LINC01215在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨LINC01215在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）组织中的表达及其临床意义。方法 利用TCGA数据库分析LINC01215在CRC组织及其癌旁正常组织中的表达,并分析其与预后的关系;采用RT-qPCR检测2009年3月至2012年1月在广州医科大学附属第二医院诊治的137例CRC患者癌组织及其癌旁正常组织中LINC01215的表达水平,并分析其与患者临床病理特征的关系。通过MEM网站获取LINC01215靶基因并进行GO注释和KEGG分析。基于富集结果,对LINC01215进行单样本基因集富集分析（ssGSEA)和药物敏感性分析。结果 TCGA数据库分析结果显示,LINC01215在CRC组织中的表达水平低于癌旁正常组织（P<0.001）。临床标本验证结果显示,LINC01215在CRC组织中的表达水平低于癌旁正常组织（P=0.001）,且与组织分化程度相关（P=0.037)。TCGA数据库分析结果显示,LINC01215高表达组的中位总生存时间明显高于LINC01215低表达组[96个月（95%CI:80～113个月) vs 82个月（95%C...     

长链非编码RNA LINC01018在非小细胞肺癌中的表达与意义

目的:探讨长链非编码RNA LINC01018在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达水平和临床意义,以及LINC01018对NSCLC细胞增殖的影响.方法:用qRT-PCR检测60例NSCLC组织和癌旁肺组织中LINC01018的表达,分析LINC01018表达与非小细胞肺癌临床特征的相关性.通过转染pcDNA-LINC01018上调 LINC01018的表达水平,采用qRT-PCR方法检测重组质粒在细胞中的表达水平.CCK8检测NSCLC细胞增殖能力的变化,Western blot法检测LINC01018对RAC1蛋白的影响.结果:相比癌旁肺组织,在NSCLC组织中LINC01018的表达出现显著下调.肺癌组织中LINC01018的表达水平与患者性别、肿瘤大小、分化程度及淋巴转移和远端转移明显相关(P<0.05).LINC01018的过表达能降低肺癌细胞的增殖能力并下调RAC1的表达.结论:LINC01018表达随着女性患者、肿瘤直径大、分期晚及分化差而显著下调.LINC01018可通过影响RAC1,抑制NSCLC细胞的增殖.     

胃癌组织中上皮间质转化相关lncRNA LINC01116的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织中上皮间质转化相关lncRNA长基因间非蛋白质编码RNA 1116(LINC01116)的表达及临床意义。方法 使用实时荧光定量PCR检测98对胃癌组织和癌旁组织的LINC01116水平,结合临床病理资料和随访数据分层分析LINC01116表达与胃癌临床病理特征和预后的关系,多因素分析采用Cox比例风险模型。结果 98例胃癌组织的LINC01116水平为3.241±0.102,高于癌旁组织的1.308±0.046,差异有统计学意义(t=17.243,P<0.001)。LINC01116表达与胃癌患者的性别、年龄、吸烟史、饮酒史、肿瘤大小和浸润深度无关(P>0.05),而与Lauren分型、TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05);单因素分析发现LINC01116表达与预后有关,其中LINC01116低表达患者的中位总生存期为58.0(95%CI:44.766～71.234)个月,优于高表达者的29.0(95%CI:18.345～39.655)个月(P=0.002);多因素分析显示LINC01116表达是胃癌的独立预后因素,LINC0111...     

血清LINC00626在老年直肠癌患者新辅助放化疗疗效预测中的作用研究

目的探讨血清长基因间非蛋白编码RNA 626(LINC00626)在老年直肠癌患者新辅助放化疗疗效和预后预测中的作用。方法选取6例老年(≥75岁)局部进展期直肠癌患者,分析对新辅助放化疗反应良好与反应不良患者的血清lncRNA表达谱,筛选差异表达lncRNA,选出第1位的基因LINC00626。进一步选取86例老年直肠癌患者,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测患者的血清LINC00626水平,并分为LINC00626高表达组(LINC00626相对表达量≥5.1)18例与LINC00626低表达组(LINC00626相对表达量<5.1)68例。比较两组患者的3年总生存率,并分析LINC00626表达水平与老年直肠癌患者性别、临床分期、癌胚抗原(CEA)水平、肿瘤下缘与肛缘的距离、疗效的关系,分析LINC00626靶基因所在的信号通路。结果 LINC00626高表达组患者的3年总生存率为72.2%,明显高于LINC00626低表达组患者的30.9%,差异有统计学意义(P<0.01)。LINC00626表达水平与老年直肠癌患者性别、临床分期、CEA水平、肿瘤下缘与肛缘的距离无关。LINC00626高表达组患者的CR率高于LINC00626低表达组患者(P<0.05)。LINC00626靶基因主要富集于转录靶点△Np63亚型和Notch等信号通路。结论血清LINC00626可以作为老年局部进展期直肠癌患者新辅助放化疗疗效预测的潜在、无创的肿瘤标志物,与老年肿瘤局部进展期直肠癌患者的远期预后有关。     

