USP24基因多态性与中国北方散发性帕金森病相关性

目的探讨泛素-特异蛋白酶24（USP24）基因多态性与散发性帕金森病（PD）的相关性。方法采用病例一对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对中国北方地区汉族人群207例散发性PD病人和218名健康对照者（对照组）的USP24基因rs487230多态性位点进行研究,并比较其在PD病人和正常对照人群中的频率分布。结果PD组和对照组USP24基因rs487230的等位基因分布、各基因型频率差异均无显著（P〉O．05）。结论中国北方汉族人群中USP24 rs487230c〉T基因多态性与PD发病不相关。     

新疆阜康牧区哈萨克族原发性高血压人群NEDD4L基因变异位点筛查

目的筛查新疆阜康牧区哈萨克族原发性高血压人群NEDD4L基因变异位点。方法随机选择94例30~60岁高血压患者,利用美国AB I公司3100xl基因分析仪对NEDD4L编码区31个外显子、部分内含子以及转录起始点上游约500bp范围内的区域直接测序筛查该基因变异位点;并采用SNPalyzer软件分析变异位点间的连锁不平衡关系。结果共检出11个变异位点,除了位于第6内含子区的271420T>C(rs2288774)、271454A>G(rs2288775)变异与NCB I数据库中报道一致外,其余9个均为新发现的变异位点;在筛查出的11个变异位点中,rs2288774、rs2288775和296921-3delTTG为高频率SNPs,其余为低频率SNPs或稀有突变,没有发现错义突变;11个变异位点无连锁不平衡关系(r2<0.5)。结论本研究共检出11个变异位点,其中9个为新发现变异位点,没有发现错义突变,这种高度保守性说明NEDD4L在维持机体正常生理功能的过程中可能起着至关重要的作用。     

非小细胞肺癌中表皮生长因子受体基因突变的筛查

目的检测非小细胞肺癌患者的表皮生长因子受体(EGFR)基因外显子的突变情况。方法收集24例肺腺癌和25例肺鳞癌手术标本,抽提组织DNA,对EGFR基因的1-28号外显子进行扩增并测序,筛查EGFR基因的突变。结果在8例肺腺癌患者中检出EGFR突变,在肺鳞癌患者中未检测到突变。检测到的突变位点位于19-21号外显子内,且均为非吸烟患者,占非吸烟肺腺癌患者的61.5%(8/13)。结论 EGFR基因突变在非吸烟的肺腺癌患者具有较高的发生率,突变主要集中发生于19-21号外显子。     

山东临沂地区RhD阴性无偿献血人群中RHD基因变异体的分析

目的 探讨临沂地区RhD阴性无偿献血人群RHD基因的变异体及其分子背景。方法 2011年采集24875人份全血,获得RhD初筛阴性标本111例,提取DNA后,采用序列特异性引物-多聚酶链反应(SSP PCR),进行以下三步实验：① 检测出缺失RHD基因的RhD阴性、DEL1227G＞A突变以及其他变异体;② 鉴定其他变异体的具体类型;③ 对有突变位点未检出型别的变异体进行测序。结果 临沂地区无偿献血人群中RhD阴性比例为0.45%,在111例RhD初筛阴性标本中,检测到1～10外显子全缺失76例,2～9外显子缺失9例,845G＞A突变3例,3～6外显子缺失3例,1227G＞A 突变18例,RHD(711DELC) 1例,Dva(Hus)1例。结论 临沂地区常规血清学筛查RhD阴性无偿献血人群中RHD基因存在多态性。     

家族性帕金森病Parkin基因外显子缺失突变

目的: 研究Parkin基因外显子缺失突变与中国家族性帕金森病(PD)发病的关系,探讨Parkin基因缺失突变在家族性PD发病机制中的作用及与临床特点、手术疗效之间的关系.方法: 家族性PD患者36例为研究对象,正常人20例作为对照,提取外周血白细胞基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳检测Parkin基因外显子4,6,7,10缺失情况,观察外显子的缺失分布及缺失率,并结合PD患者的手术疗效分析.结果: 家族性PD患者36例有10例外显子缺失突变,其中外显子4缺失8例,6和7缺失各1例,缺失突变率为27.8%,外显子10未发现异常,对照组中无缺失突变;有外显子缺失突变患者的手术疗效较好.结论: Parkin基因外显子4,6,7缺失突变是我国家族性PD的致病原因之一,PD患者的手术效果与Parkin基因外显子缺失突变与否有关.     

