FISH技术在诊断膀胱移行上皮细胞癌中的应用

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在膀胱移行上皮细胞癌诊断中的价值和意义。方法用随机引物法标记3、7、17号染色体着丝粒及p16基因探针,对该院103例膀胱移行上皮细胞癌患者尿液或膀胱冲洗液中脱落细胞FISH进行检测,分析染色体畸变或数目异常情况及与临床分期、病理分级的关系。结果 3、7、17号染色体和p16基因的畸变率分别为41.7%(43/103)、45.6%(47/103)、31.1%(32/103)和55.3%(57/103),畸变与临床分期无相关性,除p16基因外其余染色体畸变与病理分级相关,其中17号染色体畸变与病理分级显著相关(P<0.01)。4个探针组合诊断膀胱移行上皮细胞癌的总阳性率为46.6%,与临床分期无相关性(P>0.05),但与病理分级显著相关(P<0.01)。结论 FISH技术检测有助于膀胱移行上皮细胞癌的诊断,并可用于探索染色体畸变与病理分级的关系。     

多探针荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮癌诊断中的意义

目的探讨多探针荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）在膀胱尿路上皮癌诊断的可行性,并探讨其与肿瘤临床分期和病理分级的关系。方法收集经膀胱镜检查诊断为膀胱移行细胞癌35例患者,及10例非肿瘤病人,10例正常人群的新鲜尿液标本,应用FISH检测膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中的3、7、17、9号染色体异常,并进行尿细胞学检测（Urinary cytological examination,UCE）。统计学分析FISH和UCE诊断膀胱癌的灵敏性和特异性,并分析FISH检测染色体突变与膀胱肿瘤分期及分级的相关性。结果多探针联合FISH技术与UCE诊断膀胱癌的灵敏度分别为82.86%和37.14%（P〈0.05）,特异度分别为95.0%和100%（P〉0.05）。3、7及17号染色体着丝粒特异性探针及9号染色体长臂2区1带（9p21）的p16位点特异性探针联合应用诊断膀胱癌的灵敏度为82.86%,而单一探针诊断膀胱癌的灵敏度最高仅为65.71%。膀胱癌患者中发生3、7、17号染色体畸变及9号染色体p16基因畸变均与不同病理分级（G1-G3）有关（P〈0.05）;3、7号染色体畸变与临床分期（T0-T4）有相关性（P〈0.05）,而17号染色体及9号染色体p16基因畸变与临床分期无相关性（P〉0.05）。结论多荧光探针FISH诊断膀胱尿路上皮癌敏感性高、特异性强、无创,且与肿瘤分期和分级有一定相关性,临床应用价值高。     

荧光原位杂交技术检测130例自然流产绒毛染色体结果的观察与分析

目的应用荧光原位杂交技术(FISH)对130例自然流产患者的绒毛染色体进行检测,探讨并评估FISH在诊断自然流产绒毛染色体异常中的价值。方法采用13、21和16、22及18、X、Y三组染色体探针,对130例自然流产患者的绒毛标本进行FISH检测。结果 130例自然流产的绒毛染色体FISH检测中,检测成功129例,检测成功率99.2%,其中异常染色体细胞数>10%者65例,核型异常率为50.3%。结论 FISH技术不受标本污染限制,能快速、准确地诊断自然流产绒毛染色体数目畸变,与常规染色体核型分析相结合,可为临床自然流产的病因探讨提供更为准确的依据。     

