旋毛虫不同发育阶段同工酶的电泳分析

目的　通过对旋毛虫不同发育阶段同工酶酶谱变化的研究 ,以探讨其生物发育过程中的一些规律。　方法　应用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)和 UVP凝胶分析仪对猪型黑龙江株旋毛虫成虫、肌肉期幼虫和新生幼虫的酯酶同工酶(EST)、乳酸脱氢酶同工酶 (L DH)、苹果酸脱氢酶同工酶 (MDH)、延胡索酸酶同工酶 (MUF)进行分析。　结果　 3个发育时期的 MDH、EST酶谱基本相似 ;L DH的酶谱虽均有 1条带 ,但新生幼虫最深 ,肌肉期幼虫最浅 ;MUF酶谱新生幼虫最深 ,成虫较浅 ,肌肉期幼虫未见酶带。　结论　旋毛虫发育过程中 MDH、EST同工酶变化较小 ,但是 L DH、MUF同工酶存在较大差异     

我国旋毛虫蛋白质和五种酶的同工酶等电聚焦电泳分析

应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳对天津猪株（ＴＪＰ）、来源不明株（Ｘ）、长春犬株（ＣＣＤ）３个旋毛虫株肌肉期幼虫进行蛋白质和ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＭＥ、ＳＯＤ、ＡＣＰ５种酶的同工酶分析。３株的蛋白电泳谱基本相似，仅ＴＪＰ株最酸区２条区带较其他株不显著，ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＡＣＰ４种酶的酶谱均相同，仅ＴＪＰ株的ＭＥ区带较其他株稍偏碱性。     

我国旋毛虫蛋白质和五种酶的同工酶等电聚焦电泳分析

应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳对天津猪株、来源不明株、长春犬株３个旋毛虫株肌肉期幼虫进行蛋白质和ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＮＭＥ、ＳＯＤ、ＡＣＰ５种酶的同工酶分析。３株的蛋白电泳谱基本相似，仅ＴＪＰ株最酸区２条区带其他株不显著，ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＡＣＰ４种酶的酶谱均相同，仅ＴＪＰ株ＭＥ区带较其他株稍偏碱性。     

我国旋毛虫地理株的同工酶分析

目的 为旋毛虫属的分类提供依据.方法 应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对我国6个猪源旋毛虫地理株(河南、云南、哈尔滨、黑龙江同江、湖北及天津)肌幼虫的超氧化物歧化酶(SOD)、苹果酸酶(ME)、酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)进行分析,并以旋毛虫(17tichinella spiralis,T1)、乡土旋毛虫(T. nativa,T2)、布氏旋毛虫(T. britovi,T3)、伪旋毛虫(T. pseudlospiralis,T4)及纳氏旋毛虫(T. nelsoi,T7)的国际参考株作为对照.结果 我国6个猪源旋毛虫地理株的4种同工酶(SOD、ME、EST、GLDH)酶谱均与T1的相同.结论 经4种同T酶分析我国6个猪源旋毛虫地理株均为T1.     

用分子生物学技术分析国内六株旋毛虫分离株

本文首次对来自我国不同宿主来源有代表性的６个旋毛虫分离从基因组ＤＮＡ的限制性酶切长度多态性、同工酶及可溶性蛋白进行综合研究。核酸结果显示：长春株与其余各地域株的限制性酶切图谱间存在着差异，用长春株特异性ＤＮＡ片段制成探讨针，与各株ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，发现各虫株的杂交带型不一，且仅长春株出现１．１２ｋｂ杂交带。同工酶结果显示：春株与其余各株在５种同酶（ＧＰＩ、Ｇ６ＰＤ、ＨＫ、６ＰＧＤＨ）     

不同地域阴道毛滴虫品系的同工酶电泳分析

目的研究中国大陆不同地域(北京、河北唐山、河北承德、江西九江)阴道毛滴虫7个分离株的生物学类型。方法用聚丙烯酸胺凝胶电泳(PAGE)、同工酶染色、聚类分析方法进行分析。结果检测MDH、LDH、G-6-PD、PGI、PGM等5种酶的同工酶。在G-6-PD、PGI酶谱中,7株完全相同。在MDH、LDH酶谱中,北京1株、北京2株、九江3株完全相同,而与承德株、唐山株、九江1株、九江2株不同。在PGM酶谱中,北京1株、北京2株完全相同,而与承德株、唐山株、九江1株、九江2株、九江3株不同。并依酶谱绘制系统进化树。承德株、唐山株、九江1株、九江2株与北京1株、北京2株、九江3株大多数同工酶谱存在显著差异,九江3株与北京1株、北京2株在5个同工酶谱中存在微小差异。结论我国阴道毛滴虫虫株可能至少存在3种不同的生物学类型。     

