Cyr61在胃癌中的表达和意义

背景：Cyr61为CCN家族成员之一,又名CCN1,是一种分泌性蛋白。研究发现Cyr61过表达在多种人类恶性肿瘤的发生、侵袭、转移、复发中发挥重要作用。近年来,Cyr61与胃癌的关系日益受到关注。目的：检测Cyr61在胃癌组织和配对癌旁非癌胃黏膜中的表达并探讨其意义。方法：以RT—PCR检测43例胃癌、40例癌旁非癌胃黏膜标本的Cyr61mRNA表达．以免疫组化方法检测82例胃癌、80例癌旁非癌胃黏膜石蜡包埋组织的Cyr61蛋白表达,分析Cvr61在癌旁非癌胃黏膜和不同浸润深度胃癌组织中的表达差异。结果：胃癌组织Cyr61mRNA相对表达量和Cyr61蛋白高表达率均显著高于癌旁非癌胃黏膜（Cvr61mRNA：0．5286＋0．2139对0．3450＋0．1862,P=0．000;Cyr61蛋白：61．0％对32．5％,P〈0．05）。T。期胃癌组织Cyr61蛋白高表达率显著高于T。。期胃癌组织和癌旁非癌胃黏膜（72．2％对39．3％和32．5％,P〈0．05）,T1-2期胃癌组织与癌旁非癌胃黏膜之间则无明显差异（P〉0．05）。结论：Cyr61在胃癌组织中呈过表达．其表达与胃癌浸润深度相关．提示Cyr61可促进胃癌侵袭,并有望成为预测胃癌预后的分子标记物。     

SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义

目的观察SIRTl在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRTl同胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用Real．timePCR方法检测SIRTlmRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Westernblot和Real．timePCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRTl蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系。结果SIRTImRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）,SIRT1mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高（P均〈0．05）。免疫组化染色结果表明,SIRTl蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）。SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关（P均〈0．05）,同生存时间呈负相关（r=-0．5023,P〈0．05）。结论SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色。     

p57KIP2 mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

选取石蜡包埋的44例非小细胞肺癌（NSCLC）患者及12例癌旁肺正常组织的标本制作组织芯片，用地高辛标记的探针、原位杂交法检测p57^KIP2 mRNA的表达情况。发现p57^KIP2 mRNA在癌旁肺正常组织和NSCLC组织中的表达元显著差异（P〉0．05）。鳞癌中阳性表达率明显高于腺癌（P〈0．01），NSCLC中无淋巴结转移者阳性表达率明显高于有淋巴结转移者（P〈0．01）。p57^KIP2 mRNA的表达有望成为监测NSCLC患者病情发展及评价预后的有用指标。     

microRNA-101和环氧合酶-2在胃癌中的表达及其临床意义

背景：microRNAs是一类对靶基因表达具有转录后调控作用的非编码小RNA。microRNA-101（miR-101）在多种恶性肿瘤中呈低表达,而过表达外源性miR-101可发挥肿瘤抑制作用。前期体内、外实验发现外源性miR-101可抑制胃癌细胞增殖和环氧合酶-2（COX-2）表达。目的：检测胃癌组织中的miR-101、COX-2表达并探讨其临床意义。方法：收集手术切除胃癌组织和配对癌旁非癌组织标本30例,以实时荧光定量RT—PCR检测miR-101、COX-2mRNA表达,分析两者间以及两者与胃癌主要临床病理特征的关系。结果：绝大多数胃癌组织中miR-101表达低下,COX-2mRNA则呈过表达。胃癌组织与癌旁非癌组织间miR-101、COX-2mRNA表达量差异显著（P〈0．01）,且两者表达在癌组织和癌旁组织中均呈负相关（癌组织：r=-0．767,P=0．000;癌旁组织：r=-0．718,P=0．000）。TNMⅢ、IV期胃癌和伴淋巴结转移的胃癌中,miR-101表达分别显著低于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）,COX-2mRNA表达分别显著高于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）。结论：miR-101与COX-2之间的负相关性可能有助于胃癌的临床诊断;miR-101表达低下伴COX-2过表达与胃癌临床进展和转移有关,对预后判断有一定参考价值。     

