青黛中靛玉红提取方法的研究

目的:探讨从青黛提取较高纯度靛玉红单体的方法。方法:用乙酸乙酯从青黛中提取靛玉红,然后比较提取液在硅胶柱和氧化铝柱的行为。结果:选用硅胶柱分离青黛中的靛玉红,经HPLC测定,靛玉红纯度达98.3%。结论:利用较简单的实验路线,从青黛中得到较高纯度的靛玉红单体。     

青黛药材中的靛蓝和靛玉红含量的同时测定

目的 以HPLC法同时测定青黛中有效成分靛蓝和靛玉红的含量。对中国药典2010年版中青黛含量测定方法的不足之处进行改进。方法 用适量DMF超声30 min提取青黛药材中的靛蓝和靛玉红。液相条件如下：色谱柱：Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流速1 mL/min;流动相：乙腈：水(70：30);柱温：30℃;检测波长：290 nm。此法在不影响分析结果的条件下可大大缩短分析时间。结果 靛蓝和靛玉红进样量在29.90 ng～298.90 ng和6.71 ng～67.06 ng间与峰面积的线性关系良好(r＞0.999,n=6)。靛蓝平均加样回收率：101.05％(RSD=1.81％);靛玉红平均加样回收率：99.78 ％(RSD=2.52％)。结论 本法合理、便捷;能同时测定青黛中靛蓝和靛玉红含量,符合现行药典简便、快速、准确的要求。     

正交函数分光光度法测定青黛中靛蓝的含量

用氯仿提取青黛中的靛蓝和靛玉红,然后用六点正交函数分光光度法测定.本法通过统计处理,消除靛玉红的干扰,可以测定青黛中靛蓝的含量,结果与《中国药典》85年版的方法基本一致.     

靛玉红提取分离及定量测定的研究

目的:探讨从青黛中提取及分离纯化靛玉红的最佳方法,确定靛玉红的高效液相色谱(HPLC)定量分析方法.方法:乙酸乙酯提取,氧化铝干柱进行分离纯化.选择适宜的溶剂、流动相、检测波长、绘制标准曲线、确定最佳检测条件、线性范围、准确度和精密度.结果:经提取分离纯化得到的靛玉红含量为11.3%,线性范围:0.12～0.60μg,r=0.9991.结论:用乙酸乙酯提取效果好,干柱氧化铝分离色带明显.用高效液相色谱法测定青黛中的靛玉红简便可行.     

甘草—青黛药对配伍的增溶作用研究

目的：青黛难溶,与甘草配伍以增加其在水中的溶解度,提高药液中青黛有效成分的含量及生物利用度。 方法：将甘草与青黛、甘草酸分别与靛蓝和靛玉红、柠檬酸与青黛进行配伍,均以HPLC法分别测定各实验中靛蓝、靛玉红的含量。 结果：青黛与生、炙甘草配伍,溶液中靛蓝和靛玉红的含量均明显增多,但炙甘草较生甘草的低约30%左右;将甘草酸单铵盐直接与靛蓝、靛玉红分别按比例混合,测得两者含量均显著增多,约增溶4~8倍左右,且2:1为最佳比例;青黛配伍不同比例柠檬酸,溶液中靛蓝和靛玉红含量无明显变化。 结论：甘草配伍青黛到达了增溶的目的;甘草酸起主要作用,是以其表面活性进行增溶;同时为中药药对配伍应用找到了一定的理论依据。     

北京地区青黛药材商品质量调查及分析

目的调查北京地区14种青黛商品,进行含量测定,并分析影响青黛质量的主要因素。方法按《中国药典》2010版方法测定青黛中靛蓝和靛玉红的含量。结果 14种青黛商品中靛蓝平均含量为2.031%,靛玉红含量为0.066 7%。结论目前市场上青黛药材商品质量存在很大差异,一些样品的靛蓝、靛玉红含量无法达到药典规定的指标。     

甘草-青黛药对配伍的增溶作用考察

目的:考察青黛-甘草药对配伍的增溶效果。方法:将甘草与青黛、甘草酸分别与靛蓝和靛玉红、柠檬酸与青黛进行配伍,采用HPLC测定各试验品中靛蓝、靛玉红的含量。结果:青黛与生、炙甘草配伍,溶液中靛蓝和靛玉红的含量均明显增多,炙甘草较生甘草约低30%;将甘草酸单铵盐直接分别与靛蓝、靛玉红按比例混合,两者含量均显著增多,约增溶4～8倍,其中2∶1为最佳比例;青黛配伍不同比例柠檬酸,溶液中靛蓝和靛玉红含量无明显变化。结论:甘草配伍青黛可达到增溶目的,甘草酸起主要作用,为中药药对配伍应用提供理论依据。     

