基质金属蛋白酶组织抑制因子-2在退变腰椎间盘髓核与纤维环组织的表达及意义

目的:测定基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在退变椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中的表达,探讨其在椎间盘退变中的意义.方法:选取腰椎间盘突出症患者手术摘除椎间盘标本30例,分离椎间盘标本髓核与纤维环组织,设为实验组.创伤致腰椎椎体骨折经手术摘除椎间盘组织标本10例作为对照组.采用免疫组织化学法检测两组椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中TIMP-2的表达.结果:TIMP-2在椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞的表达中,实验组阳性率多于对照组(P＜0.01);在髓核细胞中的表达要强于纤维环,而且不同退变程度的表达也不同,TIMP-2在突出型中的表达较正常对照组组织标本中的表达增高(P＜0.01),TIMP-2在脱出型和游离型组织标本中的的表达较突出型有所增高(P＜0.01).结论:实验组椎间盘髓核与纤维环细胞中TIMP-2表达程度与椎间盘退变程度呈正相关;TIMP-2参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,TIMP-2可能作为MMPs的一个重要调节因素,与MMPs相互协调.     

ADAMTS-12表达与腰椎间盘退变的相关性分析

目的探讨解聚蛋白酶-12(ADAMTS-12)在退变腰椎间盘组织中的表达及意义。方法选取2015年2月至2017年2月在我院治疗的腰椎间盘突出组织标本54例,其中后外层纤维环破裂32例,后外层纤维未破裂22例,同时选取腰椎骨折患者腰椎间盘组织40例(对照组),采用HE染色观察椎间盘髓核组织,采用免疫组化法和聚合酶链反应(PCR)检测ADAMTS-12蛋白和mRNA表达。结果后外层纤维环破裂患者ADAMTS-12蛋白阳性表达率和mRNA分别为84.38%和(0.812±0.048),明显高于后外层纤维环未破裂患者和对照组(P0.05);后外层纤维环未破裂患者ADAMTS-12蛋白阳性表达率和mRNA分别为59.09%和(0.521±0.037),明显高于对照组(P0.05);MRI分级为Ⅴ级组织ADAMTS-12 mRNA表达为(0.901±0.042),明显高于Ⅲ级和Ⅳ级组织(P0.05);Ⅳ级组织ADAMTS-12 mRNA表达为(0.703±0.040),明显高于Ⅲ级组织(P0.05)。结论 ADAMTS-12可能参与了腰椎间盘组织退变过程,其表达水平与腰椎间盘组织退变程度有一定关系。     

腰椎间盘退行性改变患者ADAMTS-7表达及其机制研究

目的探讨新型金属蛋白酶(ADAMTS-7)在腰椎间盘退行性改变患者中表达情况,并探讨其作用机制。方法2014年3月至2016年2月我院手术切除腰椎间盘突出症患者退变的椎间盘组织40例(依据后外层纤维破裂与否分为破裂组及未破裂组)及同期腰椎骨折患者正常腰椎间盘组织20例(对照组),采用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术对不同髓核组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、ADAMTS-7进行定性定量检测。结果 TNF-α表达量随腰椎间盘退变程度加重而增加,ADAMTS-7蛋白在对照组腰椎间盘髓核组织呈现弱阳性表达,在未破裂组及破裂组椎间盘髓核组织中分别呈阳性表达及强阳性表达;3组ADAMTS-7蛋白表达量、mRNA表达量及TNF-αmRNA表达量由高到低排序为破裂组未破裂组对照组(P0.05)。结论 ADAMTS-7及TNF-α在腰椎间盘退行性改变患者髓核组织中存在高表达现象,并且退变程度越重其表达量越多,而作用机制可能与7 ADAMTS-7及TNF-α在腰椎间盘退行性病变中表达呈正反馈通路加速其病程进展有关。     

