nm23基因调控机理的研究进展

nm23基因作为肿瘤转移抑制因子,在肿瘤发展和转移过程中有重要调节作用。近年来,通过对nm23基因及其蛋白产物NDPK的深入研究揭示,nm23/NDPK以组氨酸依赖性磷酸转移酶活性和丝氨酸自磷酸化为基础,对细胞信号传递系统、微管相关蛋白和基底膜形成微环境的调节,以及nm23-H2的转录激活因子作用和DNA结合特性,是nm23基因调控的基本机理。     

肿瘤转移抑制基因nm23的研究进展

肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３的研究进展ＳＴＵＤＹＰＲＯＧＲＥＳＳＯＦＴＵＭＯＲＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲＧＥＮＥＮＭ２３史宏男综述何荣根审校作者单位：上海第二医科大学附属第九医院口腔颌面外科（２０００１１）（史宏男现在上海铁道大学附属甘泉医院口腔颌面外科，２０...     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ３２－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高，颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ〈０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ经无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２     

口腔鳞癌组织中nm23—H1基因的mRNA表达及临床意义

目的 研究口腔鳞癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况及其与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法 采用斑点杂交的方法检测８例口腔鳞癌,２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况。结果 ２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达水平均较高;４例手术时无颈淋巴结转移的口腔鳞癌组织中３例ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ呈相对高表达,１例表达水平较低;而伴有颈淋巴结转移的４例口腔鳞癌组织中ｎｍ２３     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅰ.Northern斑点杂交研究

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高。颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ＜０．０５）。１１例有转移颊癌患者中有９例（８１．８％）为ｎｍ２３－Ｈ１低表达；而１９例无转移颊癌，有１５例（７８．９％）为高表达（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达在有无转移组患者中无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，在颊癌的转移过程中，ｎｍ２３－Ｈ１比ｎｍ２３－Ｈ２起着更重要的作用。ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达可作为预测有无颊癌淋巴结转移的一个有价值的指标。     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅱ.定量逆转录多聚酶链反应检测

采用定量逆转录多聚酶链反应（Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在４７例组织标本中的表达情况，发现ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在颊癌原发灶、癌旁粘膜、正常颊粘膜、颌下腺、白斑、正常淋巴结和有转移的淋巴结中均有不同程度的表达。ｎｍ２３－Ｈ１在肿瘤转移组颊癌原发灶中的表达低于无转移组（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３－Ｈ２在颊癌有、无转移中的表达无差异（Ｐ＞０．０５）；ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２表达与临床病理参数间均无关（Ｐ＞０．０５）。结果提示：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达下降与颊癌转移关系密切，而ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达与颊癌转移无关；通过Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ检测ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达水平可为临床预测颊癌的转移提供有价值的指标。Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ技术的主要优点在于通过少量组织提取的总ＲＮＡ即可检测ｎｍ２３ｍＲＮＡ的表达。     

肿瘤转移抑制基因nm23在涎腺腺样囊性癌表达的研究

目的：探讨肿瘤转移抑制基因nm23与涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)预后的关系。方法：采用免疫组织化学链亲和素法分析52例SACC的nm23表达,并分析nm23与SACC病理学分型、临床分期、局部复发、远处转移和患者生存率的关系。结果：nm23表达与SACC病理学分型、临床分期、局部复发和患者生存率无明显相关（P＞0．05）,而与远处转移呈高度负相关关系（P＜0．01）。结论：nm23能抑制SACC远处转移的发生,并可作为预后指标来预测SACC的远处转移,指导临床治疗。     

nm23-H1基因在口腔鳞癌颈淋巴结转移不同阶段的调控作用

目的　探讨nm23-H1基因在口腔鳞癌区域淋巴结转移不同阶段的调控作用及影响。方法　利用免疫组化和Western Blot技术,结合淋巴结转移和原发灶浸润分型的资料,分组对照研究nm23-H1基因在200例口腔鳞癌颈淋巴结转移不同阶段的表达情况。结果　淋巴结转移组nm23-H1基因阴性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0·01)。N1期、转移仅累及1个淋巴结、Ⅳc型浸润,以及低分化肿瘤的患者,均有比其它患者明显增高的 nm23-H1基因的阴性表达率(P<0·01);转移至颌下或颌下-颈深上淋巴结平面者的阴性表达率,也高于转移到其它平面者(P<0·05)。结论　nm23-H1基因主要是通过干扰肿瘤实体内高转移细胞亚群的形成和初始转移的发生来调控口腔鳞癌患者的颈淋巴结转移。     

