TFPI-2基因体外诱导胰腺癌Panc-1细胞的凋亡

目的: 将TFPI-2基因转染胰腺癌细胞系Panc-1细胞, 研究其对胰腺癌细胞凋亡的影响.方法:将重组质粒pEGFP-C1-TFPI-2通过脂质体介导转染胰腺癌细胞系Panc-1细胞, G418筛选获得阳性细胞克隆后, 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术分别检测转染细胞中TFPI-2 mRNA及相应蛋白的表达, 同时测定转染细胞的生长曲线和凋亡情况. 结果: 同转染空载体及未转染细胞相比, 转染成功的Panc-1细胞可以检测到TFPI-2 mRNA和相应蛋白的表达, 细胞生长受到抑制(n = 9, P = 0.02), DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特有的"梯状"条带.结论:外源性TFPI-2基因能够抑制胰腺癌细胞生长增殖、诱导胰腺癌细胞凋亡.     

RNA介导Survivin基因沉默对胰腺癌细胞Panc-1细胞株凋亡及增殖的影响

目的观察靶向封闭survivin基因对胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响，探讨survivin基因在胰腺癌的发生、发展中作用：方法设计2对survivin-shRNA，体外转录制备shRNA。利用脂质体转染技术将survivin-shRNA转染胰腺癌细胞株（Panc-1），RT-PCR检测survivin-mRNA水平；MTT法检测细胞生长情况并绘制细胞生长曲线；细胞形态学观察及流式细胞仪分析细胞凋亡。结果转染2对survivin-shRNA可分别使Panc-1细胞survivin-mRNA水平下降54．86％，52．19％；MTT法检测结果显示：转染两对survivin-shRNA24、48、72小时对细胞增殖无明显影响（P〉0．05）；细胞形态学观察及流式细胞仪分析结果显示：转染两对survivin-shRNA 24、48、72小时对细胞凋亡无明显影响（P〉0．05）。结论应用RNAi技术，将survivin-shRNA转染胰腺癌细胞（Panc-1），能成功介导survivin基因沉默，达到部分靶向封闭survivin的目的：部分靶向封闭survivin对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及增殖无明显影响。提示：survivin在胰腺癌细胞增殖与凋亡调控中所起的作用可能并非关键性的。因而以survivin为靶基因的基因治疗对胰腺癌可能无效。     

长链非编码RNA HOTAIR对胰腺癌细胞增殖、迁移能力的影响

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTAIR在胰腺癌细胞系(AsPC-1和Panc-1)中的表达,分析其对细胞增殖、迁移生物学能力的影响。方法体外培养人胰腺癌细胞系(Panc-1、AsPC-1),利用qRT-PCR技术检测lncRNA HOTAIR在胰腺癌细胞中的表达水平,并通过基因转染上调或下调HOTAIR的表达,观察HOTAIR对胰腺癌细胞增殖、迁移能力的影响。结果 HOTAIR过表达对AsPC-1细胞增殖能力影响较弱,但可促进Panc-1细胞增殖;HOTAIR过表达对两种细胞迁移均有促进作用。HOTAIR敲低抑制两种胰腺癌细胞增殖,并抑制两种胰腺癌细胞的迁移能力。结论 HOTAIR可增强胰腺癌细胞增殖、迁移的能力,提示HOTAIR可能与胰腺癌的进展和预后相关。     

RNAi沉默Polo-like kinase-1基因表达对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因在胰腺癌细胞中的作用.方法:采用PLK1小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,siRNA)转染人胰腺癌Mi- aPaCa-2细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平,观察PLK1 siRNA转染对胰腺癌细胞体内外增殖的影响.于转染不同时间后收集细胞,分别采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测胰腺癌细胞凋亡情况.结果:胰腺癌MiaPaCa-2细胞经siRNA转染处理后,PLK1 mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05).PLK1基因siRNA可明显抑制癌细胞体外生长(P<0.05)和体内裸鼠模型增殖(P<0.05).细胞凋亡检测发现,DNA电泳出现明显的梯度图谱,且与浓度相关(r=0.836,P<0.05).TUNEL结果显示,转染组癌细胞凋亡指数明显增加,且呈时间和浓度依赖性(r= 0.875,P<0.05).结论:PLK1 siRNA转染可明显抑制胰腺癌细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关.     

