复方丹参降浊丸HPLC指纹图谱研究

目的:建立复方丹参降浊丸的HPLC指纹图谱,为其质量评价提供依据。方法:采用Agilent TC-C18(2)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-0.5%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱(0min,85%B;10min,65%B;19min,50%B;25min,30%B;30min15%B;40min,5%B);流速:1.0mL·min-1;检测波长:268nm;柱温:30℃。测定10批复方丹参降浊丸样品,利用Chromap1.5色谱软件建立丹参降浊丸HPLC指纹图谱。结果:建立的丹参降浊丸指纹图谱技术指标可靠、稳定、重现性好;阴性样品HPLC图谱与复方丹参降浊丸指纹图谱进行对比,峰面积和峰的个数有明显差别。结论:复方丹参降浊丸指纹图谱的建立可以快速、简便地定性检测,可用于该药的质量控制。     

丹参波长叠加指纹图谱及多指标成分测定研究

对丹参波长叠加指纹图谱和7种丹参指标成分同时定量进行研究。采用Agilent Eclipse Plus C_(18)(4. 6 mm×100 mm,3. 5μm)色谱柱,以0. 1%甲酸的水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱(0～5 min,10%～20%B; 5～20 min,20%～30%B; 20～25 min,30%～50%B; 25～40 min,50%～65%B; 40～45 min,65%～80%B; 45～46 min,80%～10%B; 46～50 min,10%B),流速1mL·min~(-1),柱温30℃,检测波长250,280,310,340 nm。运用波长叠加技术建立指纹图谱,并选取主要成分建立多指标测定方法。波长叠加指纹图谱体现了丹参250,280,310,340 nm特征吸收波长的指纹信息,17个不同来源的丹参样品与指纹图谱之间具有良好的相似性,相似度在0. 828～0. 936。确定了15个共有峰,并指认了其中7个色谱峰,分别是迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA,其方法学考察结果良好。建立了丹参波长叠加谱指纹图谱,该方法简便可靠、耐用性好,可用于丹参的质量控制。     

基于指纹图谱结合气味分析综合评价3种工业化干燥方法下小金丸的相似性

目的：建立小金丸高效液相色谱（HPLC）指纹图谱及顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱（HS-SPMEGC-MS）分析方法,用于评价不同干燥方法所得小金丸样品质量的一致性。方法：采用HPLC建立小金丸不同干燥样品脂溶性提取部位的指纹图谱,并对相似度进行分析;采用HS-SPME-GC-MS对小金丸中挥发性成分进行鉴定,计算各成分的相对含量并进行热图聚类分析。结果：在9批小金丸脂溶性部位指纹图谱中共检出19个共有峰,指纹图谱相似度较高,在0.954～0.996之间,RSD为1.52%。采用HS-SPME-GC-MS分析方法从小金丸样品中共鉴定出13种挥发性成分等。相对含量与热图聚类分析结果显示,烘箱干燥与微波干燥所得样品相似度较高,两者与微波真空干燥所得样品间存在一定差异。结论：本研究建立的指纹图谱结合气味分析方法可用于小金丸质量一致性的综合评价,且3种干燥方法所得小金丸质量一致性较好。     