lncRNA-LINC00473在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:分析LINC00473在胃癌中的表达情况、临床意义及对人胃癌细胞增殖水平的影响。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载胃腺癌相关数据集，分析肿瘤组织与正常组织之间LINC00473的表达差异；利用 Kaplan-Meier 曲线进行患者生存分析；MTT方法检测胃癌细胞增殖水平、流式细胞术检测凋亡率的改变。结果:与癌旁组织比较，LINC00473在胃癌组织中的表达明显增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）；生存分析发现，LINC00473表达与胃癌患者OS和DFS时间相关，LINC00473高表达的胃癌患者，OS和DFS时间明显缩短（P＜0.05）。转染LINC00473 siRNA至胃癌细胞后，结果发现与阴性质粒转染组比较:转染siRNA-LINC00473的胃癌细胞，LINC00473 表达明显降低；LINC00473表达下调后细胞增殖水平减慢，凋亡率增加。结论:LINC00473是一个新的胃癌生物标记物，可作为潜在的治疗新靶点。     

长基因间非编码RNA 1475调控微小RNA-423-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨长基因间非编码RNA 1475(LINC01475)对微小RNA-423-5p(miR-423-5p)的靶向调控作用及在胃癌细胞增殖、侵袭和迁移中的作用。方法 采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测胃癌组织和细胞的LINC01475和miR-423-5p水平并进一步通过双荧光素酶报告基因实验鉴定两者的靶向关系。选择胃癌SGC-7901细胞并分为4组:对照组(未转染)、LINC01475过表达组(转染过表达载体pc DNA3.1-LINC01475+miR-NC)、miR-423-5p过表达组(转染miR-423-5p模拟物mimics+空载体pc DNA3.1)和共过表达组(转染pc DNA3.1-LINC01475+miR-423-5p mimics);采用q PCR、MTT法、划痕实验和Transwell小室实验评估转染效果、细胞活力及迁移侵袭能力的变化。结果 与癌旁组织相比,胃癌组织的LINC01475水平降低,而miR-423-5p水平升高,两者水平呈负相关(r=-0.686,P<0.05)。与人正常胃上皮GES-1细胞相比,胃癌细胞的LINC01475水平降...     

LINC01314在甲状腺癌组织和细胞中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响北大核心

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC01314在甲状腺癌(thyroid cancer,TC)组织和细胞中的表达及其对TC细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:在GEPIA数据库对TC组织中LINC01314的表达进行分析。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测各60例TC组织与邻近正常组织以及人正常甲状腺上皮Nthy-ori 3-1细胞与TC细胞系(TPC-1、CAL-62、8305C、HTh-7)中LINC01314表达水平,并分析其表达水平与TC患者临床特征的相关性。体外培养对数生长期的CAL-62和8305C细胞,采用shRNA质粒(sh-LINC01314#1和sh-LINC01314#2)转染下调CAL-62和8305C细胞中LINC01314表达,CCK-8法和细胞克隆形成实验检测sh-LINC01314#1/2对细胞增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞Ki-67、Cyclin D1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9、MMP-2蛋白表达。裸鼠移植瘤实验、免疫组织化学染色探究敲低LINC01314对TC细胞裸鼠体内生长的影响。结果:LINC01314在TC组织和细胞中呈高表达,且高水平的LINC01314与肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-LINC01314#1和sh-LINC01314#2干扰后,CAL-62和8305C细胞中LINC01314水平均显著降低(P<0.05),其中sh-LINC01314#1的干扰效果优于sh-LINC01314#2(P<0.05);敲低LINC01314表达可抑制CAL-62和8305C细胞的增殖、迁移和侵袭,降低Ki-67、Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白水平(P<0.05)。裸鼠体内研究证实,敲低LINC01314会阻碍TC细胞的异种移植肿瘤生长。结论:LINC01314在TC组织和细胞中呈高表达,其表达水平与TC患者肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移显著相关;敲低LINC01314可抑制TC细胞的增殖、迁移和侵袭及裸鼠移植瘤形成能力。     