荧光原位杂交（FISH）技术在尿路上皮肿瘤诊断中的应用研究

目的应用荧光原位杂交（FISH）技术探索中国人群中3、7和17号染色体及9p21位点异常与尿路上皮肿瘤发生、发展的关系,评估其用于中国人群尿路上皮肿瘤诊断的可行性及临床应用前景。方法收集102例以血尿症状就诊,证实为尿路上皮肿瘤患者的新鲜晨尿,连续留取3d,将标本分别以FISH技术和尿脱落细胞学方法加以检测。收集20名正常成人新鲜晨尿,同法操作并计算正常成人对照组参考值。收集临床资料,明确肿瘤临床分期和病理分级。以正常成人对照组参考值判定患者FISH结果,比较其与尿脱落细胞学检测方法诊断的阳性检出率。统计分析3、7和17号染色体及9p21位点畸变率与性别、年龄、肿瘤初发、复发、单发、多发、临床分期及病理分级的相关性。结果①各染色体及区带均呈现较高的畸变发生率。多体畸变发生率由高到低为98.0%（7号）、97.1%（3号）、96.1%（17号）和83.3%（9p21位点）;单体畸变发生率由高到低为95.1%（9p21位点）、68.6%（17号）、67.4%（7号）和66.7%（3号）;缺失畸变则仅见于9p21位点（31.4%）。②尿脱落细胞学检查的肿瘤阳性检出率为64.7%,FISH则为98.0%,两者差异有统计学意义（χ^2=30.25,P〈0.01）。③各染色体畸变与患者的性别、年龄、肿瘤初发、复发、单发、多发及肿瘤临床分期均未见显著相关性。④3号染色体单体畸变与肿瘤病理分级间呈正相关（r=0.198,P=0.046）,其余染色体不同类型的畸变情况均未显示出与不同病理分级间存在显著相关性。⑤3、7及17号染色体主要以多体畸变为主,而9p21位点主要以单体畸变为主（χ2=166.426,P〈0.001）,尚无证据表明各染色体与缺失畸变间的倍性关系。结论①FISH技术是通过尿液样本检测尿路上皮肿瘤染色体畸变的有效方法,可作为早期诊断尿路上皮肿瘤的重要辅助手段。②尿路上皮肿瘤在3、7和17号染色体及9p21位点同时存在多种畸变类型,且各畸变类型均具有较高的畸变率。③3号染色体的缺失或单体畸变可能对尿路上皮肿瘤的进展具有一定预测意义。     

荧光原位杂交技术在尿路上皮细胞癌诊断中的应用

目的应用荧光原位杂交技术（fluorescenceinsituhybridization,FISH）检测分析3、7、17号染色体及9p21位点异常与尿路上皮细胞癌发生、发展的关系,评估其用于尿路上皮细胞癌诊断的可行性和临床应用前景。方法选取2011年7月至2013年8月在青海红十字医院泌尿外科经膀胱镜活检确诊为尿路上皮细胞癌的患者116例作为实验组,另外选取正常体检者92例作为对照组,分别行尿脱落细胞学检查和FISH检测,比较两种方法诊断的特异性和灵敏性,统计分析3、7和17号染色体及9p21位点的畸变率与尿路上皮肿瘤分级的相关性。结果①尿路上皮细胞癌患者中,FISH和细胞学诊断尿路上皮细胞癌的灵敏度分别为81．0％和37．9％;对照组中,FISH和细胞学诊断尿路上皮细胞癌的特异度分别为90．2％和93．4％。②各染色体及区带呈较高的畸变发生率,3、7、17号染色体畸变阳性率分别为94．3％、95．6％和88．5％;9号染色体p21位点畸变阳性率为63．2％。③FISH的灵敏性随着肿瘤分级分期的升高而增高。结论FISH技术能明显改进尿路上皮细胞癌的诊断,对于尿路上皮细胞癌的诊断及复发监测具有重要意义。     

荧光原位杂交技术在尿路上皮癌筛查中价值

目的评估尿脱落细胞学及荧光原位杂交技术（fluorescenceinsituhybridization,FISH）检测在筛查尿路上皮癌中的特异性及敏感性,分析各畸变染色体与尿路上皮癌的关系。方法对156例血尿患者（血尿组）和20例体检健康者（对照组）分别行普通细胞学和FISH检测。以手术或组织活检病理检测结果验证FISH检测技术及细胞学检测结果的准确性,比较2种检测技术在尿路上皮癌筛查中的敏感性和特异性,分析3、7、17号染色体及p16位点在尿路上皮癌中的畸变概率。结果血尿组FISH检测和尿脱落细胞学检测诊断尿路上皮癌的敏感性分别为91．6％和40．2％,二者比较差异有统计学意义（χ2=33．802,P=0．000）;特异性分别为95．9％和97．7％,二者比较差异无统计学意义（P〉0．05）;3、7、17号染色体及p16位点畸变的概率分别为63．0％、64．1％、67．4％、75．0％。结论FISH检测可明显提高尿路上皮癌术前诊断准确性,可了解尿路上皮癌患者尿脱落细胞染色体畸变情况。     

