家蝇幼虫在不同温度和饲养密度条件下生长情况的研究

为探讨人工饲养家蝇幼虫的最佳生长条件,本研究采用塑料盒饲养法以1/2麦麸、1/2酒糟共计0.5kg(各0.25kg)加水250ml为饲养物,按不同温度(20℃、24℃、28℃、32℃、36℃)和不同蝇卵数量(6000、8000、10000、12000、15000)分组进行实验观察。结果表明,家蝇幼虫在35℃～36℃、密度为8000粒的条件下,生长旺盛,发育周期短,且幼虫单体重量最重。     

温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响

目的探讨温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响。方法将家蝇卵置于不同温度和光周期下饲养,观察幼虫发育至蛹的时间。结果随着温度的降低,幼虫滞育期延长;随着温度的升高,滞育幼虫发育为蛹的时间缩短,15℃为最佳滞育温度。光周期对幼虫滞育的影响不大。结论温度对家蝇幼虫滞育的维持和终止有重要作用。高温可解除家蝇幼虫的滞育。光周期对家蝇幼虫滞育的影响不大。     

猪粪饲养家蝇幼虫的营养成分研究

目的 :分析猪粪饲养家蝇 (Muscadomestica)幼虫的营养成分。方法 :引种野生家蝇 ,用猪粪饲养幼虫 ,收获 3期老熟幼虫 ,测定粗蛋白、粗脂肪、氨基酸和脂肪酸构成及微量元素含量 ,用粮食与农业组织 世界卫生组织 (FAO WHO)提出的参考蛋白模式评价 ,并与麦麸饲养的幼虫及鱼粉比较。结果 :每公斤猪粪平均可产(0 13± 0 0 4)～ (0 2 0± 0 12 )kg鲜蛆 ,鲜蛆烘干比为 1∶0 31± 0 12 ,粗蛋白 42 36 %～ 5 2 33 % ,必须氨基酸含量占总氨基酸的 45 10 % (E % ) ,必须氨基酸与非必需氨基酸总量的比值 (E/N)为 0 82 ,E % /T为 3 0 1,脂肪酸含量为 13 73 %～ 16 83 % ,油酸、亚油酸及亚麻酸等必需脂肪酸分别为 36 99% ,7 6 1%和 0 35 % ,Fe 2 91 5mg/kg ,Cu 87 5 5mg/kg ,Zn 2 46 8mg/kg ,Mn 2 49 45mg/kg ,比麦麸饲养幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉。结论 :猪粪饲养的家蝇幼虫比麦麸饲养的幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉     

家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响

目的：观察家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响。方法：从培养家蝇幼虫的猪粪中提取幼虫分泌物，制成虫卵培养液，观察培养液中猪蛔虫卵发育情况。同时，设立未培养家蝇幼虫的猪粪为阴性对照组。结果：实验组蛔虫卵的发育率较对照组低，两者比较差异有显著性（P＜0．05）。结论：家蝇幼虫的分泌物中可能含有阻碍蛔虫卵发育的物质。     

滞育家蝇幼虫糖的变化

目的观察家蝇幼虫滞育前后血淋巴中总糖、海藻糖、糖原的变化,探讨家蝇幼虫滞育发生的生化机制。方法低温诱导家蝇幼虫滞育,用蒽酮比色法测定滞育10d、15d、20d组及非滞育组血淋巴总糖、海藻糖、糖原的含量。结果滞育组与非滞育组比较,(1)家蝇幼虫血淋巴总糖含量滞育10d组显著升高,15d组、20d组则降低。(2)血淋巴海藻糖含量滞育10d组、20d组明显升高,15d组差异无显著性。(3)血淋巴糖原含量滞育10d组、15d组降低,20d组则升高。结论家蝇滞育幼虫的糖醇积累型属于海藻糖积累型。     

家蝇三龄幼虫血细胞形态的观察

目的通过姬氏染色法以便观察家蝇三龄幼虫的各种血细胞形态。方法取家蝇三龄幼虫血淋巴制作血涂片,姬氏染液染色,油镜观察。结果染色效果良好,家蝇三龄幼虫的各种血细胞结构清晰。可分为原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞、类绛血胞5种。其中浆血胞可分为大核浆血胞和小核浆血胞两种。结论家蝇三龄幼虫血细胞分为5种。     

家蝇幼虫分泌物抗菌肽对小鼠血清溶菌酶含量的影响

目的: 观察家蝇幼虫分泌物抗菌肽对正常昆明种小鼠血清溶菌酶含量的影响.方法: 将小鼠随机分为4组,每组8只.实验组腹腔注射不同剂量(5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg)的家蝇幼虫分泌物抗菌肽,1次/ d;连续7 d后,眼球取血检测小鼠血清中溶菌酶的含量.设立腹腔注射生理盐水的小鼠为对照组.结果: 给予抗菌肽后,各实验组和对照组相比,小鼠血清溶菌酶含量均有所提高,其中以10 mg/kg和20 mg/kg组增高较为显著.结论: 家蝇幼虫分泌物抗菌肽能显著提高小鼠血清中溶菌酶含量.     