白介素-1α在退变腰椎间盘中的分布与神经根性疼痛的相关性

目的研究白介素-1α(IL-1α)在退变腰椎间盘中的表达与分布,探讨其在坐骨神经痛发生机制中的作用。方法收集30例腰椎间盘突出症手术切除的椎间盘组织,每例在3个部位取材:(1)凸入椎管内与神经根紧贴的椎间盘组织(A组);(2)软骨终板间的椎间盘(B组);(3)软骨终板(C组)。6份正常髓核取自4例急性腰椎外伤骨折患者。应用IL-1α单克隆技术,采用SP免疫组化染色技术,对标本中IL-1α表达水平进行检测。结果IL-1α表达水平A组明显高于B组及C组(P<0.05)。结论IL-1α在退变腰椎间盘3个部位均有表达,但分别不一致;腰椎间盘突出症术后坐骨神经痛不能缓解,可能与残留椎间盘中IL-1α有关。     

基质金属蛋白酶1在不同程度退变腰椎间盘髓核与纤维环中的表达及意义

背景：基质金属蛋白酶在椎间盘退变中通过影响基质合成及降解导致基质成分紊乱及功能的改变。目的：观察基质金属蛋白酶1在人类退变腰椎间盘组织中的表达变化。方法：获取经手术治疗腰椎间盘突出症患者椎间盘标本30份,突出型、脱出型、游离型各10份,分离髓核与纤维环,设为实验组;腰椎损伤致椎体骨折切除椎间盘10份设为对照组。应用免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶1在椎间盘中髓核与纤维环细胞中的表达。结果与结论：①苏木精-伊红染色显示,对照组椎间盘标本纤维环仍保持着致密的板层结构,实验组椎间盘组织多呈纤维化样改变。②两组髓核细胞中基质金属蛋白酶1表达均高于纤维环细胞中的表达。③实验组突出型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于对照组（P〈0.01）,脱出型和游离型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于突出型（P〈0.01）。     

弥散加权ADC值定量评价髓核蛋白多糖含量的研究

目的：探讨ADC值对髓核蛋白多糖含量的定量评价价值。材料与方法：腰椎间盘突出症患者拟行手术者,术前行弥散加权成像（DWI）,并测量正中矢状面腰椎间盘的ADC值;术后测量髓核蛋白多糖含量。依据Minna tertti法将退变椎间盘进行分类,比较各类椎间盘髓核ADC值及蛋白多糖含量间的差异性,对各类腰椎间盘平均ADC值与退变椎间盘髓核的蛋白多糖含量进行相关性分析。结果：13例腰椎间盘突出症患者手术中摘除15个髓核标本,其中Ⅱ类椎间盘髓核7例,Ⅲ类椎间盘髓核8例;Ⅱ类椎间盘髓核ADC值与蛋白多糖相关系数r为0.826,P<0.05。Ⅲ类椎间盘髓核ADC与蛋白多糖相关系数r值为0.210,P>0.05。结论：ADC值可间接反映椎间盘髓核蛋白多糖含量变化,并可对早期椎间盘退变进行无创定量评价。     

人颈椎间盘退变与细胞凋亡及基质金属蛋白酶11的表达

背景:前期研究发现基质金属蛋白酶11基因在人退变颈、腰椎间盘组织中明显上调.目的:观察人退变颈椎间盘髓核组织中基质金属蛋白酶11的表达与细胞凋亡的关系.方法:纳入30个经MRI确认的退变颈椎间盘髓核组织和20个因颈椎创伤治疗获得的正常颈椎间盘髓核组织.结果与结论:苏木精-伊红染色显示退变的颈椎间盘髓核组织中髓核细胞较正常髓核组织明显减少(P < 0.01),而凋亡细胞较正常髓核组织明显增多(P < 0.01).免疫组化染色显示退变的颈椎间盘髓核组织中基质金属蛋白酶11的表达明显高于正常髓核组织(P < 0.01),且基质金属蛋白酶11表达与TUNEL染色检测到的细胞凋亡正相关(r=0.44,P < 0.05).说明高表达的基质金属蛋白酶11不仅可直接破坏细胞外基质尚可诱导髓核细胞凋亡,在椎间盘退变的过程中发挥重要作用.     