过表达lncRNA LINC00886 抑制食管鳞状细胞癌Eca109 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 检测lncRNA LINC00886 在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织及细胞系中的表达及其对Eca109 细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法: 收集2014 年6 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库69 例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及ESCC细胞系Eca109、TE13、TE1、Kyse150、Yes-2 和Kyse170,用qPCR 法检测LINC00886 在ESCC组织及细胞系中的表达情况。分别用pIRES2-LINC00886、pIRES2-NC转染Eca109 细胞,用qPCR法检测pIRES2-LINC00886 转染Eca109细胞后LINC00886 的过表达效率;用MTS、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验分别检测过表达LINC00886 对Eca109 细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果: 在ESCC组织中LINC00886 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,其表达水平与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关（均P<0.05）。LINC00886 在ESCC 细胞中的表达水平也低于对照组（均P<0.01）。转染pIRES2-LINC00886 后,Eca109 细胞中LINC00886 的表达水平显著高于对照组（均P<0.05）。与对照组相比,过表达LINC00886 明显抑制Eca109 细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论: lncRNA LINC00886 低表达可能与ESCC的发生发展相关,过表达LINC00886可抑制ESCC细胞的增殖、迁移与侵袭能力。     

长链非编码RNA LINC00460在非小细胞肺癌中的表达及作用机制

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460在非小细胞肺癌中的表达及作用机制.方法 使用回顾性调查法,选取90例非小细胞肺癌患者作为研究对象,按照非小细胞肺癌患者癌细胞组织中lncRNA LINC00460的表达水平,将高表达水平患者(≥8.45)设为观察组(56例),低表达水平患者(<8.45)设为对...     

LINC00997在胃贲门腺癌中表达的临床意义及其对SGC7901细胞迁移、侵袭和EMT的影响

目的：检测LINC00997在胃贲门腺癌（GCA）组织及胃癌细胞中的表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲减LINC00997对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响。方法：基于TCGA和GTEx数据库分析LINC00997在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系。应用qPCR法检测68例GCA组织和相应癌旁组织以及胃癌细胞中LINC00997的表达水平,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。通过划痕愈合、Transwell侵袭实验分别检测敲减LINC00997对SGC7901细胞迁移和侵袭的影响,qPCR法和WB法检测敲减LINC00997对EMT相关标志物E-cadherin、N-cadherin及vimentin表达的影响。结果：LINC00997在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）,且LINC00997高表达组患者的OS及DFS显著低于LINC00997低表达组患者（P<0.01或P<0.05）。在68例在GCA组织中,LINC00997的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）,其表达与患者淋...     

LINC00649通过miR-424-5p/IGF1R轴调控内质网应激介导的宫颈癌细胞凋亡

目的探讨LINC00649/miR-424-5p/IGF1R对内质网应激(ERs)介导的宫颈癌(CC)细胞凋亡的影响。方法从GEO数据库中获取CC相关的数据,并分析差异表达的miRNAs。利用生物信息学数据库预测miR-424-5p的上、下游靶点,将LINC00649和IGF1R纳入研究,随后双荧光素酶实验进一步验证靶向关系。qRT-PCR检测LINC00649、miR-424-5p和IGF1R在CC组织和细胞中的表达水平。CCK-8和流式细胞术分别评估CC细胞增殖和凋亡变化。Western blot检测ERs相关蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达。结果与癌旁组织和H8细胞相比,LINC00649和IGF1R在CC组织和细胞中表达上调,而miR-424-5p下调(均P<0.05)。LINC00649的异常高表达与CC患者的预后不良有关,敲减LINC00649可通过促进ERs来抑制CC细胞活力,诱导细胞凋亡(均P<0.05)。LINC00649吸附miR-424-5p上调IGF1R的表达。miR-424-5p抑制剂或过表达IGF1R均可部分逆转敲减LINC00649对CC细胞的影响(均P<0.05)。结论 LINC00649能够通过miR-424-5p/IGF1R抑制CC细胞的ERs过程进而减少细胞凋亡,提高细胞活力。     

