温胆汤对精神分裂症模型大鼠海马组织PI3K，Akt和GSK3β的影响

目的:研究温胆汤对精神分裂症模型鼠海马组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路的影响。方法:将60只大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、氯氮平组、温胆汤高、中、低剂量组,每组10只。正常组和模型组灌胃生理盐水,氯氮平组灌胃氯氮平原药20 mg·kg~(-1);温胆汤高、中、低剂量组分别灌胃温胆汤生药40,20,10 g·kg~(-1); 1次/d,共21 d。在最后1次给药2 h后,除正常组外,其余各组采用一次性左侧腹腔注射MK8010. 6 mg·kg~(-1),以诱发精神分裂症。观察并记录大鼠的刻板行为,3 d后,处死并取其海马组织待测。依照Sams Dodd和Hoffman标准对大鼠的刻板行为评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定海马组织PI3K,Akt和GSK3β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马组织PI3K,Akt,GSK3βmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠刻板行为评分显著升高(P 0. 01),海马组织PI3K,Akt,GSK3β蛋白和mRNA表达水平显著下降(P 0. 01)。与模型组比较,温胆汤给药组能明显降低大鼠刻板行为评分(P 0. 05),升高海马组织PI3K,Akt,GSK3β蛋白和mRNA表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:温胆汤通过改善精神分裂症模型鼠刻板行为、升高其海马组织PI3K,Akt,GSK3β的表达,调控PI3K/Akt/GSK3信号通路,从而达到治疗精神分裂症的目的。     

基于PI3K/Akt/GSK-3β信号通路探讨七味白术散对糖尿病脑病大鼠认知功能障碍的影响

目的 观察七味白术散对糖尿病脑病（DE）大鼠模型的治疗作用，基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）通路探究其可能存在的机制。方法 选取SPF级雄性Wistar大鼠48只，随机分为空白组8只、高脂饲料组40只。高脂饲料组大鼠喂养12周后，连续2 d腹腔注射35 mg·kg^-1的1%链脲佐菌素构建DE模型，空白组大鼠注射等量柠檬酸钠缓冲液。造模成功后，按血糖和体质量随机分为模型组、七味白术散低、中、高剂量组（3.15、6.3、12.6 g·kg^-1）、联合西药组（二甲双胍+罗格列酮，0.21 g·kg^-1），每组各6只。给药组灌胃给予相应剂量药物，空白组和模型组灌胃等体积生理盐水，1次/d，连续给药6周。采用Morris水迷宫检测DE大鼠空间记忆能力，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测空腹胰岛素（FINS）水平并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠海马组织病理变化，ELISA检测海马组织氧化应激指标，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测海马组织PI3K、Akt、核转录因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、和白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠海马中PI3K、Akt、磷酸化（p）-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达情况。结果 与空白组比较，模型组大鼠FINS、HOMA-IR值均显著增高（P<0.01）；找到平台原位置的路径显著增长，逃避潜伏期显著延长（P<0.01）；海马组织神经细胞形态破坏；大鼠海马活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平升高和超氧化物歧化酶（SOD）活性降低（P<0.05，P<0.01）；PI3K、Akt mRNA表达水平显著降低（P<0.01），NF-κB、TNF-α和IL-1β mRNA表达水平升高（P<0.05，P<0.01）；PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平下降（P<0.05，P<0.01），GSK-3β表达显著增加（P<0.01）。与模型组比较，七味白术散中剂量组和联合西药组FINS、HOMA-IR值均显著下降（P<0.01）；大鼠找到平台原位置的路径显著缩短，逃避潜伏期缩短（P<0.01）；大鼠海马组织结构逐渐恢复，神经细胞形态破坏程度明显改善；大鼠海马组织中ROS、MDA含量降低和SOD水平升高（P<0.01）；PI3K、Akt mRNA表达水平显著升高（P<0.01），NF-κB、TNF-α和IL-1β mRNA表达水平降低（P<0.05，P<0.01）；PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达升高，GSK-3β表达显著降低（P<0.01）。结论 七味白术散可以缓解DE大鼠的胰岛素抵抗，其可能是通过激活PI3K/Akt/GSK-3β信号通路来修复DE大鼠海马神经元损伤，改善DE大鼠学习认知能力。     

