褪黑素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

探讨褪黑素(MEL)对肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用，在大鼠肝脏热缺血再灌注模型缺血前30min腹腔注射MEL(10mg/kg)，缺血45 min后恢复血流灌注，并于灌注2h, 24h后心腔取血测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)，同时取肝组织行病理组织学检查及细胞凋亡检测。结果缺血再灌注组(IR组)AST，ALT，AKP及肝细胞凋亡数均明显高于正常对照组（N组）(P<0.01)，褪黑素预处理组（MEL组）则明显低于IR组(P<0.05)，而高于N组（P<0.01或0.05）。MEL组肝脏病理组织学改变明显轻于IR组，重于N组。提示MEL对肝缺血再灌注损伤具有保护作用。     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤早期载脂蛋白M的表达

目的 探讨大鼠肝缺血再灌注损伤早期肝内载脂蛋白M mRNA(apoM mRNA)及血浆apoM的表达。方法 建立大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型。健康雄性SD大鼠40只随机分成5组，每组8只：假手术组(对照组)；IR1组(灌注0．5h)；[R2组(灌注1．0h)；IR3组(灌注2．0h)；[R4组(灌注3．0h)。缺血再灌注组的缺血时间统一为1．0h。检测血浆谷丙转氨酶水平(ALT)、肝组织病理变化、血浆apoM蛋白及肝组织apoM mRNA。结果 血浆ALT的水平随着灌注时间的延长而升高，肝组织损伤随着灌注时间的延长而逐渐加重。肝组织apoM mRNA的表达则先有一过性下降(灌注0．5h组)，此后随着灌注时间的延长其表达明显增强。血浆apoM蛋白有相同的变化趋势，但其表达在灌注2．0h才有上升。结论 在肝缺血再灌注损伤过程中，肝脏apoM mRNA的表达和血浆蛋白水平有迅速、明显的变化，提示apoM可能具有急性时相反应蛋白的特性。     

肝缺血再灌注对肝硬化大鼠的损伤作用

目的 研究肝硬化大鼠肝缺血再灌注（hepatic ischemia reperfusion,HIR）损伤的机制和程度。方法 用60％四经碳（CCl4）溶液皮下注射方法制作肝硬化大鼠模型，肝硬化大鼠随机分为六组：A组：假手术组（6只）；B、C、D组：分别为肝门完全阻断20min、30min、40min（每组各16只）；E组“单纯肠系膜上静脉阻断（16只）;F组：肝门阻断＋门腔转流（16只）；另外，随机取10只正常肝脏大鼠组成G组，行肝门完全阻断30min。观察7天存活率、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、透明质酸（HA）、肿瘤坏死因子（TNF），以及肝、肺病理的变化。结果 B、C、D、E、F、G组的7天存活率分别为10／10只、6／10只、4／10只、5／10只、8／10只、6／10只；再灌注后4h血清TNF变化：后六组均明显高于术前，C、D组高于B、A组，E、F组也明显高于A组（P＜0.01）再灌注4h后HA变化：D组明显高于B、E组，F、C组明显高于A组（P＜0.05）；再灌注4h后D、C组的AST、ALT均明显高于B组、A组、D组的AST明显高于F组，F组的AST、ALT显著高于E组（P＜0.05）；C、G两组比较，上述指标的差异无显著性（P＞0.05）；肝、肺组织学检查可见肝、肺的病理损害，程度随缺血时间的延长而加重，E组损伤重于F组。结论 硬化肝脏肝缺血再灌注损伤涉及全身多个器官，门脉静淤血可能是损伤乃至死亡的主要原因；肝硬化大鼠耐受肝缺血的最大的时限在30min以内。     

大鼠肺缺血再灌注损伤长期存活模型的建立

目的 建立一种简单、稳定的大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)长期存活模型.方法 将84只健康SD大鼠随机分为2组:Ⅰ组为假手术组,Ⅱ组为肺缺血再灌注组(每组n=42只).两组分别于开胸后、缺血1 h后再灌注0、2、4h、1、3、7 d取肺组织行髓过氧化物酶(MPO)活性、肺湿干比(W/D ratio)检测和肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)的电镜超微结构评价;取支气管肺泡灌洗液检测肺通透性指数(LPI).结果 手术成功率达100%.Ⅱ组与Ⅰ组比较,缺血再灌注后2、4 h、1 d的MPO、LPI、W/D比差异均有统计学意义(P<0.01),开胸后、再灌注后0 h、3、7 d两组比较差异无统计学意义(P>0.05).ATⅡ的超微结构显示,再灌注4 h后损伤最严重,再灌注1 d即出现明显的修复过程,再灌注7 d基本恢复正常结构水平.结论 本模型简单、可靠,LIRI后相关肺损伤指标和ATⅡ超微结构损伤变化特点吻合.     