LINC00649通过miR-424-5p/IGF1R轴调控内质网应激介导的宫颈癌细胞凋亡

目的探讨LINC00649/miR-424-5p/IGF1R对内质网应激(ERs)介导的宫颈癌(CC)细胞凋亡的影响。方法从GEO数据库中获取CC相关的数据,并分析差异表达的miRNAs。利用生物信息学数据库预测miR-424-5p的上、下游靶点,将LINC00649和IGF1R纳入研究,随后双荧光素酶实验进一步验证靶向关系。qRT-PCR检测LINC00649、miR-424-5p和IGF1R在CC组织和细胞中的表达水平。CCK-8和流式细胞术分别评估CC细胞增殖和凋亡变化。Western blot检测ERs相关蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达。结果与癌旁组织和H8细胞相比,LINC00649和IGF1R在CC组织和细胞中表达上调,而miR-424-5p下调(均P<0.05)。LINC00649的异常高表达与CC患者的预后不良有关,敲减LINC00649可通过促进ERs来抑制CC细胞活力,诱导细胞凋亡(均P<0.05)。LINC00649吸附miR-424-5p上调IGF1R的表达。miR-424-5p抑制剂或过表达IGF1R均可部分逆转敲减LINC00649对CC细胞的影响(均P<0.05)。结论 LINC00649能够通过miR-424-5p/IGF1R抑制CC细胞的ERs过程进而减少细胞凋亡,提高细胞活力。     

LINC00536负调控Notch信号通路对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨长基因间非蛋白质编码RNA 536(LINC00536)在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用。方法 采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF7的LINC00536水平,向MCF7细胞转染LINC00536干扰序列si-LINC00536或阴性对照序列si-NC后采用q PCR和Western blotting检测Notch1和Hes1的水平。将MCF7细胞分为未转染的对照组、转染si-NC的阴性对照(si-NC)组、干扰LINC00536的si-LINC00536组和LINC00536干扰+Notch激动剂丙戊酸(si-LINC00536+VPA)组。MTT法、伤口愈合实验和Transwell小室实验分别评估细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 MCF7细胞的LINC00536水平高于MCF7细胞(P<0.05)。与未转染和转染si-NC的细胞相比,MCF7细胞转染si-LINC00536后的LINC00536、Notch1和Hes1水平降低(P<0.05)。si-LINC00536组MCF7细胞的增殖活力、划痕愈...     

LINC01503通过miR-342-3p/IGF2R轴促进上皮性卵巢癌的进展

目的：探讨LINC01503 在上皮性卵巢癌（EOC）中的表达水平和生物学功能及其可能的作用机制。方法：收集2015年5月至2016 年5月间在河北医科大学第四医院妇瘤科手术切除并经病理学确诊的85 例EOC患者的肿瘤组织和输卵管组织。常规培养人EOC 细胞A2780、SKOV3、OVCAR3 和OV90 及正常人卵巢上皮细胞IOSE80，将si-LINC01503、si-NC 及miR-342-3p mimic、miR mimic NC分别转染至SKOV3和A2780 细胞，分别作为si-LINC01503 组、si-NC 组、miR-342-3p mimic 组和miR mimic NC组。qPCR 法检测EOC组织和细胞中LINC01503 的表达水平，Kaplan-Meier 法分析LINC01503 表达水平与患者生存的关系。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01503/miR-342-3p/IGF2R轴相关分子间的靶向关系。平板克隆、划痕愈合和Transwell 实验分别检测敲低LINC01503 及转染miR-342-3p mimic 对A2780 和SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。WB法检测EOC细胞中LINC01503/miR-342-3p 通路对IGF2R蛋白表达的影响。构建A2780 细胞裸鼠移植瘤模型，观察敲低LINC01503 对移植瘤生长的影响。结果：EOC组织和细胞中LINC01503 表达水平分别显著高于输卵管组织和IOSE80 细胞（均P<0.01），LINC01503高表达组患者术后PFS 和OS 均显著短于LINC01503 低表达组患者（均P<0.01）。敲低LINC01503、转染miR-342-3p mimic 均可抑制EOC 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.01）。敲低LINC01503 可下调IGF2R的表达（P<0.01），这一现象可通过转染miR-342-3p inhibitor 挽救。敲低LINC01503 可抑制A2780 细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.01）。结论：在EOC 组织和细胞中呈高表达的LINC01503，与患者的不良预后密切相关，LINC01503可能通过吸附miR-342-3p影响IGF2R表达进而促进EOC的进展。     

