人胎肝造血生长因子对造血祖细胞的刺激增殖作用

将胎肝提取液经超滤后取中分子蛋白(MMWP)和低分子蛋白(LMWP),用祖细胞培养方法检测其造血生长因子活性。结果显示MMWP具有刺激多向祖细胞(CFU-Mix)、粒单祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E)增殖的白介素-3(IL-3)、粒单集落刺激因子(GM-CSF)和红细胞生成素(Epo)活性。以重组的IL-3、GM-CSF和Epo作标准对照,初步测定每毫升MMWP约含12.5μgIL-3、10~5UGM-CSF和500UEpo。而LMWP在祖细胞培养中仅有少数集落生长,但无抑制现象出现。     

人胎肝造血干细胞移植性能研究

近十多年来,国外应用同种异体骨髓移植(BMT)治疗重症再生障碍性贫血(再障)及急性白血病等疾患,已获得明显疗效,国内近三年来也已有成功的报道。在胎肝移植(FLT)方面,国外近来有13例急性白血病进行FLT的报道。国内近年来也已对人胎肝造血干细胞的性能、含量及临床输注疗     

人胎肝造血干细胞的性能、保存及其临床应用

人和动物的胚胎发育中,肝脏是一个重要的造血器官。在小鼠胚胎第10天,人类胎儿发育第2月起,就开始了肝脏造血。随着胚胎的发育,造血组织中造血干细胞的数量及性能也随之发生相应的变化。用体外细胞团培养的方法可检出胎肝内含有大量的红系造血祖细胞(CFU—E)及粒系造血祖细胞(CFU—C)。这是人和动物进行胎肝移植后具有全面重建造血功能的主要物质基础。     

胎肝造血组织的基础研究及临床应用通过鉴定

我院放射医学系放射损伤学教研室和血液病研究室共同进行的胎肝造血组织的基础研究及临床应用于1985年12月27日由核工业部科技核电局和安防卫生局组织通过鉴定。我院利用放射性核素~3H-TdR掺入及细胞培养方法,研究了胎肝细胞的代谢功能与增殖特性,发现胎肝细胞以造红系为主,早期幼稚的细胞代谢旺盛,增殖分化能力强。妊娠4～5个月时胎肝、骨髓、胸腺、脾脏的代谢功能旺盛,尤以肝脏的重量大、细胞     

内皮生长因子和胎盘生长因子对小鼠胎肝造血干细胞髓系分化的作用

【目的】观察VEGF(内皮生长因子)和PlGF(胎盘生长因子)对小鼠胎肝造血干细胞髓系分化的影响,并探讨其调控机制;【方法】体外培养E13胎肝造血细胞,培养造血集落CFU-GM,观察VEGF和PlGF对胎肝造血干细胞髓系分化的作用,应用Western-Blot检测不同处理条件对胎肝造血细胞Akt蛋白以及p-Akt蛋白表达水平的影响,用MTT法来评估不同浓度的LY294002(PI3K/Akt抑制剂)对胎肝造血细胞增殖的影响,通过CFU-GM观察LY294002对VEGF和PlGF调控胎肝造血作用的影响;【结果】VEGF和PlGF均可促进胎肝造血干细胞髓系分化,集落数分别为对照组的141%(P < 0.01)和123%(P < 0.05); PlGF可上调胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达,其表达水平为对照组的143%(P < 0.05);VEGF及其与PlGF联合应用对胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达水平无明显影响;LY294002可抑制胎肝造血细胞的增殖,并具有明显的剂量依赖关系(r = 0.9647,P < 0.01),在LY294002存在的条件下加入VEGF或PlGF,其CFU-GM产率与单独应用LY294002相比无明显差异(P > 0.05);【结论】VEGF和PlGF均能促进胎肝造血干细胞的髓系分化;PlGF可通过上调胎肝造血细胞Akt的磷酸化水平调节胎肝造血细胞的髓系分化;LY294002可通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制VEGF和PlGF对胎肝造血干祖细胞髓系分化的调控作用;     

胎肝造血期胎肝间充质干细胞的分离、培养及生物学特性

【目的】分离、培养人胎肝造血期胎肝间充质干细胞(MSC) , 研究其生长特性及表面标记的表达。 【方法】取孕16～20 周人胚胎肝脏, 分离培养胎肝MSC, 传代培养成系并检测其增殖能力, 应用流式细胞术、免 疫荧光方法检测其造血相关表面标记和细胞蛋白表达。【结果】人胎肝MSC 呈成纤维样形态, 指数生长期倍增 时间约为16h, 细胞增殖26.5 倍。传代15 次仍有94.18%的细胞处于G0/G1 期。流式细胞仪检测结果显示人胎 肝MSC 表达CD29、CD44、CD105、CD106 和CD166, 不表达CD31、CD34、CD45, 不表达与GVHD 相关的HLADR 、CD80、CD86、CD40、CD40L。免疫荧光检测结果显示胎肝MSC 表达造血微环境细胞外基质蛋白 Fibronectin、α-SMA 及上皮细胞标记蛋白AFP 和E-cadherin。【结论】人胎肝MSC 具有胚胎造血组织和发育中的 肝脏特异的相关分子表达, 免疫原性弱, 可以作为研究造血、胎肝发育机制的模式细胞。     