木瓜水溶性部位高效液相色谱法指纹图谱研究

目的研究不同采收时间和不同炮制方法的木瓜药材水溶性部位高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为木瓜的规范化种植与合理应用提供依据。方法以绿原酸为参照物,采用HPLC法测定分析各指纹图谱,色谱条件:C18(Krom asil C1810 nm~5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相:(A)乙腈-甲醇(6:4)(B)0.05%磷酸梯度洗脱,0~12 m in(10%~30%A,90%~70%B),12~30 m in(30%~50%A,70%~50%B),30~35 m in(50%~70%A,50%~30%B),35~45m in(70%~90%A,30%~10%B),45~50 m in(90%~60%A,10%~40%B),50~60 m in(60%~10%A,40%~90%B),60~70 m in(10%A,90%B);流速0.8 m l.m in-1,检测波长283 nm。结果木瓜水溶性部位的指纹图谱有较好的相关性。分析表明,木瓜不同采收时间的样品分为3类—第2,3,6,9批归为一类,有13,17,19 m in3个,共有峰;第1,5,8批归为一类,出峰各有5个,有13,17,19 3个共有峰;第4,7归为一类,有17,19两个共有峰。其中又以第5批采收时间最好;不同炮制方法以晒的方法所含峰数目和含量要高;不同存放时间以存放时间短的较好。结论该研究有助于木瓜的质量控制、采集和应用。     

葛根药材及其提取物HPLC指纹图谱研究

 目的研究建立葛根色谱指纹图谱,提供较完整的质量信息,更有效地监控质量。方法采用RP-HPLC,色谱柱:Shim-pack C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A-乙腈;B-水(0.05%醋酸),梯度洗脱,0～20 min,90%～90%B;20～60 min,90%～60%B;流速为1.0 mL·min^-1,柱温为40℃,检测波长为254 nm,进行了葛根药材以及提取物指纹图谱研究。结果运用梯度洗脱法得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论采用该法可为控制葛根药材、提取物以及其制剂的内在质量提供依据。     

苦丁茶高效液相色谱指纹图谱研究

目的：建立苦丁茶的高效液相色谱指纹图谱分析方法。方法：苦丁茶样品采用甲醇为溶剂进行超声提取,色谱条件为流动相A为0.5%的乙酸水溶液,流动相B为乙腈;梯度洗脱：0～1 min,95%A,5%B,1～20 min,B5%～40%,20～25 min,B40%～95%,后运行5 min,95%A,5%B;流速0.5 mL·min^-1;进样量2.0μL;柱温30℃;检测波长262 nm。结果：苦丁茶的指纹图谱中含有12个共有峰,11批苦丁茶样品的指纹图谱相似度在0.916～0.980范围。结论：此方法稳定可靠,是苦丁茶质量评价和质量控制的有效手段。     

广西产毛果算盘子的HPLC指纹图谱研究

【摘要】目的 采用HPLC研究广西不同产地毛果算盘子的指纹图谱。方法 采用Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇(B)-0.2%磷酸(A),梯度洗脱0~7min,10%B;7~15min, 10%B→22%B;15~20min,22%B→30%B;20~30min,30%B→40%B;30~45min,40%B。检测波长270nm,柱温20℃,流速1.0mL?min-1,分析时间45min。分析了10批毛果算盘子药材的HPLC指纹图谱。应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度。结果 建立了广西产毛果算盘子的指纹图谱,且相似度较好,根据相似度分析确定了9个构成毛果算盘子药材指纹图谱的特征峰。结论 所建方法简单、稳定、重复性好,可用于毛果算盘子药材的质量控制。     

当归中混入不同比例独活HPLC特征指纹图谱研究

目的建立测定当归中按不同比例掺入独活的HPLC分析方法及特征指纹图谱,为HPLC特征指纹图谱法甄别当归药材掺伪样品提供依据。方法采用Agilent TC-C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈(A)-0.05%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,95%~75%B;20~60 min,75%~65%B;60~80 min,65%~5%B),流速1 m L/min,检测波长254 nm,柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对当归、独活及掺伪样品的HPLC图谱进行比较分析。结果当归和独活色谱图中各色谱峰分离良好,HPLC指纹图谱中有11个峰可作为区别点,其中7号峰为阿魏酸,32号峰为蛇床子素,34号峰为二氢欧芹醇当归酸酯。结论本方法快速、简单易行,能够全面反映当归药材品质,可以明确判断当归中是否混入独活。     

