ZEB蛋白及其相关miRNA、LncRNA在卵巢癌上皮间质转化中的作用

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其侵袭、转移涉及上皮—间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT).锌指E盒结合同源异型盒(ZEB)是重要的细胞核转录因子之一,由锌指E盒结合同源异型盒-1(ZEB1)和锌指E-box结合盒-2(ZEB2)组成.ZEB蛋白是EMT的关键转录...     

Zeb1、CtBP1与E-cadherin在结肠腺癌中的表达及意义

目的：探讨转录抑制因子Zeb1、转录辅抑制因子CtBP1在结肠腺癌中的表达及与其靶基因E-cadherin的关系.方法：采用免疫组织化学染色方法检测结肠腺癌及癌旁组织中E-cadherin、Zeb1和CtBP1表达.结果：CtBP1在结肠腺癌组织及癌旁组织中表达阳性率分别为96.25％和100％,Zeb1分别为28.75％和0％,E-cadherin分别为32.50％和100％.E-cadherin表达和CtBP1表达不相关,而与Zeb1表达成负相关.结论：结肠腺癌中Zeb1与E-cadherin均表达异常;结肠腺癌中Zeb1异常表达可能是E-cadherin表达下调的机制.     

子宫内膜腺癌组织中p-mTOR和p-4EBP1蛋白的表达

子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤,以腺痛最常见,为女性生殖系统三大恶性肿瘤之一.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)具有蛋白激活酶的活性,与癌细胞的牛长密切相关,是细胞生长、分化的中心调控者[1].     

聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 检测聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)在子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜组织中的表达,并探讨PARP-1与E-cadeherin、vimentin和Snail在子宫内膜异位症患者内膜中表达的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测PARP-1、E-cadeherin、vimentin和Snail在子...     

PD-1/PD-L1在子宫内膜样腺癌发生、发展中的表达及其临床意义

目的 研究程序性死亡受体 -1 (PD-1)和程序性死亡配体 -1 (PD-L1)在子宫内膜样腺癌发生、发展过程中的表达及其临床意义.方法 收集30 例正常子宫内膜、30 例子宫内膜不典型增生以及90 例子宫内膜样腺癌标本,免疫组织化学法检测 PD-1 和 PD-L1 蛋白的表达,并分析其与患者临床病理特征的相关性.结...     

β—catenin、Glut-1和PTEN蛋白在子宫内膜样腺癌发生过程中的表达及意义

通过分析子宫上皮内瘤样病变（EIN）诊断、分类与子宫内膜增生WHO（2003）分类的关系,探讨β—catenin、Glut-1和PTEN蛋白在子宫内膜样腺癌发生过程中的表达及其意义,武汉大学中南医院妇瘤科的熊艳等根据EIN诊断及分类标准,对10例增殖期子宫内膜、83例子宫内膜增生及24例子宫内膜样腺癌组织中β-catenin、Glut-1及PTEN蛋白的表达进行了检测。     

E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义

目的探讨E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达并分析其临床意义。方法免疫组织化学En Vision法检测E2F1和P53蛋白在215例子宫内膜样腺癌和100例正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析二者与临床病理参数的关系。结果 E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达均高于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);E2F1表达与肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05);P53蛋白表达与FIGO分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤分级无关(P>0.05),E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达呈显著正相关性(P<0.05)。结论 E2F1和P53蛋白表达在子宫内膜样腺癌的发展过程中起着一定的协同作用,二者过度表达的患者预后较差,联合检测对判断患者预后是非常有用的指标。     