头针及整脊治疗腰椎间盘突出症髓核大小的改变

背景:临床上通过一定的方法可减少突出椎间盘内容、降低椎间盘内压的效果,使已突出的间盘组织还纳或复位.目的:观察腰椎间盘突出物髓核治疗前后大小的变化情况.方法:随机将60例腰椎间盘突出症患者按就诊先后顺序随机数字抽签法均分为头针组、整脊组、头针合整脊组,进行不同手法的治疗.另取同期健康体检人群20例设为正常对照组.观察各组患者椎间盘突出髓核经治疗后能否回纳.结果与结论:与正常对照组比较,其他3组治疗前突出髓核的大小差异有非常显著性意义(P＜0.01);3组治疗前后突出髓核的大小比较,差异无显著性意义(P ＞ 0.05);3组疗效比较,差异亦无显著性意义(P ＞ 0.05).结果证明3种手法治疗腰椎间盘突出症对椎间盘突出髓核的回纳无明显作用.     

椎间盘突出患者椎间盘Fas基因的表达

背景：临床中发现腰椎间盘突出症常在一个家族中多人甚至全部发病,而且发病的部位、原因、症状基本一致,这表明基因在该种病症中扮演着重要的角色。目的：分析家族性腰椎椎间盘突出症患者椎间盘内Fas凋亡基因表达的特点。方法：用半定量RT-PCR方法检测15例家族性腰椎椎间盘突出患者、21例普通椎间盘突出患者、5例新鲜尸体椎间盘的软骨终板和髓核组织中Fas基因的表达情况。结果与结论：家族性椎间盘突出与普通椎间盘突出患者终板内Fas基因的表达均高于新鲜尸体椎间盘终板内Fas基因的表达,差异有显著性意义(P<0.05),家族性椎间盘突出与普通椎间盘突出患者终板内Fas基因的表达差异无显著性意义(P>0.05)。家族性椎间盘突出患者髓核内Fas基因表达与普通椎间盘突出患者、新鲜尸体髓核内Fas基因表达相比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结果可见家族性椎间盘终板中Fas基因的表达增加可能是继发性的,可以通过阻止终板退变来达到阻止椎间盘退变的目的。     

MRI对评估腰椎间盘退变程度的临床意义

目的探讨腰椎间盘退变程度与MRI表现的相关性。方法对临床诊断腰椎间盘退变的56例患者作MRI检查,术后对切除髓核标本作成分测定,并对MRI检查髓核信号强度（RSI）与髓核成分改变进行相关性分析。结果腰椎间盘退变0级0例,I级8例,Ⅱ级19例,Ⅲ级29例。Ⅲ级水分含量较I级差异有统计学意义（P0.05）。II级硫酸软骨素含量较I级下降（P〈0.05）,Ⅲ级又较II级下降（P〈0.05）。RSI与水分含量、硫酸软骨素含量呈正相关（P〈0.05）,与硫酸角质素含量无相关性。结论 MRI的RSI能较好反映髓核水分含量及髓核主要成分,从而能较好判断腰椎间盘髓核的退变程度。     