胃癌组织中CTGF蛋白表达及其临床意义

目的探讨结缔组织生长因子（CTGF）蛋自在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测10份正常胃黏膜组织、50份胃癌组织及其癌旁组织中CTGF蛋白表达情况。结果胃癌组织中CTGF阳性表达高于癌旁组织及正常胃黏膜组织,P〈0．05;癌组织CTGF阳性表达率明显高于正常黏膜组织（P〈0．01）,CTGF的高表达与胃癌分化程度、淋巴结转移密切相关（P均〈0．05）;与肿瘤浸润的深度无明显关系。结论CTGF蛋白可作为胃癌前病变及胃癌早期诊断和预后判断的指标。     

胃癌及癌旁组织Fas、Fas L的表达

目的：探讨细胞凋亡相关蛋白的Fas、FasL在胃癌发生、发展中的作用。方法：对74例手术切除胃癌标本，应用免疫组化S－P法检测Fas、FasL蛋白在癌组织和相应癌旁组织中的表达。结果：在高中分化型胃癌Fas和FasL的阳性表达率一致性显著高于低分化型胃癌（P＜0．05）。而在早期和进展期胃癌间，有淋巴结转移和无淋巴结转移胃癌间Fas和FasL的阳性表达率无显著性差异（P＞0．05）。胃癌组织Fas 阳性表达率显著低于癌旁组织（P＜0．05）。FasL在两者间无显著性差异（P＞0．05）。结论：Fas和FasL的异常表达可能是胃粘膜癌变过程中细胞凋亡抑制的重要机制之一，并与胃癌的分化和免疫逃逸有关。     

Epha4在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Epha4在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化及RT-PCR法检测Epha4蛋白及mRNA在66例胃癌组织、40例癌旁组织、14例正常胃组织中的表达,分析Epha4表达与胃癌临床病理特征的相关性。结果胃癌组织中Epha4mRNA表达水平明显高于癌旁和正常胃组织,癌旁组织与正常胃组织中的表达无明显差异。Epha4蛋白在胃癌组织中阳性表达率为53．0％（35／66）。Epha4表达与胃癌分化程度、临床分期、淋巴结转移及远处转移密切相关（P〈0．05）,而与患者的性别、年龄、肿瘤体积、癌组织浸润深度无关（P〉0．05）。结论Epha4在胃癌组织中的表达状态与胃癌的分化程度和转移关系密切,可以作为反映胃癌生物学行为的重要指标。     

蛋白激酶B在胃癌中的表达及其生物学意义

目的研究丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）在胃癌中的表达、活化情况及其与血管内皮生长因子C（VEGF—C）的关系，以初探Akt表达和活化的生物学意义及其可能的机制。方法采用RT—PCR法检测20例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt1、Akt2和Akt3 mRNA的表达；Western印迹法检测Akt和磷酸化Akt（pAkt）蛋白的表达；免疫组化检测pAkt蛋白和VEGF-C在55例胃癌配对组织中的原位表达。结果20例胃癌及相应癌旁正常组织中Akt1、2、3mRNA的表达阳性率皆为100％，且三者在癌和正常组织中的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹显示Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平为正常组织的2．7倍（P〈0．001），而pAkt蛋白的表达水平为癌旁正常组织的4．1倍（P％0．01）。免疫组化分析表明，pAkt表达于67．3％（37／55）的胃癌组织，且较高表达于组织分化较差（X^2=9．751，P％0．01）和TNM分期较晚（X^2=7．684，P〈0．05）者；VEGF—C在胃癌组织中的表达阳性率为61．8％（34／55），其表达与肿瘤的TNM分期（X^2=9．298，P〈0．01）及淋巴结转移（X^2=7．605，P〈0．05）密切相关，统计分析表明，pAkt与VEGF—C的表达呈显著性正相关（Pearson r=0．524，P〈0．05，Spearman，rho=0．747，P〈0．01）。结论Akt及pAkt蛋白特异性过表达于胃癌组织，可能是蛋白翻译水平和（或）代谢水平改变的结果。Akt蛋白的磷酸化可能促进胃癌细胞的恶性转化和淋巴结转移，VEGFC可能在其中发挥重要的介导作用。     

