促血管生成素-1、2及其受体在寻常性银屑病中的表达

目的 探讨促血管生成素-1(Ang-1)、促血管生成素-2(Ang-2)及其受体Tie-2在寻常性银屑病皮损组织中的意义.方法 免疫组化SABC法检测30例寻常性银屑病患者皮损中的Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2蛋白表达,以CD34标记新生血管内皮并计数微血管密度(MVD).另取15例正常人皮肤组织作为对照组.结果 寻常性银屑病患者皮损处Ang-2及其受体Tie-2表达明显强于正常人对照组(P<0.01),而Ang-1蛋白的表达与正常人对照组表达差异无统计学意义.进行期与静止期比较,Ang-2及Tie-2表达差异均有统计学意义(P<0.05),而Ang-1蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05).寻常性银屑病患者皮损中MVD值明显高于正常人对照组(P<0.01),高密度组(MVD≥15.46)与低密度组(MVD<15.46)的Ang-1表达差异无统计学意义(P>0.05),但Ang-2及其受体Tie-2表达差异有统计学意义(P<0.05).相关性分析表明,银屑病皮损Ang-1与Ang-2蛋白表达水平呈负相关(r=0.521,P<0.05);MVD值与Ang-2蛋白表达呈正相关关系(r=0.656,P<0.01),与Ang-1蛋白表达无相关性(r=0.237,P>0.05 o结论Ang-2及其受体Tie-2与银屑病的血管生成关系密切,促血管生成素及其受体系统在银屑病新生血管生成中的调节作用可能是以Ang-2的作用为主导的.     

银屑病患者皮损中血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶2的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)在寻常性银屑病皮损血管生成中的作用。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损、12例非皮损和12例正常人皮肤中VEGF、MMP-2的表达水平与分布特征。结果①VEGF在银屑病皮损组织中阳性表达明显高于非皮损组织和正常人皮肤(P<0.05)。②MMP-2在银屑病皮损组织中的阳性表达明显高于非皮损组织和正常人皮肤(P<0.05)。③VEGF、MMP-2在银屑病皮损中表达呈正相关(P<0.05)。结论VEGF、MMP-2在寻常性银屑病发病的血管生成中可能起协同作用。     

CCL27和CCR10在寻常性银屑病皮损的表达及与PASI的相关性

目的 探讨皮肤特异性趋化因子CCL27及其受体CCR10在寻常性银屑病皮损中的表达和表达强度与疾病活动性的相关性.方法 SP免疫组化染色检测20例寻常性银屑病皮损区皮损和10例正常人皮肤中CCL27、CCR10的表达,以PASI评分评价银屑病患者疾病活动性.结果 ①CCL27在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤中表达的阳性率分别为95%和20%,两者差异有统计学意义(X²=17.86,P<0.01);CCR10在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤表达的阳性率分别为85%和10%,两者的差异有统计学意义(X²=15.63,P<0.01).②CCL27和CCR10在皮损中的表达水平与PASI评分均呈明显正相关,r值分别为0.82和0.83,P值均<0.01.结论 CCL27和CCR10的过度表达与银屑病患者的疾病活动性相关.     

寻常性银屑病皮损及非皮损中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达

目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达水平。结果寻常性银屑病患者皮损中IL-23p19及p40(IL-23/IL-12)mRNA的表达均高于非皮损组织和正常皮肤组织(P<0.05),且非皮损处高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);IL-12p35mRNA在银屑病皮损处、非皮损处和正常对照中表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论在寻常性银屑病发病过程中,IL-23可能发挥较IL-12更重要的作用。     

中性粒细胞弹性蛋白酶在银屑病患者血清及皮损中的表达

目的:检测中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在银屑病患者皮损及血清中的表达.方法:用双抗体夹心ELISA法,检测50例寻常性银屑病患者和16例脓疱性银屑病患者外周血,以及32例寻常性银屑病患者和10例局限性脓疱性银屑病患者皮损负压吸疱液中NE表达水平.结果:寻常性银屑病患者外周血及皮损组织液中NE表达水平显著高于对照组(P均<0.01),其中进展期和稳定期寻常性银屑病患者外周血及皮损组织液中NE的表达差异有统计学意义(P<0.05),且与患者相应的银屑病皮损面积和严重度指数(PASI)积分呈正相关.脓疱性银屑病患者外周血及皮损组织液中NE表达水平与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论:NE在寻常性银屑病和脓疱性银屑病发病机制中可能起重要作用.     

