盐酸纳洛酮对大鼠脑神经损伤保护作用要机制的研究

目的 研究纳洛酮对脑神经损伤后神经细胞培养中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的测定,探讨纳洛酮对神经保护作用的机制.方法 大鼠脑神经细胞培养种α的水平,观察损伤后不同时间段不同组TNF-α含量变化.结果 TNF-α在损伤后2h开如升高,12h达到高峰,随后有所降低,至24h趋于平缓.纳各酮治疗组神给细胞2h开如升高,12h达到高峰,随后有所降低,至24h趋于平缓.纳各酮治疗组神给细胞损伤后12h、24h、48h、72hTNF-α的水平与损伤组比较有差异(P<0.05).结论 纳洛酮能够通过降低TNF-α的含量起到神经保护作用.     

纳洛酮对大鼠酒精性脂肪肝的作用及机制探讨

目的探讨纳洛酮对大鼠酒精性脂肪肝的作用及其可能机制。方法48只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为酒精性脂肪肝模型组、低剂量药物组、高剂量药物组和正常对照组。第4周末,处死所有大鼠,分别检测血液和组织中超氧化物歧化酶（SODJ、丙二醛（MDA）和β-内啡肽（β-EP）含量,同时用免疫组织化学方法检测β-EP和肿瘤坏死因子α（（TNF—α）在肝组织中的分布,并行肝脏病理组织学检查。结果与模型组相比,其他3组MDA和β-EP含量明显降低（均P〈0．01）,β-EP阳性细胞数和TNF—α阳性细胞数明显减少（均P〈0．01）,SOD含量明显上升（均P〈0．01）,且3组比较,差异也有统计学意义（均P〈0.01）;病理检查发现处理组肝脏脂肪变程度明显减轻。免疫组织化学染色发现β-EP阳性细胞和TNF-α阳性细胞在肝内的数量和分布与脂肪变性程度和区域一致。结论纳洛酮可通过降低血浆和组织中β-EP水平,升高血浆和组织中SOD含量,抗脂质过氧化而有效防治酒精性脂肪肝形成,且呈量效关系。     

麻花秦艽对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用

目的 探讨麻花秦艽对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用.方法 将60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、中药时照组、西药对照组及麻花秦艽低剂量组和高剂量组.观察、检测各组急性胃黏膜损伤模型大鼠的胃黏膜溃疡指数(UI)及血清TNF-α水平,并行病理学观察.结果 麻花秦艽低、高剂量组大鼠胃黏膜损伤程度均轻于模型组,UI指数与TNF-α水平显著低于模型组(P ＜0.05或P＜0.01).结论 麻花秦艽对急性胃黏膜损伤模型大鼠的胃黏膜组织有保护作用.     

秋水仙碱对大鼠急性胰腺炎的作用及其机制研究

目的 观察秋水仙碱对急性胰腺炎（AP）的作用,并探讨相关机制。方法 将30只AP大鼠随机分为模型组、低剂量组和高剂量组,每组10只。另取10只大鼠仅开腹,翻动胰腺,关腹,不做其他处理,设为对照组。低、高剂量组分别舌下静脉注射秋水仙碱2、4 mg/kg,对照组、模型组均舌下静脉注射等体积0.1%二甲基亚砜溶液,1次/d,连续5 d。采用酶联免疫吸附试验检测血清炎症因子水平;苏木精-伊红染色观察胰腺组织病理变化;Western blotting检测胰腺组织肿瘤坏死因子受体-1(TNF-R1)、TNFR1相关的死亡区域蛋白（TRADD）、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组、低剂量组、高剂量组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛（MDA）、降钙素基因相关肽（CGRP）水平、病理评分及TNF-R1、TRADD、RIP1蛋白相对表达量升高（P <0.05）;与模型组比较,低剂量组、高剂量组血清IL-6、TNF-α、MDA、CGRP水平、病理评分及TNF-R1、TRADD、RIP1蛋白相对表达量降低（P <0.05）...     

缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的探讨

目的:探讨缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为三组,分别为假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺血预处理组。各组采用Zea-longa等的大脑中动脉线栓法并加以改进,制备缺血预处理及缺血再灌注损伤实验动物模型。比较各组神经功能缺失评分、脑梗死体积、血清NSE含量及脑组织IL-1β和TNF-α含量。结果:脑缺血预处理可使神经功能缺损减轻、脑梗死体积缩小、血清NSE含量降低,脑组织IL-1β和TNF-α含量降低。结论:缺血预处理可诱导脑缺血耐受作用的产生,下调脑组织再灌注损伤时IL-1β和TNF-α的表达,对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

TNF-α单克隆抗体对梗阻性黄疸大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在梗阻性黄疸大鼠肾损伤中的作用及抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体（anti-TNF-αMcAb）的保护作用。方法将雄性SD大鼠24只随机分为胆总管结扎组（BDL）、胆总管结扎＋抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体治疗组（BDL＋anti-TNF-αMcAb）、假手术组（SO）。BDL组和BDL＋anti-TNF-αMcAb组均作胆总管结扎复制梗阻性黄疸模型,假手术组（SO）仅麻醉、开腹而不结扎胆总管。BDL＋anti-TNF-αMcAb治疗组于胆总管结扎第3天开始经尾静脉注射anti-TNF-αMcAb（1mg/kg）,连用5d;BDL组和SO组以同样的方法注射等量的生理盐水。分别检测各组大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和TNF-α水平,并在光镜和电镜下观察各组大鼠肾组织的病理变化。结果 BDL组及BDL＋anti-TNF-αMcAb组大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和TNF-α水平高于假手术组（SO）,P〈0.05。但BDL＋anti-TNF-αMcAb组增高的程度低于BDL组（P〈0.05）,并且肾组织病理改变也较轻。SO组肾组织无明显病理改变。结论 TNF-α可能是梗阻性黄疸时肾损伤的重要介导因子,使用抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体,可以减轻实验鼠梗阻性黄疸时的肾损伤。     

脑宁康颗粒对大鼠脑出血后炎性损伤保护作用的研究

目的观察清热解毒法拟定制成的脑宁康颗粒对大鼠脑出血后炎性反应因子:血浆细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响,以探讨清热解毒法治疗脑出血的作用机制。方法实验大鼠随机分为假手术3d、7d组,模型3d、7d组,清热解毒3d、7d组,采用胶原酶Ⅶ诱导大鼠脑出血模型,术后2h,清热解毒3d、7d组给予脑宁康颗粒(2.4mg/kg)灌胃,另4组给予等量生理盐水,连续用药(1次/日),分别在3、7d后取血,应用酶联免疫吸附法和放射免疫分析法测定血浆ICAM-1、TNF-α含量。结果与假手术组比较,模型组血浆ICAM-1和TNF-α含量均明显升高(P<0.01),与模型组比较,清热解毒组血浆ICAM-1和TNF-α含量均明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论清热解毒法对脑出血后神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与减少ICAM-1和TNF-α的产生,抑制炎症反应有关。      