一种大鼠胰腺缺血再灌注模型的建立

目的 建立一种简便实用的大鼠经腹主动脉胰腺缺血再灌注模型.方法 将60只Wistar大鼠随机分为:新模型组、对照组和假手术组,每组20只.采用显微外科技术游离胰腺,胰腺灌注后阻断血流2 h,恢复再灌注后0、2、4、6 h,切取胰腺体尾部组织,检测湿/干重比、行组织病理学分析及血清淀粉酶和脂肪酶检测.结果 再灌注后,新模型组血清淀粉酶2 h(3127.80±150.85)U/L、4 h(3122.80±131.52)U/L、6 h(2585.20±161.06)U/L;血清脂肪酶2 h(446.00±181.54)U/L、4 h(517.40±165.22)U/L、6 h(475.20±170.37)U/L;均随再灌注时间延长有明显升高趋势(P＜0.05),胰腺组织病理切片呈现逐渐加重的炎细胞浸润及组织水肿(P＜0.05)等改变.结论 本模型手术操作简便、又能够较好地模拟临床胰腺缺血再灌注的过程,是研究胰腺缺血再灌注损伤的较理想动物模型.

Abstract：

Objective To build a convenient model of pancreas ischemia reperfusion injury (IRI)in rats for investigating its negative impact on pancreas. Methods Wistar rats were randomized into 4groups:(1)sham-operated animals with dissociation of the pancreatic tail-segment ( sham, n=20 ); ( 2 )control animals with dissociation of the pancrea-tic tail-segment, 30 seconds of ischemia by bcloking the abdominal aorta and flushing(control, n=20);(3) Group New model animals experienced with dissociation of the pancreatic tail-segment, flushing, 120 mins of ischemia and reperfusion (IR, n=20). The level of serum amylase and lipase, wet to weight ratio of pancreas and pathological changes of pancreas were observed at0, 2, 4, 6 hours after reperfusion. Results The level of serum amylase[2 h (3127.80±150.85) U/L, 4 h (3122.80±131.52) U/L, 6 h (2585.20±161.06) U/L]and lipase[2 h (446.00±181.54) U/L, 4 h (517.40±165.22) U/L, 6 h (475.20 ± 170.37) U/L]in Group New model were increased significantly after perfusion accordingly, The tissue damage of pancreas become more serious after perfusion. Conclusion The model shows a typical IRl on pancreas of rats. It's a ideal and clinically relevant animal model for the study of pancreas IRI after transplantation.     

潘生丁对实验大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的探讨潘生丁对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型。将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、潘生丁预处理组,观察各组血浆肝酶及透明质酸(HA)水平变化和肝组织中丙二醛(MDA)、内皮素(ET-1)含量,并行肝组织病理形态学检查。结果与缺血肝组织相比,潘生丁预处理组肝酶的漏出、血浆HA水平及肝组织中MDA、ET-1的含量明显降低(P<0.01)。肝组织病理学损伤亦明显减轻。结论潘生丁预处理可明显改善肝微循环,减轻肝缺血再灌注损伤。药物预处理可为临床提供一种安全有效的预处理方法。     

日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型的建立

目的 建立日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型，用于肝移植术后胆道并发症及胆道损伤等研究。方法 采用无损伤动脉夹联合胆总管及肝总动脉阻断制作胆道缺血模型，以假手术组(SO)及单纯肝动脉阻断组(HAO)作为对照，阻断时间分为2h和3h，各组分别于复流前、复流12h、1、2、3、7d取血测AST、ALT、TBA水平；取胆汁行胆汁TBIL、TBA、GGT测定。术后一周观察动物死亡情况；动物处死后取肝胆组织行石蜡切片HE染色光镜下观察。以单纯肝总动脉阻断组做对照。结果 血清、胆汁指标和动物术后7d存活率联合阻断组与单纯肝总动脉阻断组相比差异显著，前者差于后者。随着缺血时间的延长，胆道损伤逐渐加重，病理改变由可逆性损伤转化为不可逆性损伤。结论 联合胆总管及肝总动脉阻断胆道缺血再灌注模型胆道缺血完全，重复性好，复制简单，是较好的胆道缺血再灌注损伤模型。     