组织因子途径抑制物-2在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察组织因子途径抑制物(TFPI)-2在正常宫颈、宫颈上皮内肿瘤(CIN)和宫颈鳞癌组织中表达的差异及TFPI-2对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2009~2010年在该院妇产科住院治疗的68例宫颈鳞癌患者,48例CIN患者及12例宫颈正常患者的宫颈组织标本,免疫组化染色检测宫颈组织中TFPI-2的表达。取生长状态良好的宫颈癌Hela细胞,应用基因转染的方法建立TFPI-2高表达细胞系,Real-time PCR和Western印迹方法检测基因转染前后细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测各组细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 1免疫组化染色显示,正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中TFPI-2表达逐渐降低,三者间比较差异有统计学意义(P0.01)。2体外观察发现,转染pc DNA3.1-TFPI-2的Hela-TFPI-2组细胞TFPI-2 mRNA和蛋白表达明显高于转染空白质粒组和空白对照组(P0.01);MTT结果显示,Hela-TFPI-2组细胞增殖速度明显低于空白对照组和空白质粒组,且随着培养时间的延长,这种抑制作用更明显(P0.05);流式细胞仪检测结果显示Hela-TFPI-2组细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白质粒组(P0.05)。结论 TFPI-2表达随着宫颈病变的进展逐渐降低;同时过表达的TFPI-2可明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖,促进其凋亡。提示TFPI-2的表达减少可能是宫颈癌发生发展的机制之一,TFPI-2可能是治疗宫颈癌的新靶点。     

p15~(INK4B)基因对人胰腺癌细胞系BxPC3增殖的影响

目的 探讨p15~(INK4B)(p15)基因转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖的影响.方法 采用脂质体将pCDNA3.1(+)-p15质粒及阴性对照pCDNA3.1(+)-neo质粒转染BxPC3细胞,以亲本细胞作为对照组.应用RT-PCR检测细胞p15 mRNA表达;Western blotting检测细胞p15蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;透射电镜观察细胞超微结构变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 p15转染组细胞恢复p15 mRNA和蛋白表达.培养第2天生长被抑制,至第7天,生长抑制率达47.9%.G_0/G_1期细胞占(61.56±3.96)%,显著高于空质粒转染组的(47.44±6.35)%和对照组的(49.22±7.23)%(P<0.05).出现明显的G,凋亡峰,细胞凋亡率为(5.27±1.04)%,显著高于空质粒转染组的(0.11±0.06)%和对照组的(0.09±0.07)%(P<0.05).透射电镜观察到p15转染组发生细胞凋亡.结论 体外p15基因转染可以抑制人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖,并能诱导其凋亡.     

TMPRSS4基因沉默对胰腺癌SW1990细胞生长及侵袭的影响

目的 观察TMPRSS4基因沉默对人胰腺癌SW1990细胞体外生长增殖和侵袭的影响.方法 体外合成4个靶向TMPRSS4基因和阴性对照的真核表达载体,瞬时转染到SW1990细胞,实时定量PCR法检测转染细胞的TMPRSS4 mRNA表达.以干扰效率最高的真核表达载体转染SW1990细胞,G418筛选出稳定的TMPRSS4基因沉默的细胞株,蛋白质印迹法检测稳定细胞株TMPRSS4蛋白抑制效率,CCK-8法检测细胞生长抑制率,Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 成功构建了稳定下调TMPRSS4表达的细胞株SW1990/psi-TMPRSS4,细胞转染效率为82.9%.与亲本SW1990细胞比较,TMPRSS4 mRNA和蛋白水平分别下调了80.1%、60%.SW1990/psi-TMPRSS4组穿膜细胞数为(118.6±13.4)个,显著低于阴性对照组的(157.4±12.9)个和亲本细胞组的(157.0±9.5)个(P值均<0.01).SW1990/psi-TMPRSS4组细胞的侵袭抑制率为24.5%.但各组细胞增殖无明显变化.结论 成功筛选出稳定下调TMPRSS4表达的细胞株.下调TMPRSS4表达能有效抑制胰腺癌SW1990细胞的侵袭能力,但对细胞增殖无影响.     

