人胰岛素基因重组杆状病毒在家蝇中表达的研究

目的:利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究.方法:用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫,用放射免疫技术、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检测.结果:重组的杆状病毒感染家蝇幼虫后,蝇蛆中有人胰岛素的表达,表达量为37.401μIU/ml,占蝇蛆总蛋白的0.583%.结论:利用杆状病毒表达系统可以在家蝇蝇蛆中表达人胰岛素.     

蝇蛆营养成分的测定与评价

目的:通过对家蝇幼虫(蝇蛆)的营养成分进行测定,对其营养价值做出初步评价。方法:对家蝇进行养殖,收集蝇蛆,测定蝇蛆的粗蛋白、粗脂肪、总糖、氨基酸和脂肪酸构成,维生素及微量元素含量,用粮食与农业组织-世界卫生组织(FAO-WHO)提出的参考蛋白模式评价。结果:蝇蛆粗蛋白含量为62.52%,必须氨基酸含量(色氨酸未测)占总氨基酸(E%)的47.72%,必须氨基酸与非必需氨基酸总量的比值(E/N)为0.91,E%/T为3.18,均高于参考模式的40%、0.6和3。粗脂肪含量为18.05%,亚油酸及亚麻酸等必需脂肪酸分别为24.21%和0.68%,不饱和脂肪酸含量为58.50%;总糖含量为2.87%;维生素A、D、E含量分别为727.8μg/100 g、131.0μg/100 g1、0.04 mg/100 g;Fe、Zn、Ca、Se含量分别为268 mg/kg1、59 mg/kg0、.31%8、.90 mg/kg。结论:蝇蛆各营养素含量较丰富,氨基酸模式高于参考模式,具有较高的营养价值,适于开发利用。     

人胰岛素基因在家蝇中表达产物降血糖效应试验

目的 研究人胰岛素基因在转基因家蝇中所获得的表达产物对正常昆明小鼠血糖的影响。方法 用重组质粒pEF1α-ImINS转入家蝇基因家蝇精卵经G418筛选后，将F2代96h蝇蛆匀浆和杆状病毒感染家蝇幼虫后96h蝇蛆的匀浆，分别对昆明小鼠按50mg／只行腹腔注射。通过对注射前、后小鼠血糖值进行统计学处理，分析转基因产物隆血糖的生物学效应。结果注射pEF1α-ImINS转基因家蝇蝇蛆后6h与注射前24h比较，差异有非常显著性；注射杆状病毒感染家蝇蝇蛆后6h与注射前24h比较，差异有非常显著性；注射正常家蝇蝇蛆后6h与注射前24h比较，差异有非常显著性；结论 pEF1α-ImINS转基因家蝇F2代96h蝇蛆、杆状病毒感染家蝇幼虫后96h的蝇蛆及正常家蝇96h蝇蛆对昆明小鼠均有明显的降血糖作用；首次发现正常家蝇蝇蛆的PBS匀浆对正常昆明小鼠具有降血糖作用。     

在家蝇中表达人胰岛素基因的研究

目的 研究人胰岛素基因在家蝇中的表达，建立家蝇生物反应器。方法 以家蝇作为实验动物，利用BAEKON6000型基因转移仪将胰岛素基因组基因导入家蝇进行实验研究。收集家蝇新产卵(1—1．5h内)，将环状质粒pCMV—mINS、pCMV-ImINS、pEF1α—mINS、pEF1α—ImINS以10μg/ml浓度分别与新采集的家蝇卵混合后进行电转移。经人工孵化发育为成虫(R)，G418(3．0mg／ml)筛选Fl代，待F1代发育至成虫并产卵后，采用PCR、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对F2代蝇蛆进行整合与表达水平检测。结果 四种质粒均能在家蝇中表达人胰岛素，表达量各占蝇蛆总蛋白0．207％、0．357％、0．473％和0．831％。结论 人胰岛素基因能够在蝇蛆中表达，即蝇蛆机体可对人胰岛素原进行翻译后加工。     

家蝇饲养中培养基防霉、板结的探讨

本文主要探讨实验室家蝇饲养过程中如何防止和克服蝇蛆期培养基的霉变和板结问题。我们通过蒸煮培养基的主要成份——麦麸,适当减少奶粉的配比含量,减少对培养基的搅拌翻动次数和适当延长接卵时间增加培养基中蝇蛆的数量等法改进探索,结果避免和克服了培养基霉变和板结现象,使蝇蛆生长良好,所化的蝇蛹较肥大,羽化出的家蝇个体较粗壮。     