程序性死亡分子5在退变腰椎间盘中的表达

背景:细胞凋亡在腰椎间盘退变中起重要作用.程序性死亡分子5是一个促细胞凋亡的蛋白,在骨关节炎的软骨细胞中表达增高,但是至今未见在退变椎间盘中表达的报道.目的:观察程序性死亡分子5在正常、突出和脱出腰椎间盘髓核细胞中的表达规律,分析其在腰椎问盘退变中的作用.方法:用SP免疫组织化学方法、免疫荧光方法检测程序性死亡分子5在2例正常、23例突出和17例脱出腰椎间盘髓核细胞中的表达,用脱氧核苷酸转移酶末端标记法和透射电镜检测髓核细胞凋亡情况;用天狼星红染色观察髓核组织细胞外基质Ⅰ,Ⅱ型胶原纤维的变化.结果与结论:脱出组髓核细胞表达程序性死亡分子5的阳性率高于突出组(P＜0.05),脱出组髓核细胞脱氧核苷酸转移酶末端标记阳性率高于突出组(P＜0.05).荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察结果显示程序性死亡分子5表达定位于退变椎间盘的髓核细胞的细胞核;用透射电镜检测到凋亡的髓核细胞:天狼星红染色结果显示,随着年龄增长,髓核中Ⅱ型胶原纤维减少,Ⅰ型胶原纤维增多.结果提示退变椎间盘髓核细胞表达程序性死亡分子5上调,细胞凋亡增加,程序性死亡分子5介导的细胞凋亡在椎间盘退变中起到重要作用.     

成人退变腰椎间盘髓核组织中端粒酶表达及意义

目的探讨端粒酶在成人退变腰椎间盘髓核组织中的表达及与腰椎间盘髓核组织退变的关系。方法 8例腰椎间盘退行性病变患者(观察组),取手术摘除退变椎间盘髓核组织,8例腰椎骨折患者(对照组),取手术摘除非明显退变腰椎间盘髓核组织,采用免疫组织化学法检测2组端粒酶阳性表达情况,ELISA法检测端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量,Spearman相关法分析观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素的相关性。结果观察组髓核组织端粒酶阳性表达率(2.1%)低于对照组(4.3%)(P<0.05),髓核组织端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量吸光度值(7.62±0.98、59.45±6.32、3.31±0.38)低于对照组(15.52±0.94、69.33±5.86、4.64±0.29)(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维(r=0.488,P<0.001)、硫酸软骨素(r=0.673,P<0.001)表达均呈正相关。结论端粒酶参与了腰椎间盘髓核组织的退变过程,且端粒酶表达下调,Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素表达降低。     

磁共振T2技术定量检测腰椎间盘突出症的临床应用研究

目的:腰椎间盘突出症患者采用磁共振T2技术进行定量处理分析,探讨对患者的临床应用研究效果。方法:将我院210例腰椎间盘突出症病人采用美国通用1.5T磁共振对其椎间盘进行T2Mapping成像,在图像上参考Pfirrmann分级法,将其进行分级,在正中矢状位上选择感兴趣区测定椎间盘中髓核的T2值,并分析比较两者间的关系。结果:T2值与Pfirrman分级均呈显著负相关且随着分级的增加,椎间盘NP的T2值降低;在Ⅳ级与Ⅴ级间进行比较其差异无显著性(P0.05),其余各级间的差异较为明显存在显著性(p0.05)。结论:T2Mapping可定量对椎间盘组织化学成分的改变进行检测,并与椎间盘间的退变程度存在直接的负相关性。为观察椎间盘退变的情况具有较高的应用价值,在临床上具有重要的指导意义。     

白介素—1α在退变腰椎间盘中的分布与神经根性疼痛的相关性

目的：研究白介素－1α（IL－1α）在退变腰椎间盘中的表达与分布，探讨其在坐骨神经痛发生机制中的作用。方法：收集30例腰椎间盘突出症手术切除的椎间盘组织，每例在3个部位取材：（1）凸椎管内与神经根紧贴的椎间盘组织（A组）；（2）软骨终板间的椎间盘（B组）；（3）软骨终板（C组）。6份正常髓核取自4例急性腰椎外伤骨折患。应用IL－1α单克隆技术，采用SP免疫组化染色技术，对标本中IL－1α表达水平进行检测。结果：IL－1α表达水平A组明显高于B组及C组（P＜0．05）。结论：IL－1α在退变腰椎间盘3个部位均有表达，但分别不一致；腰椎间盘突出症术后坐骨神经痛不能缓解，可能与残留椎间盘中IL－1α有关。     