肝硬变大鼠肝缺血再灌注损伤的研究

目的研究肝硬变大鼠肝缺血再灌注（hepatic ischemia     

挥发性麻醉药与肝缺血再灌注损伤

肝脏缺血再灌注损伤是一重要临床问题。挥发性麻醉药可能通过抑制枯否氏细胞和中性粒细胞产生上的氧自由基,减轻中性粒细胞和肝细胞内钙超载,抑制中性粒细胞的粘附,提高肝细胞缺血再灌注期间的能量贮备,而对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

三七总皂甙对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

摘要：目的:探讨三七总皂甙预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法:建立大鼠原位肝移植模型，然后分为三七预处理组（P组）、对照组（N组）和假手术组（S组）3组，取血检查ALT，AST；用免疫组化法检测caspase-3和TNF-α的表达，TUNEL法检测肝细胞凋亡，行肝组织病理检查。结果:鼠肝移植模型N组的血ALT，AST数值、肝细胞中caspase-3和TNF-α的表达及肝细胞的凋亡均明显高于P组，差异均有显著意义（P<0.05）。结论:肝细胞凋亡加重移植肝缺血再灌注损伤，三七总皂甙预处理对大鼠肝移植缺血再灌注损伤有保护作用。     

大鼠肝缺血预处理对肝缺血再灌注所致肝外脏器损伤的保护作用

目的　探讨大鼠肝缺血预处理 (IP )对缺血再灌注 (I/R )致肝外主要脏器损伤的保护作用。方法　 72只SD大鼠随机分为IP ,I/R组及S(假手术 )组 ,每组 2 4只。建立IP及I/R模型后观察术后 2 ,2 4h及 1周时小肠、胰腺、心肌、肾、肺、脑及骨骼肌组织病理学改变。结论　 (1)小肠组织损伤程度 :在 2h及 2 4h时IP组及I/R组显著高S组 (P <0 .0 1) ,且I/R组显著高于IP组 (P <0 .0 1)。 (2 )肾脏组织损伤程度 :I/R组在 2 ,2 4h及 1周时均显著高于S组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,IP组 2 4h及 1周时显著低于I/R组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。 (3 )IP组胰腺和肺组织损伤虽较I/R组有所以改善 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,但IP组及I/R组均显著高于S组。 3组的脑、心肌及骨骼肌组织未见明显损伤。结果　大鼠肝脏缺血预处理能有效减轻肝缺血再灌注对小肠及肾脏的损伤。     

缺血再灌注对肝癌组织及正常肝组织的损伤

目的:研究缺血再灌注（IR）对肝癌和正常肝组织的损伤作用。方法:超声引导穿刺新西兰兔肝脏左中叶注射VX2肿瘤组织混悬液，建立肝脏肿瘤模型。2周后，证实荷瘤模型已成功构建，乃剖腹阻断肝左中叶的肝动脉分支，60 min后去除血管阻断恢复血流;分别于再灌注0 min，1 h，1 d，3 d和7 d取肝癌组织和正常肝组织石蜡包埋切片，以HE染色法和荧光脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法观察两种组织细胞凋亡情况。结果:HE染色显示,IR后两种组织的凋亡细胞均有增加。至1 d时凋亡达峰值（肝癌为23%，正常组织为 10%），其后虽有降低，但至7d时仍明显高于IR前水平（P<0.01）。以癌组织细胞凋亡最为显著，其在各时点阳性细胞率均明显高于正常肝组织。TUNEL实验显示，IR前癌组织凋亡细胞（5%）即多于正常肝脏组织（1%）。IR后，癌组织和正常肝组织凋亡改变的特点与HE染色相似，于IR1 d和7 d凋亡细胞率分别为25%, 15% 和8%, 2%。结论:IR后肝癌组织的损伤和细胞凋亡较正常肝组织更为显著。     