ω-3多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠心肌损伤保护作用的实验研究

目的研究ω-3多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠心脏功能保护作用的机理。方法清洁级成年SD大鼠72只,随机分成3组:正常对照组(A组,共8只),20%中长链脂肪酸对照组(B组,共32只),10%ω-3多不饱和脂肪酸治疗组(C组,共32只)。采用大鼠30%TBSAⅢ度烫伤模型,A组大鼠经尾静脉注射生理盐水2 mL·kg-1·d-1,B组每天定时经尾静脉注射20%中长链脂肪乳,1 mL·kg-1·d-1,C组在相同时间点经尾静脉注射与B组等氮等热量的10%ω-3多不饱和脂肪酸(尤文),2 mL·kg-1·d-1。分别检测伤前(A组)以及伤后1 d、4 d、7 d、10 d四个时相点大鼠血清中TNF-α、肌钙蛋白I(cTnI)的水平,免疫组织化学染色法观察心肌组织中NF-κBp65的表达水平。结果 B、C两组大鼠血清TNF-α水平在伤后各时相点均显著高于A组(P0.05);C组血清TNF-α水平低于B组,在伤后4 d、7 d、10 d与B组相比较差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示:与A组相比,B、C两组心肌组织NF-κBp65表达增强;与B组相比,C组心肌组织NF-κBp65表达减弱(P0.05)。B、C两组血清中cTnI水平在伤后各时相均显著高于A组(P0.05);在伤后1 d、4 d、7 d、10 d,C组cTnI水平明显低于B组(P0.05)。结论 NF-κBp参与了烧伤后由炎症所致的心肌细胞损伤过程;ω-3 PUFAs可能通过抑制NF-κB信号通路的激活,减少各种炎症介质的产生,进而对严重烧伤后大鼠心肌起到保护作用。     

金路捷对大鼠脑神经细胞损伤的保护作用

目的建立体外培养大鼠脑神经细胞损伤模型,测定损伤前后不同时间LDH的水平,研究金路捷对脑皮质神经元的保护作用机制。方法原代培养新生Wistar大鼠的脑皮质神经细胞,建立体外脑神经损伤模型,通过测定神经细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)的含量变化观察模型对神经细胞的损伤作用。结果损伤组与对照组神经细胞损伤后LDH值比较差异均有显著性(P<0.05),证明损伤模型确实有效;本实验表明治疗组神经元LDH的水平与损伤组比较有差异(P<0.05),证明金路捷能够起神经元保护作用。结论损伤模型损伤前后各时间点LDH活力损伤组与对照组比较,表明本实验应用的损伤模型确实使细胞损伤。     

番茄红素对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨番茄红素对肠缺血再灌注大鼠肠黏膜的保护作用及机制.方法 健康清洁级SD大鼠48只按随机数字表法分为番茄红素组、缺血再灌注组、假手术组,每组16只.番茄红素组予以番茄红素10 mg/kg连续灌胃5d,缺血再灌注组和假手术组灌胃相同剂量生理盐水.各组大鼠分离肠系膜上动脉,番茄红素组和缺血再灌注组以血管夹夹闭肠系膜上动脉1h,再灌注4h后,各组大鼠采集腹主动脉血和回肠标本,测定血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,小肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)与白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)的含量,以及小肠组织病理学Chiu's评分.结果 番茄红素组小肠组织病理学Chiu's评分明显低于缺血再灌注组(P＜0.01),但与假手术组相比差异仍有统计学意义(P＜0.01).番茄红素组小肠组织TNF-α、IL-6、MPO及血清SOD、DAO和MDA明显优于缺血再灌组(P＜0.01),而小肠组织TNF-α、IL-6、MPO及血清DAO、SOD、MDA与假手术组比较差异仍有统计学意义(P＜0.01).结论 番茄红素预处理能有效抑制肠缺血再灌注后的氧化应激反应及炎症反应,减轻小肠缺血再灌注损伤.     

神经再生素对大鼠大脑皮层细胞的作用

目的：观察神经再生素(NRF)作用于离体培养的SD大鼠大脑皮层细胞过程中细胞活性、基因的表达变化,探讨MRF促神经生长机制。方法：SD大鼠大脑皮层细胞分离、培养于含NRF L15培养基,采用RT-PCR方法检测培养细胞生长相关蛋白43(GAP-43)、神经丝蛋白(NF-L)和锌指样蛋白(DDP2)基因经NRF作用后基因表达变化,MTT法检测细胞活力。结果：2μg/ml NRF作用于培养大脑皮层细胞为较佳使用浓度;NRF作用6～12h,GAP—43、NF-L和DDP2基因表达分别上调至峰值200％,150％,135％;NRF作用24h后,基因表达回复至正常值,而细胞活力仍上调23．2％。结论：NRF可通过上调神经生长相关基因表达,提高细胞活力达到促神经生长。     

