口腔黏膜下纤维化癌变过程中G2、M期细胞周期蛋白与存活素磷酸化的研究

目的 探讨细胞周期G2、M期重要分子细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞分裂周期蛋白2(cell division cycle 2,p34cdc2)和存活素磷酸化在口腔黏膜下纤维化(oral submucosa fibrosis,OSF)癌变过程中的作用与意义.方法 应用Western blotting检测10例正常口腔黏膜上皮组织、40例OSF上皮组织及42例OSF癌变组织中Cyclin B1、p34cdc2和存活素磷酸化的表达情况,免疫共沉淀实验分析p34cdc2激酶与存活素的相关性.结果 Cyclin B1、p34cdc2、磷酸化p34cdc(p-p34cdc2)和存活素磷酸化在OSF组织中表达显著高于正常口腔黏膜(P＜0.05);在OSF癌变组织中的表达显著高于OSF组织(P＜0.05);但在OSF早、中、晚期3组间差异无统计学意义(P＞0.05).免疫共沉淀实验证实了p34cdc与存活素的结合.结论 细胞周期G2、M期重要分子Cyclin B1、p34cdc2及存活素磷酸化在OSF细胞分裂增殖过程中起促进作用,对OSF癌变的早期诊断和治疗具有重要的临床意义.     

CyclinD1及P21^cip1／waf1基因在下颌骨髁状突骨中的表达及其意义

探讨ｃｙｃｌｉｎＤ１及Ｐ２１＾３ｉｐ１／ｗａｆ１基因表达变化对颞下颌关节发育中髁状突软骨细胞周期活动的影响。方法：用免疫组织化学染色及原位杂检测ｍＲＮＡ地胚胎及生后一周ＳＤ大鼠颞下颌关节不同发育时期ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白及Ｐ２１＾ｃｉｐ１／ｗａｆ１ｍＲＮＡ在髁状突软骨中的表达进行观察。     

细胞周期调控蛋白与口腔癌相关性

细胞周期调控研究不断取得新进展。细胞周期因子、周期因子依赖蛋白激酶及其相应的抑制因子等在正常细胞周期中起着重要作用。其中某一个或几个环节的失调都有导致细胞分裂异常的危险性,与细胞恶性转化密切相关。本文对细胞周期调控蛋白作用机理以及在口腔癌发生中的意义作一综述。     

口腔修复非贵金属材料对L-929细胞毒性的研究

目的：评价5种口腔修复非贵金属材料的细胞毒性。方法：采用细胞培养法、MTT法和流式细胞仪检测细胞周期的方法,研究5种合金的细胞毒性。结果：MTT比色法结果揭示：纯钛、钛合金具有良好生物相容性,而钴铬合金、镍铬合金、铜基合金抑制了细胞的生长。细胞周期所测各组细胞G2期比例与MTT结果相符。结论：不同金属合金的细胞毒性不同。     

细胞周期调节蛋白在下颌牵张成骨过程中的表达及作用

目的：探讨细胞周期素（Cyclins）A、D、E和细胞周期素依赖激酶4（CDK4）在下颌牵张成骨过程中的表达和作用.方法：对15只兔行双侧下颌骨骨切开术,在间歇期末,牵张结束当天及牵张结束后第7天、14天和28天分别处死3只兔子.采用免疫组化方法检测不同时期Cyclins A、D、E的染色分布特征和表达水平,并用放射免疫法定量测定不同时间点CDK4的血清浓度变化.结果：下颌骨延长后牵张间隙内有高水平的Cyclins A、D、E表达,阳性信号主要定位于增殖活跃的间充质细胞和成骨细胞;CDK4血清浓度自牵张开始即迅速上升,牵张结束后第7天达到最高点,14天时已逐渐降至较低的水平.结论：在牵张成骨过程中,Cyclins A、D、E和CDK4的高表达对成骨细胞系的增殖起着重要作用.     