沉默ZEB1基因对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的影响

目的：探讨沉默锌指E盒结合同源框1（ZEB1）基因对胶质瘤U87细胞间质标志物表达和细胞迁移的作用,阐明ZEB1对胶质瘤细胞上皮-间质转化（EMT）的影响。方法：将构建的ZEB1短发夹RNA（shRNA）干扰质粒（shZEB1#1和shZEB1#2）和对照质粒（shCtrl）转染至胶质瘤U87细胞,Western blotting法检测干扰效果。将胶质瘤U87细胞分为对照组（转染shCtrl的胶质瘤U87细胞）、EMT组[转染shCtrl的胶质瘤U87细胞用转化生长因子β1（TGF-β1）诱导EMT]和ZEB1基因沉默组（转染shZEB1的胶质瘤U87细胞用TGF-β1诱导EMT）。Western blotting法检测各组细胞中间质标志物（N-钙黏蛋白和波形蛋白）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白表达水平,划痕愈合实验检测各组细胞的迁移率。结果： Western blotting法检测,转染shZEB1#1和shZEB1#2的胶质瘤U87细胞中ZEB1蛋白表达水平较转染shCtrl的细胞明显降低（P<0.05或P<0.01）,shZEB1#2对ZEB1表达的抑制效果更明显,表明ZEB1已稳定转染到U87细胞。与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞中N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）;与EMT组比较,ZEB1基因沉默组N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。EMT组细胞迁移率明显高于对照组（P<0.01）,而ZEB1基因沉默组细胞迁移率明显低于EMT组（P<0.01）。结论：沉默ZEB1基因表达可抑制胶质瘤U87细胞EMT,并降低细胞迁移能力,提示ZEB1可作为侵袭性胶质瘤治疗的重要靶标。     

EIN及不同病理学分级子宫内膜样腺癌中PTTG蛋白表达的研究

目的 探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)蛋白在子宫内膜增生组织、子宫内膜上皮内瘤样病变(EIN)及子宫内膜样腺癌中的表达、PTTG蛋白表达与EIN及子宫内膜样腺癌病理学分级的相关性.方法 回顾性研究手术切除的子宫内膜样腺癌标本、诊刮得到的子宫内膜增生和EIN标本共73例,其中子宫内膜增生13例,EIN 12例,48例子宫内膜样腺癌标本病理学分级为Ⅰ级19例、Ⅱ级16例、Ⅲ级13例.采用免疫组化SP法检测PTTG的表达情况.结果 PTTG蛋白在子宫内膜增生的组织中无表达,在子宫内膜上皮内肿瘤的组织中表达,在子宫内膜样腺癌组织中有明显表达,且随肿瘤病理级别的增高而增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 对PTTG蛋白表达进行研究有助于子宫内膜癌的早期诊断,PTTG蛋白表达与子宫内膜样腺癌的病理学分级密切相关,可以作为判断恶性程度的指标.     

ZEB1在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨ZEB1(zinc finger E-box binding protein 1,锌指结合蛋白1)在不同侵袭能力乳腺肿瘤组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化方法检测62例浸润性乳腺癌、14例导管原位癌、36例淋巴结转移癌、24例癌旁组织中ZEB1的表达,同时采用组织芯片方法检测了150例浸润性乳腺癌组织中ZEB1的表达。结果 ZEB1在乳腺浸润性癌、导管原位癌、淋巴结转移癌、癌旁组织中表达分别为17.7%、0、41.7%、4.2%。ZEB1的表达与年龄、肿瘤直径大小、ER、PR和Her2没有相关性,但在组织学类型及有淋巴结转移患者的癌组织中表达更高。浸润性小叶癌比浸润性导管癌ZEB1表达明显更高。生存分析显示ZEB1阳性组比ZEB1阴性组预后更差,生存率更低。结论 ZEB1可作为预测乳腺癌更具侵袭性和不良预后的生物标志之一,也可作为靶向治疗的潜在生物靶点。     

P73、CyclinD1在子宫内膜癌中的表达及其相关性研究

目的：探讨P73、CyclinD1在子宫内膜癌中的表达以及二者的相关性。方法：采用免疫组化SP法对14例正常增殖期子宫内膜、19例不典型增生内膜以及43例子宫内膜癌中P73、CyclinD1的表达进行研究。结果：在子宫内膜癌中,P73和CyclinD1的阳性表达率分别为69．77％和74．42％,明显高于不典型增生内膜（36．84％、52．63％）、正常增殖期子宫内膜（均7．14％）中的表达（P均〈O．01）。P73的表达随组织学分级的升高而增强（P〈0．05）,CyclinD1的表达随手术一病理分期的进展而增强（p〈0．01）,二者均随肌层浸润深度的增加、淋巴结的转移而表达增强（P均〈O．05）。在子宫内膜癌中,P73、CyclinD1表达呈正相关性（r=0．3923,P〈0．05）。结论：P73、CyclinD1在子宫内膜癌中均高表达,且具有正向协同作用,在子宫内膜癌的发生、发展中有重要意义。     