化浊解毒疏肝方对癫痫大鼠学习记忆及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的影响

目的 观察化浊解毒疏肝方对癫痫大鼠学习记忆及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）通路相关蛋白表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 选取SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常组、模型组、丙戊酸钠组、化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组,每组8只。正常组给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射（0.035 g·kg^-1）,其余5组给予同等剂量戊四氮（PTZ）腹腔注射制备大鼠慢性癫痫模型,共14次。化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组分别灌胃化浊解毒疏肝方2.7,5.4,10.8 g·kg^-1,丙戊酸钠组灌胃丙戊酸钠0.19 g·kg^-1,正常组和模型组灌胃同等体积0.9%氯化钠溶液,每天1次,持续28 d。药物干预期间,各造模组大鼠在第7,14,21,28天给予PTZ腹腔注射以维持癫痫模型。应用Morris水迷宫观察大鼠的行为学变化,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠海马神经元病理形态学变化,免疫组化检测磷酸化（p）-Akt,p-GSK-3β蛋白的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PI3K,Akt,p-Akt,GSK-3β,p-GSK-3β蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠寻找平台时间延长（P<0.01）,穿越平台次数减少（P<0.01）,海马CA1区神经元结构损伤,海马CA1区p-Akt,p-GSK-3β蛋白表达降低（P<0.05）,海马组织PI3K,p-Akt,p-GSK-3β相对表达量降低（P<0.01）。与模型组比较,丙戊酸钠组、化浊解毒疏肝方各剂量组大鼠寻找平台时间缩短（P<0.01）;丙戊酸钠组、化浊解毒疏肝方高、中剂量组大鼠穿越平台次数升高（P<0.01）,各治疗组海马CA1区神经元结构明显改善,化浊解毒疏肝方高、中剂量组、丙戊酸钠组海马CA1区p-Akt,p-GSK-3β蛋白表达升高（P<0.05）,化浊解毒疏肝方高、中剂量组、丙戊酸钠组PI3K,p-Akt,p-GSK-3β相对表达量升高（P<0.01）。结论 化浊解毒疏肝方可改善癫痫大鼠学习记忆能力,可能与激活PI3K/Akt/GSK-3β通路相关蛋白有关,从而发挥抗癫痫作用。     

葛根素通过PI3K/Akt/GSK-3β信号通路调节HepG2细胞胰岛素抵抗

目的:观察葛根素对胰岛素抵抗Hep G2细胞内磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号分子的影响。方法:通过0.5 mmol·L~(-1)棕榈酸联合9×10~(-4)U·L~(-1)胰岛素孵育24 h诱导Hep G2胰岛素抵抗细胞模型,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率以确定葛根素给药浓度。实验设正常组、模型组和葛根素各剂量组(40,80,160,320μg·L~(-1))。葡萄糖检测试剂盒检测细胞培养液上清葡萄糖的含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的含量,肝糖原测定试剂盒测定Hep G2细胞内肝糖原含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内PI3K,Akt,磷酸化(p)-Akt,GSK-3β,p-GSK-3β的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组Hep G2细胞葡萄糖消耗率明显下调(P0.05),细胞内糖原含量减少(P0.05),细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量增加(P0.05),PI3K和p-Akt蛋白表达下降(P0.05),GSK-3β蛋白表达增加(P0.05);与模型组比较,葛根素可呈剂量依赖性增加细胞葡萄糖消耗率(P0.05),增加细胞内肝糖原含量(P0.05),降低细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量(P0.05),增加PI3K蛋白表达,上调Akt蛋白磷酸活化水平(P0.05),下调GSK-3β蛋白表达并增强其磷酸失活水平(P0.05)。结论:葛根素可通过增强PI3K/Akt/GSK-3β信号转导过程,增加肝细胞内糖原含量从而改善Hep G2细胞的胰岛素抵抗状态。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NLRP3通路的免疫调节作用