HPLC-PDA指纹图谱结合UFLC-Q-TOF/MS定性鉴别评价不同产地白术药材质量

目的 建立白术药材HPLC-PDA指纹图谱并进行定性鉴别,为全面控制白术质量提供参考。方法 白术加70%甲醇超声60 min;色谱分析采用Inertsil#174;ODS-SP色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,体积流量1.0 m L/min,采用Waters 2998紫外检测器,检测波长为235 nm,流动相为水(A)-乙腈(B),洗脱梯度为0~10 min,30%~45%B;10~25 min,45%B;25~50 min,45%~70%B;50~55 min,70%B;55~62 min,70%~30%B;62~75 min,30%B。质谱测定采用电喷雾离子源(ESI)的飞行时间质谱(TOF/MS);正离子模式下;质量扫描范围m/z 50~1 500。结果 分别对不同产地的白术进行比较、拟合,标定了白术HPLC-PDA指纹图谱的6个共有峰,并通过高分辨UFLC-Q-TOF/MS对共有峰进行了指认,分别为5-羟甲基糠醛、白术内酯III、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯VI和双白术内酯;对白术的色谱条件及系统适用性、提取条件进行了优化、考察,其精密度、稳定性、重复性RSD值均小于2%;测得的10批次样品与拟合指纹图谱相似度均大于0.95。结论 所建立的HPLC指纹图谱可作为规范白术的均一性和稳定性的质量控制手段。     

高效液相色谱法指纹图谱结合化学模式识别的小金制剂质量研究

目的：建立小金制剂系列品种的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,结合化学识别模式方法评价市售不同厂家小金制剂的质量一致性。方法：采用HPLC建立不同厂家47批小金制剂的指纹图谱,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)进行相似度评价,确定共有峰;运用主成分分析、聚类分析和正交偏最小二乘判别分析,筛选出不同批次小金制剂的质量差异性成分,对小金制剂进行整体评价。结果：建立了小金制剂的HPLC指纹图谱,共标定9个共有峰,不同厂家小金制剂的相似度差异较大,相似度在0.90以上的仅占63%。通过主成分分析、聚类分析、正交偏最小二乘判别分析,发现47批小金制剂可聚为3类,并从标定的9个共有峰中筛选出了小金制剂的4个质量标志物。结论：HPLC指纹图谱结合化学模式识别的方法可以快速、可靠地评价不同厂家、不同批次小金制剂的质量,为小金制剂的质量一致性评价提供了参考。     

壁虎体外抗Bel-7402肿瘤细胞活性部位的筛选研究

目的:对壁虎体外抗Bel-7402肿瘤细胞的活性部位进行筛选研究,为壁虎抗肿瘤活性物质研究奠定基础。方法:采用超声﹑萃取的方法依次分级提取壁虎的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位,并采用噻唑蓝(MTT)法对不同极性部位的体外抗Bel-7402肿瘤细胞作用进行研究。结果:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位在体外对Bel-7402肿瘤细胞抑制率分别为93.24%、74.81%、93.25%、91.03%和25.13%,抑制率从高到低依次为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、二氯甲烷部位、水部位。结论:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位对Bel-7402肝癌细胞均有一定抑制作用,其中以石油醚部位的抑制作用最强。     

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的龙眼叶降血糖有效部位化学成分分析

目的:为明确龙眼叶的降血糖物质基础,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-OrbitrapHRMS)对龙眼叶有效部位的化学成分进行快速分析和鉴定.方法 :采用Thermo Hypersil GOLD C,8色谱柱(2.1 mmx 100 mm,1.9 μm),流动相0.1％甲酸乙腈溶液-0...     