细胞周期依赖性激酶抑制蛋白和激酶抑制蛋白及其与口腔疾病

细胞周期和程序性细胞死亡与口腔疾病的发生发展密切相关,细胞周期蛋白、细胞周期依赖性激酶（CDK）、细胞周期依赖性激酶抑制剂是与细胞周期调控有关的主要分子。细胞周期依赖性激酶抑制蛋白（CIP）和激酶抑制蛋白（KIP）由P21、P27和P57三种蛋白质构成,参与细胞周期和程序性细胞死亡调控,抑制多种CDK的活性。口腔疾病的大多数组织破坏是由病变刺激因素诱导宿主细胞增殖和程序性细胞死亡异常改变所引起的,而CIP和KIP表达降低或缺失则导致牙龈结合上皮组织明显增厚,白斑伴上皮异常增生,肿瘤细胞增殖失控;因此,CIP和KIP在调控牙龈上皮细胞增殖和维持牙周组织的正常功能活动中起着不可替代的作用,其表达水平和活性可作为预测口腔白斑恶变与否,肿瘤进展和预后的重要指标。本文就CIP和KIP的组成和功能,CIP和KIP与口腔疾病等研究进展作一综述。     

根管水门汀诱导体外培养成骨细胞周期的改变

牙髓组织严重损伤途径有外伤、医源性操作不当,更主要是由龋导致牙髓的细菌感染.为了保护很尖周组织和保留牙齿,去除坏死和感染组织是非常必要的.这个过程包括把自发产生的脓毒腐败根管的有机物去除,而后消毒,在不损伤根尖组织的情况下,用根充剂填充.根管封闭剂阻断了根尖周组织和口腔的通路,使根组织得以恢复正常及骨样牙骨质形成生理性封闭.因此,水门汀除了有粘固性、容量稳定性、不溶性、抗菌性外,还必须有良好的耐受性,以防止其达到根尖组织,且不能防碍牙周组织的治愈过程,所含有的抗菌物质无论如何不可损伤宿主细胞.根据大多数生产厂家声明,由于技术上的原因或解剖上的因素(如开放根尖),万一水门汀泄出根管外,巨噬细胞会完全将其吞噬而不会产生任何副作用.     

维甲酸诱导Tca8113细胞凋亡及其机理探讨

目的：研究维甲酸在体外对Tca8113（人舌部细胞系）细胞系凋亡的诱导作用。方法：在细胞培养液体系中加入不同浓度的维甲酸（Retinoic Acid，RA）进行诱导，以流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期时相变化，同时应用光镜、电子显微镜技术检测细胞形态学改变。结果：RA对Tca8113细胞凋亡率为23％，细胞周期时相变化以G1期细胞为显著。光镜下观察经RA诱导后的Tca8113细胞变圆、细胞间隙变大，游离细胞增多。电子显微镜观察细胞核凝固变小、凋亡小体增加，细胞内线粒体肿胀、变性。结论：RA能够诱导Tca81173细胞发生凋亡，G1期细胞受阻，不能进入S期。     

绞股蓝皂甙及平阳霉素对口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞抑制作用的研究

目的 :探讨绞股蓝皂甙 (gypenosides,GP)及平阳霉素 (PYM )对口腔鳞癌颈淋巴结转移癌GNM细胞的体外抑制作用及作用机制。方法 :采用MTT法及流式细胞仪进行分析。结果 :GP与PYM对GNM细胞均有抑制作用 ,抑制率与药物浓度呈正相关 ,二者联用 ,抑制率增强。GP主要作用于细胞的“S”期。结论 :GP与PYM对GNM细胞具有抑制作用 ,GP对细胞的损伤是通过干扰细胞周期实现的 ,GP与PYM联用抑制作用增强在于二者作用的细胞周期不同。提示用药时可根据二者各时相时间分开应用。GP具有临床应用价值。     