Glut-1和PCNA在子宫内膜癌及癌前病变中的表达和意义

目的探讨葡萄糖运转蛋白-1（Glut-1）和增殖细胞核抗原（PCNA）在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测20例正常增生期子宫内膜、25例子宫内膜单纯增生、25例子宫内膜不典型增生、40例子宫内膜腺癌组织中Glut-1和PCNA的表达。结果 Glut-1和PCNA在子宫内膜癌和不典型增生子宫内膜中的表达明显高于正常增生期子宫内膜,差异有统计学意义（P〈0.05）,进一步分析显示二者的高表达与子宫内膜癌的组织分化程度有关（P〈0.05）,而与临床分期无关（P〉0.05）,且二者在子宫内膜癌组织中的表达呈正相关（r=0.544,P〈0.05）。Glut-1在子宫内膜单纯增生和子宫内膜不典型增生中的表达差异有统计学意义（P〈0.05）,在高分化与低中分化子宫内膜癌中的表达差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论 Glut-1和PCNA的异常表达可能在子宫内膜的恶性转变和细胞分化中发挥着重要的作用,Glut-1可能有利于鉴别子宫内膜单纯增生与子宫内膜不典型增生、高分化与低中分化子宫内膜癌。     

缺氧条件下Netrin-1通过激活PI3K/AKT通路诱导宫颈癌细胞上皮-间质转化

目的 探讨缺氧条件下Netrin-1通过激活PI3K/AKT通路诱导宫颈癌细胞上皮-间质转化(EMT).方法 qPCR检测正常上皮细胞HaCaT及宫颈癌细胞系SiHa、Caski、Hela中Netrin-1的表达.二氧化钴处理模拟低氧微环境,通过Trans wall和细胞划痕实验观察SiHa、Caski、Hela细胞侵...     

微小RNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能分析

目的分析miRNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能影响。方法 Real-time PCR对正常肺支气管上皮细胞16HBE、肺癌细胞SK-MES-1、NCI-H520、A549及25例非小细胞癌癌旁组织与癌组织内miR-200a表达量检测,CCK-8法检测肺癌A549细胞增殖活性受miRNA-200a影响状况,生物信息学对miRNA-200a靶基因进行预测,双荧光素酶联合Western blot及Real-time PCR检验YAP1受miRNA-200a调控影响。CCK-8法检测肺癌549细胞受YAP1增殖影响。结果肺癌细胞株SK-MES-1、NCI-H520及A549内miR-200a表达量均低于正常细胞株16HBE,差异有统计学意义(P0.05)。miR-200a mimics组内A549细胞在48、72及96 h时其吸光度均低于Mimics-NC,差异有统计学意义(P0.05)。肺癌A549转染siRNA-NC或者siRNA-YAP1后,PCR检测显示siRNA-YAP1内YAP1 m RNA表达量为(0.37±0.06),siRNA-NC内YAP1 mRNA表达量为(1.03±0.07),差异有统计学意义(P0.05);Western blot显示siRNA-YAP1内YAP1蛋白表达量比siRNA-NC低;siRNA-YAP1内YAP1细胞吸光度在48、72及96 h时均低于siRNA-NC,差异有统计学意义(P0.05)。结论 miR-200a对肺癌细胞增殖的抑制作用主要是经过靶向作用YAP1基因来实现的,进而在肺癌内起到抑癌功能。     