六味地黄汤活性部位3A的免疫调节作用研究

目的：初步研究六味地黄汤活性部位3A的免疫调节作用,方法：观察po给予3A对环磷酰胺（Cy)处理小鼠,肉瘤S180荷瘤小鼠及快速老化模型小鼠（SAM）等免疫功能低下模型免疫反应的影响。结果：3A对以上模型低下的抗体生成反应和脾细胞增殖反应具有明显的改善作用。结论：3A具有明显的免疫调节作用。 六味地黄汤的重要活性部位之一。     

四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤作用

目的考察四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤的作用。方法实验动物随机分为正常组、模型组、四逆汤组、四逆汤有效部位组。大鼠心脏进行L angendorff灌流,通过控制灌流液流量建立心肌缺血-再灌注损伤模型,用药组在灌流液中加入相应药液,测定再灌注后50 m in的冠脉流量、心肌收缩力和再灌注1 m in内心律失常发生率。小鼠ig给药3 d后ip垂体后叶素(20 U/kg)造模,记录0~8 m in的心电图,并取心肌测SOD活性、M DA及LA水平。结果四逆汤和四逆汤有效部位均可不同程度地提高大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌收缩力恢复率、降低再灌注1 m in心律失常发生率,四逆汤有效部位对心肌收缩力的恢复作用较好,四逆汤对心律失常发生的抑制较好;四逆汤和四逆汤有效部位均可明显地降低小鼠心肌缺血-再灌注损伤过程中的心电图J点抬高,明显提高心肌组织SOD活性,降低M DA和LA水平,四逆汤和四逆汤有效部位作用无明显差异。结论四逆汤有效部位可以显著地改善心肌缺血-再灌注损伤过程中的氧化损伤和抑制无氧酵解,改善心肌收缩功能和心律失常。     

板蓝根F022部位抗内毒素分子机理研究

目的探讨板蓝根F022部位抗内毒素分子机理。方法内毒素定量检测法测定F022样品液对内毒素的破坏作用;研究样品液对内毒素致鼠巨噬细胞分泌炎性因子的抑制作用、对蛋白激酶MAPKp38活性的影响、对内毒素刺激鼠组织moesin mRNA分子表达及对内毒素诱导鼠体内TNF-,αIL-6和NO的抑制作用。结果1?22对内毒素破坏率达到86.5%,F022能显著抑制内毒素刺激巨噬细胞分泌TNF-,αIL-6水平;抑制内毒素刺激蛋白激酶MAPKp38活性;降低内毒素刺激鼠肝、肾、脾组织moesin mRNA和体内TNF-,αIL-6和NO等炎性因子的表达。结论F022部位不仅直接破坏内毒素结构,且阻断内毒素引起的信号传导通路,从而抑制机体炎性因子的过度释放、抑制膜结构伸展刺突蛋白和丝裂原活化蛋白激酶的表达,从分子水平阐明了板蓝根中活性部位F022抗内毒素的分子机理。     

当归A3活性部位的抗炎作用及其对大鼠离体子宫环氧化酶-2表达的影响

目的研究当归A3活性部位(A3)的抗炎作用及其对脂多糖(LPS)诱导离体大鼠子宫环氧化酶-2(Cox-2)表达增高的影响。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法进行抗炎药效学实验;采用RT-PCR和Westernblotting法检测Cox-2mRNA及蛋白表达水平。结果A3(1、5、10mg/kg)可剂量依赖性地抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足趾肿胀。LPS1μg/mL可显著增加离体大鼠子宫Cox-2mRNA和蛋白表达水平。A3(10~320mg/L)剂量依赖性地抑制LPS诱导的子宫Cox-2mRNA和蛋白表达水平增高。结论A3具有较强的抗炎作用,其抗炎作用机制可能与抑制Cox-2mRNA及蛋白表达有关。     

