器官移植病人巨细胞病毒感染、治疗及其耐药机制的研究

人类巨细胞病毒 (HCMV)感染是器官移植患者术后常见而严重的并发症之一 ,特异性抗病毒药物的应用可有效预防和治疗HCMV感染 ,但也可诱导病毒通过基因突变耐药     

器官移植病人巨细胞病毒感染、治疗及其耐药机制的研究

人类巨细胞病毒(HCMV)感染是器官移植患者术后常见而严重的并发症之一，特异性抗病毒药物的应用可有效预防和治疗HCMV感染，但也可诱导病毒通过基因突变耐药。     

器官移植后巨细胞病毒耐药的处理

巨细胞病毒(CMV)感染是器官移植术后常见的并发症,其耐药发生亦非罕见,且易导致临床预后不良。CMV耐药的危险因素来源于宿主、病毒以及抗病毒药物等各个方面,产生耐药的原因则主要由于药物发挥活性的基因(UL97基因)或病毒复制的基因(UL54基因)发生突变所致。目前临床上诊断CMV耐药的手段相对缺乏,主要依靠检测病毒基因突变,并以此指导下一步的临床决策。UL97基因突变的临床措施可以将更昔洛韦更换为西多福韦或膦甲酸钠,而UL54基因突变则通常可以更换为膦甲酸钠。目前一些新型抗CMV药物如letermovir、maribavir、brincidofovir以及一些用于其他指征的药物如来氟米特、青蒿酯也为CMV耐药的治疗带来了新的曙光。     

人巨细胞病毒感染及母婴传播阻断临床研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)为ds DNA病毒,其囊膜糖蛋白和基质蛋白诱导人体产生免疫反应。HCMV通过直接损伤和免疫病理损伤,导致多器官损害。人感染HCMV以潜伏性和再次激活为特征,临床症状与免疫力状态有关。本文旨在对HCMV感染的流行病学、临床表现及母婴感染特点、实验室检查手段及评价、抗HCMV治疗及母婴阻断措施作一综述。我国育龄妇女HCMV血清学阳性率为95%以上,妊娠期原发感染率为1%~4%,其中24%~75%通过垂直传播引发宫内胎儿感染,导致其发育畸形、流产、死胎或新生儿出生缺陷甚至死亡,建议实施规范感染控制措施预防孕期CMV感染。先天性CMV感染可累及多脏器,常见于神经系统和网状内皮系统损害。HCMV检测包括分子技术与非分子技术,抗-HCMV亲和力的测定有助于原发感染的诊断。目前不能将抗病毒治疗和超免疫球蛋白作为预防孕期先天性CMV感染常规手段。抗病毒药阿昔洛韦、伐昔洛韦、泛昔洛韦无致畸作用,但仍有必要评价其孕期治疗的安全性和有效性。巨细胞病毒免疫球蛋白是防治HCMV感染的有效制剂,单克隆抗体的研制是防治HCMV感染的研究热点之一。     

肾移植术后人巨细胞病毒感染的早期诊断和抢先治疗效果

目的 评估肾移植术后人巨细胞病毒(HCMV)感染的早期诊断和抢先治疗效果.方法 选择2007年1月至2009年1月进行肾移植手术并坚持随访的165例受者作为研究对象.移植术前及术后第2～8周每周1次、第9～24周每2周1次收集受者血液和尿液标本.采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测血液和尿液标本中的HCMV DNA拷贝数.对浓缩尿中HCMV DNA超过103拷贝/ml的受者,立即给予更昔洛韦进行抢先治疗.结果 165例肾移植受者术前血液和浓缩尿中均未检测到HCMV DNA;从术后第2周开始,浓缩尿中就可检测到HCMVDNA,峰值出现在第6～8周,且同一检测时间点,浓缩尿中HCMV DNA阳性例数均明显多于血液中阳性例数.术后共有30例受者血液中检测到HCMV DNA,阳性率为18.18%;有64例受者浓缩尿中检测到HCMV DNA,阳性率为38.79%;浓缩尿中阳性率明显高于血液,差异有统计学意义(P＜0.05).血液和浓缩尿中HCMVDNA均阳性的30例受者,经更昔洛韦抢先治疗后,病毒拷贝数逐渐下降,但有8例发展为巨细胞病毒性肺炎,经加强抗病毒以及其他综合治疗后痊愈,浓缩尿中HCMVDNA转阴时间为(10.2±3.4)d.另34例仅浓缩尿中HCMV DNA阳性的受者,经更昔洛韦抢先治疗后,无一例发展为巨细胞病毒性肺炎,浓缩尿中HCMV DNA转阴时间为(5.5±2.1)d,与血液和浓缩尿中HCMVDNA均阳性的受者比较,其转阴时间明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用FQ-PCR方法检测受者的浓缩尿能提前检出HCMV DNA,提高阳性检出率.一旦受者浓缩尿中HCMV DNA阳性,采用抢先治疗效果较好.     