长链非编码RNA LINC00261在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00261在结直肠癌中的表达及其临床意义.方法 选取86例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织石蜡标本,应用原位杂交技术检测结直肠癌组织及癌旁组织中LINC00261的表达,比较LINC00261在结直肠癌组织及相应癌旁组织中的表达情况,分析其与临床特征的关系.结果 LINC00261在结直肠癌组织中阳性表达率为62.79％(54/86),明显高于癌旁组织的8.14％(7/86),差异有统计学意义(P﹤0.01).不同分化程度、TNM分期、是否发生淋巴结转移的结直肠癌患者结直肠癌组织中LINC00261阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);不同年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤直径的结直肠癌患者结直肠癌组织中LINC00261阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).结论 LINC00261在结直肠癌组织中的表达明显升高,与结直肠癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,其有可能成为结直肠癌潜在的诊断标志物.     

lncRNA LINC00460在结直肠癌组织中的表达及其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:GEPIA在线数据库和实时荧光定量PCR(qPCR)分析检测lncRNA LINC00460在结直肠癌组织、结直肠癌细胞株(HCT-8、HCT-116、SW480、SW620)及结直肠黏膜上皮细胞NCM460中的表达,进一步分析LINC00460表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。将LINC00460过表达质粒及阴性对照(pcDNA3.1-LINC00460和pcDNA3.1-NC)转染HCT-8细胞,将LINC00460小干扰RNA及阴性对照(si-LINC00460和si-NC)转染SW620细胞,分别采用CCK-8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测细胞增殖能力和侵袭迁移能力,采用Western blot实验检测cyclin D1、p21、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:与癌旁组织和NCM460细胞相比较,LINC00460在结直肠癌组织及结直肠癌细胞株(HCT-8、HCT-116、SW480、S...     

长链非编码RNA LINC01001 在乳腺癌中的表达及其对MCF-7细胞增殖的影响

目的：探讨长链非编码RNA LINC01001 在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌MCF-7 细胞增殖能力的影响。方法：筛选2016 年3 月至2017 年6 月于湖北医药学院附属人民医院甲状腺乳腺外科行手术切除的乳腺癌患者癌及癌旁组织12 例,qRTPCR检测乳腺癌组织及癌旁组织LINC01001 的相对表达量;通过重组质粒在人乳腺癌MCF-7 细胞中过表达LINC01001,采用流式细胞术和MTT 法检测过表达LINC01001 后MCF-7 细胞周期分布和增殖能力变化。qRT-PCR 检测miR-485-5p 和CDKN1A mRNA的表达变化,Western blotting 检测CDKN1A、CDK4、CDK6 和Cyclin D1 蛋白表达变化。结果：LINC01001 在乳腺癌组织中表达水平低于对应的癌旁组织（P<0.01）。LINC01001 重组质粒转染MCF-7 细胞后可显著抑制细胞周期进展（P<0.05）,抑制细胞的增殖能力（P<0.05）。过表达LINC01001 后,MCF-7 细胞的miR-485-5p 的表达水平降低（P<0.01）,CDKN1A mRNA表达水平升高（P<0.01）;可促进CDKN1A蛋白的表达和抑制CDK4、CDK6 和Cyclin D1 蛋白的表达。结论：LINC01001 在乳腺癌组织中表达降低,其可能通过下调miR-485-5p 的表达上调CDKN1A的表达来抑制乳腺癌MCF-7 细胞的增殖能力,为lncRNA 的临床应用提供实验基础。     