五个地理株周期型马来丝虫成虫蛋白和同工酶电泳分析

本文应用圆盘电泳对五个地理株——福建建阳株、安徽泾县株、四川乐山株、贵州独山株和贵州荔波株周期型马来丝虫成虫的蛋白和七种酶进行了区带分析和比较。结果显示五个虫株的蛋白、PGM和PO同工酶电泳型没有差异;而MDH和GPI的同工酶电泳型出现了两种类型,即贵州省内的两个株与另外三个株不同;G6PD、EsT和LDH没有区带出现。     

乳酸脱氢酶及其同工酶对良恶性腹水的诊断价值

目的研究乳酸脱氢酶与同工酶鉴别良恶性胸腹水的价值。方法选择有胸腹水、诊断明确的良恶性疾病患者４５例，分别测定血清和腹水ＬＤＨ总酶和同工酶。结果恶性胸腹水ＬＤＨ（ｘ±ｓ４５４±４０８Ｕ／Ｌ）显著高于良性组（ｘ±ｓ１９８±１３４Ｕ／Ｌ）。恶性组ＬＤＨ４，ＬＤＨ５同工酶显著高于良性组（Ｐ＜００５）。结论本试验对良恶性腹水的鉴别诊断具有重要参考价值     

小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化

目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组（每组10只），分别感染旋毛虫（T1）、乡土旋毛虫（T2）、布氏旋毛虫（T3）、伪旋毛虫（T4）及纳氏旋毛虫（T7），每只感染300条幼虫，感染后1～6周每周尾部静脉采血，6周后每2周尾部静脉采血，至感染后20周，用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清中抗旋毛虫IgG抗体水平。结果小鼠感染旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫后3～5周，血清IgG抗体水平快速升高，至感染后第8周达高峰，此后旋毛虫和乡土旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平缓慢下降，布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平迅速下降；小鼠感染伪旋毛虫后3～5周血清IgG抗体水平快速升高，至第16周达高峰，之后缓慢下降。5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平差异具有显著性（P〈0．05）。结论5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平和动态变化不同；旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫（乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫）感染的血清学诊断及流行病学调查。     

旋毛虫抗原的保护性免疫

本综述了旋毛虫的成虫、新生幼虫和肌肉幼虫街头一期的抗原及其诱导宿主产生的保护性免疫。     

广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究

目的 探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。方法选择广西微小按蚊（A.m.G）、海南微小按蚊（A.m.H）和云南微小按蚊（A.m.Y）的单雌线蚊匀浆，采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离，特异性底物染色，比较观察乳酸脱氢酶（LDH）、醇脱氢酶（ADH）和酯酶（EST）3种同工酶谱。结果三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同，均具1条Rm14酶带；ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带，A.m.G与A.m.H具相同酶带Rm34，而A.m.Y则是1条Rm40酶带；EST的主带谱A.m.G与A.m.H基本相似，前者显示Rm18、35和61、后者显示Rm18、35、39和61。而A.m.Y明显不同于A.m.G和A.m.H显示Rm18、39、43、50、56和59六条主带。结论ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别，可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。     

旋毛虫抗原的保护性免疫

本文综述了旋毛虫的成虫、新生幼虫和肌肉幼虫等三期的抗原及其诱导宿主产生的保护性免疫。     

不同种株旋毛虫肌肉期幼虫温变形态观察比较

目的探索我国是否存在旋毛虫的不同类型及其在生物学性状方面与布氏旋毛虫(T.britovi,T3)和南方旋毛虫(T.nelsoni,T7)存在的差异。方法在4℃低温下观察云南、湖北、黑龙江、河南4地和2株国际标准株(T3、T7)旋毛虫肌肉期幼虫(ML)形态及其分布。结果 4地旋毛虫及2株国际标准株旋毛虫 ML 形态分布各不相同,呈螺旋状卷曲者所占的比例分别为14.1%、41.1%、12.1%、39.5%、3.5%和25.7%。其中湖北株、河南株比例接近,并且比例较高;云南株、黑龙江株分布比例接近,比例较低。该四株与 T3、T7比例皆相差较远。云南、湖北、黑龙江、河南4地和2株国际标准株(T3、T7)的温变率分别为3.92、9.86、6.72、9.40、2.43、11.68。结论我国4地与2株国际标准株旋毛虫 ML 在低温下形态上存在着明显的差异,提示我国4地旋毛虫存在2种不同的生物学类型,且与国际标准株(T3,T7)的亲缘关系较远。     