人工饲养家蝇蛆和蛹提取几丁质的研究

目的：提取蝇蛆表皮和蛹壳的几丁质。方法：在实验室内人工饲养家蝇48天，传代饲养3代，用人工竹筛分离收集蝇蛆和蛹，并用清洗、脱钙、脱脂、漂白、脱乙酰基、干燥的方法初步提取了几丁质。结果：获得蝇蛆表皮几丁质0．8g和蛹壳几丁质2g。结论：用人工饲养家蝇所得到的家蝇蛆表皮和蛹壳的和几丁质含量分别为60％－70％。     

家蝇幼虫营养价值及抗病毒活性的初步研究

目的：为在贵阳地区建立畜禽粪便养殖家蝇生产蝇蛆动物蛋白提供实验室数据，并观察用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡的效果及经济效益，确定家蝇组织匀浆液的抗病毒活性。方法：（1）在相同的实验室饲养环境下，观察人工饲料、猪粪饲养的家蝇幼虫体内脂肪酸及微量元素含量的区别；（2）用蝇蛆粉或鲜蝇代替鱼粉饲养蛋鸡，观察对蛋质的影响；（3）用鸡胚法检测蝇蛆组织匀浆液的抗病毒活性。结果：用猪粪饲养的蝇蛆体内所含的微量元素（Ca、Fe、Cu、Zn、Se)高于用人工饲料饲养的蝇蛆（P＜0．05）；用蝇蛆粉或鲜蝇代替鱼粉饲养蛋鸡，蛋内的脂肪酸及微量元素含量无明显改变（P＞0．05）；蝇蛆组织匀浆液中有抗病毒活性物质存在，性质尚待进一步确定。结论：用猪粪饲养家蝇不仅可以生产出优质的蝇蛆蛋白，还可以节约开支，净化环境及生产大量的优质生物肥；用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡不会影响鸡蛋的质量，蝇蛆生产周期短、经济、简单易行；蝇蛆组织匀浆液中存在抗病毒的活性物质，为抗病毒药物的寻找开辟了新的路径。     

信息素合成毒饵对家蝇诱杀效果的研究

目的 :信息素合成毒饵 ,经实验室试验表明对家蝇具有 10 0 %的诱杀效果 ;经模拟现场释放试验表明 ,2 4h对家蝇诱杀率达 99.6 % ;经餐厅及养猪场等现场使用 ,均取得明显效果 ,2 4h密度下降度 94.2～ 97.3% ,诱杀效果优于原自配毒饵 2 .5 3倍 ;对人、畜安全 ,使用方便 ,成本低廉。     

家蝇产卵基质配方研究

目的集合筛选出的对家蝇产卵行为具有引诱作用的因子,完成家蝇产卵基质配方的研究。方法在实验室条件下,比较孕蝇在不同处理的集卵杯中的产卵量,筛选出对家蝇产卵行为有强引诱力的气味物质。结果 10%的白糖对家蝇产卵具有较强的引诱力;10%的白糖+10%碳酸氢铵则对家蝇产卵具有更强的引诱效果,基本达到100%;用家蝇信息素处理过的麦麸并没有表现出对家蝇产卵具有引诱作用,处理与对照相比无规律可循。结论 10%白糖和10%白糖+10%碳酸氢铵均能引诱孕蝇前来产卵,可以作为家蝇产卵的引诱物质在下一步的产卵基质配方研究中加以利用。家蝇信息素对家蝇产卵没有引诱力。     

