管并发症的发生、发展有关。     

2型糖尿病患者SDF-1、MMP-9水平与颈动脉内膜中层厚度相关性研究

测定65例无微血管并发症的T2DM患者和30例健康对照者外周血中SDF-1、MMP-9水平和内皮祖细胞（EPCs）数量。糖尿病患者分单纯糖尿病组、大血管病变组。结果SDF．1水平和EPCs数量对照组、单纯糖尿病组、大血管病变组依次降低（P〈0．05 or 0．01）;MMP-9水平对照组、单纯糖尿病组、大血管病变组依次增高（P〈0．01）;SDF-1水平与EPCs数量成正相关（r=0．327,P〈0．05）,与MMP一9呈负相关（r=-0．234,P〈0．05）;MMP-9与EPCs呈负相关（,=-0．225,P〈0．05）;颈动脉内膜中层厚度与SDF-1、EPCs负相关（r=-0．342、-0．298,P〈0．05）,与MMP-9正相关（r=0．323,P〈0．05）。多元逐步回归分析表明SDF-1、MMP-9、EPCs等为影响颈动脉IMT的主要因素。结论T2DM患者外周血中SDF-1、MMP-9水平的变化与大血管病变有关。     

2型糖尿病患者的肺功能损害及其相关因素分析

目的研究T2DM患者的肺功能损害及其影响因素。方法选取我院100例诊断为T2DM的患者及40名健康志愿者,检测肺功能及动脉血气进行对照研究,并以肺功能各项指标与FPG、胰岛素敏感性指数（ISI）、HbA1c、BMI和糖尿病病程等进行多因素线性回归分析。结果（1）T2DM组BMI明显高于对照组（P〈0．01）。（2）T2DM组肺总量（TLC）、用力肺活量（FVC）、1秒用力呼气量（FEV1）、用力呼出气量为50％肺活量的最大呼气中期流量（MMEF50）、用力呼出气量为25％肺活量的最大呼气中期流量（MMEF25）明显低于对照组（P〈0．01）。T2DM组一氧化碳弥散量（DLCO）、弥散指数（DLCO／VA）、动脉血氧分压（PaO2）和血氧饱和度（SaO2）低于对照组（P〈0．01）。（3）TLC、FVC、FEV1、MMEF50与FPG、2hPG、FC-P、2hC-P、HbA1c、BMI、ISI、病程无明显相关;但DL（如、DLCO／VA、MMEF25与FPG、2hPG、FC-P、2hC-P、HbA1c、BMI、病程呈显著负相关（P〈0．05或P〈0．01）,与ISI呈显著正相关（P〈0．05）。结论（1）T2DM患者肺功能损害主要表现为限制性通气功能障碍、小气道功能减退和弥散功能异常。（2）FPG、2hPG、FC-P、2hC-P、HbA1c、BMI、病程、ISI与T2DM小气道损害和肺弥散功能障碍密切相关。     

血清抵抗素水平与2型糖尿病并脑梗死的关系

目的 探讨血清抵抗素水平与2型糖尿病（T2DM）并脑梗死（CI）的关系。方法 采用酶联免疫法测定的血清抵抗素水平。CI并发T2DM组（n=48），单纯CI组（n=50），对照组（n=36）。结果 T2DM＋CI及CI组血清抵抗素水平均明显升高（P〈0．05）；二者相比，T2DM＋CI组血清抵抗素水平较CI组明显升高（P〈0．05）。相关分析发现，血清抵抗素浓度与FINS、SBP、DBP．Homa-IR呈显著正相关（均P〈0．05），与Homa-β显著负相关（P〈0．01）。结论 T2DM＋CI组，血清抵抗素水平显著高于CI组，高抵抗素血症与高胰岛素血症的相关性提示，抵抗素可能在T2DM及其脑血管并发症CI的发病中起一定作用。     

胰岛素抵抗患者血清脂联素与部分炎性因子的相关性研究

目的研究胰岛素抵抗（IR）患者血清脂联素（AN）与高敏C反应蛋白（HsCRP）、白介素-6（IL-6）等的关系。方法ELISA法测定25例正常对照、30例糖调节受损（IGR）、30例2型糖尿病（T2DM）个体血清AN水平，R1A法测定HsCRP、IL-6水平。结果正常对照组AN水平显著高于IGR组及T2DM组（P〈0．001），HsCRP水平显著低于IGR组及T2DM组（P〈0．001），IL-6水平低于IGR组（P〈0．01），显著低于T2DM组（P〈0．001）；AN与HsCRP、IL-6呈负相关（r=-0．416，P〈0．05，r=-0．366，P〈0．05），控制性别因素后，相关性存在（r=-0．427，P〈0．01，r=-0．337，P〈0．05），控制性别、体重指数等因素后，不存在相关性。结论AN可预测T2DM发生，AN与炎症之间的联系是通过肥胖连接起来的。     