寻常性银屑病患者外周血中性粒细胞中趋化因子受体的表达

目的:了解趋化因子受体在寻常性银屑病外周血中性粒细胞活化及趋化中的作用,探讨寻常性银屑病的发病机制。方法:应用反转录(RT)-PCR检测33例进行期斑块状银屑病患者及其中16例患者治疗后外周血中性粒细胞中趋化因子受体CXCR1～3及CCR1、5mRNA的表达水平,并设30名正常人作对照。将检测结果与银屑病皮损面积严重度指数(PASI)进行相关性分析。结果:寻常性银屑病患者治疗前中性粒细胞中CXCR1、CXCR2与CCR1mRNA表达水平分别为1.36±1.19、1.45±0.87与1.43±1.28,明显高于正常对照及治疗后的患者[正常对照分别为0.55±0.37(P<0.01),0.74±0.58(P<0.001),0.68±0.37(P<0.001);治疗后分别为0.46±0.33(P<0.001),0.63±0.58(P<0.01),0.73±0.86(P<0.05)],其中CXCR1、CXCR2与PASI呈显著正相关。结论:CXCR1、CXCR2与CCR1在寻常性银屑病患者外周血中性粒细胞中表达异常增高,它们可能参与了中性粒细胞的活化及趋化,进而参与了银屑病的发病。     

寻常型银屑病患者皮损中miRNA-34a及其靶基因Notch1的表达及意义

目的:探讨miRNA-34a及其靶基因Notch1在寻常型银屑病患者皮损中的表达水平及意义。方法:实时荧光定量PCR法检测22例寻常型银屑病患者皮损组织及10例正常人皮肤组织中miRNA-34a的表达水平。采用免疫组化EnVision法检测51例寻常型银屑病患者(包括上述22例患者)和29例正常人(包括上述10例正常人)皮损组织中miRNA-34a可能的靶基因Notch1的表达情况。结果:miRNA-34a在寻常型银屑病患者皮损组织中的表达水平为0.162±0.186,高于正常皮肤组织中的表达水平(0.028±0.029),银屑病组为正常对照组的5.786倍,两组比较,差异有统计学意义(t=2.22,P<0.05);Notch1在寻常型银屑病组织中主要为表皮全层细胞质表达,阳性表达率为76.47%(39/51),而在正常皮肤组织中阳性表达率为13.79%(4/29),两者差异有统计学意义(χ~2=29.22,P<0.05)。结论:miRNA-34a在寻常型银屑病皮损组织中的表达高于正常人皮肤组织,其可能通过调控靶基因Notch1参与寻常型银屑病的发病机制。     

银屑病患者粒-单核巨噬细胞集落刺激因子表达的研究

目的 探讨脓疱性银屑病和寻常性银屑病患者皮损组织及外周血粒-单核巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）表达的变化。方法 免疫组化法和双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测脓疱性银屑病和寻常性银屑病患者皮损组织和外周血中GM-CSF表达水平,并与正常人进行比较。结果 与正常人对照组相比,脓疱性银屑病组和寻常性银屑病组皮损组织中GM-CSF表达均增高（P < 0.01）,且脓疱性银屑病组皮损组织中GM-CSF表达高于寻常性银屑病组（P < 0.01）。与正常人对照组相比,脓疱性银屑病组和寻常性银屑病组外周血中GM-CSF含量均升高（P < 0.01）,且脓疱性银屑病组外周血中GM-CSF水平高于寻常性银屑病组（P < 0.01）。结论 GM-CSF可能参与银屑病的发病。     

Toll样受体2和4在银屑病皮损中的表达

目的研究Toll样受体（TLR）2和4在银屑病皮损中的表达，探讨其与银屑病发病的关系。方法选用16例滴状银屑病、13例斑块状银屑病患者及10例正常人皮肤的石蜡切片．用免疫组化的方法研究TLR2和TLR4的表达。结果10例正常人皮肤的基底层均有较弱的TLR2表达而无TLR4表达．真皮血管内皮细胞未见TLR2及TLR4表达。所有16例滴状银屑病、13例斑块状银屑病皮损的基底细胞层均可见明显的TLR2表达，棘层也有弱表达；TLR4则呈现表皮全层的弥漫性强表达。银屑病真皮浅层血管内皮细胞可见明显的TLR2及TLR4表达。结论TLR2、TLR4在银屑病皮损均有表达，TLR4的表达更高：提示感染相关免疫与银屑病发病关系密切。     