联用Plackett-Burman与Box-Behnken设计控制青黛制备过程中靛玉红的生成

目的:筛选出青黛炮制过程中显著影响靛玉红生成的因素,优化最佳水平组合,确定生成靛玉红的最佳工艺。方法:以鲜叶产靛玉红的质量分数(mg·g-1)为指标,采用Plackett-Burman设计,Box-Behnken设计效应面分析等统计学方法,筛选出显著影响因素及最佳水平组合。结果:青黛的浸泡、打靛工艺确定为浸泡前不除蜡、浸泡液pH7、溶剂用量-鲜叶质量(mL∶g)15、浸泡不避光、浸泡48h、温度60℃、通气时间180min、加氨水调节打靛前pH至10.5。结论:系统考察了青黛炮制过程中各个影响因素对产生的有效成分靛玉红的影响,使工业化生产控制靛玉红的生成变为现实,为进一步研究青黛炮制原理奠定了基础。     

不同药物配伍与不同基质对甘石青黛膏经皮吸收的影响

目的建立甘石青黛膏透皮实验中靛蓝及靛玉红的测定方法,考察甘石青黛膏全方与拆方,以及不同基质下靛蓝及靛玉红的体外经皮渗透行为,探讨不同药物配伍与不同基质对其透皮效果的影响。方法采用Franz扩散池,以离体鼠皮为屏障,用高效液相色谱法测定接受液中靛蓝及靛玉红的量;考察全方与拆方、凡士林基质以及橄榄油基质下靛蓝及靛玉红的透皮特性。结果全方组的透皮速率和累计渗透量均大于拆方组,且差异有统计学意义(P0.05);橄榄油基质对软膏中靛蓝的渗透效果较凡士林基质明显,而二者对靛玉红的影响没用显著性差异。结论不同药物配伍与不同基质对甘石青黛膏中靛蓝及靛玉红的透皮吸收均有影响。     

基于色度分析原理的青黛有效成分含量与其色度值的相关性分析

目的:研究青黛粉末外观颜色及其提取液颜色与靛蓝、靛玉红含量的相关性。方法:采用HPLC法测定27批青黛中靛蓝、靛玉红的含量,采用分光测色仪测定青黛粉末及提取液的色度值L~*,a~*,b~*。运用SPSS 20.0软件对青黛有效成分含量与其色度值进行相关性及多元线性回归分析。结果:感官评定青黛粉末外观颜色结果表明,随着粉末颜色加深,分光测色仪测定粉末和提取液的明亮度(L~*)降低、红-绿色度(a~*)升高。相关性分析表明,靛蓝含量与青黛粉末L~*呈负相关(P0.01),相关性系数为-0.520;与a~*呈正相关(P0.01),相关性系数为0.567。靛玉红含量与青黛粉末、提取液的L~*呈负相关(P0.01),相关性系数分别为-0.635,-0.580;与a~*呈正相关(P0.01),相关性系数分别为0.706,0.493。结论:青黛粉末外观颜色较深者,其靛蓝、靛玉红含量较高;青黛粉末L~*,a~*与靛蓝、靛玉红含量的相关性比提取液的相关性大;青黛粉末颜色与靛蓝、靛玉红含量具有显著相关性,为青黛快速鉴别方法提供参考依据;采用分光测色仪测定青黛色度值的方法具有稳定性、科学性和可靠性。     

靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响

目的观察青黛及其有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎（UC）小鼠脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响,探讨其治疗uc的作用机制和靶点。方法将50只BABL／c小鼠随机分为正常组、模型组、靛玉红组、青黛组和5-ASA组。除正常组外,其余小鼠采用自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液5天,制备DSS诱导的UC小鼠模型。于造模后第5天开始,予各组小鼠给药治疗7天。观察各组小鼠一般状况及结肠组织病理学改变,同时检测脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达变化。结果与正常组比较,模型组小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达显著减少（P〈0．01）;各治疗组CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达较模型组升高（P〈0．01）。结论青黛及其有效成分靛玉红可通过上调CD4CD25Treg细胞Foxp3表达以防治UC。     

一阶导数光谱法测定中成药青龙散中靛蓝的含量

目的:为排除靛玉红或其它组分的干扰。建立中成药青龙散的质控方法。方法:利用一阶导数光谱法对青龙散中靛蓝的含量进行测定。结果:平均回收率为99.63％,RSD为±0.18％。结论:本法准确、稳定、测定结果可靠。     

Indirubin,a purple 3,2- bisindole,inhibited allergic contact dermatitis via regulating T helper (Th)-mediated immune system in DNCB-induced model

Ethnopharmacological relevance

Indirubin, isolated from Indigo naturalis (Apiaceae) is a purple 3,2- bisindole and a stable isomer of indigo. Although it is known to have anti-inflammatory activities, its mechanism of action has not been elucidated.