应用流式细胞技术分析Ca（OH）2及HA对牙髓细胞周期的影响

目的：采用流式细胞技术分析盖髓剂氢氧化钙[Ca(OH2)]及羟基磷灰石（HA）对牙髓细胞周期的影响。方法：将香猪恒牙牙髓机械暴露后,行氢氧化钙和羟基磷灰石盖髓术,分别于术后2,4,8,12周拔牙,采取牙须,胶原酶消化后流式细胞仪检测。将组方图存入磁盘进行计算机分析处理,得到G0／G1,G2,S及M细胞百分比。结果氢氧化钙和羟基磷灰石均能使牙髓细胞的G0／G1期细胞减少,S期细胞积累,结论：提示氢氧化钙及羟基磷灰石可能有促进G0／G1期细胞进入S期,增加DNA合成的作用。     

细胞周期素A在口腔鳞癌中的表达及临床病理意义

目的探讨细胞周期素A(CyclinA)在口腔鳞癌及癌前病变中的的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测CyclinA在65例口腔鳞癌、25例上皮异常增生及20例正常粘膜的表达。结果CyclinA在口腔鳞癌组织中阳性表达率为55.4%(36/65),在上皮异常增生组织有少量表达,在正常口腔粘膜组织未见表达。CyclinA在低分化鳞癌组较高中分化组表达增高(P<0.01)。CyclinA表达与颈淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.05)。CyclinA表达与患者的年龄、性别及病灶大小无关(P>0.05)。结论CyclinA表达可能与口腔鳞癌的发生、分化及侵袭转移有关。     

CDK4对口腔扁平苔藓细胞增殖的调控作用

目的：探讨口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP)的病因和病机。方法：通过免疫组织化学方法,观察了40例OLP细胞中CDK（细胞周期蛋白依赖性激酶,cyclins dependent kinases)的表达状况,结果：OLP组上皮基底层和棘层细胞CDK4表达指数显著高于对照组,同时CDK4的阳性表达与年龄呈显著性正相关,结论：CDK4表达的改变可能与OLP的发生或进展和患者的年龄有关联。     

细胞周期调控因子在舌鳞癌中的表达与意义

恶性肿瘤的细胞周期调控机制常发生异常。通过测定细胞周期的调控因子如细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)和它们的抑制剂(CDKIs)可显示该组织中的细胞是否处于正常的细胞周期，因而对临床诊治具有辅助作用。我们检测舌鳞癌中p27、cyclin D1和CDK4的表达，探讨它们在临床应用中的意义。     

8—甲氧基补骨脂素对MEC—1细胞癌基因／抑癌基因表达的影响

目的：研究８－甲氧基补骨脂素对ＭＥＣ－１细胞部分基因表达的影响。方法：细胞贴壁后用３０％细胞生长抑制浓度的药物处理１２０ｈ，常规制备标本，ＡＢＣ法免疫组织化学染色。结果；药物处理后细胞Ｐ１６和ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达强度增强，而ＣＤＫ４和Ｈ－ｒａｓ蛋白表达强度减弱。结论：８－ＭＯＰ可以调节ＭＥＣ－１细胞部分基因的表达，从而可能影响细胞相关的生物学特性。     

白藜芦醇对人舌癌细胞Tca增殖及凋亡影响的研究

目的探讨白藜芦醇对人舌癌细胞Tca的增殖及凋亡影响。方法应用MTT比色法检测白藜芦醇对Tca细胞体外生长的抑制作用;平板克隆检测白藜芦醇处理前后Tca细胞的克隆形成能力;流式细胞仪测定细胞的周期和凋亡;Hoechst33258荧光染料染色,显示凋亡细胞形态。结果MTT实验观察,白藜芦醇对Tca细胞生长有抑制作用,随浓度升高和时间延长,作用增强,呈剂量-时间效应关系;白藜芦醇作用Tca细胞48 h和72 h后,半数细胞抑制作用所需浓度约为(IC50)100μmol/L和75μmol/L。白藜芦醇(75μmol/L)处理后,细胞的克隆形成能力明显下降。白藜芦醇(100μmol/L)作用48 h后使G1期细胞的比例增加;Hoechst33258染色,可见细胞呈明显的凋亡特征。结论白藜芦醇可抑制人舌癌细胞Tca增殖,使细胞周期呈G1阻滞并可诱导细胞发生凋亡。     