红斑、丘疹及鳞屑性皮肤病

20072434Toll样受体2和4在银屑病皮损中的表达/齐焕英(北京大学人民医院皮肤科),张建中∥中华皮肤科杂志.-2006,39(11).-636~638选用16例滴状银屑病、13例斑块状银屑病患者及10例正常皮肤的石蜡切片,用免疫组化法研究Toll样受体(TLR)2和TLR4的表达。其中正常人皮肤的基底层均有较弱的TLR2表达而无TLR4表达,所有滴状银屑病、斑块状银屑病皮损的基底细胞层均可见明显的TLR2表达,棘层也有弱表达,TLR4则呈现表皮全层的弥漫性表达。银屑病真皮浅层血管内皮细胞可见明显的TLR4表达。这些均提示感染相关免疫与银屑病关系密切。图6参6(陈…     

银屑病和扁平苔藓皮损ki-67及PCNA蛋白的表达

目的研究银屑病和扁平苔藓患者皮损表皮增殖状态，并比较ki-67和PCNA在增殖性皮肤疾病中表达的一致性。方法应用免疫组化法分别检测银屑病和扁平苔藓患者皮损处ki-67及PCNA的表达。结果正常对照组ki-67及PCNA弱阳性表达，仅在基底层有表达；扁平苔藓组ki-67及PCNA在基底层和棘层中均有阳性表达；银屑病组表皮基底层、棘层、颗粒层中角质形成细胞强阳性表达ki-67及PCNA。与正常对照组相比，扁平苔藓组、银屑病组ki-67及PCNA表达均增高（P〈0．05）；与扁平苔藓组相比，银屑病组ki-67表达增高（P〈0．05），PCNA无统计学意义。ki-67和PCNA在皮损中表达一致性差。结论ki-67和PCNA可能通过诱导角质形成细胞增殖参与了扁平苔藓和银屑病的发病，银屑病和扁平苔藓表现出不同的表皮增殖动力学状态。     

The effects of calcipotriol and methylprednisolone aseponate on bcl-2, p53 and ki-67 expression in psoriasis

OBJECTIVE: The decrease of physiological apoptosis in the psoriatic lesions is thought to be involved in the pathogenesis of psoriasis, and induction of apoptosis was shown to contribute to the regression of psoriatic hyperplasia. In the present study, we compared the effects of calcipotriol and methylprednisolone aseponate (MPA) treatments on bcl-2, p53 and ki-67 expressions in psoriatic patients in order to define a relationship between regulation of apoptosis and healing process in psoriasis. METHODS: Thirty psoriatic patients with stable and moderate chronic plaque psoriasis applied either calcipotriol or MPA ointment for 6 weeks twice daily. Evaluation of bcl-2, p53 and ki-67 positivity was performed at baseline and was repeated at sixth week for each therapy. RESULTS: The mean percentage of positive keratinocytes was 8.63 +/- 7.15% for p53, 20.66 +/- 14.45% for ki-67, and 3.74 +/- 2.83% for bcl-2 in psoriatic skin at baseline. Normal skin values were 3.27 +/- 3.21% for p53, 4.93 +/- 4.77% for ki-67, and 1.80 +/- 0.41% for bcl-2. The psoriatic skin showed higher ki-67 (P < 0.05) and bcl-2 (P < 0.05) expression rates when compared to normal skin. The p53 positivity observed in psoriatic skin and normal skin was not significantly different (P > 0.05). Following calcipotriol and MPA treatments, there was a significant reduction in p53 and ki-67 positivity accompanied by an increase in bcl-2 positivity (P < 0.05 each). No significant differences were found at sixth week between calcipotriol and MPA groups with respect to p53, ki-67 and bcl-2 positivity (P > 0.05). The post-treatment psoriatic skin showed lower expression of p53, higher expressions of ki-67 and bcl-2 when compared to normal skin (P < 0.05 each). CONCLUSION: The results of this study provide evidence that both calcipotriol and MPA decrease the p53 and ki-67 expression and increase bcl-2 expression. However, it should further be elucidated if these changes were the common behaviour of psoriatic keratinocytes to any antipsoriatic medication.     