目的 探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体通路的作用及其机制。方法 60只雄性SD大鼠随机平均分为6组,分别为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低剂量组,NLRP3抑制剂（MCC950）组。除正常组外,其余采用孤养联合慢性不可预见性应激（CUMS） 21 d,制备抑郁大鼠模型。柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低组分别灌胃13,6.5,3.25 g·kg^-1柴胡加龙骨牡蛎汤溶液,MCC950组腹腔注射1 mg·kg^-1,正常组、模型组灌胃等体积生理盐水,给药21 d期间持续追加造模。采用糖水偏好实验（SPT）和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马组织匀浆中白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-18含量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠海马中NLRP3,凋亡相关微粒蛋白（ASC）及半胱氨酸天门冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组糖水偏好率显著降低（P<0.01）,新奇摄食时间显著延长（P<0.01）;海马组织中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达显著增强（P<0.01）,IL-1β和IL-18水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤高、中组糖水偏好率显著提高（P<0.01）,新奇摄食时间显著缩短（P<0.01）;海马中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达明显减弱（P<0.05,P<0.01）,IL-1β和IL-18水平显著降低（P<0.01）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤可减轻CUMS诱导的抑郁行为,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体通路有关。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对心肌梗死合并焦虑大鼠海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路的影响

目的探讨心肌梗死合并焦虑大鼠海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路变化及柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠海马区炎性损伤的作用效应。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组9只、心梗并焦虑组17只、心梗组17只、心梗并焦虑+中药组17只。心梗组采用结扎冠状动脉左前降支方法进行造模;假手术组穿线不结扎;心梗并焦虑组和心梗并焦虑+中药组先采用空瓶刺激方法进行焦虑造模(周期21 d),于造模第15天采用结扎冠状动脉左前降支方法进行心肌梗死造模。心肌梗死造模后第2天,心梗合并焦虑+中药组给予柴胡加龙骨牡蛎汤10 mL/kg灌胃,其余组灌胃等量蒸馏水,均1次/d,连续7 d。灌胃结束后进行心脏超声检查,采用高架十字迷宫实验、旷场实验评价各组大鼠行为学,大脑海马区HE、尼氏染色观察脑神经元病理改变,免疫组化检测大鼠海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达情况,Western blot法检测大鼠海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平。结果与心梗并焦虑组比较,心梗并焦虑+中药组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)均明显升高(P均<0.05),左心室舒张末期内径(LVIDd)和左心室收缩末期内径(LVIDs)均明显缩短(P均<0.05),大鼠进入开放臂次数所占比和开放臂停留时间所占比、大鼠水平运动得分和垂直运动得分均明显升高(P均<0.05)。心梗并焦虑组和心梗组大鼠海马区尼氏阳性面积均明显低于假手术组(P均<0.05),心梗并焦虑+中药组明显高于心梗并焦虑组和心梗组(P均<0.05)。心梗并焦虑组和心梗组大鼠海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达IOD值和海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均明显高于假手术组(P均<0.05),且心梗并焦虑组GSDMD表达IOD值和NLRP3、Caspase-1、IL-18蛋白表达水平均明显高于心梗组(P均<0.05),而心梗并焦虑+中药组NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达IOD值和NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均明显低于心梗并焦虑组(P均<0.05)。结论柴胡加龙骨牡蛎汤可能通过调控海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路,抑制心肌梗死合并焦虑大鼠海马区的炎性反应,缓解大鼠焦虑状态。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF表达的影响

目的：探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF表达的影响。方法：选择SD雄性大鼠50只,随机分为对照组、抑郁模型组（模型组）、柴胡加龙骨牡蛎汤低剂量组、柴胡加龙骨牡蛎高剂量组、氟西汀组5组,每组10只。用慢性应激结合孤养方法造模,免疫组化法观察大鼠海马BDNF的表达。结果：抑郁模型大鼠海马BDNF表达降低（ P＜0．05）,柴胡加龙骨牡蛎汤可不同程度减轻上述变化。中药高剂量组与氟西汀组作用相近（P＞0．05）。结论：柴胡加龙骨牡蛎汤可增加抑郁模型大鼠海马的BDNF表达,这可能是其抗抑郁作用的环节之一。     