甲基转移酶3B基因在胰腺癌中的表达

目的检测胰腺癌组织中甲基转移酶3B（DNMT3B）基因表达,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。方法应用实时定量PCR和免疫组织化学方法检测42例胰腺癌组织及相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中DNMT3B mRNA和蛋白表达。结果胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织DNMT3B mRNA表达量分别为9．4±5．9、1．02±0．71和0,相差非常显著（P〈0．05）;DNMT3B蛋白表达阳性率分别为83．3％、14．3％和10．0％,相差也非常显著（P〈0．01）。DNMT3B mRNA表达与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关（P〈0．05或P〈0．01）;DNMT3B蛋白表达与肿瘤的部位、淋巴结转移有关（P〈0．01或P〈0．05）;DNMT3B mRNA和蛋白表达均与年龄、性别、神经浸润、肿瘤大小、血CEA和CA19—9浓度无关。结论胰腺癌DNMT3B mRNA和蛋白高表达提示胰腺癌已发生淋巴结转移,预后较差。     

胃癌组织p21基因表达及基因改变的研究

目的研究胃癌组织P21蛋白表达和p21基因改变的意义．方法32例胃癌石蜡标本，其中乳头状腺癌6例，管状腺癌9例，粘液腺癌8例，低分化腺癌7例，未分化癌2例，存在淋巴结转移的标本23例，32例癌旁正常胃粘膜组织作对照．应用ABC免疫组化方法检测P21蛋白表达，单链构象多态性分析（SSCP）检测p21基因改变．参照文献确定p21蛋白表达的阳性标准及SSCCP检测p21基因异常标准，并对结果进行统计学分析．结果胃癌组织P21蛋白表达阳性率56．3％（18／32），其中管状腺癌77．8％（7／9），乳头状腺癌83．3％（5／6），粘液腺癌37．5％（3／8），低分化腺癌42．9％（3／7），未分化癌0％（0／2），存在淋巴结转移组为43．5％（10／23），无淋巴结转移组为88．9％（8／9），癌旁组织为90．6％（29／32）．P21蛋白表达阳性率胃癌组织较癌旁组织明显降低（P＜0．05），与胃癌伴淋巴结转移呈负相关（P＜0．05），不同病理类型间未见差异显著（P＞0．05）．PCR－SSCR分析18．8％（6／32）胃癌组织存在p21基因改变．结论p21基因以异常表达及基因改变的方式参与胃癌发生、发展．     

趋化因子受体CCR7在胃癌组织和细胞株中过度表达

背景:趋化因子受体CCR7高表达与肿瘤淋巴结转移等因素密切相关。目的:检测CCR7在胃癌组织和细胞株中的表达情况,探讨CCR7在胃癌中的作用。方法:采用实时PCR技术检测30例胃癌组织及其配对癌旁组织中的CCR7 mRNA表达,RT-PCR检测人胃癌细胞株SGC-7901和AGS中的CCR7 mRNA表达。分析胃癌组织中的CCR7mRNA表达与胃癌临床病理特征间的相关性。结果:CCR7 mRNA在胃癌组织中的表达水平显著高于其配对癌旁组织(P0.05),人胃癌细胞株SGC-7901和AGS中均存在明显CCR7 mRNA表达。CCR7 mRNA表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关(P0.05)。结论:CCR7在胃癌中存在过度表达,可能参与了胃癌的进展过程。     

Claudin-4 mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究chudin-4mRNA在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌生物学行为的关系.方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测10例正常胃黏膜组织和31例胃癌组织的claudin-4 mRNA的转录水平.结果 正常胃黏膜组织claudin-4 mRNA相对表达量低于胃癌组织(P<0.05),高中分化胃癌组织低于低分化组织(P<0.05),有淋巴结转移的胃癌组织高于无淋巴结转移组织(P<0.05),浸润深度达黏膜下层组织高于浸润深度未达到者(P<0.05).claudin-4 mRNA相对表达量与患者性别及肿瘤大小无显著相关性(P>0.05).结论 Claudin-4 mRNA在胃癌中表达上调可能在胃癌的发生发展中起着重要的作用,其表达上调可能促进胃癌的侵润和转移.     