广西地区帕金森病患者Parkin基因外显子缺失的研究

目的:研究Parkin基因1～12号外显子缺失突变与广西地区帕金森病(Parkinson Disease,PD)发病的关系.方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增29例临床确诊为早发性帕金森病(EOPD)和34例临床确诊为晚发性帕金森病(LOPD)的患者的Parkin基因1～12号外显子;用琼脂糖凝胶电泳检测Parkin基因1～12号外显子缺失突变.结果:未检测到Parkin基因1～12号外显子缺失突变.结论:未发现Parkin基因外显子缺失突变与PD发病有明显相关关系.     

聚合酶链反应-单链构象多态性分析Kallmann综合征的基因突变

目的 检测Kallmann综合征位于X染色体p22.3基因KAL-1外显子的突变.方法 KAL-1基因外显子突变应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析.结果 5例Kallmann综合征患者KAL-1基因外显子突变情况,发现2例KAL-1基因外显子5～10缺失.结论 Kallmann综合征可能存在KAL-1基因外显子的缺失.     

应用变性高效液相色谱技术筛查一个正常血钾性周期性麻痹家系的SCN4A基因突变

目的 应用变性高效液相色谱(DHPLC)技术筛查一发生Met1592Val替换的正常血钾性周期性麻痹(normoKPP)家系的SCN4A基因,证实该突变为疾病相关突变,并总结其在此家系的临床表型特点。方法 总结一normoKPP家系14例患者的临床特点,应用DHPLC技术筛查SCN4A基因全部24个外显子,并对发现异常洗脱峰者进行测序。结果 该家系具有典型的normoKPP临床特征,无肌强直表现及早显、性别偏移现象,病程呈良性过程,发病早晚与症状严重程度及预后无相关。DHPLC筛查发现在外显子1及24存在杂合二倍体,测序及连锁分析证实位于外显子1的突变为良性多态性,外显子24的Met1592Val替换为疾病相关突变。结论 国人存在Met1592Val突变,此突变可导致normoKPP。normoKPP与高钾性周期性麻痹临床表现相似,两者可存在共同突变。     

先天性肾病综合征1例报告及文献复习

目的 探讨先天性肾病综合征患儿的基因突变情况及其临床特点.方法 分析1例先天性肾病综合征患儿及其父母的临床资料并进行文献复习.取静脉血4 ml,提取基因组DNA,行NPHS1、NPHS2基因检测.结果 患儿血、尿巨细胞病毒(CMV)全项检测均阳性,规律足量抗病毒治疗未见改善,患儿有逐渐加重的重度低蛋白血症及重度水肿,在患儿基因检测中发现了NPHS1的G928A(D310)的杂合突变,发现2种碱基变异,E117K(rs3814995),IVS18,+5G＞A,经比对第1种为单核苷酸多态性,第2种突变为位于内含子的变异(IVS18,+5G＞A)尚未见报道.其父亲、母亲尿检正常,父亲基因检测没有第8外显子G928A (D310)突变,但存在两种碱基变异,E117K (rs3814995),(IVS18,+5G＞A).母亲基因检测结果有第8外显子G928A(D310)的杂合突变,及1种碱基变异,E117K(rs3814995).结论 先天性肾病综合征婴儿存在NPHS1基因突变,当患儿同时存在CMV感染并且抗病毒治疗未见改善时,需进一步行基因检测明确.     