逍遥散正丁醇部位基于IGF-1Rβ/PI3K/Akt信号通路的抗抑郁作用

目的 观察逍遥散正丁醇部位对慢性不可预知应激（CUMS）模型小鼠抑郁样行为的干预作用,及其作用发挥与调控类胰岛素生长因子-1受体β（IGF-1Rβ）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路的关系。方法 首先基于小鼠行为绝望模型初步获得逍遥散正丁醇部位发挥抗抑郁作用的有效剂量。再将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组、逍遥散组、逍遥散正丁醇部位20,40 g·kg^-1组,采用CUMS法建立抑郁症模型小鼠研究其抗抑郁作用及机制,以糖水偏好实验检测造模效果。模型成功后,各给药组连续灌胃小鼠5周,正常组与模型组给予等体积溶媒。第5周末,开展小鼠糖水偏好实验、悬尾实验及新奇环境抑制进食实验;酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠血清、海马区类胰岛素生长因子-1（IGF-1）含量,甲苯胺蓝染色法检测海马CA3区神经元尼氏小体平均光密度,免疫荧光法标记海马齿状回（DG）5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）和双肾上腺皮质激素（DCX）阳性表达神经元,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马区IGF-1Rβ,PI3K,磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）,Akt,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）,剪切后的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶（cleaved Caspase-3）蛋白表达水平。结果 小鼠强迫游泳和悬尾实验结果表明,逍遥散正丁醇部位生药量9.1,40 g·kg^-1均能明显缩短小鼠不动时间（P<0.05,P<0.01）,表明其在9.1~40 g·kg^-1剂量之间具有有效性。CUMS模型中,与模型组比较,逍遥散正丁醇部位（生药量20,40 g·kg^-1）能明显提高小鼠糖水偏好率（P<0.05,P<0.01）,缩短悬尾不动时间（P<0.01）及新奇环境摄食潜伏期（P<0.01）;并逆转模型小鼠血清、海马区下调的IGF-1含量（P<0.01）,增加小鼠海马CA3区神经元尼氏小体数目（P<0.01）,促进海马DG区Brdu和DCX表达（P<0.05,P<0.01）,下调模型小鼠海马IGF-1Rβ（P<0.05,P<0.01）,p-PI3K/PI3K（P<0.05,P<0.01）,p-Akt/Akt（P<0.05）,cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平。结论 逍遥散正丁醇部位具有与逍遥散全方相当的抗抑郁作用,可改善CUSM模型小鼠的抑郁样行为,诱导模型小鼠海马CA3区神经元合成尼氏小体,增加DG区神经元增殖、分化,促进神经发生;其作用发挥可能与抑制过度激活的IGF-1Rβ/PI3K/Akt通路、减少神经元凋亡有关。     

淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖

目的 研究淫羊藿苷对肝细胞癌细胞CLC5增殖能力的影响及其可能的机制。方法 通过网络药理学筛选淫羊藿苷作用靶点,构建靶点网络及构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,预测淫羊藿苷可能作用靶点及相关通路;使用梯度浓度（0、6.25、12.5、25、50 μmol·L^-1）淫羊藿苷刺激肝细胞癌CLC5细胞,通过细胞活性及增殖检测（CCK-8）法检测淫羊藿苷对CLC5细胞活力的影响;使用不同浓度（0、25、50 μmol·L^-1）淫羊藿苷处理肝细胞癌CLC5细胞,通过Edu-488及克隆形成实验（Clone Forming）检测淫羊藿苷对CLC5细胞增殖的影响;使用不同浓度淫羊藿苷分别刺激CLC5细胞不同时间,通过蛋白免疫印迹法（Western blot）验证淫羊藿苷对蛋白激酶B（Akt）/糖原合成酶激酶3β（GSK3β）/细胞周期依赖激酶（CDK）通路蛋白表达水平的影响情况。结果 网络药理学分析发现淫羊藿苷作用于肝细胞癌的机制与阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞增殖有关;CCK-8法结果表明,与空白组比较,淫羊藿苷组CLC5细胞活力显著下降（P<0.01）,呈时间-浓度依赖性;与空白组比较,淫羊藿苷组Edu-488阳性率及克隆形成菌落数量明显减少（P<0.05,P<0.01）;与空白组比较,淫羊藿苷组p-Akt、p-GSK3β、CDK4、细胞周期蛋白D₁（CyclinD₁）的蛋白表达水平明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 淫羊藿苷可抑制阻滞肝细胞癌细胞周期,抑制肝细胞癌增殖,作用机制可能与抑制Akt/GSK3β/CDK通路有关。     