SIRT1 mRNA在新诊断的2型糖尿病患者脂肪组织的表达及意义

目的探讨新诊断的2型糖尿病（T2DM）患者脂肪组织SIRT1 mRNA表达水平及其与体质指数（BMI）、腰臀比（WHR）、血糖、血浆胰岛素、胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）关系。方法采用RT—PCR方法检测了40例对照组和40例T2DM患者脂肪组织SIRT1 mRNA水平,并分析了SIRT1水平与BMI、WHR、血脂、HbA1C、血糖、血浆胰岛素和HOMA—IR等的关系。结果新诊断的T2DM患者SIRT1 mRNA水平显著低于对照组（1．49±0．47VS1．12±0．32,P〈0．01）;线性相关分析表明,SIRT1与Fins、HOMA—IR呈显著负相关（r=-0．421,P〈0．01和r=-0．511,P〈0．01）。以SIRT1为因变量,年龄、WHR、BMI、TG、TC、LDL—C、HDL—C、HbA1C、FPG、Fins和HOMA—IR为自变量,进行多元线性逐步回归分析,结果表明HOMA—IR是影响SIRT1的独立相关因素。Logistic回归分析表明控制性别、年龄、WHR、BMI、TC、TG、HDL—C、LDL—C后,发现SIRT1与T2DM发病呈负相关,OR〈1。结论脂肪组织中SIRT1 mRNA水平的变化与IR和T2DM相关。     

内皮祖细胞移植对糖尿病兔下肢缺血的病理及血管内皮生长因子的影响

目的探讨内皮祖细胞(EPC)移植治疗糖尿病兔下肢缺血的病理及缺血肌肉中血管内皮生长因子(VEGF)的变化。方法2006年1月至9月在哈尔滨医科大学附属第二医院内分泌科将30只健康日本大耳白兔随机分为3组,即糖尿病磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(A组)8只、糖尿病内皮祖细胞移植治疗组(B组)14只、正常血糖内皮祖细胞移植治疗组(C组)8只。骨髓来源的内皮祖细胞经体外扩增培养7d后,通过肌内注射进行细胞移植,用病理改变及肌浆中VEGF的变化评价治疗效果。结果EPC移植后14d,病理示3组毛细血管密度分别为(9.29±1.63)个/视野、(12.60±2.16)个/视野、(12.51±1.56)个/视野;血管数/肌束数分别为0.66±0.05,0.83±0.11,0.90±0.13;肌浆中VEGF质量分数[每克肌肉中VEGF因子的质量(ng)]分别为0.22±0.05,0.30±0.07,0.31±0.08;糖尿病内皮祖细胞移植治疗组与糖尿病PBS对照组比较,毛细血管密度、血管数/肌束数、VEGF值差异均有显著性意义,P<0.05。结论EPC移植能有效治疗糖尿病兔下肢缺血。     

Stimulation of endothelial progenitor cells: a new putative therapeutic effect of angiotensin II receptor antagonists

The number of circulating endothelial progenitor cells (EPCs) correlates with endothelial dysfunction and cardiovascular risk in humans. We explored whether angiotensin II receptor antagonist therapy affects the number of regenerative EPCs in patients with type 2 diabetes. In a prospective double-blind parallel group study, we randomly treated 18 type 2 diabetics with olmesartan (40 mg) or placebo for 12 weeks. We analyzed circulating CD34+ hematopoietic progenitor cells (flow cytometry) and EPCs (in vitro assay) before and after therapy. We verified the results in a second open trial treating 20 type 2 diabetics with 300 mg of irbesartan for 12 weeks. The number of EPCs was significantly lower in diabetic patients as compared with 38 age-matched healthy subjects (210+/-10 versus 258+/-18 per high-power field; P<0.05), whereas there was no significant difference with respect to hematopoietic progenitor cells. Treatment with olmesartan (n=9) significantly increased EPCs from 231+/-24 to 465+/-71 per high-power field (P<0.05), but not hematopoietic progenitor cells. In contrast, placebo treatment (n=9) did not affect EPCs and hematopoietic progenitor cells. With irbesartan therapy, EPC number increased significantly from 196+/-15 to 300+/-23 per high-power field (P<0.05) already after 4 weeks of treatment. At the end of 12-week therapy, patients had 310+/-23 EPCs per high-power field (P<0.05 versus baseline). Angiotensin II receptor antagonists increase the number of regenerative EPCs in patients with type 2 diabetes mellitus. This action may be of therapeutic relevance contributing to their beneficial cardiovascular effects.     

