基因二代测序技术在假体周围感染诊断中的价值

目的通过与细菌培养及血清生物学标志对比,探讨二代测序技术(NGS)对人工关节置换术后假体周围感染(PJI)的诊断价值。 方法选取2017年7月到2019年12月在聊城市人民医院关节外科因假体周围感染或无菌性松动行关节翻修手术,排除初始关节液无法采集到,通过关节内注射生理盐水获得样本的患者及其他部位存在感染病灶的患者,共纳入患者35人(35例)根据美国肌骨骼感染协会(MSIS)的诊断标准,15例患者纳入感染组,20例患者纳入非感染组。术前两组患者常规检查血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白介素6(IL-6)及D-二聚体(D-Dimer)。所有患者术前均行关节穿刺,穿刺液检测白细胞计数、白细胞分类、细菌培养及NGS。计算ESR、CRP、PCT、IL-6及D-Dimer的受试者操作特性曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)。计算NGS、细菌培养及各项血清学标志物的诊断精确度、敏感性及特异性。 结果髋关节19例(54.3%),膝关节16例(45.7%)。男性21例(60.0%),女性14例(40.0%),年龄67.0(62.0,74.0)岁。感染组15例患者中NGS结果阳性14例(93.3%),细菌培养结果阳性7例(46.7%)。非感染组NGS结果阴18例(90.0%)。ESR及D二聚体的AUC分别为0.667和0.572(均为P>0.05)。CRP、IL-6及PCT的AUC分别为0.827、0.767及0.808(均为P<0.01)。NGS、细菌培养、CRP、IL-6及PCT的精确度分别为0.91、0.74、0.77、0.74及0.83。NGS与CRP、IL-6、PCT、细菌培养两两比较,总体检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。NGS与CRP、IL-6、PCT、细菌培养两两比较,NGS敏感性更高(P<0.05)。NGS与CRP比较特异性更好(P<0.05)。NGS与IL-6、PCT及细菌培养比较,特异性差异无统计学意义(P>0.05)。 结论NGS比细菌培养及常用的血清学标志物有更高的精确度及敏感性,在PJI的诊断中具有更大的价值。     

结核性脑膜炎的脑脊液细胞变化在诊治中的意义

目的:观察脑脊液细胞动态变化在结核性脑膜炎诊断的价值。方法:采用玻片离心沉淀法制片收集脑脊液细胞,瑞-姬姆萨染色(MGG),光学显微镜分类计数结果结核性脑膜炎急性期,其CSF细胞检查以混合型细胞反应为主,占总标本数的95.83%,其中以转化型淋巴细胞占大多数,占混合型细胞反应总标本数的52.17%,恢复期仍然以转化型淋巴细胞为主的混合型细胞反应,转化型淋巴细胞反应的比率相对有所提高(34.62%)结论:脑脊液细胞学对结核性脑膜炎的早期诊断有重要参考价值,脑脊液细胞学呈混合细胞反应多见于结核性脑膜炎,但仍需结合病史、病程作出判断,且脑脊液细胞动态观察的鉴别意义较大。     

二代测序技术在诊断假体周围感染中的应用

[目的]探讨二代测序技术在关节置换术后假体周围感染诊断中的应用价值。[方法]选取2018年1月～2018年12月在本院就诊的人工关节置换术后关节疼痛、红肿、怀疑假体周围感染的患者。依据美国肌肉、骨骼感染病学会(MSIS)诊断标准,最终共计22例患者确诊为人工关节置换术后假体周围感染。其中男10例,女12例;膝关节感染16例,髋关节感染6例。所有22例PJI患者均行关节液二代测序和细菌培养。分别记录二代测序及细菌培养结果,以检测或培养出微生物为阳性,未检测或培养出微生物为阴性,记录阳性例数。分别计算二代测序技术和细菌培养在PJI患者中的阳性检出率以及在髋膝不同部位的阳性检出率,并通过配对卡方检验进行统计学分析。[结果]总计22例PJI患者中,18例患者二代测序检出微生物,二代测序在PJI患者中的阳性检出率为18/22(81.82%);关节液细菌培养阳性9例,关节液细菌培养在PJI患者中的阳性检出率为9/22(40.91%)。配对卡方检验提示两种方法在PJI患者中的检出率差异有统计学意义(P=0.022)。[结论]二代测序技术在PJI患者的诊断中具有更高的细菌检出率,在PJI患者病原微生物学检查中有更大的诊断价值。     