腰椎间盘突出髓核的自身免疫性

背景：引起椎间盘源性腰腿痛的发病机制很多,在椎间盘退变的发生和发展过程中血管内皮生长因子与T,B淋巴细胞的表达与突出类型、病程等是否具有相关性还未完全清楚。目的：观察不同类型腰椎间盘突出症患者腰椎间盘组织中T,B淋巴细胞及血管内皮生长因子的表达变化,分析其与患者症状、体征的相关性。方法：选取腰椎间盘突出症患者的腰椎间盘标本作为实验组,包括游离脱出型、突出型及膨出型;以腰椎骨折患者的正常椎间盘作为对照。采用苏木精-伊红染色法观察椎间盘标本中血管形成及周边淋巴细胞聚集情况,免疫组化法检测CD4,CD8,IgG,IgM及血管内皮生长因子的分布。结果与结论：①在突出髓核组织中有大量新生血管形成并可见血管内皮细胞,在其周围可见明显的淋巴细胞聚集。②实验组均有活化的CD4,CD8阳性T细胞、IgG,IgM阳性B细胞和血管内皮生长因子表达,其中脱出游离组和突出组的阳性细胞率高于膨出组（P〈0.05）,而对照组均无阳性表达。提示髓核组织暴露于自身免疫系统中可以激活T、B细胞,引起自身免疫反应,血管内皮生长因子参与了退变椎间盘新生血管的形成,并可能与T,B细胞引起的自身免疫反应对椎间盘突出腰腿痛机制有协同作用。     

人颈椎间盘退变与细胞凋亡及基质金属蛋白酶11的表达

背景：前期研究发现基质金属蛋白酶11基因在人退变颈、腰椎间盘组织中明显上调。目的：观察人退变颈椎间盘髓核组织中基质金属蛋白酶11的表达与细胞凋亡的关系。方法：纳入30个经MRI确认的退变颈椎间盘髓核组织和20个因颈椎创伤治疗获得的正常颈椎间盘髓核组织。结果与结论：苏木精-伊红染色显示退变的颈椎间盘髓核组织中髓核细胞较正常髓核组织明显减少（P〈0.01）,而凋亡细胞较正常髓核组织明显增多（P〈0.01）。免疫组化染色显示退变的颈椎间盘髓核组织中基质金属蛋白酶11的表达明显高于正常髓核组织（P〈0.01）,且基质金属蛋白酶11表达与TUNEL染色检测到的细胞凋亡正相关（r=0.44,P〈0.05）。说明高表达的基质金属蛋白酶11不仅可直接破坏细胞外基质尚可诱导髓核细胞凋亡,在椎间盘退变的过程中发挥重要作用。     

蛋白聚糖酶2与金属蛋白酶组织抑制剂3在腰椎间盘髓核退变中的表达及意义

目的观察人体腰椎间盘髓核在不同退变程度时蛋白聚糖酶2及金属蛋白酶组织抑制剂3（TIMP-3）的阳性表达,探讨其在髓核退变过程中的作用。 方法选取脊柱外科腰椎手术摘除的髓核标本45例,采用Pfirrmann分级法对椎间盘髓核退变MRI进行分级。分为3组：对照组（Pfirrmann分级I、Ⅱ级）、退变组（Pfirrmann分级Ⅲ-IV级）和严重退变组（Pfirrmann分级V级）,每组15例。用4%多聚甲醛固定、石蜡包埋后,应用免疫组织化学方法检测髓核细胞中蛋白聚糖酶2及TIMP-3的表达。 结果椎间盘髓核细胞中蛋白聚糖酶2的阳性细胞率在对照组、退变组、严重退变组分别为（13.58±7.76）%、（33.48±13.95）%、（56.00±18.39）%,且退变组与对照组比较,表达增强（P<0.01）;严重退变组分别与对照组和退变组比较,表达均增强（P<0.01）。对照组、退变组和严重退变组的TIMP-3阳性细胞率分别为（34.78±13.80）%、（46.77±10.98）%、（50.65±16.45）%,且退变组与对照组比较,表达增强（P<0.05）;严重退变组与对照组比较,表达亦增强（P<0.01）;严重退变组与退变组比较,表达也增强（P<0.05）。对照组、退变组和严重退变组的蛋白聚糖酶2/TIMP-3比值分别为（45.37±30.57）%、（75.90±40.30）%和（120.62±49.67）%;退变组与对照组比较,比值升高（P<0.05）;严重退变组分别与对照组和退变组比较,比值均升高（P<0.01）。 结论在腰椎间盘髓核中蛋白聚糖酶2与TIMP-3的表达及蛋白聚糖酶2/TIMP-3比值均随髓核退变程度加重而升高,提示二者与髓核退变有密切关系,其比值升高与髓核退变程度呈正相关。     