中国7市家蝇rDNA-ITS2基因分析

目的:分析我国7市家蝇的rDNA-ITS2基因.方法:采集北京、吉林、长春、成都、南京、湖北荆州和养殖7市8个家蝇样本,形态鉴定. 依据Drosophila melanogaster的nrRNA序列,设计扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2基因的引物,PCR扩增不同地区家蝇基因组,获特定基因片段,SSCP分析. 将PCR扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2片段克隆于pMD-18T载体,序列测定,采用Clustal W软件在线分析不同地区家蝇rDNA-ITS2序列,用MegAlign(4.0)软件的UPMGA方法构建系统发育树. 结果:我国7市8个家蝇样品的rDNA-ITS2基因均获约360 bp阳性扩增区带. SSCP分析8个家蝇样品的rDNA-ITS2的SSCP电泳DNA迁移率均有一定差异. Clustal W比对分析不同地区的8个家蝇rDNA-ITS2基因序列间存在一定差异. 同源性为75%,而其中部分地区家蝇样品rDNA-ITS2序列同源性高,家蝇(长春、吉林、养殖),三者之间的同源性为98.0%～99.1%;家蝇(成都、南京、广州、荆州)之间的同源性为99.1%～99.7%. 系统聚类分析显示,发育树共分成2支,1支是家蝇(北京与养殖)关系密切,先聚为一类,然后与家蝇(长春)再聚类;另1支是家蝇(成都与荆州)关系密切,最先聚类,然后与家蝇(南京)聚类,再与家蝇(广州)聚类,最后与家蝇(吉林)聚类. 结论:应用PCR-SSCP和rDNA-ITS2基因序列分析揭示我国不同地区家蝇基因组序列存在一定差异.     

溴氰菊酯抗性家蝇的防治及其对策的研究

本文从我国家蝇抗性特点、菊酯类杀虫剂的抗性机理、抗性家蝇的防治实践及防治策略等几个方面报道了1985—1988年的研究结果,试验证明:我国绝大多数地区的家蝇没有抗击倒基因。抗溴氰菊酯、抗二氯苯醚菊酯家蝇对 DDT、666、敌百虫、敌敌畏等药没有交互抗性,而对菊酯类药剂有不同程度的交互抗性,这对选择混配药剂有参考意义。穿透速度的降低,多功能氧化酶活性增加是产生抗性的重要原因。现场实践证明:根据蚊蝇生活习性、尽可能缩小滞留喷洒范围,一年内轮换用药的措施较三年大轮换用药经济有效。对蝇蛆和成蝇间交替用药将有新的突破。     

新分离的灭蚊真菌(Pythium sp. GY1938)对家蝇幼虫的安全性检测

目的: 检测新分离的灭蚊真菌(Pythium sp. 代号GY1938)对非靶生物家蝇(Musca domestica Vicina)幼虫的安全性. 方法: 用分别拌以高(1%)、中(0.5%)和低(0.1%)剂量该真菌菌丝悬液的家蝇饲料饲养家蝇幼虫,并以不加真菌的家蝇饲料饲养的家蝇幼虫作对照.待幼虫成熟后,拣出幼虫并计数,计算幼虫拣出率.并观察幼虫的外形,称体重.结果: 实验组家蝇幼虫的外形和体重与对照组无显著性差异.结论: 灭蚊真菌Pythium sp.GY1938对家蝇没有毒性作用.     

影响家蝇胚胎细胞系建立的相关因素研究

目的 探讨家蝇胚胎细胞系建立的影响因素.方法 取不同发育时间的家蝇卵(胚胎),用不同培养基将细胞培养于玻璃培养瓶和塑料培养瓶中,观察细胞生长.结果 产出约6 h的家蝇胚胎细胞能生长增殖,并成功建立贴壁生长细胞.其它时间段产出卵的家蝇胚胎不能建立贴壁细胞;家蝇胚胎细胞在TC-199培养基中不能生长,在TC-199加酵母提取液和水解乳蛋白的培养基中,家蝇胚胎细胞生长缓慢.在M3培养基中迅速生长,其中在15%胎牛血清(FBS)、20?S的M3培养基中,细胞生长迅速并可传代.细胞在玻璃培养瓶中不能贴壁生长,而在塑料培养瓶中能迅速贴壁生长.结论 取产出后约6 h的家蝇胚胎细胞接种于含15%～20% FBS的M3培养基的塑料培养瓶中,家蝇胚胎细胞能贴壁生长,成功传代.     