寻常型银屑病皮损中血管紧张素Ⅱ及血管紧张素转化酶的检测

目的:检测寻常型银屑病皮损中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及血管紧张素转化酶(ACE)的水平变化。方法:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组化技术检测30例寻常型银屑病患者(进行期17例,静止期13例)皮损AngⅡ和ACE mRNA及蛋白质的表达。结果:银屑病患者皮损中AngⅡ和ACE mRNA及蛋白质的表达明显高于正常人对照组(P0.001),且进行期高于静止期(P0.001)。结论:AngⅡ和ACE在银屑病皮损中表达上调,推测可能与银屑病皮损中新血管的形成有关。     

转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α在银屑病皮损中的表达及意义

目的 探讨转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBP-α）在寻常性银屑病皮损中的表达及与角质形成细胞异常增殖及皮损严重程度间的相关性。 方法 用免疫组化二步法及Western印迹检测30例寻常性银屑病患者皮损和30例健康对照皮肤的表皮中C/EBP-α。免疫组化法检测Ki-67的表达,并根据Ki-67阳性表达数量计算增殖指数,Pearson相关分析法分析寻常性银屑病皮损中C/EBP-α的表达水平与角质形成细胞Ki-67增殖指数及银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI评分）间的相关性。 结果 C/EBP-α主要在角质形成细胞胞质中表达,寻常性银屑病皮损中C/EBP-α的表达较健康对照皮肤明显下调（t = 7.82,P ＜ 0.05）。Ki-67主要在角质形成细胞胞核中表达,寻常性银屑病皮损中角质形成细胞的增殖指数明显高于健康对照皮肤（t = 4.54,P ＜ 0.05）。经Pearson相关分析,寻常性银屑病皮损中C/EBP-α表达水平与增殖指数呈负相关,与PASI评分呈负相关。Western印迹结果亦显示,C/EBP-α在银屑病皮损处的表达量显著下调。 结论 C/EBP-α在寻常性银屑病皮损中表达下调,可能参与了寻常性银屑病的发病过程。     

寻常型银屑病患者体内半乳糖凝集素家族蛋白表达研究

 目的:探讨寻常型银屑病（PV）患者体内半乳糖凝集素（Gal）家族蛋白表达情况。方法:采用ELISA法检测30例PV患者与30例正常对照者血清中Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-9的水平;采用免疫组化检测15例PV患者皮损与10例正常皮肤中Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-9的表达及细胞定位;以平均光密度值评价表达水平,比较其在PV患者与正常对照组中表达的差异。结果:与正常对照者相比,PV患者血清中Gal-1水平明显上调［（39.57±11.33） ng/mL比（31.93±7.98） ng/mL,t=3.02,P=0.004）］,且与PASI评分呈正相关（r=0.37,P=0.049）;皮损中Gal-1主要表达于真皮且表达明显上调（0.030±0.043比0.011±0.002,t=3.34,P=0.003）;PV患者表皮中Gal-3表达下调（0.016±0.001比0.060±0.018,t=-2.85,P=0.009）、 Gal-7上调（0.090±0.011比0.049±0.009,t=2.58,P=0.017）、 Gal-9下调（0.011±0.002比0.049±0.007,t=-6.16,P<0.001）。结论:Gal家族成员Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-9在PV患者血清中的水平及皮损局部的细胞定位与表达各不相同,提示其在PV中的功能也存在差异,有可能参与了PV的发病机理。     

寻常性银屑病患者皮损NF-κB,IL-6,p16,DNMT1和HDAC1表达及共表达的关系

目的探讨寻常性银屑病患者皮损中NF-κB,IL-6,p16的表达水平及各与DNMT1或HDAC1的共表达的关系。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病和30例包皮环切术皮损中NF-κB,IL-6,p16及各与DNMT1或HDAC1的表达和共表达,并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均光密度测定,分析各自表达水平及共表达定位的关系。结果寻常性银屑病皮损中NF-κB(96.25±1.92)和IL-6(129.11±10.47)的表达显著高于正常对照(NF-κB为67.53±2.03,IL-6为67.61±1.92);p16的表达(64.92±1.97)显著低于正常对照(84.01±12.01);此外,DNMT1和HDAC1各与NF-κB,IL-6,p16的共表达信号比较,正常对照组和病变组有差异,病变组在棘细胞浅层的表达均高于深层。以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 NF-κB,IL-6,p16参与银屑病发病机制;棘细胞浅层可能参与银屑病的表观遗传调节。     