不同饲养密度对斑马鱼生长发育的影响

目的探讨饲养密度对斑马鱼生长发育的影响。方法分别按1、2、4、6、8Tail／L的密度将斑马鱼饲养于容积为3L饲养盒中,测定不同生长阶段的体重、体长、脏器重量等指标,计算日增重（DWG）、增重率（WGR）、增长率（LGR）和成鱼脏器指数,并使用SPSSl7．0进行统计分析。结果当饲养密度介于1—4Tail／L之间时,各组间的DWG、WGR、LGR及脏器指数无显著差异。进一步增加饲养密度时,DWG、WGR、LGR及脏器指数均出现不同程度下降,与低密度组有显著性差异（P〈0．01）。结论综合考虑空间利用率、斑马鱼生存环境质量等因素,4Tail／L是一个比较理想的饲养密度。     

两种提取家蝇幼虫血淋巴方法的比较

目的:对剪头法和瞬时破壁法提取的家蝇幼虫血淋巴粗提液进行蛋白浓度和SDS-PAGE分析比较.方法:分别采用剪头法和瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴粗提液,同时设立未诱导组和热诱导组,测定各组的蛋白浓度进行比较分析,并对各组血淋巴粗提液进行SDS-PAGE的分析比较.结果:剪头法热诱导组的血淋巴粗提液蛋白浓度高于未诱导组,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白浓度高于剪头法;经SDS-PAGE分析,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白条带明显多于剪头法.结论:瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴简便易行,所提取的血淋巴蛋白成分多于剪头法.     

家蝇幼虫组织匀浆液抗病毒活性的研究

目的 探索家蝇组织匀浆液的抗病毒作用。方法 用鸡胚法检测经针刺或冷冻免疫诱导及同期对照家蝇幼虫组织匀浆液的抗病毒活性。结果 家蝇幼虫组织匀浆液中有抗病毒活性物质存在，针刺或冷冻组抗病毒物质的活性高于同期对照组。结论 家蝇幼虫组织匀浆液中抗病毒活性物质的性质尚待进一步确定。研究结果为抗病毒药物的寻找开辟了新的路径。     

家蝇幼虫Defensin成熟蛋白序列的克隆及在原核中的表达

目的 克隆家蝇幼虫defensin成熟蛋白编码序列并在大肠杆菌中表达，为进一步的研究该基因的功能奠定基础。方法 以家蝇幼虫cDNA文库为模板扩增出defensin基因的成熟蛋白全长编码序列，构建重组原核表达载体pGEX／MDEF，转化的克隆(质粒)通过筛选并测序鉴定。重组的pGEX／MDEF在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，SDS-PAGE鉴定其表达情况和分子质量并用抗鼠GST单抗作western blot杂交进一步鉴定融合蛋白的表达。结果 以家蝇幼虫cDNA文库扩增出一条长约为140bp的cDNA片段，经测序证实其为defensin基因成熟蛋白的编码序列，它编码含40个氨基酸的蛋白质，预测其分子质量单位为4kD。被成功克隆入pGEX-4T-1载体的家蝇幼虫defensin基因的cDNA，在重组大肠杆菌BL21(DE3)中诱导可大量生成相对分子质量30KD融合蛋白。结论 成功构建了家蝇幼虫defensin基因原核表达载体，且其成熟蛋白的编码序列在大肠杆菌高效表达。为下一步表达蛋白纯化，以及研究其生物活性提供了材料。     