加减柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠急性应激反应的影响

目的：观察加减柴胡加龙骨牡蛎汤对急性束缚应激大鼠旷场行为和血浆促肾上腺皮质激素的影响。方法：采用大鼠急性束缚应激动物模型，在应激前用两种不同浓度的加减柴胡加龙骨牡蛎汤胃饲1周，观察大鼠应激后旷场行为和血浆促肾上腺皮质激素含量的改变，并与对照组比较。结果：与正常对照组相比，应激大鼠在旷场中的穿行格数和直立次数明显增加，血浆促肾上腺皮质激素浓度显著升高，而高浓度加减柴胡加龙骨牡蛎汤，对此反应有抑制作用。结论：加减柴胡加龙骨牡蛎汤对急性束缚应激大鼠的心理行为反应和生理反应具有调节作用。     

电针通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路调节抑郁大鼠糖代谢紊乱

目的:探讨电针“足三里”改善应激后抑郁大鼠糖代谢紊乱的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组10只。采用慢性束缚应激复制抑郁大鼠模型。电针组造模期间同时进行双侧“足三里”电针干预,每次30 min,每日1次,持续4周。造模前后记录大鼠体质量并计算体质量增加量;造模结束后行糖水偏好实验、强迫游泳实验观察大鼠行为学;生化法检测大鼠血清中葡萄糖含量及糖化白蛋白水平;HE染色、PAS染色观察大鼠肝脏组织病理形态及肝糖原含量;Western blot法检测肝脏组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、糖原合成酶激酶-3(GSK3β)、p-GSK3β蛋白表达量。结果:与空白组相比,模型组大鼠体质量增加量、糖水偏好指数降低(P<0.01),游泳不动时间延长(P<0.01),血清中葡萄糖含量及糖化白蛋白水平升高(P<0.05),肝脏组织中p-Akt蛋白表达量及p-Akt/Akt比值降低(P<0.001),p-GSK3β蛋白表达量及p-GSK3β/GSK3β比值升高(P<0.01,P<0.00...     

柴胡加龙骨牡蛎汤对去卵巢大鼠睡眠时相的影响

目的:探讨去卵巢大鼠脑电图的变化及中药复方柴胡加龙骨牡蛎汤对其影响。方法:以去卵巢大鼠为动物模型,采用大鼠皮层脑电图描记技术,从睡眠时相方面阐明柴胡加龙骨牡蛎汤改善更年期失眠症的药理作用。结果:去卵巢大鼠睡眠时相中的慢波睡眠深睡期(Slow wave sleep 2,SWS2)持续时间明显低于假手术组,给予柴胡加龙骨牡蛎汤7d后能明显延长自由活动去卵巢大鼠SWS2,对SWS1(Slow wave sleep1,慢波睡眠浅睡期)和REMS(rapid eyes movement sleep,快速眼球运动睡眠)没有明显的影响。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤具有改善去卵巢大鼠睡眠的作用。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电图的影响