转染Podoplanin对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响

目的 探讨转染外源性Podoplanin基因对口腔白斑细胞增殖和细胞周期的影响,以证实Podoplanin在白斑癌变中的作用.方法 以口腔黏膜白斑细胞系Leuk-1、转染pCMV-Podoplanin表达质粒白斑细胞系A4-1和转染空白载体pCMV的白斑细胞系B4-1为细胞模型,应用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测转染目的基因后细胞中Podoplanin mRNA水平的变化.激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹法观察转染目的基因后细胞中Podoplanin蛋白的定位和表达水平.甲基噻唑基四唑(MTT)法检测转染目的基因细胞增殖活性的变化.流式细胞仪检测过表达外源性Podoplanin后细胞周期分布的变化情况.结果 转染外源件Podoplanin基因的A4-1细胞,mRNA相对表达量为0.022,明显高于B4-1细胞的0.001及Leuk-1细胞的0.002(P<0.05);A4-1细胞Podoplanin蛋白表达水平较B4-1和Leuk-1细胞明显提高.免疫荧光结果表明,3种细胞的胞质及胞膜均可见Podoplanin蛋白的表达,A4-1细胞的蛋白表达量(绿色荧光强度)明显高于B4-1和Leuk-1细胞.细胞生长曲线分析结果表明,A4-1细胞生长速度明显高于Leuk-1细胞,A4-1接种后3 d增殖活性比Leuk-1细胞高40.4%(P<0.05).细胞周期检测结果显示,A4-1细胞处于G_2～M期比例为(24.89±4.55)%,明显高于B4-1[(4.13±5.24)%]和Leuk-1细胞[(4.69±7.42)%],P<0.05;A4-1细胞增殖指数(0.57±0.06)高于B4-1(0.41±0.04)及Leuk-1(0.40±0.02),P<0.05.结论 口腔白斑细胞过表达外源性Podoplanin蛋白后,细胞生长和增殖能力明显增强;Podoplanin町能是口腔白斑细胞癌变的关键基因之一.     

Ki-67抗原及其在肿瘤细胞增生活性的研究现状

Ki-67抗原是核基质的一部分,是由分于量为345 KD和395 KD的两条多肽链组成的核蛋白,Ki-67仅在增殖细胞核中表达,其单克隆抗体能标记G_1后期、S期,G_1期和M期细胞核,而G_ο期和G_1早期细胞核不被标记。近年来,很多学者对这种抗原的表达与肿瘤的生物学行为进行了研究。本文就Ki-67抗原在细胞周期中的表达及其在肿瘤尤其是在口腔肿瘤中的研究现状进行综述。     

舌鳞状细胞癌中Cyclin D1和CDK4的表达及意义

目的:分析细胞周期素D1(CyclinD1)和细胞周期素依赖激酶4(CDK4)在舌鳞状细胞癌中的表达及意义.方法:用免疫组织化学方法检测CyclinD1和CDK4在39例舌癌和15例正常舌黏膜中的蛋白表达,及其与组织学分级和颈部淋巴结状态之间的关系.应用χ2检验分析舌癌中CyclinD1和CDK4与在正常舌黏膜中表达的差异,应用Spearman等级相关分析CyclinD1和CDK4的表达关系.结果:CyclinD1、CDK4在舌癌中的阳性表达率分别为69.2%、61.5%,均高于正常舌黏膜,有显著性差异(P<0.01),CyclinD1和CDK4在舌癌中的表达成正相关(P<0.05),伴有颈部淋巴节转移组的阳性表达率高于无转移组,有显著性差异(P<0.05).结论:CyclinD1和CDK4在舌癌组织中呈过表达,并与其发生、发展密切相关.