胃癌组织中P27表达与cyclin D1、cyclin E表达的相关性

目的:检测胃癌组织中P27的表达及其与cyclin D_1、cyclin E表达的相关性,并探讨其意义.方法:临床病理资料齐全的胃癌蜡块标本54例,正常胃黏膜标本15例,采用SP免疫组化方法检测P27、cyclin D和cyclin E在其中的表达.结果:胃癌组织54例中有20例P27表达阳性(37.0%),正常胃组织中15例有11例P27呈阳性表达(73.3%),胃癌组织与正常胃组织相比,P27的表达有明显差异(P<0.05),胃癌组织中P27的表达与患者的性别、年龄及肿瘤大小,浸润深度,分化程度无相关性(P>0.05),而与TNM分期及有无淋巴结转移明显相关(P<0.05),P27的表达与cyclin D_1的表达呈负相关(r=-0.332),而与cyclin E的表达无明显相关性(p>0.05).结论:胃癌组织中P27表达与正常胃组织有显著差异,胃癌组织中P27蛋白表达与淋巴结转移及临床分期密切相关,与cyclin E的表达呈负相关.     

COX-2基因表达与胃癌淋巴结转移的关系

目的 研究COX-2 mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达,探讨COX-2与胃癌淋巴结转移的关系。方法 采用 RT-PCR方法检测30例新鲜胃癌标本及相匹配的癌旁正常组织COX-2 mRNA的表达;用免疫组化方法检测45例胃癌石蜡标本COX-2蛋白表达。结果 胃癌组织中存在COX-2 mRNA(73.3％)及蛋白(62.2％)表达。伴淋巴结转移者,COX-2 mRNA及蛋白表达高于无转移者,(P<0.05)。结论 COX-2基因在胃癌中表达增高,且与胃癌淋巴结转移明显相关。     

死亡相关蛋白激酶基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因在原发性胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨其在胃癌发生发展中可能的机制.方法 收集62例原发性胃癌及相对应的癌旁正常组织.应用RT-PCR法检测DAPK mRNA的表达,应用Western-blot及免疫组化方法检测DAPK蛋白的表达.结果 DAPKmRNA和蛋白表达水平在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(OD值分另0为0.2863±0.2027 vs 0.5736 4-0.1968,P＜0.0001;0.2616±0.0913 vs 0.6529±0.1808,P＜0.0001).免疫组化分析显示,DAPK在所有癌旁正常组织中表达均为阳性,均值为8.61 4-2.89;而在胃癌组织中表达则明显减弱或缺失,均值为2.90 4-3.38.DAPK在癌旁正常组织中的表达水平显著高于胃癌组织(P＜0.0001).DAPKmRNA及蛋白表达水平与胃癌分期和淋巴结转移显著相关.结论 在原发性胃癌组织中,DAPKmRNA和蛋白表达明显缺失或低下,且与胃癌临床分期和淋巴结转移显著相关.     

Survivin、COX-2和VEGF在胃癌中的表达及其与预后的意义

目的研究生存素(Survivin)、环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达,探讨它们表达的关系及其与胃癌预后的关系。方法选取淮南东方医院集团总医院1992~2002年10年间行根治性手术治疗,临床、病理和随访资料齐全的胃癌患者65例,应用免疫组化S-P技术,检测Survivin、COX-2和VEGF在胃癌组织中表达。结果早期胃癌的5年生存率为95.2%(20/21),中期胃癌的5年生存率为63.6%(7/11)。中期胃癌组Survivin阳性表达高于早期胃癌组(73.6%vs 66.7%,P<0.05),其VEGF阳性表达和微血管密度(MVD)平均值高于早期胃癌组(P<0.05)。Survivin和COX-2在慢性萎缩性胃炎中的表达明显低于不典型增生者(P<0.05),在癌组织中的表达明显高于非癌组织(P<0.05)。胃癌组中的VEGF阳性表达率和MVD平均值均明显高于非癌组,且与胃癌浸润深度有关(P<0.05)。胃癌中Survivin、VEGF阳性表达的MVD值显著高于Survivin、VEGF阴性表达者(P<0.05);Survivin、COX-2、VEGF及MVD值与胃癌淋巴结转移、血管浸润均密切相关(P<0.05);Survivin、COX-2阳性表达及VEGF阳性表达者5年生存率明显低于阴性或低表达者(P<0.05)。多因素分析显示,淋巴结转移、浸润深度、Survivin表达、VEGF表达均为胃癌独立的预后因素。结论Survivin、COX-2、VEGF与胃癌的生长和浸润转移关系密切,可以作为反映胃癌生物学行为和判断预后的有效指标。     