广西人芽囊原虫分离株同工酶谱的初步分析

目的观察广西人芽囊原虫分离株的苹果酸脱氢酶(MDH)和碱性磷酸酶(ALP)同工酶谱特征。方法从感染者粪便中分离人芽囊原虫,体外培养,收集虫体,制备电泳样品。采取不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳分离同工酶的不同区带,以苹果酸钠和1-萘磷酸钠盐为特异性底物,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)和固蓝RR盐为染色剂,分别对MDH和ALP染色,以相对迁移率标记酶带。结果人芽囊原虫10个分离株在MDH酶谱中,共出现7条酶带,常见的酶带有Rm34、Rm47、Rm51、Rm55和Rm59,10个分离株完全一致的酶带有Rm34和Rm51;在ALP酶谱中共出现5条酶带,Rm22、Rm25、Rm28、Rm35和Rm38。各分离株之间的MDH和ALP同工酶谱均存在差异。结论MDH和ALP同工酶谱能反映人芽囊原虫各分离株之间的遗传差异。     

抗旋毛虫单克隆抗体的制备及应用

抗旋毛虫单克隆抗体的制备及应用华西医科大学寄生虫学教研室胡少良，冯瑞元七十年代中期以来，单克隆抗体以其突出特点被迅速地推广到包括寄生虫学在内的许多领域。１９８４年，Ｏｒｔｅｇａ－Ｐｉｅｒｒｅｓ等［１］以及其他学者率先制备了抗旋毛虫单克隆抗体并开始着手...     

旋毛虫新生幼虫的扫描电镜观察

本文对旋毛虫新生幼虫扫描电镜下的体表形态作了描述。虫体呈线形,两端较细,中段较粗,其直径约6～7μm。头端呈圆锥形,其端部有一口孔,直径约0.5μm,内有一个可伸缩的口刺。头端周围有环状排列的感觉乳头,并有头感器,直径约0.27μm。虫体表面有许多环形皱褶,每一皱褶宽约0.57μm,还有许多纵形的小嵴,每条纵嵴宽约0.17μm,排列相当规则。虫体后端钝圆有一缝隙状的肛孔,宽约0.6μm。     

旋毛虫新生幼虫cDNA文库的免疫筛选

目的　获取具有抗原性的旋毛虫新生幼虫基因。　方法　以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序及分析。结果　从45×105旋毛虫新生幼虫cDNA文库重组子中共获得158个阳性克隆。序列分析结果表明,其中有36个新的cDNA序列,已报道的序列有5个,有12个序列无开放阅读框架(ORF),与旋毛虫线粒体基因组DNA同源。　结论　获得具有抗原性的旋毛虫抗原编码cDNA分子     

不同佐剂对旋毛虫Ts87重组蛋白免疫小鼠保护性的影响

目的 比较福氏完全佐剂（CFA）等6种佐剂对于旋毛虫Ts87重组蛋白（rTs87）免疫保护性的影响。 方法 经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析鉴定的rTs87分别与上述各种佐剂免疫ICR小鼠，每间隔2周免疫1次，共免疫3次。ELISA检测免疫小鼠血中抗原特异性IgG抗体水平。攻击感染45 d后剖杀小鼠取肌幼虫（ML）并计数，计算肌幼虫减虫率。 结果 rTs87相对分子质量（Mr）约为40 000，可被旋毛虫感染鼠血清和rTs87免疫鼠血清识别，分别与佐剂CFA（或IFA）、IMS 1312、ISA720、Quil-A及氢氧化铝免疫后均引起较强的IgG抗体反应，各佐剂免疫组减虫率分别为49.4%、49.2%、63.5%、65.1%和70.8%，与空白对照组比较有统计学意义；单纯抗原rTs87免疫组获得了23.7%的减虫率，与对照组及各佐剂免疫组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 佐剂CFA（或IFA)、IMS1312、ISA720、Quil-A及氢氧化铝均能不同程度增强rTs87对小鼠的保护性免疫力，其中佐剂ISA720、Quil-A和氢氧化铝的保护效果更好。