野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶mRNA转录的影响

目的 研究野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA转录及端粒酶活性的影响。方法 将含人野生型p53基因的pcDNA3—p53转染人胃癌细胞系BGG—823，通过半定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测转染后细胞hTERT基因mRNA的转录，聚合酶链式反应结合酶联免疫吸附(PCR ELISA)方法检测端粒酶活性。结果 转染野生型p53基因后48、72h BGC-823细胞的hTERT基因mRNA转录量由对照组的( )下降为( )和( )；转染前BGC—823细胞表达高水平的端粒酶活性(3．049)，而转染48、72h后的端粒酶活性分别为1．678和0．757。结论 野生型p53基因能够显著抑制人胃癌细胞hTERT基因mRNA的转录，通过下调hTERT、基因mRNA的转录来抑制胃癌细胞的端粒酶活性。     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因、野生型p53基因联合治疗裸鼠肝癌

目的：观察阳离子脂质体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV－TK）、野生型P53基因（wt-p53）联合治疗裸鼠肝癌的作用。方法：用6μl Dosper脂质体介导将1．5μgHSV－TK基因、1．5μg野生型p53基因转染人肝癌细胞系SMMC－7721，逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测基因表达，四唑蓝比色（MTT）法测定其对肝癌细胞的杀伤作用。在0．8cm裸鼠肝癌模型单独或联合导入5μg基因后，结合应用前药无氧鸟苷（GCV）100mg/kg体重7－10d，分别观察肿瘤的生长情况。结果：单独导入wt-p53对肝癌细胞的抑制率为15％，与HSV－TK基因联用后，在GCV10μmol/L时，杀伤效率明显强于单用HSV－TK，但在GCV1000μmol/L时，两者间杀伤效率差异无显著性（P＞0．05）。在鼠实验性肝癌，导入wt-p53后，肿瘤的生长受到抑制；wt-p53与HSV－TK／GCV联用后，在治疗的第8天就有4只（80％）裸鼠肿瘤完全消退，与HSV－TK／GCV组相比差异有显著性（P＜0．05）。结论：HSV－TK基因、wt-p53基因联合应用对裸鼠肝癌有显著杀伤作用。     

野生型p53基因对不同内源性p53状态的肝癌细胞株生长的影响

目的探讨外源性野生型p53(wild-type p53,WT-p53)基因对具有不同内源性p53功能状态肝癌细胞生长的影响.方法通过表达WT-p53的重组腺病毒载体(Ad-p53),将p53基因导入具有不同内源性p53功能状态的肝癌细胞株Bel-7402、QGY-7701和PLC/PRF/5中,用MTT法检测Ad-p53对各细胞株生长的影响,流式细胞仪分析各组细胞中DNA含量及凋亡的比例.结果当取40、200、800 MOI值的表达p53的腺病毒分别转染PLC/PRF/5、Bel-7402和QGY-7701细胞时,72 h后行MTT检测,OD值分别为在 PLC/PRF/5细胞,空载体(Ad-LacZ)组0.98±0.16,Ad-p53组0.02±0.00(P＜0.01);在Bel-7402细胞Ad-LacZ组1.04±0.23,Ad-p53组0.10±0.02(P＜0.01);而在QGY-7701细胞Ad-LacZ组1.88±0.24,Ad-p53组1.86±0.19(P>0.05).细胞周期分析显示,在PLC/PRF/5,表现为既诱导细胞凋亡,又诱导细胞周期阻滞.在Bel-7402,表现为诱导细胞周期阻滞.结论外源性p53对肝癌细胞生长的抑制可能与内源性p53功能状态无关.     

野生型p53基因对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤及其血管生成的影响

本文通过对荷ｐ5 3基因突变人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤的抑瘤实验及相关检测 ,评价ｐ5 3基因对肝癌细胞体内生长的影响及对其肿瘤血管生成的影响。1.资料与方法 :( 1)细胞培养 :人肝细胞癌细胞 (ＨＣＣ 92 0 4)常规方法培养。 ( 2 )抑瘤实验 :5× 10 6 ｍｌＨＣＣ92 0 4细胞悬液注射到裸鼠侧腹部皮下 ,待肿瘤长到 1周约 5ｍｍ大小时随机分组 ,每组 10只 ,分别瘤内注射等量Ｗｐ5 3重组质粒ＤＮＡ(Ｗｐ5 3 ＤＮＡ)、逆转录病毒载体重组质粒ＤＮＡ( ｐＬＸＳＮ ＤＮＡ)和ＰＢＳ ,每次 0 1ｍｌ,隔日 1次 ,共 14ｄ。两质粒ＤＮＡ的ＯＤ2 6 0 Ｏ…     