目的:探讨戊四唑(PTZ)致痫大鼠脑电图的变化及中药柴胡加龙骨牡蛎汤对其影响。方法:成年SD大鼠30只随机分为3组(每组10只):正常对照组、PTZ致痫组、柴胡加龙骨牡蛎汤组。采用多导生理记录仪记录大鼠脑电变化情况。结果:柴胡加龙骨牡蛎汤组大鼠脑电图痫波潜伏期较PTZ致痫组延长(P<0.05);痫波持续时间明显缩短(P<0.01);发作频率明显减少(P<0.01)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤可明显抑制PTZ诱导大鼠癫痫发作。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的 基于脑源性神经营养因子（BDNF）/络氨酸激酶B（TrkB）/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）途径探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马的影响。方法 取60只SD大鼠,其中10只作为空白组,余50只建立慢性应激抑郁大鼠模型后,随机分为5组,即模型组,盐酸氟西汀组（0.003 g·kg^-1）,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组（1.625,3.25,6.5 g·kg^-1）。连续灌胃给药8周,1次/d,分别于造模前、造模后及给药后进行行为学实验评估大鼠抑郁状态。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠海马形态学变化,免疫组织化学法（IHC）检测大鼠海马组织中BDNF蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）定量检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠糖水偏嗜率明显降低（P<0.05）,水平得分、垂直得分明显降低（P<0.05）,不动时间明显增加（P<0.05）,漂浮时间显著增加（P<0.05）,HE染色结果显示海马神经元结构损伤,免疫组织化学染色中BDNF表达明显降低（P<0.05）,BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05）;与模型组比较,盐酸氟西汀组及柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组大鼠糖水偏嗜率明显升高（P<0.05）,水平得分、垂直得分明显增加（P<0.05）,不动时间明显减少（P<0.05）,漂浮时间明显减少（P<0.05）,海马神经元结构明显复原,免疫组织化学染色中BDNF表达明显增加（P<0.05）,BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显增加（P<0.05）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤能显著改善经慢性应激刺激后大鼠的抑郁样行为,增强海马组织神经元的再生与修复,其机制可能与上调大鼠海马BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对焦虑模型大鼠单胺类递质的影响

目的探讨柴胡加龙骨牡蛎汤(CJLM)对焦虑模型大鼠分子生物学指标的影响及其作用机制。方法Vogel冲突实验建立大鼠焦虑模型,连续给药10d,观察CJLM对模型大鼠舔水次数、脑指数、血单胺氧化酶(MAO)活力及脑组织单胺类递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的影响结果CJLM明显降低焦虑模型大鼠舔水次数,降低脑指数,增加血MAO活力,降低模型大鼠脑组织5-HT,且呈现剂量和药效作用的反线性关系。对NE和DA作用不明显。结论CJLM能降低舔水次数,可能系镇静安神作用的体现,CJLM可能通过影响MAO活力和单胺类神经递质改善焦虑情绪,同时起到镇静安神的作用。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠作用机制

目的 观察红芪多糖（HPS）对糖尿病肾病db/db小鼠Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、HPS高、中、低剂量组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg^-1·d^-1蒸馏水,厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg^-1·d^-1厄贝沙坦溶液,HPS高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg^-1·d^-1 HPS溶液。6组小鼠每日灌胃1次,连续给药12周。检测各组小鼠一般状态、血糖（GLU）、24 h尿蛋白（UTP）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾脏中Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化糖原合成激酶-3β（p-GSK-3β）的蛋白及mRNA的表达水平。结果 治疗12周后,与正常组比较,模型组小鼠一般状态较差且肾脏组织病理超微结构病变显著,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组小鼠一般状态及肾脏组织病理超微结构均得到一定程度改善,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均降低（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 HPS可在一定程度上减轻糖尿病肾病的肾损伤,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。     

中医药调控PI3K/Akt 信号通路治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎是一种以滑膜炎症为基本病理表现的自身免疫性疾病,临床常以对称性多关节疼痛、肿胀 为主要症状,甚者还会引发肺间质纤维化和冠状动脉疾病等关节外表现和合并症,严重影响患者的生活质量。 中医药治疗类风湿关节炎具有多通路、多靶点、多成分及毒副反应少的特点,在类风湿关节炎治疗中发挥着重 要的作用。近年,许多研究已经证实中药单体及中药复方可以通过调控磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路控制炎症,减少血管新生,诱导滑膜成纤维细胞 凋亡,抑制其增殖、侵袭、迁移,发挥治疗类风湿关节炎的作用。基于此,该文概述了PI3K/Akt 信号通路及 其对类风湿关节炎的作用,总结中医药通过调控PI3K/Akt 信号通路治疗类风湿关节炎的研究进展,以期为类 风湿关节炎的治疗及新药开发提供理论依据。     

白虎加人参汤对MKR糖尿病鼠肝脏PI3K/Akt信号通路的影响

目的：探究白虎加人参汤对MKR糖尿病模型小鼠肝脏磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关分子的作用。方法：选取30只6周龄MKR小鼠,经高脂饲料喂养4周后予以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)进行糖尿病造模,检测空腹血糖值≥11.1 mmol·L^-1即造模成功,造模成功后随机分成模型组、白虎加人参汤组、二甲双胍组,每组各10只,同时设10只FVB鼠为空白组,各药物干预组分别持续给药28d,药物剂量分别为白虎加人参汤组12.09g·kg^-1·d^-1、二甲双胍组0.065 g·kg^-1·d^-1。给药结束后处死小鼠检测口服葡萄糖耐量实验(OGTT)及空腹血糖(FBG),半定量酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清极低密度脂蛋白(VLDL)含量,血生化仪测定血脂4项;肝脏组织进行苏木素-伊红(HE)病理学检测;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肝脏组织PI3K、Akt、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、叉头框蛋白O1(FoxO...     