神经肽Y在突出腰椎间盘组织中的表达及意义

目的:探讨突出的腰椎间盘髓核组织中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的表达及表达的意义。方法:收集30例有症状的腰椎间盘突出症患者,其中L4/5或L5/S1需行腰椎间盘髓核摘除术,取出腰椎间盘髓核组织作为实验组,同时收集20例尸体L4/5椎间盘组织作为对照组。将取出标本固定后切片染色,观察正常和病变椎间盘组织学改变。采用免疫组化方法对标本内NPY染色阳性的神经纤维进行定性和定量分析。结果:突出椎间盘的髓核组织中,少数细胞位于丰富的基质中。细胞膜不清楚,可见胞质内圆形细胞核及胞质内空泡。髓核中透明软骨细胞核大而胞浆深染,多聚集成团。突出的髓核组织中NPY的表达高于正常髓核组织,有显著性差异(t=17.617,P<0.05)。结论:在突出腰椎间盘的髓核组织中有大量的NPY表达。这说明交感神经纤维已经侵入到中央的髓核组织,释放出NPY递质,可能是椎间盘突出患者早期下腰痛的机制之一。     

核因子κB、基质金属蛋白酶3在退变腰椎间盘组织中的表达

背景:对于椎间盘退变的原因一直是国内外学者研究的重点.近年来随着研究的深入,在椎间盘退变过程中多种细胞因子、黏附分子、趋化因子、炎症递质、蛋白质酶等发挥着重要作用.目的:比较正常腰椎间盘组织及退变腰椎间盘组织中核因子κB、基质金属蛋白酶3的表达,分析两者的相关性.方法:收集唐山市第二医院脊柱外科手术切除退变椎间盘组织68例(病变组),腰椎爆裂骨折正常椎间盘组织10例(对照组),应用苏木精-伊红染色、免疫组织化学方法和ELISA方法检测核因子κB、基质金属蛋白酶3的表达,并对两者相关性进行分析.结果与结论:苏木精-伊红染色结果显示对照组可见纤维环和髓核结构,腰椎间盘髓核的软骨细胞表现为不规则的软骨陷窝,病变组细胞增殖明显,细胞核呈圆形或卵圆形,髓核细胞胞质呈空泡状.免疫组织化学方法显示病变组核因子κB、基质金属蛋白酶3吸光度值明显高于对照组(P < 0.05).ELISA检测病变组核因子κB、基质金属蛋白酶3的表达均高于对照组(P < 0.05).两者具有正相关性(r=0.643 0,P < 0.01).     

碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1在退变椎间盘组织中的表达和意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)在椎间盘退变组织中的表达情况和意义.方法 选取2004年至2006年手术切除的50例腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘组织(病变组)及10例因外伤手术切除椎间盘的正常间盘组织(对照组).采用免疫组化方法、酶联免疫吸附法(ELISA)检测标本中bFGF、TGF-β1的表达.结果 病变组椎间盘组织bFGF、TGF-β1的表达明显高于对照组(P＜0.05).结论 bFGF、TGF-β1在椎间盘的退变过程中可能发挥重要作用.