KAI1基因抑制胰腺癌细胞转移机制的探讨

目的　将pCMV KAI1重组质粒转染人高转移胰腺癌细胞株MiaPaCaⅡ中 ,观察转染前后KAI1基因对胰腺癌细胞侵袭转移能力和运动能力的影响 ,从基因水平探讨KAI1基因抗胰腺癌转移机制。方法　通过脂质体转染法成功将重组质粒转染到MiaPaCaⅡ中 ,利用Transwell小室测定细胞穿膜侵袭运动能力 ,采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测明胶酶活性。结果　pCMV KAI1重组质粒转染后 ,显微镜下细胞计数示转染后胰腺癌细胞穿透基底膜的数量较转染前明显减少 (P <0 0 5 ) ,细胞运动能力明显减弱。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示负染带宽度比转染前变窄 ,亮度减弱 ,降解基质膜和细胞外基质的能力和侵袭转移能力下降。结论　KAI1基因控制胰腺癌细胞转移可能是通过抑制癌细胞侵袭及运动功能来实现的。     

胰腺癌TFPI-2的表达及与临床病理关系的分析

目的探讨人胰腺癌组织中TFPI-2蛋白表达及与临床病理参数的关系。方法应用免疫组化方法检测50例胰腺癌及9例正常胰腺组织中TFPI-2蛋白的表达,并应用TUNEL法检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果胰腺癌组织TFPI-2表达指数为73.28±9.63,明显低于正常胰腺组织的81.42±12.25(P<0.05)。胰腺癌组织的AI为(7.19±1.77)%。胰腺癌TFPI-2表达指数及AI与临床TNM分期及转移有关,Ⅰ、Ⅱ期及无转移的胰腺癌组织TFPI-2表达指数及AI值均高于Ⅲ、Ⅳ期及有转移的胰腺癌组织;TFPI-2阳性表达的癌组织AI值为(7.77±0.25)%,TFPI-2阴性表达的癌组织AI值为(6.77±1.43)%,两者比较差异显著(P<0.05)。结论胰腺癌组织TFPI-2呈低表达,TFPI-2可能在诱导胰腺癌细胞凋亡中起重要作用。     

重组腺病毒载体介导HOSM 基因对胰腺癌细胞PC3体外增殖的抑制作用

目的构建了含人抑瘤素M（HOSM）基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,观察其对人胰腺癌细胞株PC3在体外生长抑制情况。方法通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM,报告基因AD-GFP检测腺病毒的对胰腺癌细胞系的转染效率;人胰腺癌细胞株PC3转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM后,用RT-PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达;台盼兰染色、细胞计数法检测AD-HOSM对PC3的体外增殖抑制情况。结果成功构建了重组腺病毒载体AD-HOSM,AD-HOSM对胰腺癌细胞PC3有较高的转染效率,HOSM基因在转染细胞能有效的表达。体外试验示AD-HOSM明显抑制PC3的的生长。结论重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制PC3在体外的增殖,提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为胰腺癌治疗的候选方案。     