大肠杆菌诱导家蝇抗菌物质的研究

目的　对家蝇体内的抗菌物质进行研究。方法　用大肠杆菌诱导家蝇三龄幼虫 ,采用抑菌圈法 ,对家蝇体内抗菌物质的诱导效果及其活性进行研究。以SDS PAGE法分离家蝇的抗菌蛋白。结果　诱导产生的家蝇抗菌物质其活力高峰出现于第 48h。诱导后第 48h血淋巴稀释 10 0倍 ,对大肠杆菌的致死率仍达 12 % ;其抗菌物质对动、植物病原菌有广谱的抗菌活性 ,同时 ,未经诱导的家蝇幼虫也具有抗菌活性。SDS PAGE电泳分析表明 ,外源诱导能增强原有抗菌物质的表达量 ,并能激活新的蛋白产生。结论　为进一步纯化和生化分析家蝇体内的抗菌蛋白提供了新的依据。     

家蝇幼虫抗菌肽Defensins基因的克隆与序列分析

目的：克隆家蝇幼虫的抗菌肽defensins基因并对其进行序列分析。方法：提取家蝇幼虫总RNA，根据家蝇成虫defensins基因cDNA序列设计一对引物，RT-PCR扩增目的基因片段，T-A克隆后测序，应用相关生物信息学软件对该序列进行分析。结果：RT—PCR扩增出一条约310bp的目的片段，序列分析表明，其与家蝇成虫防御素基因同源性高达97％，核酸序列变异主要发生在信号肽区域。结论：成功克隆及分析了家蝇幼虫防御素基因全长编码区cDNA序列，为其下一步的重组表达和生物活性研究奠定了基础。     

家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC和A375肿瘤细胞的抑制作用

目的研究家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC和A375肿瘤细胞的抑制作用。方法在体外培养的JEC和A375肿瘤细胞中分别加入0.02%、0.1%、0.5%、2.5%和12.5%浓度的抗菌蛋白,用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡,计算细胞凋亡指数;HE及AO染色法观察凋亡细胞形态。对照组采用不含抗菌蛋白的等量培养基。结果JEC细胞的凋亡指数/增殖指数(AI/PI)随浓度的增加而递增,2.5%抗菌蛋白组和12.5%抗菌蛋白组PI及凋亡率明显升高,G0/G1期下降。对A375细胞,12.5%抗菌蛋白组的G2/M期、S期、G0/G1期、G2/M期、AI/PI及PI与对照组的差异均有统计学意义(P<0.01)。结论家蝇幼虫抗菌蛋白可能通过诱导细胞凋亡来抑制JEC细胞生长;其对A375细胞的抑制可能是通过细胞周期阻滞以及诱导细胞凋亡而发挥作用。     

自然变温下家蝇发育的有效积温及其应用研究

本文报告了在自然变温条件下测定的家蝇各虫态及全世代发育起点温度(C)和有效积温常数(K)。并利用积温法则,根据当地气温情况预测了当地家蝇全年发生代数及成蝇密度高峰期。结果表明:家蝇全世代发育起点C为8.2℃,有效积温K为241.25(日·度),家蝇在济南地区全年发生12代,成蝇密度高峰期在6月及9月,与实际调查结果基本相符。认为利用积温法则预测家蝇的发生量,对制定防制策略具有重要意义。     

家蝇抗菌肽的诱导提取及筛选

目的 筛选家蝇血淋巴中抑制各种病原体的抗菌肽。方法用多种病原体及药物来刺激家蝇幼虫，诱导其产生抗菌肽，把其中部分加热，用诱导出的抗菌肽进行抑菌试验。结果所提取的抗菌肽均有抗菌成份，但效果不一。结论诱导源不同可产生不同的抗菌成份，加热后的抗菌成份有所破坏。     

家蝇蛆粉的临床前致畸性研究

目的探讨家蝇蛆粉对大鼠的致畸性,以评价其安全性。方法家蝇蛆粉按比例定量添加到普通饲料原料中混匀,干燥,做成高、中、低剂量家蝇蛆粉饲料。将性成熟的98只SD大鼠按雌雄2：1的比例同笼交配。取64只孕鼠平均分为四组：家蝇蛆粉饲料低剂量组;家蝇蛆粉饲料中剂量组;家蝇蛆粉饲料高剂量组;普通饲料对照组。于受孕后称量体重增长情况。最后脱颈椎处死孕鼠,称子宫重量,并进行胎鼠检查。结果家蝇蛆粉饲料高、中、低剂量组与对照组相比,雌鼠体重增长未见显著差异,子宫重量未见显著差异,无吸收胎、早死胎、晚死胎;各组间雄性与雌性胎鼠数均未见显著差异;各组间雄性与雌性胎鼠的外观、体重、体长均未见显著差异。各组间胎鼠骨骼和胎鼠内脏均未见显著差异。结论家蝇蛆粉对SD大鼠未见致畸性。