肿瘤转移抑制基因nm23研究现状

ｎｍ２３是引人注目的肿瘤转移抑制基因，分为ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２两个亚型，编码具有ＮＤＰＫ活性的蛋白。ｎｍ２３基因的ｍＲＮＡ、蛋白质表达下降，等位基因缺失或基因突变与恶性肿瘤的高转移潜力有关。     

nm23基因在涎腺腺体囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺性囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｉｔｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐａｔｅｋｉｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达，结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，在肺转移者阳性率为１２．５％（１／８）无肺转移阳性率为８８     

nm23-H1基因对BcaCD885细胞侵袭、粘附和运动力影响的研究

目的：通过nm23-H1的转化及导入BcaCD885细胞株，建立稳定、高效、低毒的转染方法，观察nm23-H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响。方法：（1）利用基因转化技术，制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒；（2）利用阳离子脂质体介导的转染技术，完成转染方法的建立；（3）利用免疫组化技术，检测转染前后的NDPKA的表达；（4）利用transwell小室和冲刷实验，观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。结果：（1）使用重组的pCMV-N-B 的真核表达载体，将nm23-H1转染口腔癌,细胞并获得稳定表达；（2）发现BcaCD885细胞株nm23-H1基因的转染前后表达水平有明显差异；（3）转染后的BcaCD885细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。结论：nm23-H1对BcaCD885细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用。     

p16和nm23基因在唾液腺肿瘤中表达的研究

目的　探讨p16和nm23基因在唾液腺良、恶性肿瘤中的表达情况及与唾液腺肿瘤发生之间的关系。方法　用免疫组织化学SABC法检测39例正常唾液腺和唾液腺肿瘤存档石蜡标本中P16蛋白和nm23蛋白的表达。结果　P16和nm23蛋白阳性表达主要见于细胞浆及细胞核,呈棕黄色。在正常唾液腺中,二者阳性表达率均为100% (4/4)。在良性和恶性唾液腺肿瘤中,P16蛋白阳性表达率分别为76·9%(10/13)和40·9%(9/22),良恶性之间P16蛋白表达差异有统计学意义(P<0·05);nm23蛋白阳性率分别为84·6%(11/13)和45·5%(10/22),良恶性之间亦有统计学意义(P<0·05)。唾液腺肿瘤中P16与nm23表达之间无相关性。结论　p16和nm23基因在唾液腺肿瘤发生中可能分别起着不同的重要作用,其表达下降可能有利于唾液腺恶性肿瘤的形成。     

有无区域性淋巴结转移的舌鳞癌中nm23-H1基因比较研究

目的:探讨nm23-H1基因与舌鳞癌区域性淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化SP法检测75例舌鳞癌原发灶中nm23-H1蛋白的表达分布,并应用反转录聚合酶链式反应检测其中20例舌鳞癌新鲜标本中nm23-H1mRNA的表达。结果:nm23-H1蛋白和nm23-H1mRNA的阳性表达率在区域性淋巴结转移组分别为27.8%(5/18)、42.9%(3/7),在无区域性淋巴结转移组分别为86.0%(49/57)、92.3%(12/13)。nm23-H1蛋白和nm23-H1mRNA的表达呈显著相关(P<0.05),两者与舌鳞癌区域性淋巴结转移皆呈负相关(P<0.05)。结论:nm23-H1蛋白和nm23-H1mRNA的阴性表达减弱了抑制舌鳞癌转移的能力,联合检测可在细胞及分子水平上了解该基因的表达变化情况,nm23-H1基因可作为评估舌鳞癌有无区域性淋巴结转移的重要指标。     