ATDC在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

背景：ATDC又名TRIM29,属于TRIM蛋白家族,具有促进细胞增殖和抑制电离辐射敏感性的功能。研究显示其在某些恶性肿瘤中呈高表达,可作为胃癌淋巴结转移的标记,并参与了胰腺癌的生长和转移。目的：明确ATDC在胃癌中的作用,并初步探讨ATDC与幽门螺杆菌（H.pylori）相关胃癌的关系。方法：应用免疫组化方法检测72例胃癌患者癌组织和相应癌旁组织中的ATDC表达,分析其在胃癌组织中的表达与胃癌临床病理特征和患者H.pylori感染状态的关系。结果：胃癌组织ATDC阳性表达率显著高于相应癌旁组织（76.4%对2.8%,P〈0.05）。中低分化、伴淋巴结转移或远处转移、伴H.pylori感染的胃癌患者,胃癌组织ATDC阳性表达率和表达强度分别显著高于高分化、不伴转移、不伴H.pylori感染的胃癌患者（P〈0.05）,ATDC表达与胃癌患者的性别无关。结论：胃癌组织中的ATDC表达与胃癌组织学分级、转移和患者的H.pylori感染状态相关,提示其可能参与了胃癌的发生、发展,并可能与H.pylori相关胃癌有一定联系。     

15-脂氧合酶-1在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测15-脂氧合酶-1（15-LOX-1）mRNA及蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的表达，并探讨15-LOX-1表达与胃癌临床病理因素的关系。方法采用RT-PCR、westernblot和免疫组织化学方法检测胃癌组织及相匹配的癌旁正常组织中15-LOX-1 mRNA和蛋白的表达。结果15-LOX-1 mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达均显著低于癌旁正常组织（P＜0．05）。15-LOX-1蛋白表达水平与胃癌中肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期呈明显的负相关（P＜0．05）。结论15-LOX-1蛋白可能对胃癌的发生发展有一定抑制作用。检测胃癌中15-LOX-1的表达情况对评估患者的预后可能具有意义。     

Significance of vascular endothelial growth factor expression and its correlation with inducible nitric oxide synthase in gastric cancer

AIM:To investigate the clinical significance of theexpression of VEGF_(165)mRNA and the correlation withvascular endothelial growth factor (VEGF) protein andinducible nitric oxide synthase (iNO) in human gastriccancer.METHODS:We tested VEGF_(165)mRNA expression in 31 casesof resected gastric cancer specimens and normal pairedgastric mucosae by RT-PCR.Total RNA was extracted withTRIzol reagents,transcribed into cDNA with oligo (dT_(15))priming,inner controlled with β-actin expression andagarose gel isolated after PCR.VEGF expression wasquantitated with IS1000 imaging system.Meanwhile wealso examined expression levels of VEGF protein and iNOSin 85 cases of gastric cancer.All paraffin-embeddedsamples were immunohistochemically stained by streptavidin-peroxidase method (SP).RESULTS:The mean expression of VEGF_(165)mRNA ingastric cancer was 1.125±0.356,significantly higher thanthat of normal paired mucosae,which was 0.7604±0.278.The data indicated that the expression level ofVEGF_(165)mRNA was well related to lymph node metastasisand TNM stages of UICC.The expression levels in patientswith lymph node metastasis and without lymph nodemetastasis were 1.219±0.377 and 0.927±0.205 respectively(P<0.05).The expression in stages Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ was0.934±0.194,1.262±0.386 respectively (P<0.01).Furtheranalysis showed the lymph node metastasis rate in thegroup with over-expression of VEGF was higher than thatin the group with low expression of VEGF (83.3% vs 46.2%),and the ratio of stage Ⅲ Ⅳ in the group with over-expression of VEGF was also higher than that in the groupwith low expression with VEGF (77.8% vs 33.8%) (P<0.05).The positive rates of expression of VEGF protein and iNOSin 85 cases of gastric cancer were 75.4% and 58.8%respectively,and 50.1% of the patients showed positivestaining both for iNOS and VEGF,the correlation with thetwo factors was significant (P=0.018).But more intensive analysis showed the immunoreactive grades of VEGF werenot associated with that of iNOS.CONCLUSIONS:The expression of VEGF_(165)mRNA is wellrelated with lymph node metastasis and TNM stages of UlCCin gastric cancer,and is concerned with the invasivenessand metastasis of gastric cancer.The relationship can beobserved between the expression of VEGF and iNOS in gastriccancer.