胎肝造血期胎肝间充质干细胞的分离、培养及生物学特性

【目的】分离、培养人胎肝造血期胎肝间充质干细胞（MSC），研究其生长特性及表面标记的表达。【方法】取孕16～20周人胚胎肝脏，分离培养胎肝MSC，传代培养成系并检测其增殖能力，应用流式细胞术、免疫荧光方法检测其造血相关表面标记和细胞蛋白表达。【结果】人胎肝MSC呈成纤维样形态，指数生长期倍增时间约为16h，细胞增殖26．5倍。传代15次仍有94．18％的细胞处于GO／G1期。流式细胞仪检测结果显示人胎肝MSC表达CD29、CD44、CD105、CD106和CD166，不表达CD31、CD34、CD45，不表达与GVHD相关的HLA-DR、CD80、CD86、CD40、CD40L。免疫荧光检测结果显示胎肝MSC表达造血微环境细胞外基质蛋白Fibronectin、α-SMA及上皮细胞标记蛋白AFP和E-cadherin。【结论】人胎肝MSC具有胚胎造血组织和发育中的肝脏特异的相关分子表达，免疫原性弱，可以作为研究造血、胎肝发育机制的模式细胞。     

胎肝输注促进重建造血功能

造血干细胞损伤是再生障碍性贫血(简称再障)的主要发病机理之一。普遍认为胎肝细胞输注具有重大的理论意义和实用价值,它不仅可以补充正常造血干细胞,达到恢复造血功能的目的,而且输注的胎肝细胞     

人胎肝组织匀浆中HBsAg的检测

人胎肝细胞悬液在我国有不少人试用于血液病,肝癌及各型肝炎等的治疗,且有不断扩大应用的趋势,甚至有滥用胎肝细胞悬液的现象。由于我国是乙型肝炎高流行地区,在自然人群中HBsAg携带者高达10%左右,孕妇HBsAg的携带率与所在地区一般人群相仿,并且已有乙型肝炎病毒宫内传播的报道,故对用于制备胎肝     

人胎肝造血细胞移植的临床应用

五十年代后期有人对人胎肝细胞(FLC)进行了研究,并已有用于人体的报告。由于FLC存在着丰富的造血干细胞,比骨髓细胞有更强的增殖能力,免疫活性细胞数量较少,以及抗原性较低的特性,因此当无合适     

人胎肝细胞液临床应用的现状

人胎肝细胞液临床应用的现状贵州电力医院姜吉煦贵州省人民医院方永善人胎肝细胞（ＦＬＣ）液的临床应用最早在１９５８年由ＶＰｈｏｆｆ［’］首先提出，输ＦＬＣ液可使放射元素所致骨髓再生障碍小鼠的造血功能完全重建而不发生移植物宿主病。此后国内外许多学者由实验医...     

人胎肝造血细胞的制备和临床应用

近十多年来,国外同种骨髓移植已有不少报告,国内近三年来也已有了成功报道。在人胎肝造血细胞性能、含量、保存及临床应用方面,近年来国内也已作了研究。同时,胎肝移植(FLT)治疗急性白血病最近又获得了成功。本文介绍了人胎肝细胞的来     

人胎肝cDNA文库构建及鉴定

从人胎肝组织提取总ＲＮＡ并纯化出ｍＲＮＡ，经反转录合成第一、二链ｃＤＮＡ，去除小于２００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段后，连接ＥｃｏＲＩ人工接头，与去磷酸化的λｇｔ１１噬菌体长、短臂连接，体外包装后感染Ｅ．ｃｏｌｉＹ１０９０，成功构建含４．２×１０８重组子的人胎肝ｃＤＮＡ表达文库，重组子平均外源插入片段约１．５ｋｂ，适合用于筛选低丰度ｍＲＮＡ的ｃＤＮＡ克隆。     

人胎肝造血细胞4℃保存及临床应用研究

近年来骨髓移植取得了很大的进展,但存在着供者来源及移植物抗宿主疾病(GVHD)等问题。因此,我们开展了人胎肝造血细胞性能,保存及临床应用的研究,并进行了急性白血病胎肝移植研究。虽然人胎肝较骨髓来源丰富,但在临床移植时,也很被动,常因选不到合适胎儿而耽误移植时机,因而也有一个保存问题。由于一般医院     

造血生长因子及其临床应用

在过去20年里,证实了有一组糖蛋白激素调节着复杂的造血过程,控制着造血祖细胞的复制和分化之间的平衡,这些物质就叫做造血生长因子(HGF或GF)。在半固体细胞培养基里加入这些物质,就能刺激造血祖细胞集落的增生和分化,故又叫     

造血生长因子在新生儿期的应用

造血生长因子是一种蛋白质 ,属多肽类 ,是人类细胞生命的物质基础。其作用 :①调节造血细胞增殖、发育、分化及增强细胞功能。②调节机体免疫应答 ,刺激免疫细胞增殖与分化。正常情况下 ,造血生长因子体内浓度很低 ,但在缺氧、感染、内毒素诱导下 ,数分钟有反应 ,数小时增加上千倍 ,且造血生长因子之间可相互作用。新生儿体内各种造血生长因子浓度低于成年人 ,造血和免疫系统处于从胎儿向生后转换过程中 ,功能不健全。当患血液和感染性疾病时 ,应用造血生长因子治疗或辅助治疗上述疾病显出了很好疗效 ,表明了造血生长因子的应用价值。1　促…