导入野生型p53基因对人胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响

目的 研究野生型p53基因对人胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响。方法 将载有野生型p53基因的表达质粒PC53-SN3导入U251细胞。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53基因在转染细胞中的表达,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)和流式细胞仪检测p53基因对U251细胞生长抑制及凋亡的影响以及它与顺铂联合作用后的效果。结果 通过RT-PCR证实了野生型p53基因在U251细胞中的表达。MTT检测发现p53基因对U251细胞的生长有明显的抑制作用,抑制率为(79.60±5.69)％。顺铂对 U251细胞的抑制作用随着顺铂浓度的增加(1、2、4、8 mg/L)而增强,抑制率分别为(19.40±6.69)％、(24.41±2.68)％、(51.84±13.38)％、(66.22±5.02)％,但不如 p53基因的抑制作用强。当野生型 p53基因与顺铂联合作用于 U251细胞时,抑制率明显增加,分别为(91.64±1.00)％、(94.98±1.67)％、(95.32±2.01)％、(95.65±1.00)％。p53基因转染所产生的 U251细胞凋亡率为 17.38％。顺铂引起的细胞凋亡率随着顺铂浓度的增加(1、2、4、8mg/L)而增加,分别为5.71％、5.93％、6.27％、6.81％。当p53基因与不同浓度的顺铂(1、2、4、8mg/L)联合作用于U251细胞时,凋亡率也明显增加,分别为23.50％、23.54％、23.89％、28.88％。结论 野生型p53基因与     

重组腺病毒介导的野生型p53基因对结直肠癌细胞的放射治疗增敏作用

目的探讨野生型p53基因通过重组腺病毒转染至结直肠癌细胞后对放射治疗（放疗）的增敏作用。方法将含野生型p53基因的重组腺病毒转染SW480结直肠癌细胞后,采用4、6Gy对其进行放疗。并通过噻唑蓝比色法检测生长抑制率、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记检测细胞凋亡水平、免疫组化检测增殖细胞核抗原的表达。结果经4、6Gy放疗后,转染野生型p53基因的SW480细胞生长受到了明显的抑制（P〈0．05）,凋亡率增加,增殖细胞核抗原比率下降。结论野生型p53基因可增加p53突变的结直肠癌细胞对放射治疗的敏感性。     

p53基因及其蛋白与大肠癌关系研究进展

结肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一 ,其发病率有逐年升高的趋势 ,目前已升至消化道肿瘤的第二位[1] 。随着医学生物技术以及分子生物学的飞速发展 ,人们已认识到本病的发生发展是一个多基因、多阶段、多步骤渐进演化的过程。该过程涉及到众多原癌基因的激活和肿瘤抑制基因的突变和 (或 )失活。p5 3即是其中极为重要的肿瘤抑制基因。　　 p5 3基因位于人类 1 7号染色体短臂 (1 7p1 3 1 )。全长约 1 6 2 0kb。由 1 1个外显子和 1 0个内含子组成。p5 3基因在进化过程中高度保守 ,外显子 2、 4、 5、 7、 8分别编码 5个在进化上高度保守的结构。野…     

肝细胞肝癌中p53、ras基因与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究肝细胞肝癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与ｐ５３,ｒａｓ基因之间的关系。方法 用免疫组织化学方法研究４５例肝癌标本ＶＥＧＦ,ｐ５３及ｒａｓ基因的表达。结果 ＶＥＧＦ的表达率为６４．４％（２９／４５）,ｐ５３的表达率为４８．９％（２２／４５）,ｒａｓ表达率为５３．３％（２４／４５）,经连续切片对比分析表明,在ＶＥＧＦ表达较高的区域,ｐ５３,ｒａｓ的表达亦较强,但Ｘ＾２检验仅提示ｐ５３     

肝癌bcl-2基因异常及与p53蛋白表达的关系

为探讨bcl-2和p53基因与肝细胞癌的关系，采用半套式原位聚台酶链反应和免疫组化技术原位检测40例肝细胞癌中bcl-2／JH融合基因、bcl-2蛋白及突变型p53蛋白的表达。结果显示40例肝细胞癌中6例bcl-2蛋白阳性，发生bcl-2基因重排10例，25例p53蛋白阳性，bcl-2蛋白表达与bcl-2／JH融合基因间无相互相对应关系。p53蛋白与bcl-2蛋白表达及bcl-2基因重排间无明显关系。结果说明，bcl-2和p53基因均与肝细胞癌的发生有一定关系。bcl-2／JH融合基因不是引起bcl-2蛋白表达的唯一原因。bcl-2和p53基因在肝细胞癌变过程中无协同作用。     