Protective effects of the dipeptidyl peptidase IV inhibitor sitagliptin in the blood-retinal barrier in a type 2 diabetes animal model

Aim: The aim of this study was to evaluate the efficacy of sitagliptin, a dipeptidyl peptidase IV inhibitor (DPP‐IV), in preventing the deleterious effects of diabetes on the blood–retinal barrier in male Zucker Diabetic Fatty (ZDF) rats. Methods: ZDF rats at 20 weeks of age were treated with sitagliptin (10 mg/kg/day) during 6 weeks. The effect of the drug on glycaemia was assessed by evaluating glycated haemoglobin (HbA1c). The content and/or distribution of tight junction (TJ) proteins occludin and claudin‐5, as well as nitrotyrosine residues, interleukin (IL)‐1β, BAX and Bcl‐2 was evaluated in the retinas by western blotting and/or immunohistochemistry. Retinal cell apoptosis was assessed by the terminal deoxynucleotidyl transferase‐mediated dUTP nick‐end labelling (TUNEL) assay. The number of CD34+ cells present in peripheral circulation was assessed by flow cytometry, and endothelial progenitor cells (EPC) adhesion ability to the retinal vessels was evaluated by immunohistochemistry. Results: Sitagliptin improved glycaemic control as reflected by a significant decrease in HbA1c levels by about 1.2%. Treatment with sitagliptin prevented the changes in the endothelial subcellular distribution of the TJ proteins induced by diabetes. Sitagliptin also decreased the nitrosative stress, the inflammatory state and cell death by apoptosis in diabetic retinas. Diabetic animals presented decreased levels of CD34+ cells in the peripheral circulation and decreased adhesion ability of EPC to the retinal vessels. Sitagliptin allowed a recovery of the number of CD34+ cells present in the bloodstream to levels similar to their number in controls and increased the adhesion ability of EPC to the retinal vessels. Conclusions: Sitagliptin prevented nitrosative stress, inflammation and apoptosis in retinal cells and exerted beneficial effects on the blood–retinal barrier integrity in ZDF rat retinas.     

冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和活性

目的研究冠心病患者外周血中内皮祖细胞的数量、形态和活性。方法选择冠心病患者57例和正常对照者30例,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,用加入血管内皮生长因子165和碱性成纤维细胞生长因子的1640培养基培养细胞,并分析细胞形态和形成集落的数量,7d后贴壁细胞进行细胞分析和计数。用激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记的荆豆凝集素和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白,双染色阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞;用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和KDR;采用MTT比色法检测细胞的生长状态。结果冠心病患者外周血内皮祖细胞数量较对照组明显减少(23.1±1.8个/200倍比56.7±2.4个/200倍,P<0.05),形成细胞集落数(14.7±2.5个/40倍比24.2±1.7个/40倍,P<0.05)、细胞增殖能力和生长曲线也明显降低。结论冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和活性明显降低。     

冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量与功能的变化

目的探讨冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量和功能的变化。方法入选研究对象54例,分成冠心病组(n=27)和对照组(n=27)。密度梯度离心法从外周血中获得单个核细胞,体外培养扩增21天后鉴定内皮祖细胞,计数晚期集落数量,分别用MTT比色法、改良的Boyden小室法和HFN培养板测定晚期内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附功能。结果冠心病组内皮祖细胞晚期集落数量(2.5±1.2)与对照组(3.8±1.6)相比,明显减少(P<0.05);增殖、迁移和黏附能力与对照组比较(分别为0.324±0.024比0.433±0.064,9.9±2.5比13.9±4.1,21.3±5.1比31.0±7.1)显著降低(P<0.05)。结论冠心病患者晚期内皮祖细胞的数量减少,功能受损。     

Circulating endothelial progenitor cells are reduced in peripheral vascular complications of type 2 diabetes mellitus