64例进展型脑梗死纳洛酮治疗临床分析

目的:探讨盐酸纳洛酮对进展型脑梗死的临床疗效。方法:选择128例进展型脑梗死患者分为两组,其中64例应用纳洛酮,64例对照组应用胞二磷胆碱,疗程15d,治疗前后分别行神经功能缺损评分,疗程结束后行临床疗效评定。结果:治疗组治疗后神经功能缺损评分较对照组改善明显,临床疗效优于对照组,治疗中未出现明显不良反应。结论:纳洛酮治疗急性进展型脑梗死能有效抑制梗死区扩大及防止病灶进展,起效快,疗效好且无不良反应。     

甘草酸二铵对缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的影响

目的：观察甘草酸二铵（dammonii glycyrrhizinatis,DG)对局灶性脑缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的防治作用，并探讨其神经保护作用的机制。方法：雄性witar大鼠分为3组，假手术组（sham组），缺血再灌注组（IR组），给药组（DG组），采用大脑中动脉栓塞模型（MCAO），缺血2h再灌注12h，24h后，分别观察脑组织超微结构，脑神经细胞凋亡情况，结果：与IR组相比，DG组脑组织病理损害明显减轻，神经细胞凋亡减少。结论：DG可明显抑制局灶性脑缺血－再灌注所诱导的脑神经细胞凋亡，起到一定的社会保护作用。     

NGF和bFGF联合治疗大鼠坐骨神经损伤的实验研究

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor，NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFCF)联合应用对大鼠坐骨神经损伤的治疗作用，为周围神经损伤的临床治疗提供实验依据。方法96只Wistar大鼠随机分为生理盐水组、NGF组、bFGF组和NGF bFGF组，将大鼠坐骨神经手术造成5mm缺损后用2．Omm内径、1．Ocm长的硅胶管桥接，术中硅胶管中局部滴加药物、术后大鼠小腿肌内注射药物1日1次(10ng/100g）体重)，术后3、6、9、12周行大体观察、坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index，SFI)、运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity，MCV)，神经肌肉动作电位幅值(muscle evoked action potential，MAP)和再生轴突计数检查。结果各组大鼠硅胶管中3周时已有不同程度的神经组织再生。计量分析表明，NGF组、bFGF组SFI、MCV、MAP、再生轴突数优于NS组，NGF bFGF组SFI、MCV、MAP和再生轴突计数结果显高于其余各组，差异有显性。结论NGF。和bFGF联合应用对大鼠坐骨神经损伤的促修复作用优于单独使用NGF或bFGF。     

神经生长因子对大鼠小脑皮质神经细胞缺氧、缺糖损伤的保护作用

目的　探讨神经生长因子 (NGF)对小脑皮质神经细胞缺氧、缺糖损伤的影响。方法　采用含 0 5mmol·L-1连二亚硫酸钠 (Na2 S2 O4)的无糖Earle’s液复制小脑皮质神经细胞缺氧、缺糖损伤模型 ,通过形态学观察、MTT法和LDH活性的测定研究NGF对小脑皮质神经细胞的保护作用。结果　NGF (5 0 ,10 0 μg·L-1)组小脑皮质神经细胞形态损伤明显减轻 ,细胞存活率升高 ,培养液中LDH含量明显下降。结论　NGF对缺氧、缺糖引起的小脑皮质神经细胞损伤具有保护作用。     