DRD2基因多态性与帕金森病的相关性分析

目的:分析帕金森病(Parkinson's Disease,PD)患者DRD2(dopamine receptor D2)基因的rs6276和rs6275位点多态性,探索DRD2基因多态性与散发型PD易感性的关联。方法:纳入77例PD患者和54例健康对照作为研究对象,对两组受试者DRD2基因位点rs6276和rs6275的基因型及等位基因频率进行统计分析,分析其与PD患病之间的关联性。结果:⑴rs6276和rs6275位点突变同步,共有3种基因型(AACC、AGCT、GGTT),其中基因型AACC、GGTT在病例组与对照组间有差异(分别为χ2=7.755,P=0.005;χ2=5.139,P=0.023)。与PD易感性之间的线性关联系数为9.252,P=0.002;⑵rs6276和rs6275位点等位基因频率(A/G、C/T)与PD易感性有关(χ2=10. 488,P=0.001);⑶将性别和年龄作为协变量进行调整后,基因型AGCT的OR值上调(2.233～2.659,P=0.002),基因型GGTT的OR值上调(3.558～3.731,P=0.000)。结论:rs6276和rs6275变异与PD易感性存在关联,rs6276和rs6275突变型是PD患病的危险因素。     

Gene polymorphism of alpha-2 macroglobulin in patients with Parkinson''''s disease

Parkinson' s disease(PD) is one of the com-mon neurodegenerative disorders in the aged popu-lation,which is thought to be for the environmen-tal factors acting on predisposed individuals ingene. The typical pathologic manifestation of PDis the presence of Lewy body (LB) in substantianigra dopaminergic neurons. As the major compo-nent of LB is protein, those genes involved in pro-tein aggregation may also be the candidate genes ofPD. Biochemical studies showed that α2-macroglobulin (A2M) …     

帕金森病患者Parkin基因缺失突变的初步研究

为观察中国不同亚型帕金森病 (Parkinson's disease,PD)患者的 parkin基因外显子 2～ 10的缺失分布 ,并探讨 parkin基因在 PD发病机制中的可能作用 ,对 6 3例 PD患者进行了观察。根据起病年龄将 6 3例患者分为早发性 PD组和晚发性 PD组。以提取的基因组 DNA为模板 ,扩增 parkin基因 2～ 10号外显子 ,然后行琼脂糖凝胶电泳 ,观察外显子缺失分布。在 6 3例 PD患者中发现外显子 2、 4缺失各 1例 ,外显子 3缺失 2例 ,这些缺失均出现于早发性 PD组。结果表明 :parkin基因外显子缺失是我国早发性 PD患者的致病原因之一。     

冠心病患者外周血中lncRNA-ANRIL的表达水平及其临床意义

目的:研究冠心病患者外周血中lncRNA-ANRIL的表达水平及其临床意义。方法:选取2016年2月-2018年2月于本院心内科住院的冠心病病人231人作为冠心病组,此外纳入447名健康自愿者作为对照组,取两组病人外周血,RtPCR法测定外周血中lncRNA-ANRIL的表达及9p21基因区域3种单核苷酸:rs1333049、rs564398、rs2811712以及CDKN2A、CDKN2B的相对表达量,分析各变量的相关性,分析ANRIL的表达于冠心病诊断中的敏感性与特异性。结果:ROC曲线示:ANRIL（外显子1-2）、ANRIL（外显子17-18）在诊断冠心病方面均具有统计学意义（均P＜0.01）;lnc RNA-ANRIL（外显子1-2）与CDKN2A、CDKN2B表达均呈正相关（均P＜0.05）,lncRNA-ANRIL(外显子17-18)与CDKN2A的表达呈正相关（P＜0.000 1）。冠心病组单核苷酸rs1333049等位基因G显著低于对照组（P＜0.05）;冠心病组rs133049等位基因G与ANRIL(外显子1-2)、ANRIL（外显子17-18）的表达均呈正相关（r=0.340 2/0.312 4,均P＜0.05）;冠心病组ANRIL(外显子1-2)与ANRIL（外显子17-18）的相对表达量均明显小于对照组（均P＜0.01）,结论:ANRIL可能通过调控CDKN2A/B的表达影响冠心病的发生发展,ANRIL的表达可能受染色体9p21区域单核苷酸rs1333049表达的影响,外周血ANRIL的表达可以作为早期诊断冠心病的特异性指标。     