日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型的建立

目的建立日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型,用于肝移植术后胆道并发症及胆道损伤等研究。方法采用无损伤动脉夹联合胆总管及肝总动脉阻断制作胆道缺血模型,以假手术组(SO)及单纯肝动脉阻断组(HAO)作为对照,阻断时间分为2h和3h,各组分别于复流前、复流12h、1、2、3、7d取血测AST、ALT、TBA水平;取胆汁行胆汁TBIL、TBA、GGT测定。术后一周观察动物死亡情况;动物处死后取肝胆组织行石蜡切片HE染色光镜下观察。以单纯肝总动脉阻断组做对照。结果血清、胆汁指标和动物术后7d存活率联合阻断组与单纯肝总动脉阻断组相比差异显著,前者差于后者。随着缺血时间的延长,胆道损伤逐渐加重,病理改变由可逆性损伤转化为不可逆性损伤。结论联合胆总管及肝总动脉阻断胆道缺血再灌注模型胆道缺血完全,重复性好,复制简单,是较好的胆道缺血再灌注损伤模型。     

大鼠肾冷缺血再灌注损伤模型的建立

目的 建立大鼠肾冷缺血再灌注损伤(IRI)的模型.方法 封闭群SD大鼠24只,随机分为2组(n=12):A组(对照组),B组(实验组).A组切除右肾并游离左肾蒂,60 min后关闭腹腔切口.B组采用冷缺血再灌注模型,主要步骤:(1)冷灌注:右肾动脉插管对左肾原位灌注.通过右肾静脉插管将灌注液引流出体外,完成冷灌注后切除右肾,阻断左肾蒂.(2)冷缺血保存:将已充分游离的左肾牵至腹腔外,在自制保存袋中冷保存.(3)再灌注:60min后,去除保存袋,开放血流,再灌注左肾,左肾复位,缝合切口;2组大鼠均在术后24 h再次手术切除左.肾.肾组织进行光镜、电镜形态学检查,检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,术前与术后24 h取血标本进行测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)评估肾功能.结果 (1)形态学检查(光镜与电镜超微结构):A组肾脏组织形态结构正常,B组损伤表现明显;(2)A组手术前后比较血浆BUN、Cr测定值差异均无统计学意义(P＞0.05).IR后的B组均高于术前,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)IRI后A组肾组织匀浆SOD活力高于B组(P＜0.05),A组肾组织匀浆MDA含量测定值低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 建立的模型要求条件简单、易行,可用于肾移植冷缺血再灌注损伤相关的研究;

Abstract：

Objective In this study,for studying IRI in kidney transplantation. ,we established the models of cold ischemia and reperfusion injury in rats. Methods Twenty four SD rats were randomly assigned to two groups:control (A) ,and experimental (B) group. Group A was only removed the right kidney. Cold ischemia reperfusion was performed as the follow-listed model in Group B. The main process of the model: ( 1) Perfusing left kidney: after resected the right kidney of the rat, one pipe was put in the remainder right renal artery to perfuse the left kidney. The perfusion flowed out through another pipe in the right renal vein. The blood vessels of left kidney were clipped after cold perfusion. (2) Cold ischemic conservancy : the operation table was leant to left side, and the left kidney was taken out of abdominal cavity then stored in a cold bag which was full of ice and water,but the vessels of that were intact. (3) Reperfusing left kidney: after 60 minutes, the clip was removed. Left kidneys of all rats in two groups were removed to be detected. Structure of the kidney was evaluated by light microscopy and electronic microscopy. Superoxide dismutase ( SOD) activity and malondialdehyde ( MDA) content in the renal tissues was examined,and the renal function was also assessed by determining the levels of blood urea nitrogen ( BUN) and serum creatinine (CR) before and 24 hours after operation. Results (1) Morphologic change (hematoxylin-eosin staining) :A normal morphology was observed by light microscopy and electon microscopy in group A.Significant injury was detected in group B. (2 ) In group A, there was not significant difference about BUN and CR between before and after operation (P ＞0. 05) ,but in Group B,those increased significantly at 24 hour after operation (P ＜0. 05). (3) Activity of SOD in renal tissues in group A was higher than those in group B (P ＜ 0. 05 ) , meanwhile, Content of MDA in group A was lower than those in group B ( P ＜0. 05 ).Conclusion The rat renal cold ischemia reperfusion model we established is feasible regardless of experimental conditions, and can be studied as the events following IRI in kidney transplantation.     