人巨细胞病毒在前列腺上皮内瘤和前列腺癌中的高感染率

最新的流行病学资料显示 ,性传播疾病会增加罹患前列腺癌的风险。人巨细胞病毒 (HCMV)属疱疹病毒 (HPV)家族成员 ,是一种常见于成人的性传播疾病 ,它能导致宿主前列腺上皮细胞持续感染。由于HCMV具有激活原癌基因的潜在可能 ,作者研究在前列腺癌的发病过程中是否有HCMV的参与。随机选取2 2例前列腺上皮内瘤 (PIN)和 (或 )前列腺癌患者的石蜡包埋活检标本 ,采用免疫组织化学、原位杂交、聚合酶链反应和DNA测序检测HCMV基因和蛋白在瘤细胞中是否表达。结果发现 ,HCMV核酸和蛋白在所有 2 2例前列腺癌前病变和前列腺癌中都有表达 ,H…     

肝移植术后巨细胞病毒感染因素和疗效分析

人巨细胞病毒(HCMV)感染是原位肝移植(OLT)术后最常见的病毒性感染之一,也是导致术后并发症发生率和死亡率升高的主要原因之一。为了解OLT术后HCMV感染的发生率、相关危险因素及抗病毒药物的疗效,本文对166例行OLT患者的资料进行了回顾性分析,报道如下。资料与方法一、一般资料     

二次浓缩尿动态监测肾移植术后巨细胞病毒感染的研究

目的 通过与原尿沉渣、血浆标本比较人巨细胞病毒DNA(HCMV-DNA)含量的差异,评估二次浓缩尿沉渣在监测肾移植术后HCMV感染的应用价值.方法 将165例肾移植患者血浆、原尿沉渣和二次浓缩尿沉渣标本用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法 检测肾移植前、移植后、抗病毒治疗过程中HCMV-DNA拷贝数,二次浓缩尿标本与原尿沉渣监测HCMV-DNA均阳性组进行更昔洛韦(GCV)抗病毒干预,采用卡方检验和秩和检验方法 进行组间比较.结果 165例肾移植患者术前血浆、原尿沉渣和二次浓缩尿沉渣标本中均未检测到HCMV-DNA;术后原尿沉渣中检出率25.45%,浓缩尿沉渣中检出率38.79%,差异有统计学意义(x~2=6.727,P＜0.01),血浆检出率18.18%,与二次浓缩尿组比较,差异有统计学意义(χ~2=8.598,P＜0.01);同一时间点浓缩尿HCMV-DNA检出的病毒拷贝数均高于原尿,差异有统计学意义(U=4.772,P＜0.01);二次浓缩尿比原尿标本检出HCMV-DNA早7～14 d,HCMV.DNA检出高峰均集中于术后第6～8周.施加临床干预患者浓缩尿HCMV-DNA拷贝数显著下降、或调整干预方案后下降.结论 二次浓缩尿沉渣方法 能明显缩短HCMV-DNA检出时间,提高阳性检出率,能及时有效地为临床提供诊断和治疗依据,尤其在监测肾移植术后HCMV感染中具有临床应用价值.     