连续R显带和荧光原位杂交技术在白血病诊断中的应用

目的探讨连续R显带和荧光原位杂交技术(FISH)在鉴定自血病染色体复杂变异易位中的应用。方法对15例核型分析有疑问的标本在R显带基础上再进行荧光原位杂交。对比分析同一中期分裂相的显带和FISH结果。结果4例应用BCR／ABL探针；4例PML／RARa探针；4例AML1／ETO探针；2例IgH探针；1例MLL探针。经显带结果与FISH结果对比分析，9例疑似的复杂易位得到确证，并精确定位。6例核型结果得到修正。结论连续R显带和FISH方法在复杂变异易位的鉴定方面与传统的核型分析和直接FISH检测相比具有明显的优势。在自血病的诊断方面．对于未知异常染色体的检出将具有更广泛的应用前景。     

荧光原位杂交技术快速诊断胎儿常见染色体数目异常

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术在产前诊断中的应用价值。方法采集116名孕妇孕16~23周的羊水标本,应用荧光标记的21号染色体特殊位点探针（21q22,DSCR2）、13号染色体特殊位点探针（13q14,DLEU1）及18号染色体探针、X/Y染色体着丝粒探针（CEP）对未经培养的羊水间期细胞进行FISH检测;同步进行羊水细胞培养,行常规细胞遗传学染色体核型分析。结果 FISH与羊水细胞核型分析相符的染色体数目正常108例,数目异常6例,另各有1例染色体核型分析分别显示为平衡易位、臂内倒位异常,FISH结果显示正常。6例数目异常胎儿引产时抽脐血染色体检查结果与羊水产前诊断结果一致。结论 FISH技术用于快速诊断胎儿常见染色体数目异常,具有简便、快速、特异性强等优点,临床有较高的应用价值。     

比较基因组杂交技术在软组织肉瘤诊断中的应用

比较基因组杂交(CGH)技术是在荧光原位杂交(FISH)基础上，结合消减技术发展起来的一种能快速、全面分析染色体基因组获得和缺失的分子遗传学方法。它不需要特殊探针，能进行全基因组检测，并可在正常中期染色体上定位。目前CGH技术是对整个染色体扫描分析最常用的技术，在软组织肉瘤的诊断和研究中有重要意义。     

荧光原位杂交技术快速诊断胎儿常见染色体数目异常

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在产前诊断中的应用价值。方法采集116名孕妇孕16~23周的羊水标本,应用荧光标记的21号染色体特殊位点探针(21q22,DSCR2)、13号染色体特殊位点探针(13q14,DLEU1)及18号染色体探针、X/Y染色体着丝粒探针(CEP)对未经培养的羊水间期细胞进行FISH检测;同步进行羊水细胞培养,行常规细胞遗传学染色体核型分析。结果 FISH与羊水细胞核型分析相符的染色体数目正常108例,数目异常6例,另各有1例染色体核型分析分别显示为平衡易位、臂内倒位异常,FISH结果显示正常。6例数目异常胎儿引产时抽脐血染色体检查结果与羊水产前诊断结果一致。结论 FISH技术用于快速诊断胎儿常见染色体数目异常,具有简便、快速、特异性强等优点,临床有较高的应用价值。     