二甲双胍靶向Notch信号通路抑制胰腺癌干细胞自我更新

目的探讨二甲双胍对胰腺癌干细胞自我更新及其Notch信号通路活性的影响。方法通过细胞球培养法获取Panc1胰腺癌干细胞。通过CCK-8检测二甲双胍对Panc1普通胰腺癌细胞和胰腺癌干细胞的半数抑制浓度(IC 50)。通过CCK-8检测二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞自我更新能力的抑制;通过实时定量PCR检测二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞中Notch4、DLL1、DLL3、Jagged1和HES1 mRNA水平的影响。结果Panc1普通胰腺癌细胞悬浮培养于干细胞培养基后,全部细胞聚集成球状、团块状;5 d后悬浮培养得到的Panc1胰腺癌干细胞与Panc1普通胰腺癌细胞相比体积小,呈梭形或圆形。二甲双胍对Panc1普通胰腺癌细胞的IC 50为27.97 mmol/L,对Panc1胰腺癌干细胞的IC 50为16.10 mmol/L。在加入20 mmol/L二甲双胍后,体外培养的Panc1胰腺癌干细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.01),细胞中Notch4、DLL1、DLL3、Jagged1、HES1 mRNA水平明显下调(P<0.01)。结论二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞的IC 50低于对Panc1普通胰腺癌细胞的IC 50,提示Panc1胰腺癌干细胞对二甲双胍更为敏感;二甲双胍可抑制Panc1胰腺癌干细胞自我更新,并可显著抑制其Notch信号通路活性,提示抑制该通路活性可能是二甲双胍抑制胰腺癌干细胞自我更新的机制之一。     

MiR-25-3p attenuates the proliferation of tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113

ObjectiveTo investigate the effects of miR-25-3p on the occurrence, development and proliferation of tongue squamous cell carcinoma cells.MethodsTo establish tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113 that stably and highly express miR-25-3p using recombinant retroviral vector-mediated gene transfer method. The proliferation of transfected Tca8113 was detected by thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT) and cell colony formation assays. cyclinD1, p21^cip1 and p27^kip1 mRNA expressions in the transfected Tca-8113 were detected by quantitative PCR. cyclinD1, p21, p27^kip1, AKT, p-AKT, FOXO1 and p-FOXO1 expressions in the transfected Tca8113 were detected by western blot analysis. In addition, miR-25-3p expression in the tongue squamous cell carcinoma cell line and tissue specimen was also detected by quantitative PCR.ResultsQuantitative PCR showed that miR-25-3p expression in the tongue squamous cell carcinoma cell lines and tissue specimen was significantly lower than that in the adjacent tissue. MTT and cell colony formation assays showed that after miR-25-3p overexpression, the proliferation of transfected Tca8113 was obviously attenuated. Western blot analysis and quantitative PCR showed that after miR-25-3p overexpression, p21^cip1 and p27^kip1 expressions were upregulated, while cyclinD1, AKT, FOXO1 expressions were downregulated, and AKT and FOXO1 phosphorylation was inactivated in the transfected Tca8113 cells.ConclusionsMiR-25-3p inhibited the proliferation of tongue squamous cell carcinoma cells and regulated cell cycle-related protein expression, playing an important role in the occurrence and development of squamous cell carcinoma of the tongue.     

丙型肝炎病毒核心区蛋白对 HepG2细胞周期、细胞凋亡和细胞端粒酶活性的影响

目的　研究丙型肝炎病毒核心区 (HCV C)蛋白对肝癌细胞HepG2细胞周期、细胞凋亡和细胞端粒酶活性的影响。方法　首先运用基因重组技术构建含有HCV C基因的真核表达质粒pcDNA3.1( ) ,然后利用脂质体介导将重组真核表达质粒转染HepG2 ,经G4 18筛选获得稳定转染HepG2细胞 (HCV C转染HepG2细胞 ) ,经逆转录 聚合酶链反应技术 (RT PCR)和间接免疫荧光法证实其中有HCV C蛋白表达。然后进行如下实验 :( 1)利用四甲基偶氮唑蓝比色 (MTT)法检测HCV C转染HepG2细胞、空白质粒转染HepG2细胞和未转染HepG2细胞的生长增殖率 ;经流式细胞术(FACS)检测 3组细胞的细胞周期 ;( 2 )经流式细胞术检测细胞凋亡率 ;( 3)经端粒重复扩增 酶联免疫吸附试验 (TRAP ELISA)法检测上述 3组细胞端粒酶活性表达情况。结果　 ( 1)HCV C转染HepG2细胞增殖率显著高于空白质粒转染HepG2和未转染HepG2细胞增殖率 ;HCV C转染HepG2细胞S期所占百分率高于未转染HepG2细胞S期所占百分率 ;( 2 )HCV C转染HepG2细胞凋亡率显著低于无HCV C转染细胞凋亡率 ;( 3)上述 3组细胞端粒酶活性之间差异无显著性。结论　 ( 1)HCV C蛋白具有抑制细胞凋亡的作用 ;( 2 )HCV C蛋白促进HepG2从G0 /1期进入S期 ,从而可能促进细胞生长增殖 ,抑制细胞凋亡 ;( 3)HCV     