人巨细胞病毒与肿瘤相关性研究新进展

人巨细胞病毒与肿瘤相关性研究新进展
　　许越施浩强梁朝朝
　　doi：10.3870/j.issn.1674-4624.2016.01.020
　　巨细胞病毒(CMV)是疱疹病毒之一,属于β疱疹病毒,病毒颗粒呈球形,直径约150~200 nm,主要感染人和哺乳类,引起细胞及核增大,具有典型的嗜酸性 A 型包涵体. HCMV 基因组至少能编码250种蛋白,仅仅在病毒颗粒的衣壳与包膜间存在有8种以上的糖蛋白,这些糖蛋白可能与病毒的黏附、融合、装配以及中和靶细胞抗体的作用有关[1].目前认为共有50余种蛋白与其生物学行为密切相关,这些功能性蛋白为病毒形成了一套较成熟的感染-潜伏-再激活机制.在发达国家 HCMV人群感染率在50％以上,而在我国HCMV人群感染率则为70％~90％[2].目前认为在正常的易感人群中,感染 HCMV 后将成为 HCMV 的终生携带者,呈现为隐性感染的状态.而携带者体内潜伏的 HCMV在机体免疫功能处于正常状态时是不具备致病能力的,当携带者处于免疫抑制或者缺陷的时候,体内潜伏的 HCMV 将可能诱发某些肿瘤.我们回顾了近10年的有关恶性肿瘤与HCMV感染的报道.研究提示在肿瘤患者肿瘤组织标本中检测到 HCMV DNA 或 mRNA,并且在其血清学样本中检测到的 HCMV标志物的阳性率显著提高.这也在一定程度上提示 HCMV 感染与某些人类恶性肿瘤相关.而国内外的文献中也提示 HCMV在某些肿瘤的发生、发展甚至恶化的过程中可能发挥了一定的作用,与尿路上皮癌[3]、人脑胶质瘤[4]、宫颈癌[5]、结直肠癌[6]、胶质母细胞瘤[7]和颅咽管瘤[8]的发生和发展有着一定关系.因此,我们就 HCMV 感染与人类某些肿瘤的相关性及机制的研究进展做一综述。     

肾移植术后巨细胞病毒感染与排斥反应

人类巨细胞病毒(HCMV)感染是免疫抑制状态下的器官移植受者常见而严重的并发症。肾移植术后巨细胞病毒感染和排斥反应是密切相关的两过程,并通过产生一系列相似的细胞因子、化学因子和生长因子共同作用于移植肾,导致移植肾功能丧失。     

荧光定量PCR检测巨细胞病毒在婴幼儿肺炎中的应用

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)在婴幼儿肺炎中的感染情况.方法:采集符合临床诊断标准的婴幼儿肺炎患儿尿液,应用荧光定量PCR技术检测HCMV-DNA.结果:234例肺炎患儿中,114例检测结果阳性,120例检测结果阴性,阳性率为48.72％.结论:在婴幼儿肺炎中,HCMV的感染率较高,应引起临床重视,做到早期诊断以利治疗.     

抗人巨细胞病毒pp65抗原单克隆抗体的制备及检测方法

巨细胞病毒(CMV)属疱疹病毒科,其中使人致病的为人巨细胞病毒(HCMV),又名人疱疹病毒5型(HHV 5).CMV在人群中的感染非常普遍,人感染病毒后,多数可长期带毒成为潜伏感染.     