OBJECTIVES: We sought to establish whether a reduction in endothelial progenitor cells (EPCs) has a putative role in peripheral vascular disease (PVD) of type 2 diabetic patients. BACKGROUND: Peripheral vascular disease is a common and severe complication of diabetes mellitus. Impaired collateralization of diabetic vasculopathy has been extensively shown, but causes leading to its pathogenesis are not fully understood. Recently, EPCs have been found to contribute to vascular repair and angiogenesis. Diabetes has been associated with low levels of circulating EPCs, but no data are available in the literature on the relationship between EPCs and PVD in diabetes. METHODS: Flow cytometric analysis was used to quantify circulating progenitor cells (CPCs, CD34+) and EPCs (CD34+KDR+) in 51 patients and 17 control subjects. RESULTS: The CPCs and EPCs from diabetic patients were reduced by 33% and 40%, respectively, compared with healthy subjects (p < 0.001). An inverse correlation was found between the number of EPCs and the values of fasting glucose (r = -0.49, p = 0.006). Peripheral vascular disease was associated with a 47% reduction in EPCs (p < 0.0001) and EPC levels directly correlated with the ankle-brachial index (r = 0.70, p = 0.01). The subgroup of diabetic patients with PVD also had reduced CPCs by 32% (p = 0.037), whereas patients with ischemic foot lesions had the lowest levels of both EPCs and CPCs (p = 0.02). CONCLUSIONS: Our data demonstrate decreased EPC levels in diabetic patients and, for the first time, show that PVD is associated with an extensively low number of EPCs. Depletion of circulating EPCs in diabetic patients may be involved in the pathogenesis of peripheral vascular complications.     

内皮祖细胞移植治疗糖尿病兔下肢缺血的影像学改变

目的探讨内皮祖细胞（EPC）移植治疗糖尿病兔模型下肢缺血的疗效。方法将日本大耳白兔随机分3组：糖尿病PBS对照组（A组）、糖尿病内皮祖细胞移植治疗组（B组）、正常血糖内皮祖细胞移植治疗组（C组）。骨髓来源的内皮祖细胞经体外扩增培养7d后,通过肌内注射进行细胞移植。结果EPC移植后14d,彩超示B组兔缺血侧／正常侧下肢胫前动脉收缩期峰值流速比值明显增加,动脉造影示该组缺血侧下肢动脉显影血管数多于对照组（P〈0．05）。结论EPC移植能有效治疗糖尿病兔模型下肢缺血。     

C反应蛋白对外周血内皮祖细胞数量及功能的影响

目的研究C反应蛋白对人外周血内皮祖细胞数量及功能的影响。方法从外周血中分离出单个核细胞，体外培养7天，在贴壁细胞中加入不同浓度的C反应蛋白（1mg／L、2．5mg／L和5．0mg／L）作用不同时间（24h、48h和72h），用四唑盐比色试验（MI]r）和细胞集落形成单位计数的方法评价C反应蛋白对内皮祖细胞增殖的影响；采用趋化试验评价不同浓度的C反应蛋白对血管内皮生长因子诱导的内皮祖细胞趋化能力的影响；检测细胞上清中一氧化氯的浓度变化；逆转录-聚合酶链式反应检测细胞内皮源性一氧化氮合酶表达强度变化。结果C反应蛋白减少内皮祖细胞的集落形成单位数量及抑制内皮祖细胞的增殖能力；随着C反应蛋白浓度的增加，内皮祖细胞的趋化能力受到抑制；同样细胞分泌的一氧化氮减少，内皮源性一氧化氮合酶表达减弱。结论C反应蛋白可能通过押制内皮祖细胞的增殖和趋化能力促进内皮功能不全的发展。     

C反应蛋白对外周血内皮祖细胞数量及功能的影响

目的研究C反应蛋白对人外周血内皮祖细胞数量及功能的影响。方法从外周血中分离出单个核细胞,体外培养7天,在贴壁细胞中加入不同浓度的C反应蛋白(1 mg/L、2.5 mg/L和5.0 mg/L)作用不同时间(24 h、48 h和72 h),用四唑盐比色试验(MTT)和细胞集落形成单位计数的方法评价C反应蛋白对内皮祖细胞增殖的影响;采用趋化试验评价不同浓度的C反应蛋白对血管内皮生长因子诱导的内皮祖细胞趋化能力的影响;检测细胞上清中一氧化氮的浓度变化;逆转录—聚合酶链式反应检测细胞内皮源性一氧化氮合酶表达强度变化。结果C反应蛋白减少内皮祖细胞的集落形成单位数量及抑制内皮祖细胞的增殖能力;随着C反应蛋白浓度的增加,内皮祖细胞的趋化能力受到抑制;同样细胞分泌的一氧化氮减少,内皮源性一氧化氮合酶表达减弱。结论C反应蛋白可能通过抑制内皮祖细胞的增殖和趋化能力促进内皮功能不全的发展。