家蝇脑内蛋白质含量的随龄变化及其性别差异

我们用家蝇作为衰老模型观察了脑内蛋白质含量的随龄变化和性别差异。实验方法一、家蝇饲养:取家蝇(Musca Domestica)卵放在1%酵母和5%奶粉的麦麸中培育成蛹。羽化后的家蝇喂奶粉和白糖(1:1),饮普通水,每日更换饲料和饮水。饲养室温度为25℃,湿度为70%,每日光照10小时。二、家蝇脑样品制备及蛋白质含量测定:羽化后的第一天及以后每隔10天随机分别取雌雄家蝇剪头称重,2mg 脑组织用0.5ml 生理盐水匀浆,匀浆     

气雾杀虫剂对家蝇的杀灭效果观察

近年来随着人们生活水平的提高 ,气雾杀虫剂已广泛被人们所接受 ,今后还将成为家庭用药的主流。为摸清市场销售气雾杀虫剂对本市家蝇的杀灭效果 ,我们对太原市销售的部分气雾杀虫剂进行了对家蝇杀灭效果的试验。现将结果报告如下。1　材料及方法1 .1　气雾剂品种 :　共采样 1 1种 ,分别按序编号 1～ 1 1号。1 .2　试虫 :　本实验室饲养的太原品系家蝇 ,4～ 5日龄成虫 ,雌雄各半 ,1 0 0只左右。1 .3　器材 :　 0 .5 m X0 .5 m X0 .5 m玻璃实验柜、气雾剂电子控制器、秒表等。1 .4　试验条件 :　温度 2 5℃± 1 ,湿度 60 %～ 70 %。1 .5　实…     

蝇蛆营养成分及其在养殖中的应用进展

蝇蛆含有大量维生素、氨基酸、微量元素等营养成分，并可以分泌抗菌活性物质等，且其具有来源广泛、饲养周期短、抗病力强、繁殖力强、饲养成本低等特点，其优势逐渐在各个领域崭露头角，并取得了较好的效果。本文就其营养成分以及在养殖中的应用研究进行综述。     

江苏省家蝇对卫生杀虫剂敏感品系和抗性品系的调查

目的 建立家蝇对卫生杀虫剂的抗性谱,为全省各地开展除害灭蝇工作提供科学数据。方法 采用点滴法测定家蝇对杀虫剂的敏感品系和抗性品系。结果 江苏省家蝇对敌敌畏、溴氰菊酯、二氯苯醚菊酯等十三种卫生杀虫剂的抗性品系高于敏感品系的8～12倍,对其他卫生杀虫剂高1～2倍。结论 我省家蝇对所测十三种杀虫剂已经产生抗性。     

河北省沧州地区滹沱河蓄滞洪区蝇类监测及防制对策研究

目的了解滹沱河蓄滞洪区蝇密度、种群构成、季节消长及家蝇抗性水平,为蓄滞洪区蝇类防制工作提供科学依据。方法采用笼诱法监测蝇密度,点滴法测定家蝇抗药性。结果蓄滞洪区蝇类有4科11种,家蝇为优势种群,占捕获总数的41. 54%,平均密度7. 48只/笼,蝇密度在5～7月和10月呈现两个高峰期,绿化带蝇密度最高,蓄滞洪区家蝇对残杀威、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敌敌畏抗性系数分别为68. 02、52. 68、35. 87、9. 74。结论加强对蝇类密度消长和抗药性监测,合理选用杀虫剂,减缓抗性产生,重点时间段、重点场所将针对性灭蝇措施和综合治理相结合,提高防治效果。     

家蝇对有机磷农药的抗性测定

我国自 70年代以来家蝇对有机氯、有机磷杀虫剂普遍产生抗性之后 ,给蝇类防制工作带来了很大困难。我们于 1 998年和 2 0 0 0年 8月进行了家蝇对化学药物敌敌畏、倍硫磷、乐果、溴氰菊酯等抗性测定 ,结果报导如下。1　材　　料1 .1　药品 :敌敌畏原液、 80 %敌敌畏乳剂、倍硫磷、乐果、 2 .5 %敌杀死可湿性粉剂 (溴氰菊酯 )。1 .2　溶剂 :丙酮、水。1 .3　器械 :70 0 0毫升玻璃钟罩、喷塔全套设备 ,压力喷雾器 ,秒表等。1 .4　家蝇来源 :张掖市南关菜市场 ,本站院内等环境中 ,将采来的家蝇混合饲养后等待测试。2　方　　法2 .1　钟罩法 :将…     

四川省雅安地区家蝇对五种杀虫剂的抗性研究

<正> 家蝇(Musca d.vicina Maca.),为世界广泛分布的蝇种。据我站历年对其虫口数量监测分析,室内种群组成为95—100%,室外则仅占5%左右。据体外检验分析家蝇携带痢疾,伤寒等致病菌,在流行病学、卫生保健等方面具有重要意义。近年来,国内外科学家发现家蝇几乎对所有化学杀虫剂都