男性不育患者生精细胞HCMV、HSV感染检测及形态学研究

目的:探讨男性不育患者精液中生精细胞人类巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染状况及其形态学特征。方法:收集83例精液检查中发现较多生精细胞男性不育患者精液,洗涤收集细胞后提取DNA,用PCR方法进行HCMV、HSV-Ⅱ筛查,阳性者精液细胞涂片用免疫细胞化学法(ICC)做相应的病毒标记,并另行细胞学染色作形态学观察。结果:83例精液样本PCR检测HCMV阳性8例,HSV-Ⅱ阳性4例,未发现2种病毒同时阳性病例。8例HCMV阳性病例ICC标记生精细胞HCMV晚期抗原均见阳性表达,HCMV早期抗原均为阴性表达;4例HSV-Ⅱ阳性病例ICC标记生精细胞3例阳性表达,1例弱阳性。12例病毒阳性病例均发现较多未成熟生精细胞,并有不同程度的核染色质固缩、出现空泡、核膜破损、核崩解、凋亡小体等凋亡现象,但未能找到病毒感染的特异性形态学改变(如病毒包涵体)。病毒感染阳性组精子密度明显低于阴性组(P<0.05)。结论:生精细胞HCMV、HSV-Ⅱ感染时可出现不同程度的病理性损害,影响生精功能,感染的生精细胞形态学表现为出现凋亡现象等病理性改变;不育男性患者精液中出现病理性生精细胞,其生精细胞HCMV感染率可能较高。     

胸苷激酶/更昔洛韦系统联合肿瘤坏死因子-α治疗鼠膀胱癌

目的 观察腺病毒介导胸苷激酶/更昔洛韦(TK/GCV)系统联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠膀胱癌的杀伤作用.方法 构建MB49小鼠皮下模型,随机分为对照组、TK/GCV组、TNF-α组、联合治疗组.按治疗计划分组进行病毒及药物注射,实验结束测量肿瘤体积大小,进行组织病理学检查.结果 体外实验验证低浓度TNF-α联合GCV较单纯GCV对细胞的杀伤率明显增强,差异有统计学意义(P＜0.01).流式细胞仪检测,联合治疗组较单独用药组凋亡率明显提高,差异有统计学意义(P＜0.01).动物实验结束后肿瘤体积对比:TK/GCV组为(93.43±2.10) mm3、TNF-α组为(53.95±2.61)mm3、对照组为( 171.52±4.33) mm3、联合治疗组为(18.23±1.11) mm3,联合治疗组肿瘤体积较其他各组明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.01).苏木素-伊红(HE)染色见各治疗组均出现细胞坏死凋亡,其中联合治疗组仅于周边见少量肿瘤细胞存活.结论 GCV对转染腺病毒MB49细胞及TNF-α对MB49细胞均有良好的抑制生长作用,且呈浓度依赖性；TK/GCV、TNF-α均能有效诱导凋亡,且两者具有协同作用；TK/GCV系统联合小剂量TNF-α能增强自杀基因系统对小鼠膀胱癌的治疗作用.     

移植受者耐药巨细胞病毒感染的诊治

本文总结了器官移植受者耐药巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)感染的诊治新进展, 包括针对CMV感染的防治药物、耐药CMV的诊断、诊治策略及免疫学治疗策略, 旨在为预防和治疗器官移植受者耐药CMV感染提供参考。     

人端粒酶逆转录酶启动子调控腺病毒介导的胸苷激酶基因治疗膀胱癌的实验研究

目的　观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷(HSV tk/GCV)自杀基因系统体外对人膀胱癌的选择性杀伤效应。　方法　利用不同感染复数(MOI)的重组腺病毒携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因感染膀胱癌细胞253J和人成纤维细胞MRC 5,荧光显微镜下观察其感染效率。利用携带不同启动子的重组腺病毒Ad hTERT HSV/tk以及Ad CMV HSV/tk感染253J和MRC 5细胞,加入不同浓度GCV,MTT法观察受染细胞的存活率。　结果　重组腺病毒Ad hTERT EGFP能特异性转染253J细胞,其转染效率随重组病毒的MOI增加而升高(P<0. 01),MOI为1时转染率为8. 3%,MOI为1000时转染率达100. 0%;应用GCV处理后,Ad CMV HSV/tk对253J和MRC 5细胞均有杀伤作用,而Ad hTERT HSV/tk只杀伤253J细胞(P<0. 001),随着MOI和GCV浓度增加, 253J细胞存活率明显降低(P<0. 01),MOI为1、GCV浓度为1μmol/L时存活率为95. 4%,MOI为100、GCV浓度为1000μmol/L时存活率仅为6. 1%,并有旁观者效应。　结论　重组腺病毒携带EGFP报告基因可准确、简便地确定转染效率,hTERT启动子调控的重组腺病毒介导的HSV tk/GCV自杀基因系统对人膀胱癌细胞有靶向杀伤作用。     