肿瘤转移抑制基因nm23-H1和nm23-H2特异性片段的体外扩增、克隆和鉴定

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），从人基因组ＤＮＡ中扩增出ｎｍ２３－Ｈ１（１８５ｂｐ）和ｎｍ２３－Ｈ２（１４５ｂｐ）特异性ＤＮＡ片段，与载体ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）平端连接，重组质粒分别转化宿主菌ＪＭ１０９，在含Ｘ－ｇａｌ和ＩＰＴＧ的平板上直接筛选阳性克隆，限制性内切酶谱分析及ＰＣＲ扩增鉴定，确定ｐＧＥＭ－Ｈ１和ｐＧＥＭ－Ｈ２重组体。为ｎｍ２３基因与肿瘤转移研究打下基础。     

nm23基因在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉ－ｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达。结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中有较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，有肺转移者阳性率为１２．５％（１／８），无肺转移者阳性率为８８．２％（１５／１７），差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；ＮＤＰＫ表达与临床分期有关，分期越高，阳性率越低，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与病理分型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３基因在人ＡＣＣ肺转移过程中起到抑制转移的作用，可作为临床颈侧ＡＣＣ患者转移和预后的指标。     

肿瘤抑制基因nm23—H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及 …

目的 研究ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在口腔鳞癌中的表达情况,并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法检测７５例口腔鳞癌、１９例癌旁粘膜、８例正常口腔粘膜及９例颈淋巴结转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白染色,利用Ｘ＾２检验及单因素、多因素Ｃｏｘ比较风险模型进行统计分析。结果 Ｘ＾２检验发现,ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达水平在生存期小于３年组和大于７年组间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。单因素Ｃｏｘ模型     

nm23—h1基因导入对腺样囊性癌分化的影响

目的 探讨nm23h1基因对腺样囊性癌细胞分化的影响。方法 体外用了子脂质体介导nm23－h1质粒转染人口腔涎腺样囊性癌（ACC）细胞株,筛选出转染阳性细胞克隆,并植入4只裸鼠颌面部,3w后获取标本,石蜡包埋后进行常规组织学及免疫组织化学检查,实验以未转染的阴性细胞克隆植入4只裸鼠作对照。结果 nm23－h1阳性ACC植入裸鼠体内后肿瘤细胞有向原代细胞回归的倾向,即由实体型向筛状型或管状型转变,肿瘤细胞周围的肿瘤间质增多,巢状的肿瘤细胞外围有基底膜样结构;肿瘤细胞在体内增殖的过程中,表达nm23－h1的细胞数量有逐渐减少、表达强度减弱的趋势。结论 以nm23-h1为靶基因的治疗同时具有抑制转移和促进分化的作用,具有较大的研究价值和临床应用前景。     

肿瘤转移抑制基因nm_(23)研究现状

nm_(23)是引人注目的肿瘤转移抑制基因,分为nm_(23)-H_1和nm_(23)-H_2两个亚型,编码具有NDPK活性的蛋白。nm_(23)基因的mRNA、蛋白质表达下降,等位基因缺失或基因突变与恶性肿瘤的高转移潜力有关。     

nm23-HlcDNA克隆及腺病毒载体的构建

目的：在正常人肝组织中克隆nm23-HlcDNA基因，构建腺病毒克隆载体。方法：应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术，从正常人肝组织中扩增出nm23-HlcDNA，连接到质粒pMD18-T上，经测序、鉴定，与腺病毒穿梭质粒正向连接，构建腺病毒克隆载体。结果：克隆的基因经测序鉴定，与已知nm23-HlcDNA编码区基因100％符合，以此基因成功构建正向腺病毒穿梭质粒载体。结论：利用分子克隆技术，成功克隆中国人nm23-HlcDNA基因，构建出正向重组腺病毒穿梭质粒载体。     

nm23基因在涎腺恶性肿瘤中表达的意义

为了探讨ｎｍ２３基因在涎腺恶性肿瘤中表达的意义，作者应用免疫组织化学方法检测了４０例涎腺恶性肿瘤ｎｍ２３基因表达情况，并分析了ｎｍ２３基因表达变化与涎腺恶性肿瘤的临床病理及其转移的关系。结果发现，ｎｍ２３低表达者其肿瘤转移率为８１８％，而ｎｍ２３高表达者其肿瘤转移率只有３４％，两者差异有高度显著性（Ｐ＜０．００５）；ｎｍ２３低表达与肿瘤大小、部位、病理类型无显著相关性（Ｐ＞０．０５）。结果表明ｎｍ２３基因在抑制涎腺恶性肿瘤转移方面起重要作用。