Materials and methods

Seven-week-old female BALB/c mice were sensitized with 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (DNCB) to induce skin inflammation. Hematoxylin and eosin staining was performed to assess epidermal and dermal hyperplasia, which were determined by measuring the thicknesses of the epidermis and dermis, respectively. We also evaluated serum immunoglobulin E (IgE) levels and cytokines production, such as tumor necrosis factor (TNF)-alpha, interleukin (IL)-4, 6 and Interferon (IFN)-gamma. In addition, we investigated nuclear factor (NF)-κB, IκB-α and mitogen-activated protein (MAP) kinase activities for verifying the molecular mechanism of inflammation.

Results

Indirubin treatment suppressed skin inflammation in DNCB-exposed mice. The skin lesions were significantly thinner in the Indirubin-treated group than in untreated controls, and the hyperkeratosis disappeared. Indirubin reduced the total serum IgE level and cytokines production. In addition, it normalized NF-κB, IκB-α and MAP kinase expression.

Conclusions

Indirubin might be a useful treatment for allergic contact dermatitis via regulating the co-expression of T helper (Th) 1 and 2 cell-mediated immune responses.     

薄层层析法检测板蓝根所含靛玉红、靛蓝的方法研究

目的：对板蓝根所含靛玉红、靛蓝的薄层色谱进行实验性研究。方法：采用硅胶G板点样，选择最佳展开系统和样品最低检出量。结果：获得最佳色谱条件①硅胶G板为吸附剂；②石油醚-乙酸乙酯-氯仿（1：1：8）为展开剂。该色谱条件下，样品所含靛玉红、靛蓝的最低检出量分别为20μl、12μl。结论：本方法简便、快速、有效，可以作为板蓝根提取液靛玉红及靛蓝的相对含量的检测方法。     

青黛炮制原理的新认识

目的:研究青黛炮制原理.方法:通过扫描电子显微镜(SEM)和X-衍射(XRD)方法,对青黛的微观结构进行了研究.结果:经SEM发现,靛蓝依附于某种白色固体的表面,而XRD证明了吸附靛蓝的白色固体是CaCO3.结论:对青黛炮制原理有了新的认识,了解到青黛是由靛蓝等有效成分依附于CaCO3表面而组成的.     

复方青黛散的制备与临床应用

目的:探讨复方青黛散对口腔溃疡的治疗效果.方法:介绍该制剂的处方、制备及质量控制方法.结果:复方青黛散治疗口腔溃疡总有效率98%.结论:该制剂临床疗效较好,未发现不良反应,值得临床推荐使用.     

青黛镇痛、抗炎药效学研究

目的:观察不同给药方式下青黛的镇痛、抗炎作用。方法:分别采用ig和外涂两种给药途径,用药4 d。动物分为空白对照组,阳性药组以及青黛治疗组(600,300,150 mg·kg-1 ig 3个剂量;外涂青黛给药剂量为小鼠400 mg/只、大鼠500 mg/只)。以热板法和小鼠扭体法观察青黛的镇痛作用;以二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、大鼠棉球肉芽肿法观察青黛的抗炎作用。结果:ig给药,青黛对热板所致的小鼠疼痛可使痛阈提高达47%,醋酸致小鼠疼痛的扭体减少达40%,与空白组比较差异显著(P<0.05或P<0.01);对急性炎症模型耳廓肿胀抑制率为48%,与空白组比较抗炎作用显著(P<0.05),对亚急性炎症模型作用不明显;外涂给药,对热板法致的小鼠疼痛有显著镇痛作用(P<0.01),对醋酸所致的小鼠扭体反应影响不明显,对急性、亚急性炎症模型均有明显抗炎作用(P<0.01)。结论:结果提示青黛内服、外用均有一定的镇痛、抗炎作用;不同给药途径对于不同疼痛、炎症模型的影响表现出一定的差异性。     

对11种青黛的质量考察

目的：对目前市场上青黛药材进行质量考察。方法：采用薄层色谱法，紫外分光光度法等对其进行定性。定量分析。结果：目前市场上青黛的质量存在较大差异。青黛中靛蓝的含量最高达3.12% ，最低仅为1.29%。结论：应进一步规范青黛的生产工艺，完善质量标准，严把质量关。     

大青叶中靛玉红的抗血管生成活性研究

 目的 研究大青叶中靛玉红的抗血管生成活性。方法 采用斑马鱼模型和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型对靛玉红抑制血管生成活性进行测定。结果 10,50 mg·L-1的靛玉红能显著抑制斑马鱼胚胎体节间血管生成,抑制率为20.9%和38.4%。每个鸡蛋分别加入5, 7.5和10 μg 靛玉红处理72 h后,CAM血管生成被显著抑制,抑制率为32.70%,41.61%和51.43%。结论 靛玉红具有显著的抗血管生成活性。