高通量二代测序技术在泌尿生殖道无乳链球菌筛查中的应用

目的探讨高通量二代测序技术(NGS)在泌尿生殖道无乳链球菌(GBS)筛查中的应用价值。方法运用高通量二代测序技术检测58份男性尿道分泌物、30份处女和20份孕妇阴道分泌物中的微生物,同时进行GBS荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和传统细菌培养鉴定。结果GBS在NGS中的检出率为18.5%(20/108),在FQ-PCR中的检出率为20.4%(22/108),在传统细菌培养鉴定中检出率为4.6%(5/108)。NGS与FQ-PCR两种分子生物学方法在男性尿道分泌物、处女和孕妇阴道分泌物GBS筛查鉴定中符合率为100%、30%和0%。男性尿道分泌物中的菌群数量最多,孕妇阴道分泌物中的菌群数量最少。男女泌尿生殖道均有瑞士乳酸杆菌、惰性乳酸杆菌、copri普雷沃菌、无乳链球菌、婴儿链球菌等相同菌群存在。结论高通量二代测序技术具有高通量、高准确度和高灵敏度的特点,适合微生物菌群及物种的筛选,男、女泌尿生殖道均有无乳链球菌定植,且菌群结构部分相同。     

宏基因组二代测序技术对骨关节感染诊断的潜在应用价值

目的:评价宏基因组二代测序(mNGS)在骨关节感染诊断中的潜在应用价值。方法:回顾性分析青岛市胸科医院脊柱外科2019年1月至12月临床确诊为骨关节感染的37例住院患者临床资料。所有患者均经过穿刺或手术途径获取感染病灶核心部位组织样本,分别对样本进行分枝杆菌、需氧菌和厌氧菌常规培养,结核分枝杆菌(MTB)-DNA扩增检...     

宏基因组二代测序技术在布鲁菌脊柱炎诊治中的应用价值

目的 探讨宏基因组二代测序(mNGS)技术在布鲁菌脊柱炎诊治中的价值。方法 手术治疗36例布鲁菌性脊柱炎患者,收集术前血液标本和术中病灶区组织标本(髓核、软骨终板、黄韧带、纤维环),采用Giemsa染色、试管凝集试验(SAT)、血培养、多重聚合酶链式反应技术(PCR)检测和mNGS评估不同组织样本。另选取30例椎间盘突出患者作为阴性对照组。结果 静脉血的mNGS、SAT、多重PCR检测阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。髓核的mNGS与多重PCR检测阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。软骨终板、黄韧带和纤维环的mNGS检测阳性率均大于多重PCR检测阳性率(P<0.05)。髓核中多重PCR和mNGS检测阳性率均高于静脉血、软骨终板、黄韧带和纤维环(P<0.05)。敏感性、阴性预测值：mNGS均高于Giemsa染色、血培养和SAT(P<0.05);mNGS与多重PCR检测比较差异均无统计学意义(P>0.05)。临床诊断一致性mNGS最好,多重PCR和SAT较好,Giemsa染色一般,血培养较差。结论 mNGS可以作为布鲁菌脊柱炎的有效检...     

宏基因组学第二代测序技术在烧伤患者和急慢性创面患者病原体检测中的应用

目的:探讨采用宏基因组学第二代测序（mNGS）技术检测烧伤患者和急慢性创面患者病原体的价值。方法:采用回顾性观察性研究方法。选择2019年3月—2020年6月解放军总医院第四医学中心的11例符合入选标准的烧伤患者和急慢性创面患者（男10例、女1例,年龄23~85岁）,共采集标本23份,其中全血标本6份、皮肤组织块标本1...     

宏基因组二代测序技术在脊柱感染病原微生物诊断中的应用

【摘要】 目的：探讨宏基因组二代测序（metagenomic next-generation sequencing,mNGS）技术在脊柱感染疾病中诊断病原微生物的能力和价值。方法：纳入2019年1月～2020年12月收治的46例疑似脊柱感染患者,其中男性26例,女性20例;年龄26～77岁（50.4±15.7岁）。获取患者的血液和病灶组织或脓液标本（CT引导下穿刺活检21例,开放手术25例）,行微生物培养、血清学检测、病理检查和mNGS检测后进行结果的比较分析。结果：46例标本均在48h内获得了mNGS结果,微生物培养、血清学检测、病理检查等传统实验室检测时间1~12d不等。经临床最终诊断共35例为脊柱感染,11例为非脊柱感染。35例脊柱感染患者中,化脓性细菌感染14例,结核感染5例,布鲁菌属感染4例,未明确病原微生物感染12例;11例非脊柱感染患者中,脊柱肿瘤3例,终板Modic改变4例,终板骨折1例,DISH病合并假关节1例,强直性脊柱炎合并假关节2例。通过mNGS检测发现了脆弱拟杆菌、微小微单胞菌、齿垢密螺旋体、贝纳柯克斯体等少见病原微生物。mNGS在种水平与临床最终诊断的一致性为82.61%（19/23）,在属水平的一致性为95.65%（22/23）。微生物培养阳性率为42.86%（15/35）,mNGS检测阳性率为94.29%（33/35）,二者存在统计学差异（P＜0.01）。mNGS检测的敏感度为91.43%,特异度为90.91%,阳性预测值96.97%,阴性预测值76.92%。结论：宏基因组二代测序技术检测病原微生物快速、高效、准确,在脊柱感染疾病的诊疗中有较高的诊断价值。     