三联脆组基因对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究三联脆组基因(fragile histidine triad,FHIT)对胰腺癌细胞增殖的影响,探讨FHIT基因对胰腺癌增殖的抑癌机制。方法：通过脂质体介导的方法将pRC／CMV FHIT质粒转染有FHIT全基因丢失的胰腺癌1990细胞株。用RT－PCR及Western-blot方法对获得G418抗性细胞进行外源性FHIT基因整合及表达的鉴定。对导入有外源性FHIT基因表达的细胞（1990p FHIT)进行 细胞生长特征及裸鼠致瘤性分析。经光镜及电镜对1990pFHIT进行观察,并对其进行DNA片段化分析。结果：转染FHIT基因的1990细胞,有外源性FHIT基因的整合及表达,其增殖活性明显减弱,裸鼠致瘤性明显降低或消失。1990pFHIT细胞中存在明显的凋亡现象。结论：导放外源性的FHIT基因,通过某种途径诱导胰腺癌细胞的凋亡,从而抑制肿瘤细胞的恶性增殖。     

Flavopiridol对人尤文肉瘤VH-64细胞株增殖与凋亡的影响

目的观察小分子细胞周期蛋白激酶抑制剂Flavopiridol（FP）对人尤文肉瘤VH-64细胞株增殖与凋亡的影响,初步探讨FP对尤文肉瘤的体外抗肿瘤活性。方法将FP作用于VH-64细胞株,光学显微镜观察其形态变化,MTT法测定FP对VH-64细胞增殖的抑制率,流式细胞仪及DNA凝胶电泳法检测细胞凋亡, Western blot检测bcl-2、bax和caspase-8的蛋白表达变化。结果MTT实验显示,FP对VH-64细胞株增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖特点;琼脂糖凝胶电泳及流式细胞计数分析表明,FP可诱导细胞凋亡,并导致G0／G1期阻滞;免疫印迹检测显示,FP对bel-2及bax的表达无影响,但活性型caspase-8表达被上调。结论FP可诱导人尤文肉瘤VH-64细胞株凋亡,其作用不依赖于bcl-2／bax基因的变化,caspase-8路径的激活可能为其机制之一。     

人宫颈癌基因小干扰RNA抑制HepG2细胞生长的作用及其机制

目的 利用RNA干扰技术探讨人宫颈癌基因(HCCR)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法 构建表达HCCR小干扰RNA的真核表达质粒pRIV2-siHCCR,将其转染肝癌细胞株HepG2细胞,定量PCR、Westem blot检测HCCR及其相关基因的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖状态,流式细胞术观察细胞凋亡与细胞周期变化. 结果 成功构建真核表达质粒pRIV2-siHCCR,其表达的HCCR siRNA可有效抑制HepG2细胞内HCCR的表达,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加.Western blot结果显示HCCR小干扰RNA作用HepG2细胞后,细胞内P53蛋白的表达降低,P15蛋白的表达明显升高,而PTEN、P16、P27蛋白水平没有明显改变. 结论 HepG2细胞中HCCR蛋白下调后,细胞增殖受到抑制,凋亡细胞增多,其作用机制可能与蛋白质P53、P15有关.     