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前hbv p区基因序列测定的意义

对于慢性乙型肝炎(chb),目前抗病毒治疗是唯一能够最大限度抑制病毒复制和延缓病情进展的方法.在抗病毒药物中,核苷(酸)类药物对chb的疗效已得到肯定.但目前所有口服核苷(酸)类药物,包括拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定等在治疗过程中均可出现不同程度的耐药性.耐药株的出现给乙型肝炎的治疗带来了极大的困难,但这些耐药株是在用药之前就存在还是由于用药而诱发的呢?这些核苷(酸)类药物在应用过程中亦有原发无应答现象,其原发无应答的原因何在?是否其感染的hbv本身就存在耐药株呢?在选用核苷(酸)类药物抗病毒之初进行hbv耐药位点检测,根据检测结果选择有效的抗病毒药物,可以获得较好的疗效,也可以避免不必要的浪费.     

人巨细胞病毒感染与宿主细胞趋化因子分泌的相关性研究

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人胚肺成纤维(HEL)细胞分泌趋化因子:白细胞介素-8(IL-8)及正常T细胞表达和分泌,受活化调节的蛋白(RANTES)的影响及意义.方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IL-8 mRNA和RANTES mRNA的表达,用双抗体夹心ELISA法测定IL-8和RANTES蛋白的分泌.结果 HEL细胞感染HCMV后,IL-8无论从mRNA水平或蛋白质水平,均随感染时间的延长,表达逐渐增加,至感染后72 h,IL-8 mRNA约为对照组的12倍,IL-8蛋白约为对照组的9倍.感染后8 h可测出RANTES mRNA,24 h达到高峰,其后虽有所下降,但仍维持较高水平;RANTES蛋白的分泌在感染后24 h达到高峰,随后急剧下降,至72 h基本无表达.结论 HCMV感染HEL细胞后,诱导IL-8基因转录及IL-8蛋白分泌增加,从而趋化中性粒细胞至感染部位,并促进中性粒细胞的移行而传播病毒.HCMV可通过模拟β族趋化因子受体而下调细胞外RANTES蛋白的分泌,逃避感染时的局部免疫应答.     

先天性心脏病与病原体感染的关系

目的 探讨先天性心脏病(先心病)与弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(HCMV)和单纯疱疹病毒(HSV)、人微小病毒(HPVB19)感染的关系.方法 实验对象分两组.A组为先心病组80例,B组为风湿性心脏病患者和妊娠高血压综合征引产的死婴共32例.采用聚合酶链反应(PCR)荧光定量方法检测两组心肌组织中的5种病原,比较5种病原体的阳性率.同时对阳性者病原基因进行定量,比较病原体数量上是否有差异.结果 先心病组中TOX、RV、HCMV、HSV、HPVB19病原基因阳性检出率分别为16.2%、18.8%、28.8%、7.5%、17.5%,对照组分别为0、0、18.8%、6.2%、0.TOX、RV、HPVB19在两组中检测差异有统计学意义(P<0.05),HCMV、HSV基因检出率间差异无统计学意义(P>0.05).先心病与对照组心肌组织HCMV阳性者定量检测值分别为(5.50±1.30)、(5.30±0.33)copies/ml,HSV阳性者定量检测值分别为(4.51±0.87)、(4.32±0.17)copies/ml,先心病组数值高于对照组,但差异无统计学意义.结论 先心病的发生与TOX、RV、HCMV、HSV、HPVB19感染存在密切关系.     

肾移植术后巨细胞病毒感染与排斥反应

人类巨细胞病毒（HCMV）感染是免疫抑制状态下的器官移植受者常见而严重的并发症.肾移植术后巨细胞病毒感染和排斥反应是密切相关的两过程,并通过产生一系列相似的细胞因子、化学因子和生长因子共同作用于移植肾,导致移植肾功能丧失.