活血消异方对子宫内膜异位大鼠内膜容受性及CXCL12/CXCR4信号通路的作用机制

目的 探究活血消异方对子宫内膜异位大鼠内膜容受性及CXCL12/CXCR4信号通路的作用机制。方法 将50只SPF级SD雌性大鼠按照数字随机法分为假手术组、模型组（子宫内膜异位症大鼠模型组）、中药组（子宫内膜异位症大鼠模型组给予活血消异方干预治疗组）、西药组（子宫内膜异位症大鼠模型组给予醋酸亮丙瑞林干预组）和拮抗剂组（子宫内膜异位症大鼠模型组给予AMD3100干预组）,每组10只（只在检测CXCL12和LXCR4蛋白表达中使用拮抗剂组干预）。ELISA检测4组大鼠性指标E2、P水平;HE染色比较4组大鼠子宫内膜组织病理学变化;LIF、αvβ3、CXCL12和CXCR4蛋白（Western blot检测）;CXCL12和CXCR4 mRNA表达（RT-PCR）。结果 与假手术组相比,模型组大鼠血清中性激素指标E2、P含量均显著降低（P<0.05）;与模型组相比,西药组和中药组血清中性激素指标E2、P含量均不同程度升高,且中药组E2、P含量升高的较为显著（P<0.05）。模型组大鼠子宫内膜中LIF、αvβ3蛋白表达明显低于假手术组（P<0.05）;干预后的西药组和中药组中的LIF、αvβ3蛋白表达明显升高,且中药组升高较为显著（P<0.05）。模型组CXCL12和CXCR4蛋白和相对表达量较假手术组明显升高（P<0.05）;干预后的西药组、中药组和拮抗组大鼠子宫内膜组织中CXCL12和CXCR4蛋白和相对表达均明显低于模型组,且中药组和拮抗组大鼠CXCL12和CXCR4蛋白和相对表达较西药组降低的更为显著（P<0.05）。结论 活血消异方对子宫内膜异位症大鼠子宫内膜容受性进行有效的改善,同时可抑制子宫内膜异位症大鼠CXCL12、CXCR4表达。     

TGF-β1对人舌鳞状细胞癌上皮-间质转化的诱导作用及其对PI3K/AKT信号通路的影响

目的: 研究转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人舌鳞状细胞癌(鳞癌)细胞上皮-间质转化(EMT)的作用,并探讨其对PI3K/AKT信号通路的影响。方法: 体外培养的舌鳞癌细胞SCC9和CAL27分为对照组和不同浓度TGF-β1(5和10 μg·L^-1)组,TGF-β1刺激24 h后,光学显微镜下观察各组细胞形态学,细胞免疫荧光实验检测细胞中间质相关标记蛋白Vimentin和上皮相关标记蛋白E-cadherin的表达,Western blotting法检测细胞中AKT和p-AKT的表达。结果: 与对照组比较,TGF-β1组舌鳞癌SCC9和CAL27细胞形态从多边形上皮样结构、成簇生长、细胞之间连接紧密状态变为单个分散的长梭形细胞,细胞间连接消失,呈现间质细胞表型。与对照组比较,TGF-β1组SCC9和CAL27细胞中Vimentin表达强度升高,E-cadherin 表达降低;与对照组比较,TGF-β1组SCC9和CAL27细胞中p-AKT表达强度降低。结论: TGF-β1可诱导舌鳞癌细胞发生EMT,并影响PI3K/AKT信号通路。     

Wnt5a/Dvl2/Rac1信号通路调控MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移

目的:探讨Wnt5a信号通路调控MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移的分子机制?方法:在建立了划痕实验检测MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移模型的基础上,研究Wnt5a/Dvl2/Rac1信号通路对MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移的调控?结果:高表达的Rac1可促进MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移,干扰Rac1的表达可显著降低其迁移,Rac1活性受Wnt5a/Dvl2信号通路的调控?结论:Wnt5a/Dvl2/Rac1信号通路可调控MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移,此为深入阐明乳腺癌细胞转移的分子调控机制提供了新线索?     

HMGB1/TLRs 信号通路在大鼠机械通气肺损伤中的作用

目的：探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体(TLRs)信号通路在大鼠机械通气肺损伤(VILI)中的作用机制。方法32只健康SD大鼠随机分为4组：正常对照组( N组)不行机械通气,保留自主呼吸;高氧流量组( HN组)氧流量7 L/min;小潮气量机械通气组( LV组)潮气量7 ml/kg;大潮气量机械通气组( HV组)潮气量30 ml/kg。通气4 h后处死动物取肺组织,HE染色观察各组肺组织损伤情况,检测支气管肺泡灌洗液( BALF)中白细胞( WBC)计数、肺湿重干重比值( W/D);ELISA法检测BALF中IL-6、TNF-α、HMGB1水平;Western blot法检测肺组织HMGB1、TLR2、TLR4蛋白的表达。应用单因素方差分析及两样本均数t检验进行不同组间的比较。结果与N组相比,HV组及HN组大鼠肺W/D, BALF中WBC计数,BALF中HMGB1、TNF-α、IL-6水平以及HMGB1、TLR2、TLR4蛋白表达均显著增加,差异有统计学意义(P<0．05);LV组上述各指标与N组相比差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气及高氧流量通气均可引起大鼠肺组织急性炎症反应,其机制可能与HMGB1/TLRs信号通路激活有关。