泛素特异性蛋白酶39 在非小细胞肺癌中的表达 及其对细胞增殖的影响

目的 检测泛素特异性蛋白酶39（USP39）在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达情况,并分析 USP39 的表达水平与85 例非小细胞肺癌患者的临床病理特征的相关性,及USP39 对非小细胞肺癌细胞系增殖、 凋亡和周期的影响。方法 利用免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌石蜡组织标本中USP39 蛋白的表达情况, 分析非小细胞肺癌组织及癌旁组织中USP39 的表达差异,利用Spearman 秩相关分析USP39 与非小细胞肺癌患 者临床病理特征的相关性,利用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测非小细胞肺癌细胞系及支气管上 皮样细胞系中USP39 的表达,利用CCK-8 实验检测USP39 对非小细胞肺癌细胞增殖的影响,利用流式细胞术检 测USP39 对非小细胞肺癌细胞凋亡和周期的影响。结果 USP39 蛋白在非小细胞肺癌组织中的阳性率高于癌旁 组织（P <0.05）;USP39 蛋白的表达水平与非小细胞肺癌患者TNM 分期呈正相关（P <0.05）,而与其他临床病 理特征无相关性（P >0.05）;非小细胞肺癌细胞系中USP39 的表达水平高于支气管上皮样细胞（P <0.05）;转 染USP39 siRNA 的非小细胞肺癌细胞增殖能力低于转染USP39 NC 者（P <0.05）;转染USP39 siRNA 的非小 细胞肺癌细胞早期凋亡细胞比例高于转染USP39 NC 者（P <0.05）,细胞周期被阻滞于G1 期。结论 USP39 在 非小细胞肺癌中表达升高,与患者TNM 分期密切相关,可促进非小细胞肺癌的增殖。     

泛素化特异性蛋白酶39在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的 检测泛素化特异性蛋白酶39（ubiqutin-specific protease,USP39）在结肠癌组织中的表达情况,并分析USP39的表达水平与77例结肠癌患者的临床病理特征、生存及预后之间的相关性。方法 利用免疫组织化学技术检测结肠癌石蜡组织标本中USP39蛋白的表达情况,利用卡方分析结肠癌组织及癌旁组织中USP39的表达差异,利用Spearman秩相关分析USP39与结肠癌患者临床病理特征的相关性,利用K-M生存曲线分析USP39与结肠癌患者5年总体生存率的相关性,利用Cox风险比例模型分析USP39与结肠癌患者预后的相关性。结果 免疫组织化学结果显示USP39在结肠癌组织中的阳性率显著高于癌旁组织;Spearman秩相关分析显示USP39的表达水平与结肠癌患者TNM分期及淋巴转移情况呈正相关,而与其他临床病理特征无显著相关性;K-M生存曲线结果显示USP39阳性表达的结肠癌患者术后5年总体生存率低于USP39阴性表达的结肠癌患者（P=0.009）。Cox风险比例模型结果显示USP39可作为独立判断结肠癌患者预后的分子指标。结论 USP39在结肠癌组织中表达升高,可作为预测结肠癌患者生存周期及预后的潜在分子标志物。     

Exon Deletions of Parkin Gene in Patients with Parkinson Disease

Mutations in the parkin gene have recently been identified in familial and isolated patients with early-onset Parkinson disease (PD) and that subregions between exon 2 and 4 of the parkin gene are hot spots of deletive mutations. To study the distribution of deletions in the parkin gene among variant subset patients with PD in China, and to explore the role of parkin gene in the pathogenesis of PD, 63 patients were divided into early onset and later onset groups. Exons 1-12 were amplified by PCR, templated by the genomic DNA of patients, and then the deletion distribution detected by agarose electrophoresis. Four patients were found to be carrier of exon deletions in 63 patients with PD. The location of the deletion was on exon 2 ( 1 case), exon 3 (2 cases) and exon 4 (1 case). All patients were belong to the group of early onset PD. The results showed that parkin gene deletion on exon 2, exon 3 and exon 4 found in Chinese population contributes partly to early onset PD.     

多巴胺β羟化酶和去甲肾上腺素转运体基因多态性与惊恐障碍的关联分析

目的:探讨惊恐障碍与多巴胺β羟化酶(dopamine-β-hydroxylase,DβH)和去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)基因多态性的关系。方法:采用DSM-Ⅳ轴Ⅰ结构式临床访谈选取139例惊恐障碍患者(惊恐障碍组)和196例正常健康对照(对照组)。采用imLDRTM...