南葶苈子各化学拆分组分化学成分的研究

目的：研究南葶苈子各拆分组分的化学成分,诠释南葶苈子各拆分组分发挥药效的物质基础。方法：运用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20、ODS、Silica gel等柱色谱技术结合高压制备液相等方法进行分离纯化,并根据化合物的光谱数据和理化性质鉴定结构。结果：从南葶苈子的20%和80%乙醇组分中分离并鉴定了28个化合物的结构。从20%乙醇组分中分离得到13个化合物：山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷（1）,槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷（2）,异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷（3）,异鼠李素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）,槲皮素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,山柰酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）,山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）,芥子酸甲酯（8）,丁香醛（9）,（S）-对羟基苯基乳酸（10）,（S）-2-羟基苯丙酸（11）,东莨菪内酯（12）,芥子酸（13）;从80%乙醇组分中分离得到15个化合物：异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（14）,槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（15）,山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（16）,槲皮素（17）,山柰酚（18）,异鼠李素（19）,丁香酸（20）,槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷（21）,槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷（22）,6-O-[E]-Sinapoyl-（α- and β）-D-glucopyranoside（23）,dimethyl（E,E）-4,4′-dihydroxy-3,3′,5,5′-tetramethoxylign-7,7′-dien-9,9′-dioate（24）,索马榆脂酸二甲酯（25）,2-羟基-3-吲哚丙酸（26）,2-羟基-3-吲哚丙酸甲酯（27）,4''-甲氧基二氢槲皮素（28）。结论：化合物7-11,21-28均是首次从南葶苈子中分离得到。     

华蟾素不同组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠的抑瘤作用

目的观察华蟾素不同组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠的抑瘤作用。方法采用大孔吸附树脂技术分离华蟾素的极性组份和非极性组份,将荷人胰腺癌SW1990裸小鼠随机分为生理盐水、华蟾素（25g/kg）、华蟾素非极性组份（60．50、31．25mg/kg）、华蟾素极性组份（90．63、181．25mg／kg）、华蟾素联合组份（非极性组份＋极性组份,125．00、250．00mg／kg）等8组。定期测量各组小鼠的肿瘤大小,并于治疗4周后计算抑瘤率。结果华蟾素（25．00g/kg）、华蟾素非极性组份和华蟾素联合组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠肿瘤生长均有抑制作用,平均瘤重均小于生理盐水组（P〈0．05）;其中联合组份（125．00mg／kg）的抑瘤率为62．97％,优于华蟾素和非极性组份,但差异无统计学意义。结论华蟾素非极性组份和联合组份对荷人胰腺癌细胞株SW1990裸小鼠均有一定的抑瘤作用,非极性组份为华蟾素的有效组份。     

青天葵活性部位的体内抗肿瘤作用研究

目的:确定广西特产药材青天葵体内抗肿瘤作用的活性部位。方法:体外初步筛选出的青天葵石油醚和乙酸乙酯活性部位,利用S180和H22小鼠模型进行了体内抗肿瘤试验。结果:青天葵石油醚和乙酸乙酯部位对小鼠移植性肉瘤S180和小鼠肝癌H22均有明显的抑瘤活性,并且对H22荷瘤小鼠可延长其生存期。它们也能改善小鼠的免疫机能。结论:首次确定了青天葵的石油醚和乙酸乙酯部位是体内抗肿瘤作用的有效部位。在此基础上,可以更深入探讨青天葵抗肿瘤作用的有效成分或成分群以及抗肿瘤作用的特点。     

滇桂艾纳香正丁醇部位HPLC指纹图谱建立及6种成分测定

目的建立滇桂艾纳香正丁醇部位HPLC指纹图谱,并测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量。方法分析采用ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱,建立HPLC指纹图谱,采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件进行相似度评价,SPSS 23.0软件进行聚类分析及主成分数据分析,同时测定6种成分含量。结果 12批滇桂艾纳香有12个共有峰,各批次药材相似度均大于0.9。聚类分析结果显示12批滇桂艾纳香药材可分为2类,主成分分析表明,前2个成分的累计方差贡献率为96.689%。6种成分在其各自的范围内线性关系良好(r≥0.999 0),精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于3%,加样回收率平均值为97.1%~102.7%,RSD为1.81%~2.82%。结论该方法稳定准确,可为滇桂艾纳香正丁醇活性部位质量评价提供参考依据。