染色体核型分析联合荧光原位杂交技术对儿童急性髓系白血病M2的诊疗意义

目的探讨染色体核型分析联合荧光原位杂交(FISH)检测在儿童急性髓系白血病M2中的诊疗意义。方法选择25例AML-M2儿童骨髓标本应用染色体G显带进行核型分析,并同时应用荧光原位杂交技术(FISH)检测AML1/ETO融合基因。结果在25例AML-M2儿童中,核型分析检出t(8;21)染色体易位17例(68%),包括除典型t(8;21)及其它染色体异常,如复杂易位、缺失、额外染色体等,核型正常5例(20%),其中4例为复诊儿童,3例(12%)标本因细胞生长不良,制片质量差,无法分析;25例AML-M2儿童同时做FISH,检出阳性20例(80%),包括17例t(8;21)及3例无分裂相的标本,4例复诊儿童均为阴性,检出信号异常1例(4%),但无阳性改变。结论急性髓系白血病M2患儿特异性t(8;21)/AML1-ETO融合基因阳性改变较易检出,FISH技术检测患儿易位的敏感性较高于染色体核型分析。FISH检测不仅可以提示融合基因是否阳性,也可提示特定基因是否异常。染色体核型分析可同时提示相关染色体是否易位及其余染色体有无畸变。因此,两种分析方法联合应用可多方面提示AML-M2儿童的疾病信息,在AML-M2的诊治及预后中具有重要的应用价值。     

FISH检测尿脱落细胞的临床意义及与肿瘤肌层浸润的关系

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)检测在尿脱落细胞染色体畸变中的意义及与膀胱肿瘤病理分期的关系.方法 用2组DNA探针CSP3/CSP7分别杂交于3号和7号染色体的着丝粒区域,GLPp16/CSP17分别杂交于9号染色体长臂(9q21)和17号染色体的着丝粒区域,检测36例疑似膀胱肿瘤患者血性尿液中的脱落细胞,与常规尿脱落细胞学检查比较,分析与肿瘤分期的关系.结果 FISH检测总敏感度为73.33%,总特异度为88.46%,总敏感度高于尿细胞学检测(26.70%);肌层浸润敏感度(88.24%)高于非肌层浸润敏感度(53.85%),二者分别高于尿细胞学检测(35.29%,15.38%),差别显著(P<0.05);3、7、9和17号染色体的畸变率分别为88.34%、64.71%、70.59%和88.24%,3号和17号染色体的畸变程度与肿瘤浸润深度呈正相关性(P<0.05).结论 FISH检测尿脱落细胞诊断膀胱肿瘤优于常规尿脱落细胞学检查,对于有肌层浸润的膀胱肿瘤意义更明显,3号和17号染色体的畸变与肿瘤浸润深度有关.     

染色体核型分析与荧光原位杂交用于胚胎停育患者病因学诊断

目的 探讨染色体核型分析技术及荧光原位杂交（FISH）技术两种检测方法在胚胎停育患者胎儿病因学诊断中的应用。 方法 对78例胚胎停育患者清宫后的妊娠组织行细胞培养后做染色体核型分析;若培养失败,采用FISH进行分析。 结果 78例胚胎停育患者的妊娠组织,染色体培养且成功用于核型分析者38例,其中检出正常核型23例、异常核型15例、常染色体三体8例、三倍体1例、性染色体异常3例、结构异常3例。40例染色体培养失败,采取FISH检测,检出正常染色体15例,异常染色体25例,其中常染色体三体占19例、三倍体2例、45XO 4例。 结论 胚胎停育的主要原因是胚胎染色体异常导致。通过染色体核型分析及FISH检测对胚胎停育的妊娠组织进行分析,两种方法对异常核型和常染色体数目异常的检出有明显差异,对胚胎坏死时间长的妊娠组织,FISH成功率更高。临床上应结合两种检测方法用于胚胎停育的原因分析,为下次妊娠提出指导意见。       

荧光原位杂交技术（FISH）在泌尿系统肿瘤领域的应用

一、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术概述 1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验,获得成功。1987年,染色体原位抑制杂交法的创建,使FISH技术得以迅速发展。随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰荧光素等非放射性物质标记探针,创立了双色FISH技术。1990年,Nederlof等用3种荧光素成功探测出了3种以上的靶位DNA序列,从而宣告了多色FISH技术的问世。     