胆碱能抗炎通路对感染性休克大鼠肺的保护作用

目的:应用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立感染性休克模型,研究胆碱能抗炎通路对感染性休克大鼠肺的保护作用。方法:采用CLP复制感染性休克模型,取成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组。①假CLP组(Sham);②CLP组(CLP);③迷走神经切断组(VGX);④迷走神经电刺激组(STM)。各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压。刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻持续电刺激(5V、2ms和1Hz)20min。分别在各组模型制备完毕或电刺激后0,1,2,4h检测血浆TNF-α含量和4h抽动脉血行血气分析、取肺组织在透射电镜下观察肺组织超微结构变化。结果:CLP组和VGX组平均动脉血压进行性下降,STM组血压下降幅度减轻,各时间点均显著高于CLP组相应的血压值。各组动物血浆TNF-α含量均在2h出现高峰,并在4h回落。STM组1h和2h与CLP组比较,血浆TNF-α含量则显著降低。4h取颈动脉血行血气分析,CLP组和VGX组血气分析pH值、PaO2和BE显著下降(P<0.01),明显低于假CLP组和STM组(P<0.05),表明CLP组和VGX组肺功能有明显损伤,STM组肺功能有明显改善。肺组织超微结构CLP组在电镜下可见肺泡Ⅱ型上皮细胞轻度增生,肺气血屏障的中间带增厚,部分线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化。STM组病理变化明显减轻。结论:电刺激迷走神经减轻肺损伤的机制与迷走神经兴奋释放大量神经递质乙酰胆碱有关。电刺激迷走神经兴奋后,其末梢释放大量乙酰胆碱,与存在于单核巨噬细胞上的乙酰胆碱受体α7亚单位结合后,阻止单核巨噬细胞TNF-α合成,从而减轻肺脏等脏器的炎性损害。电刺激迷走神经通过胆碱能抗炎通路能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降,降低血清TNF-α含量,减轻急性肺功能损伤和肺组织病理损害,对肺有潜在的保护作用。     

金尔伦治疗重型颅脑创伤的临床观察

目的 :探讨应用金尔伦 (盐酸纳洛酮 )治疗重型颅脑创伤的临床疗效。方法 :72例重型颅脑创伤患者 (GCS 3分～ 8分 )随机分为金尔伦治疗组和对照组。观察治疗 1W后生命体征、颅内压、意识觉醒、GCS评分变化和 3个月后GOS评分。结果 :金尔伦组 1W后呼吸循环较快恢复稳定 ,颅内压显著升高者明显少于对照组 ,意识清醒率及GCS升高幅度明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。金尔伦组伤后 3个月恢复良好率显著高于对照组 ,重残率明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 :金尔伦能拮抗颅脑创伤后内源性阿片肽引起的应激性反应 ,缩短昏迷时间 ,降低伤残率 ,促进神经功能恢复 ,改善预后。     

大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期的基因表达变化

目的:探讨Wallerian溃变早期激活神经损伤修复与再生的分子机制。方法:建立大鼠损伤坐骨神经模型,通过表达谱基因芯片和生物信息学方法,全面系统分析大鼠坐骨神经损伤后远端Wallerian溃变早期的基因表达变化,运用RT-PCR、Western Blot和Immunohistochemistry等方法验证和鉴定表达谱基因芯片分析结果。结果:大鼠坐骨神经损伤后,坐骨神经远端在Wallerian溃变早期即有1546个显著表达差异基因和21种显著性差异基因表达趋势;基因功能注释和信号通路分析显示,Wallerian溃变早期有58种信号通路被激活,形成Wallerian溃变早期的信号调控网络。结论:大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期即有大量基因的表达变化和多种信号途径的激活,本研究可为神经损伤修复与再生提供理论基础。     

自体深筋膜包裹神经断端治疗周围神经损伤

目的 :寻找一种治疗周围神经损伤的新方法。方法 :对 76例 91条神经损伤的病例分别采用自体深筋膜包裹神经断端和神经外膜缝合的方法进行修复 ,并对其治疗结果进行观察与分析。结果 :应用自体深筋膜包裹神经断端方法修复的周围神经 ,功能恢复良好 ,优良率为 87.1 %;神经外膜缝合方法修复的周围神经优良率为 75 .7%,两种方法优良率比较差异有显著性 ( P<0 .0 5 )。结论 :采用自体深筋膜包裹神经断端修复周围神经损伤疗效满意