导入野生型p53基因对人胶质瘤细胞生长及放疗敏感性的影响

目的　研究野生型p5 3基因对人胶质瘤细胞生长及放疗敏感性的影响。方法　将野生型 p5 3基因导入U 2 5 1细胞 ,通过逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测 p5 3基因的表达。U2 5 1细胞分为 4组 :对照组、转染组、放疗组、转染联合放疗组。用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法 )和流式细胞仪检测p5 3基因或 /和放疗 (3、6、9Gy)对U 2 5 1细胞生长抑制及凋亡的影响。结果　通过RT PCR证实了 p5 3基因在U 2 5 1细胞中的表达。MTT检测发现 p5 3基因对U2 5 1细胞的生长抑制率为 (79.60± 5 .69) %。当放射剂量为 3、6、9Gy时 ,U2 5 1细胞的生长抑制率分别为(17.0 6± 4.3 5 ) % ,(17.3 9± 1.67) % ,(18.73± 4.68) %。当 p5 3基因与放疗 (3、6、9Gy)联合作用时 ,抑制率分别为 (80 .60± 5 .3 5 ) % ,(90 .3 0± 1.67) % ,(91.3 0± 2 .0 1) %。p5 3基因转染所产生的U 2 5 1细胞凋亡率为 17.3 8%。放疗 (3、6、9Gy)引起的细胞凋亡率分别为 4.61% ,4.84% ,5 .40 %。当p5 3基因与放疗 (3、6、9Gy)联合作用时 ,凋亡率分别为17.80 % ,2 0 .0 3 % ,2 2 .3 4%。结论　野生型p5 3基因与放疗对人胶质瘤细胞生长有协同抑制作用     

胆囊癌组织细菌L型的检测与p21及p53基因突变的关系

目的 探讨胆囊癌的发生与细菌L型感染和p21及p53基因突变的关系。方法 采用免疫组化SP法和革兰氏染色技术，对40例胆囊癌及40例慢性胆囊炎组织中的细菌L型和突变型p53蛋白及p21蛋白进行检测，并对胆囊癌组织中的细菌L型阳性伴p21及p53蛋白阳性表达结果和细菌L型阴性伴p21及p53蛋白阳性表达结果进行对比分析。结果 胆囊癌组织中革兰氏染色细菌L型检出率为77．5％(31／40)，明显高于胆囊炎的57．5％(23／40)，P＜0．05，且与免疫组化细菌L型抗原表达阳性率[80．0％(32／40)]具有一致性；胆囊癌组织中的p21及p53蛋白表达阳性率分别为62．5％(25／40)和65．0％(26／40)，明显高于胆囊炎组织中的p21及p53蛋白表达阳性率[2．5％(1／40)和5.0％(2／40)]，P＜0．05；胆囊癌组织中的细菌L型阳性者其p21及p53蛋白表达阳性率分别为75．0％(24／32)和78．1％(25／32)，明显高于细菌L型阴性者的p21及p53蛋白的表达阳性串率[12.5％(1／8)，12．5％(1／8)]，P＜0。05。结论 细菌L型参与了p21及p53基因的突变，并在胆囊癌的发生中可能起协同作用。     

膀胱癌复发与p53、p21WAF1/CIP1和细胞周期素E基因表达的相关性研究

目的：探讨膀胱癌p53、p21^WAF1/CIP1和细胞周期素E(CyclinE)基因的表达、相互间的调控及其与膀胱肿瘤复发生为的关系。方法：采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶法（SP）检测64例有随访资料的膀胱癌患者p53、p21^WAF1/CIP1、CyclinE基因和Ki-67抗原表达，并用双变量相关分析、Kaplan-Meier分析及Cox regression多因素分析。结果：p53与p21WAF1/CIP1之间有明显相关（rs=-0.630，P=0.000）。p21^WAF1/CIP1与CylinE之间无明显相关（rs=-0.160，P=0.206），p53、Ki-67阳性表达患者有较高的肿瘤复发率。结论：肿瘤的临床病理特征、p53、Ki-67可作为评估膀胱肿瘤恶性程度及预后的指标。     

The expression profile of p14, p53 and p21 in tumour cells is associated with disease-specific survival and the outcome of postoperative chemotherapy treatment in muscle-invasive bladder cancer