Nicotinamide prohibits proliferation and enhances chemosensitivity of pancreatic cancer cells through deregulating SIRT1 and Ras/Akt pathways

BackgroundNicotinamide (NAM), the precursor for the synthesis of NAD⁺ and also an inhibitor of SIRT1, has been discovered to inhibit some types of cancer. However, little is known about the effects of NAM on pancreatic cancer cells. Since previous research showed that SIRT1 and K-Ras/Akt signaling acted as a promoter in tumorigenesis of pancreatic cancer, our present research set out to explore whether NAM inhibits proliferation and facilitates chemosensitivity in pancreatic cancer cells as well as the potential mechanisms involving SIRT1 and K-Ras/Akt pathway.MethodsCell viability was assessed by MTT assay, and apoptosis and cell cycle were measured by flow cytometry. Cell invasive ability was evaluated by matrigel invasion assays. The activity of SIRT1 was measured by the Fluor de Lys deacetylation assay. Expression levels of SIRT1, K-Ras, Phosphated Akt (P-Akt, Ser-473) and Akt were measured using western blot. In vivo tumor growth was performed in pancreatic cancer cells xenografts.ResultsNAM inhibited the proliferation of pancreatic cancer cells in a dose-dependent manner, and significantly induced apoptosis and cell cycle arrest in G2/M phase. Moreover, NAM obviously restrained cell invasive ability and increased the chemosensitivity. NAM significantly inhibited the activity of SIRT1 and decreased expression of SIRT1, K-Ras and P-Akt. Further, NAM prohibited proliferation and enhanced GEM antitumor activity in vivo.ConclusionsOur results implied that NAM might be a potential therapeutic agent for human pancreatic cancer treatment through downregulating SIRT1, K-Ras and P-Akt expression.     

The inhibition effect and its molecular mechanism of human cervical cancer oncogene siRNA on hepatocarcinoma cells

OBJECTIVE: To evaluate the effect and the possible mechanism of HCCR siRNA on cell proliferation and apoptosis of hepatocarcinoma cells. METHODS: pRIV2-siHCCR plasmids, which express small interfering RNA of HCCR were constructed and transfected into HepG2 cells. The mRNA and protein expressions of HCCR were detected by real time PCR and Western blot. The proteins p15, p16, p27, p53, and PTEN were detected by Western blot. The cell proliferation and apoptosis were observed by MTT and FACS. RESULTS: The plasmid pRIV2-siHCCR was constructed successfully. Real time PCR and Western blot analysis showed that the HCCR siRNA effectively inhibited HCCR expression in HepG2 cells after pRIV2-siHCCR transfection. MTT method confirmed that HepG2 cell proliferation was suspended, while the cell apoptosis was increased much more than that in the control group. After the transfection with the plasmid of pRIV2-siHCCR into HepG2 cells, the expression of p53 protein was decreased, and P15 increased; and levels of PTEN, p16, and p27 were evidently not changed. CONCLUSION: After being transfected with HCCR siRNA expression plasmid, the cell proliferation of HepG2 was arrested, while the apoptosis of HepG2 cells increased. Our results demonstrate the potential role of p53 and p15 in HCCR signaling.     

喉癌组织中Mst1基因表达与喉癌的相关性及其对人Hep2细胞化疗敏感性的影响

目的探讨Mst1基因在喉癌发生、发展中的作用,并指导化疗用药。方法荧光定量PCR法检测74例喉癌及相应癌旁组织中Mst1 mRNA表达;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,实验组转染真核表达载体pcDNA3.1-Mst1,空白对照组未转染,阴性对照组转染空载体。Western blot法检测三组Mst1蛋白表达。三组细胞培养基中分别加入0、1、3、5μg/ml顺铂（DDP）进行干预,作用12 h,MTT法测定三组细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果喉癌组织中Mst1 mRNA表达明显低于癌旁组织;实验组Mst1蛋白表达、细胞凋亡率明显高于空白对照组及阴性对照组,细胞增殖活力明显低于空白对照组及阴性对照组;DDP干预后,随DDP浓度增加,实验组细胞凋亡率明显升高,增殖活力明显降低。结论喉癌发生与Mst1 mRNA表达降低相关,Mst1蛋白表达增加能抑制Hep2细胞增殖并促进凋亡,并可在一定程度上增强肿瘤细胞对DDP的敏感性,可将Mst1基因作为指导喉癌化疗用药的参考指标。