鞘内置管脑脊液置换与反复腰穿放脑脊液分别鞘内注药治疗结核性脑膜炎的疗效比较

目的探讨鞘内置管脑脊液置换与反复腰穿放脑脊液分别鞘内注药治疗结核性脑膜炎的疗效。方法在常规综合治疗的基础上,对照组采用反复腰穿放脑脊液并鞘内注药,观察组采用鞘内置管脑脊液置换加鞘内注药。结果观察组总有效率（93.1%）明显高于对照组（73.0%）（P〈0.01）;观察组脑脊液压力恢复正常和住院时间均明显短于对照组（P〈0.01）;对照组不良反应（5例）明显多于观察组（0例）（P〈0.05）。结论相比反复腰穿放脑脊液,鞘内置管脑脊液置换疗效高,疗程短,不良反应少,值得临床推广应用。     

脑脊髓液中腺苷脱氨酶活性对结核性脑膜炎诊断价值的临床研究

目的 探讨脑脊髓液中腺苷脱氨酶（CSF-ADA）活性对结核性脑膜炎的诊断价值及在病程中的动态变化.方法 选择160例患者纳入本研究,76例结核性脑膜炎为病例组;84例非结核性脑膜炎为对照组,其中细菌性脑膜炎36例,病毒性脑膜炎30例,隐球菌性脑膜炎18例.每例患者均于治疗前抽取CSF,采用酶耦联Trinder法测定CSF-ADA活性,结果以（-x）±s表示,组间差异使用Mann-Whitney U检验.47例结核性脑膜炎患者于抗结核治疗后2周和6周时再次检测CSF-ADA,治疗前后差异使用配对t检验.结果 结核性脑膜炎组CSF-ADA活性为（12.9±6.4）U/L,非结核性脑膜炎组为（6.0±4.1）U/L,两组比较差异有统计学意义（U=7.860,P＜0.05）.取CSF-ADA≥9 U/L作为临界值时鉴别结核性脑膜炎与非结核性脑膜炎价值最高,灵敏度为84.21%,特异度为83.33%.随着患者病情好转,CSF-ADA活性逐渐降低.结论 CSF-ADA活性≥9 U/L可作为诊断结核性脑膜炎的一项辅助诊断指标,抗结核治疗后CSF-ADA活性可作为疗效判断的参考指标.     

获得性免疫缺陷综合征合并新型隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎一例并相关文献复习

目的提升对获得性免疫缺陷综合征（AIDS）合并中枢神经系统新型隐球菌及结核分枝杆菌混合感染的认知。 方法分析1例AIDS合并新型隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎患者的诊疗过程，并结合相关文献进行复习。 结果1例38岁男性患者因AIDS合并新型隐球菌性脑膜炎于2015年3月17日于武汉大学中南医院住院诊治，完善检查后确诊为新型隐球菌及结核分枝杆菌颅内混合感染，给予抗感染及对症综合治疗后，病情缓解，预后较好。 结论AIDS合并隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎患者应及时诊断，予以抗隐球菌、抗结核综合治疗并适时启动抗逆转录病毒治疗，可改善预后。     

结核性脑膜炎246例临床分析

目的 分析结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）患者的临床特征及实验室检查特点,提高TBM早期诊断和治疗水平.方法 回顾分析1999年1月1日-2005年12月31日浙江省中西医结合医院结核病治疗中心收治的246例TBM患者的临床及实验室资料,应用SPSS 15.0软件进行统计分析.结果 246例TBM患者中,203例（82.5%）为颅底脑膜炎型,170例（69.1%）患者合并肺结核,临床症状以发热、恶心呕吐、头痛为主.155例（63.0%）患者结核菌素（PPD）试验阳性,仅12例（4.9%）患者脑脊髓液涂片抗酸杆菌阳性.脑脊髓液检查白细胞升高[（320～880）×106/L],分类以淋巴细胞为主（≥95%）,蛋白升高（0.95-13.8 g/L）,糖（1.53～3.20 mmol/L）和氯化物（90～111 mmol/L）含量降低.93.5%（230/246）的患者脑脊髓液检查腺苷脱氨酶≥8 U/L,75.2%（185/246）的患者结核抗体阳性.81例（32.9%）具有脑部影像学改变,以结节状和环状阴影为主.242例患者经过综合治疗有效,总有效率为98.4%,4例患者死亡,病死率为1.6%.结论 综合分析临床表现、脑脊髓液改变、影像学检查结果以及PPD试验是早期诊断TBM的有效方法.     