基于PI3K/Akt/HIF-1α信号通路探讨补肾活血汤干预乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松的作用机制

目的 利用网络药理学预测补肾活血汤干预乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松的潜在作用机制,并通过体外细胞模型进行实验验证。方法 首先通过网络药理学筛选补肾活血汤的主要有效化学成分和作用靶点,进一步获取乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松相关的疾病靶点。将二者的共同靶点信息进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。其次利用生存分析网站（Kaplan-Meier Plotter）对关键靶点进行生存分析。最后通过体外实验噻唑蓝（MTT）比色法评估细胞增殖抑制活性,蛋白免疫印迹法（Western blot）验证关键靶点及通路,并使用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）评估关键靶点mRNA表达。结果 网络药理学研究共获得补肾活血汤活性成分716个,关键靶点249个,补肾活血汤和乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松的共同靶点135个,其中蛋白激酶B（Akt）1、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）是两个关键靶点,靶点共涉及生物过程531种,细胞组成62种,分子功能162种,参与乳腺癌、内分泌抵抗等细胞信号通路145条;靶点有效地富集在磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt和低氧诱导因子（HIF）-1两条信号通路。体外实验中,MTT比色法显示,与空白组比较,22.5、45、90 g·L^-1及45、90、180 g·L^-1质量浓度的补肾活血汤作用48 h后分别能不同程度的降低人Luminal A型乳腺癌细胞系MCF-7和T47D细胞增殖率和细胞运动能力。将0、15、60 g·L^-1的补肾活血汤干预MCF-7细胞48 h,Western blot实验表明,与空白组比较,不同质量浓度的补肾活血汤作用于MCF-7细胞中磷酸化（p）-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt和HIF-1α蛋白相对表达水平均降低（P<0.05,P<0.01）,且呈浓度依赖性。采用Real- time PCR检测关键靶点HIF-1α的mRNA表达,结果显示,与空白组比较随浓度升高MCF-7细胞中HIF-1α的mRNA表达显著降低（P<0.01）,且呈浓度依赖性。结论 补肾活血汤通过PI3K/Akt/HIF-1信号通路作用于关键靶点Akt1、HIF1A,进而干预乳腺癌内分泌治疗相关的骨质疏松。     

中药调控PI3K/Akt信号通路改善认知障碍的研究进展

认知障碍是指大脑的海马、皮层等部位出现异常,表现为学习、记忆、注意力等认知能力下降。随着人们的工作压力和不良生活习惯的愈发严重,认知障碍发生率越来越高,严重影响人们的正常生活。目前改善认知障碍的西药存在胃肠道反应和锥体外系反应等不良反应。因此,开发一种不良反应相对较小的药物具有重要意义。中药发挥药效作用具有“多成分、多途径、多靶点”的特点,不良反应发生率相对较小。研究表明认知障碍发病原因与大脑皮层和海马体神经元氧化应激反应、炎症反应、凋亡、自噬等过程密切相关。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是一条在传导细胞内外信号方面起重要作用的传导通路,在调节细胞炎症、凋亡、自噬等方面发挥着重要作用。中药单体、中药提取物、中药复方通过调控PI3K/Akt信号通路发挥抗炎、抗氧化、抗凋亡、调节自噬等作用,达到改善认知障碍的目的。该篇综述先总结PI3K/Akt信号通路的组成与调控过程,后论述其通过改善神经元氧化应激、炎症反应、凋亡与自噬等过程而改善认知障碍的研究进展,最后对近年来中药单体、中药提取物、中药复方调控该信号通路改善认知障碍的研究现状进行总结,为后期认知障碍相关中药...