Comparison of the Expression Profile of JunB, c-Jun, and S100A8 (Calgranulin A) in Psoriasis Vulgaris and Guttate Psoriasis

Background

Psoriasis is a chronic, inflammatory, immune-mediated skin disease. Recently, several psoriasis-linked genetic loci have been reported; PSORS4 contains S100A8 (calgranulin A), and PSOR6 (19p13) locus harbors JunB (19p13.2). S100A8 is considered to be a marker of inflammation in a variety of diseases. The expression of JunB and c-Jun have been reported to be reduced in psoriatic lesions.

Objective

We attempted to assess the role and correlation of S100A8, JunB, and c-Jun in the pathogenesis of guttate psoriasis and psoriasis vulgaris by studying whether any difference of immunohistochemical expression existed.

Methods

Skin biopsy specimens from patients with psoriasis vulgaris (n=37) and guttate psoriasis (n=17), and a normal skin controls (n=9) were utilized in the study. Formalin-fixed and paraffin-embedded tissue sections were prepared and JunB, c-Jun, and calgranulin A were immunohistochemically stained in order to compare the expression of those three proteins in each group.

Results

Reduced JunB expression was observed in patients with psoriasis vulgaris and guttate psoriasis, as compared to patients in the control group; however, c-Jun expression was reduced only in the psoriasis vulgaris group. The expression of S100A8 increased in the psoriasis groups as compared to the control group. In addition, the expression of S100A8 was different between the psoriasis vulgaris and guttate psoriasis groups; S100A8 was expressed more profoundly in the guttate psoriasis group (p<0.05).

Conclusion

Our results indicate that S100A8 contributes to the pathogenesis of guttate psoriasis, and it may be a good target for therapy for guttate psoriasis provoked by microorganisms.     

银屑病患者皮损中VEGF受体FLT-1和KDR的表达

目的:检测VEGF受体FLT-1与KDR在寻常型银屑病皮损中的表达水平,探讨其在银屑病发病中的意义。方法:应用免疫组化SABC法,检测37例寻常型银屑病患者皮损和37例正常人皮肤组织FLT-1蛋白、KDR蛋白的表达。结果:寻常型银屑病皮损处的FLT-1蛋白和KDR蛋白的表达水平明显强于正常对照组(P<0.001);KDR的表达强度与寻常型银屑病严重程度指数PASI评分有显著正相关(r=0.93,P<0.001),且KDR的表达强度高于FLT-1的表达强度(P<0.05)。结论:VEGF的两种受体FLT-1与KDR在银屑病新生血管形成中具有重要作用,其中KDR起主要作用。通过阻断VEGF受体KDR以抗血管生成,可望为治疗银屑病提供一种新的有效方法。     

血管内皮生长因子在寻常型银屑病患者中医辨证分型皮损和血清中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在寻常型银屑病患者中医辨证分型(血热型、血燥型和血瘀型)皮损和血清中的表达。方法采用免疫组化法和酶联免疫吸附法(ELISA法)对60例寻常型银屑病患者(中医辨证分型)皮损处及血清中VEGF的水平进行了检测。结果皮损处VEGF水平为血热型组>血燥型组及血瘀型组;血清中VEGF的水平为血热型组>血燥型组>血瘀型组。结论对寻常型银屑病患者皮损处及血清中VEGF水平的检测有可能用于血热型银屑病与非血热型银屑病的中医辨证分型。     

神经生长因子受体P75和P140trkAmRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)受体P75和P140trkA在寻常型银屑病发病机制中的作用.方法应用原位杂交技术检测了33例寻常型银屑病患者(18例为进展期,15例为静止期)和10例正常人皮肤组织中两受体(P75和P140trkA)mRNA的表达情况.结果与正常人皮肤比较,寻常型银屑病皮损及非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P＜0.01);进展期患者皮损与非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达分别高于静止期患者的皮损与非皮损区(P＜0.01).结论神经生长因子及其两受体可能是参与银屑病病理机制的重要因子.