Role of neuroendoscopy in the management of patients with tuberculous meningitis hydrocephalus

The role of neuroendoscopy in patients of tuberculous meningitis with hydrocephalus (TBMH) is not yet established. We present details of endoscopic morphology, and analyze outcome of Neuroendoscopy performed in 28 patients (15 males and 13 females, average age 23 years) of TBMH in last 2.5 years. Endoscopic procedures performed included endoscopic third ventriculostomy (ETV) alone (n=19), ETV with monroplasty (n=2), and septostomy (n=2), ETV with decompression/biopsy of tuberculoma (n=2) and with abscess drainage (n=1). Outcome was assessed on the basis of clinico-radiological improvement, need for external shunt and complications. Outcome was satisfactory in 14 (50%), acceptable in five (18%) and unsatisfactory in nine (32%) patients. Overall, 19 (68%) patients benefited from endoscopic intervention. Cerebrospinal fluid (CSF) leak (n=2) and per-operative bleeding (n=1) were the only complications encountered. Endoscopy appears to be helpful in a considerable number of patients with TBMH, and should be considered as the first surgical option for CSF diversion surgery in these patients. External shunt should be reserved for those who fail the endoscopic CSF diversion.     

The role of cerebrospinal fluid shunting in tuberculous meningitis

Twenty-three patients with severe tuberculous meningitis who underwent cerebrospinal fluid shunting within the first month of illness were reviewed nine months later. The criteria for and results of the use of cerebrospinal fluid shunts in tuberculous meningitis are reviewed.     

腹腔镜技术在结核性腹膜炎诊断中的应用

目的:探讨腹腔镜技术用于诊断结核性腹膜炎的价值,总结结核性腹膜炎的镜下特点及诊断要点。方法:回顾分析2002年7月至2010年7月27例结核性腹膜炎患者的临床资料。患者均行腹腔镜检查,术中取腹水及病灶标本行生化、病理学等检查。结果:27例患者均获确诊,手术时间30～140 min,平均40.2 min,术中出血量10～110 ml,平均12.3 ml。术中及术后均未出现肝、肠管等器官损伤。结论:腹腔镜检查诊断结核性腹膜炎具有患者创伤小、阳性率高、痛苦小等优点,可作为诊断结核性腹膜炎的优选术式。     

The use of ventriculoperitoneal shunts for uncontrollable intracranial hypertension without ventriculomegally secondary to HIV-associated cryptococcal meningitis

BACKGROUND: The risks associated with implanting a cerebrospinal fluid (CSF) shunt in immunocompromised patients with ongoing CSF infection have historically discouraged surgeons from implanting CSF shunts in patients with HIV and cryptococcal meningitis. However, this patient population often requires frequent lumbar punctures to manage elevated intracranial pressure (ICP) secondary to cryptococcal infection. To date, only 7 cases of ventriculoperitoneal (VP) shunting for the treatment of intracranial hypertension in patients with HIV-associated cryptococcal meningitis have been reported. Few of these reports have included outcomes more than 3 months postsurgery. It remains unclear if VP shunts are an effective long-term treatment of intracranial hypertension in this patient population. CASE DESCRIPTIONS: Two patients with HIV/AIDS (CD4 counts of 8 and 81 cells/mm(3)) presented with altered mental status, visual changes, florid cryptococcal meningitis, and elevated ICP (>500 mm CSF) without evidence of hydrocephalus on computed tomography scan. Both patients experienced rapid reversal of symptoms with external lumbar CSF drainage, and remained lumbar drain-dependent after 2 weeks of amphotericin B and flucytosine therapy. Despite evidence of unresolved cryptococcal meningitis, each patient underwent implantation of a VP shunt without complication and was discharged on lifetime fluconazole therapy. They remained asymptomatic at 12 and 16 months after surgery without evidence of shunt infection or malfunction. CONCLUSION: Patients with intracranial hypertension and HIV-associated cryptococcal meningitis who cannot tolerate cessation of external lumbar CSF drainage or frequent lumbar punctures may be considered for VP shunt placement despite severe immunosuppression and persistent CSF cryptococcal infection.