分子细胞遗传学技术在染色体病诊断中的研究进展

染色体病是由染色体数目异常或结构畸变引起的疾病，该病的早期诊断尤其是产前诊断，已成为人们研究疾病的焦点。现从传统的染色体核型分析技术、染色体荧光原位杂交技术、多色荧光原位杂交技术、比较基因组杂交技术，以及分子生物学技术等方面对染色体病在分子细胞遗传学这一领域的研究进展作一综述。     

13号染色体部分三体1例临床分析

研究人类染色体数目、结构异常与染色体病关系是人类细胞遗传学的范畴，染色体是遗传物质的载体，其上载有很多基因，如果染色体畸变就会发生众多基因变化引起综合征。染色体病就是由于先天性染色体数目或结构畸变而引起的疾病。临床上，染色体的数目或结构畸变的类型不同会使患者出现不同的临床症状，因此，我们常常根据就诊人员体检过程中的典型症状作出初步诊断，再经细胞遗传学检查判断是否染色体病，并进一步明确染色体数目或结构异常情况。     

荧光原位杂交技术在胎儿染色体非整倍体产前诊断中的应用

目的:探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在快速产前诊断胎儿染色体数目异常中的价值。方法:对275例孕18～23周、有产前诊断指征者,在B超引导下经腹抽取羊水后,应用18号、X、Y染色体着丝粒探针以及13q14和21q22特异性探针,对未培养的羊水间期细胞进行FISH检测,然后在荧光显微镜下进行观察,并用荧光成像系统进行摄像和后期处理。同时对羊水细胞进行常规培养及染色体核型分析。结果:275例产前诊断者中,染色体数目异常者9例(其中21三体7例,47,XXX1例,47,XYY1例),与羊水细胞培养染色体核型分析结果完全吻合。结论:FISH技术用于羊水细胞染色体非整倍体产前诊断具有快速、简便、准确等优点,具有较好的临床应用价值。     

染色体畸变与不良孕产关系研究

目的:对不良孕产患者染色体核型进行分析,明确畸变核型的分布特点。方法:取受检者外周血行淋巴细胞培养,常规制备染色体,G显带,镜下计数50个中期分裂相,显微摄影分析10个核型。结果:1 065例生殖异常患者中,不良孕产者染色体畸变核型79例(7.4%),其中常染色体畸变36例(3.4%),性染色体畸变43例(4.0%)。36例常染色体畸变核型中,结构畸变率[30例(83.3%)]多态性率[6例(16.7%)]数目畸变率(0例)。43例性染色体畸变核型中,多态性率[32例(74.4%)]数目畸变率[11例(25.6%)]结构畸变率(0例)。结论:不良孕产患者常染色体畸变特点以结构畸变为主,性染色体畸变特点以多态性为主。     

荧光原位杂交技术检测骨髓增生异常综合征患者+8和20q-

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者8号和20号染色体异常的应用。方法 40例MDS患者,采用间期FISH技术,选取+8和20q-探针的组合,检测MDS患者中的+8和20q-异常情况。结果利用FISH技术,+8和20q-检出率分别为12.5%,15.0%。采用FISH技术的组合探针可以检测出8号和20号染色体异常。结论 FISH技术能够检测出MDS染色体异常,采用组合探针的FISH更为敏感和特异。     

荧光原位杂交技术在染色体病临床诊断中的应用研究

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术，在染色体病临床诊断中的实用意义。方法选择18、21；x，y二组双色荧光直接标记DNA探针，对2003年7月～2004年12月，在江西省妇幼保健院门诊及住院就诊的71名患者提供的72例标本（2例来自同一名患者）。全部行单色或双色FISH分析，其中70例同时进行了常规染色体对比分析。结果 成功地检测了经培养的，或未培养的、新鲜的，或陈旧的，以及常规染色体制备失败及不宜检测的临床各类标本。发现了常规染色体分析未能检出的异常，及结果与临床体征不相一致的原因。结论 FISH技术是一种快速、简便、检测范围广、对标本质量要求不高的分子细胞遗传学技术。它弥补了常规染色体检测方法中的不足，在染色体疾病临床诊断中具有广阔的应用前景。