lncRNA LINC00909靶向miR-548-3p对结直肠癌细胞放射敏感性的研究

目的 探讨lncRNA LINC00909是否通过靶向miR-548-3p而影响结直肠癌细胞放射敏感性。方法 采用qRT-PCR检测结直肠癌组织、癌旁组织中LINC00909、miR-584-3p的表达量;体外培养结直肠癌细胞SW480、SW620,分别将si-NC、si-LINC00909、miR-NC、miR-584-3p mimics、si-LINC00909与anti-miR-NC、si-LINC00909与anti-miR-584-3p转染至SW480、SW620细胞,用4 Gy照射细胞;克隆形成实验检测细胞存活分数及放射增敏比;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证LINC00909、miR-584-3p的靶向关系。裸鼠皮下移植瘤实验检测干扰LINC00909表达或抑制miR-584-3p表达对照射后移植瘤重量的影响。结果 结直肠癌组织中LINC00909的表达水平显著升高(P<0.05),miR-584-3p的表达水平显著降低(P<0.05);干扰LINC00909表达或miR-584-3p过表达后细胞存活分数明显降低(P<0.05),放射增敏比分别为2.017、1.762,并可抑制增殖、迁移及侵袭(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00909可靶向结合miR-584-3p;干扰LINC00909表达后移植瘤重量显著降低(P<0.05)。共转染anti-miR-584-3p后移植瘤重量显著升高(P<0.05)。结论 干扰LINC00909表达可通过上调miR-548-3p的表达而减弱结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力从而增强细胞放射敏感性。     

基因间长链非编码RNA152靶向微小RNA?103a?3p对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

目的探讨基因间长链非编码RNA 152(LINC00152)靶向调控微小RNA-103a-3p(miR-103a-3p)表达及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞(ANIP-973、NCI-H157、A549和NCI-H1975)的LINC00152水平。选取LINC00152水平最高的细胞分别转染LINC00152特异性小干扰RNA(si-LINC00152组)或无关序列(si-NC组),另设未转染细胞为对照组。QPCR检测LINC00152水平,活细胞计数CCK-8法、Transwell小室和划痕实验测定细胞增殖、侵袭和迁移能力,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的水平;荧光素酶报告实验验证LINC00152靶向结合miR-103a-3p的能力。结果NSCLC细胞的LINC00152水平均高于BEAS-2B细胞(P<0.05),尤其是NCI-H1975细胞的最高。si-LINC00152组的LINC00152水平为0.352±0.087,低于对照组的1.058±0.219和si-NC组的1.126±0.139(P<0.05)。与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组NCI-H1975细胞转染48、72 h的增殖活力下降(P<0.05);si-LINC00152组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(27.386±2.428)%和(78.840±5.031)个,低于si-NC组的(77.675±4.803)%和(179.208±13.264)个及对照组的(76.371±5.385)%和(174.003±15.678)个(P<0.05);与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组的MMP-2和MMP-9水平均降低,而PTEN水平升高(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告分析证实,miR-103a-3p模拟物降低了野生型LINC00152的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。结论LINC00152在NSCLC细胞中高表达并发挥促癌作用,与NSCLC的迁移侵袭密切相关,LINC00152与miR-103a-3p间的相互作用在NSCLC靶向治疗中有一定潜能。     

下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458调控乳腺癌SK-BR-3细胞放射敏感性

目的 研究下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭及放射敏感性影响。方法 qRT-PCR方法分别检测乳腺癌组织、癌旁组织、正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中LINC00263表达差异。SK-BR-3细胞中转染LINC00263shRNA下调LINC00263表达,克隆实验检测放射敏感性。SK-BR-3细胞给予6Gy照射处理,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡,Transwell小室检测细胞运动和侵袭,蛋白印迹法检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、MMP-2、MMP-9蛋白表达。生物信息学软件预测LINC00263和miR-4458有互补结合位点,荧光素酶报告系统测定二者的靶向关系。在SK-BR-3细胞中共转染LINC00263shRNA和miR-4458 inhibitor,给予6Gy照射处理,检测细胞增殖、运动、侵袭和凋亡变化。结果 乳腺癌组织中LINC00263表达水平高于癌旁组织。乳腺癌细胞中LINC00263表达水平高于正常乳腺上皮细胞。转染LINC00263shRNA以后的SK-BR-3细胞放射敏感性增加。转染LINC00263shRNA和放射联合具有协同作用,共同抑制细胞增殖、运动、侵袭,促进细胞凋亡,提高细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达水平,降低细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达水平。下调LINC00263靶向促进miR-4458表达。miR-4458 inhibitor逆转LINC00263shRNA联合放射对SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭的抑制作用和凋亡促进作用。结论 下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458抑制SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭,提高细胞放射敏感性。