肝缺血再灌注损伤的药物预处理

介绍肝缺血再灌注损伤的药物预处理及其机制。     

缺血后处理对大鼠肝缺血再灌注时肝细胞线粒体损伤的影响

目的 评价缺血后处理对大鼠肝缺血再灌注时线粒体损伤的影响.方法 雄性SD大鼠30只,体重180～230 g,随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(IR组)和缺血后处理组(Ipo组).IR组和Ipo组采用阻断肝门60 min再灌注6 h的方法 制备肝缺血再灌注模型,Ipo组缺血60 min时再灌注10 s、缺血10 s,反复6次,进行缺血后处理.于再灌注6 h时取静脉血样,测定血清谷丙转氨酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,然后取肝组织,制备病理切片及分离肝细胞,电镜下观察线粒体超微结构,测定线粒体膜电位及线粒体Na+-K+-ATP酶活性.结果 与S组比较,IR组和Ipo组血清ALT和AST活性升高,线粒体Na+-K+-ATP酶活性及线粒体膜电位降低(P<0.01);与IR组比较,Ipo组血清ALT和AST活性降低,线粒体Na+-K+-ATP酶活性及线粒体膜电位升高(P<0.05或0.01).Ipo组线粒体损伤程度轻于IR组.结论 缺血后处理可减轻大鼠肝缺血再灌注时肝细胞线粒体损伤.     

常温肝缺血再灌注肝血窦内皮细胞损伤

目的 探讨肝脏常温 因再灌注稆肝血窦内皮细胞的结构变化及其在再灌注损伤中的作用。方法 将４４只大鼠在常温下分别阻断人肝血流２０、４０、６０和９０ｍｉｎ,然后再开放血流２ｈ,制备成缺血再灌注模型,对肝血窦内皮细胞进行扫描和透射电镜观察,正常对照组大鼠５只。结果 肝血流阻断２０、４０ｍｉｎ时内皮细胞受损;血流开放后２ｈ内皮变化可恢复。肝血流肝断６０、９０ｍｉｎ后内皮细胞出现损伤,使部分内皮缺损,上直接     

亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年新西兰大白兔24只,雌雄不拘,体重2.0～2.3 kg,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I/R组)和亚甲蓝组(MB组).I/R组及MB组采用夹闭肝左外叶、中叶、右中叶及方形叶肝动脉分支40min再灌注60 min的方法制备肝缺血再灌注模型,S组仅游离相应血管.MB组于再灌注前20 min经耳缘静脉注射亚甲蓝5 mg/kg(用生理盐水稀释至5 ml),S组及I/R组给予等容量生理盐水.于缺血前即刻(T1)、缺血20 min(T2)、加min(T3)、再灌注1 min(T4)、再灌注5 min(T5)、30 min(T6)、60 min(T7)时记录MAP和HR.于T1,5-7时取股动脉血样1 ml,测定血清TNF-α及IL-6的浓度.分别于T1,6,7时取股动脉血样1.5 ml,测定血浆ALT及AST的活性.于T7时测定肝左叶组织SOD活性及MDA含量,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组比较,I/R组T4-7,时MAP降低,T7时HR降低,肝组织SOD活性降低,MDA含量升高,I/R组及MB组T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度升高,T6,7时血浆ALT和AST活性升高(P<0.05或0.01);与I/R组比较,MB组T4-7时MAP升高,肝组织SOD活性升高,MDA含量降低,T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度降低,T6,7时血浆ALT和AST活性降低(P<0.05或0.01).MB组肝组织损伤较I/R组减轻.结论 亚甲蓝可维持血液动力学稳定,减轻兔肝缺血再灌注损伤.     

大鼠胰十二指肠移植缺血-再灌注损伤模型的建立

目的 探索胰腺移植缺血．再灌注损伤(I-RI)的发生机制及防治措施。方法 采用双套管 移植物腹主动脉三通管外接法完成大鼠全胰十二指肠同种异体移植动物模型。实验分为A、B组。每组15只，分别于术后6、24h处死。处死时检测非空腹血糖，并行移植物组织学观察。结果 30次实验中，总手术时间仅为2h左右，移植手术成功率100％。排除因套管内血栓形成引起移植物失功的3例外，其余受试大鼠血糖水平均在术后6或24h降至正常，移植胰功能存活率为90％(27／30)。A、B两组组织学改变符合I-RI病生特点。结论 本模型操作简便、稳定，不需阻断体循环，具有术后移植物功能恢复早的优点，适用于临床胰腺移植有关的理论研究。     

肝脏缺血再灌注损伤

肝脏是一易受再灌注损伤的器官，原位缺血再灌注〔１〕、移植肝脏〔２〕、离体肝脏〔３〕及孤立肝细胞（如枯否氏细胞〔４〕和肝实质细胞〔５〕）实验都表明肝脏可产生再灌注损伤。近年来实验表明，肝脏的缺血再灌注损伤与多种机理有关。１氧自由基暴发性形成氧自由基的大...