Purpose: We investigated the effects of alterations in the biological markers p14, p53, p21, and p16 in relation to tumour cell proliferation, T-category, N- category, lymphovascular invasion, and the ability to predict prognosis in patients with muscle-invasive bladder cancer (MIBC) treated with cystectomy and, if applicable, chemotherapy.Materials and methods: We prospectively studied patients with urinary bladder cancer pathological stage pT1 to pT4 treated with cystectomy, pelvic lymph node dissection and postoperative chemotherapy. Tissue microarrays from paraffin-embedded cystectomy tumour samples were examined for expression of immunostaining of p14, p53, p21, p16 and Ki-67 in relation to other clinical and pathological factors as well as cancer-specific survival.Results: The median age of the 110 patients was 70 years (range 51-87 years), and 85 (77%) were male. Pathological staging was pT1 to pT2 (organ-confined) in 28 (25%) patients and pT3 to pT4 (non-organ-confined) in 82 (75%) patients. Lymph node metastases were found in 47 patients (43%). P14 expression was more common in tumours with higher T-stages (P?=?0.05). The expression of p14 in p53 negative tumours was associated with a significantly shorter survival time (P=0.003). Independently of p53 expression, p14 expression was associated with an impaired response to chemotherapy (P=0.001). The expression of p21 in p53 negative tumours was associated with significantly decrease levels of tumour cell proliferation detected as Ki-67 expression (P=0.03).Conclusions: The simultaneous expression of the senescence markers involved in the p53-pathway shows a more relevant correlation to the pathological outcome of MIBC than each protein separately. P14 expression in tumours with non-altered (p53-) tumours is associated with poor prognosis. P14 expression is associated with impaired response to chemotherapy. P21 expression is related to decreased tumour cell proliferation.     

Roles of estrogen receptor, progesterone receptor, p53 and p21 in pathogenesis of pelvic organ prolapse

The aim of this study is to compare the levels of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), p53 and p21 between pelvic organ prolapse (POP) and control groups in order to evaluate their roles in pathogenesis of POP, and to find out the relationship among these proteins. Through the year of 2002, uterosacral ligaments were obtained from 20 prolapsus and 24 non-prolapsus hysterectomized uteruses. ER, PR, p53, and p21 proteins were extracted by Western blot analysis and relative levels of proteins were compared by Student t-test and Pearson correlation coefficient. P value <0.05 was considered statistically significant. All patients were postmenopausal and had never taken hormone replacement therapy. ER, PR, p53, and p21 were significantly lower in the study than control group (p<0.0001). Positive correlations were found among all proteins in the prolapse group. Further researches are needed to elucidate the interrelationship among these proteins and their precise roles in pathogenesis of POP.This study was supported by Yonsei University Research Fund of 2000 (2000-1-0225)     

乳腺浸润性导管癌钼靶X线表现与腋窝淋巴结转移及p53蛋白表达的关系

目的 探讨乳腺浸润性导管癌X线征象与腋窝淋巴结转移、p53蛋白表达的关系.方法 观察72例浸润性导管癌的X线征象及腋窝淋巴结转移状况,应用免疫组织化学检测p53表达,分析乳腺癌X线征象与腋窝淋巴结转移、p53表达的关系.结果 淋巴结转移组p53阳性表达率56.7%,较未转移组31.4%高(P＜0.05);≥2 cm组和血管增粗组p53阳性表达率、淋巴结转移率分别为66.7%、70.0%和56.4%、66.7%,均较＜2 cm组28.6%、38.1%和血管正常组30.3%、33.3%高(P均＜0.01);毛刺组淋巴结转移率70.8%高于无毛刺组41.7%(P＜0.05).结论 乳腺癌X线征象可评价腋窝淋巴结转移及p53表达,为临床诊治及预后判断提供参考.

Abstract：

Objective To investigate the relationship among the mammography signs, the axillary lymph node ( LN) metastasis, and the p53 expression of infiltrating ductal breast carcinoma. Methods Mammography signs and axillary LN metastasis were analyzed in 72 cases of infiltrating ductal carcinoma. Immunohistochemistry was used to detect p53 expression in tumor specimens. The relationship among the mammography signs, the axillary LN metastasis and the p53 expression was assessed. Results The positive rate of p53 expression was 56. 7% in the patients with axillary LN metastasis, which was higher than 31.4% in the patients without axillary LN metastasis ( P ＜ 0. 05 ). The rate of axillary LN metastasis and p53 expression were 66. 7% and 70. 0% in the tumors larger than 2 cm, 56. 4% and 66. 7% in the tumors with more vascular signs, 28. 6% and 38. 1% in the tumors less than 2 cm, 30. 3% and 33. 3% in the tumors with normal vascular signs (P ＜0. 01) , respectively. The rate of axillary LN metastasis in the patients with spinulation was 70. 8% , which was higher than 41.1% of patients without spinulation (P ＜0.05). Conclusion Mammography signs of breast cancer can evaluate the axillary LN metastasis and p53 expression, and also can provide objective reference for clinical diagnosis, treatment and prognosis of breast carcinoma.