侧脑室注射IL-1β、IL-1ra对癫痫大鼠脑皮层、海马Fos蛋白表达的影响

目的　了解外源性和内源性白细胞介素 - 1(IL- 1)对戊四氮 (PTZ)致痫大鼠脑皮层、海马神经元兴奋性的影响。方法　应用流式细胞免疫荧光技术对大鼠大脑皮层、海马 Fos表达进行定量分析。结果　 IL- 1β和IL - 1ra侧脑室注射后再致痫大鼠分别较单纯 PTZ致痫大鼠皮层海马 Fos表达显著增高和下降 (P<0 .0 1,P<0 .0 5)。结论　内源性和外源性 IL- 1β均有增高癫痫大鼠脑皮层及海马神经元兴奋性的作用。     

Caspase-3在癫痫模型大鼠海马神经细胞凋亡中作用的研究

目的对癫痫模型海马神经细胞凋亡中caspase-3的作用机制进行实验研究。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经细胞凋亡情况，以Western blot法检测其中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织构建cDNA文库，构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体，进行筛库实验。结果在癫痫发作后12h TUNEL阳性神经元增加，72h达高峰；发作后24hm现eIF2α被caspase-3酶切的片段，逐渐增加至72h。制作成功cDNA文库，构建了caspase-3的酵母三杂交诱饵载体，筛库获得caspase-3的新底物Mizl。结论在癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中eIF2α被caspase-3酶切。酵母三杂交寻找caspase-3下游底物有可行性，从癫痫大鼠海马中获得caspase-3的底物Mizl。     

NGF对β-淀粉样蛋白诱导海马神经细胞凋亡的保护作用

目的　研究神经生长因子 (nerve growth factor ,NGF)对β-淀粉样蛋白 (amyloid-beta protein,Aβ)诱导体外培养大鼠海马神经细胞凋亡的作用 ,从而探讨 NGF对阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)的治疗作用。方法　于无菌条件下取新生 1 d大鼠海马 ,进行原代海马神经细胞培养 ,用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、原位末端标记 (TUNEL)等方法观察 Aβ组和 NGF组神经元细胞的凋亡变化。结果　 Aβ1 -40可诱导海马神经细胞凋亡 ,染色质浓缩 ,凋亡小体形成 ,细胞核 DNA降解 ,TUNEL 染色阳性 ;而 NGF组细胞凋亡率明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　 Aβ1 -40能诱导海马神经细胞凋亡 ,NGF对 Aβ诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用。     

经侧脑室注射IL-1ra对脑挫裂伤大鼠血浆S-100β蛋白和神经功能的影响

目的 研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)对大鼠脑挫裂伤后血浆S-100β蛋白含量变化和大鼠神经功能行为评分的影响,探讨IL-1ra脑保护作用的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为生理盐水组(n=30)及IL-1ra组(n=30),分别经侧脑室注射生理盐水、IL-1ra 5 μL,并设立正常对照组(n=5).30 min后按Feeney法将生理盐水组及IL-1ra组大鼠制作出脑挫裂伤模型,正常对照组不做任何处理.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定脑挫裂伤后6 h、12 h、24 h、2 d、3 d、7 d各组大鼠血浆S-100β蛋白含量,Faden评分标准评定大鼠颅脑创伤后各时间点神经功能行为.结果 (1)正常对照组大鼠血浆S-100β蛋白含量为(0.43±0.04)μg/L,神经功能评分为35分.(21伤后各时间点生理盐水组及IL-1ra组大鼠血清S-100β蛋白含量显著高于正常对照组(P<0.05).(3)IL-1ra组各时间点大鼠血清S-100β蛋白含量低于生理盐水组,且差异有统计学意义(P<0.05).(4)IL-1ra组伤后各时间点神经功能评分显著高于生理盐水组(P<0.05).结论 (1)IL-1ra可降低脑挫裂伤大鼠血浆S-100β蛋白含量,提高大鼠神经功能评分.(2)IL-1ra对脑挫裂伤大鼠具有脑保护作用,可能与IL-1ra阻断IL-1β介导的损伤性脑细胞炎症反应有关.     

大鼠短暂脑缺血后海马区IL-1β和CRF蛋白的表达

目的探讨脑缺血再灌注后海马区白细胞介素1(IL1β)与促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)蛋白表达的诱导关系。方法对Koizumi和Nagasawa法加以改进,采用同侧颈总动脉永久结扎线栓法制备短暂脑缺血大鼠模型,2h后实现大脑中动脉再灌注。假手术组大鼠作为对照组。分别在再灌注后30min及1、2、4、6、12、24h至7d的不同时间取材,应用免疫组化方法标记实验各组大鼠脑海马区组织中IL1β、CRF免疫反应细胞数量。结果IL1β免疫反应细胞在缺血再灌注后海马区从1h(974±393)后开始表达,2h(6107±1884)时达高峰,至7d(66±59)时IL1β免疫反应细胞表达基本消失;CRF蛋白免疫反应细胞从2h(972±184)时开始表达,12h(3744±570)和7d(3963±510)时表达为2次高峰。而且,脑缺血再灌注后海马区IL1β、CRF蛋白表达在时间上具有一定的诱导关系,即IL1β表达早于CRF蛋白。结论此研究提示大鼠脑缺血再灌注后海马区IL1β蛋白的升高表达可诱发内生的CRF蛋白表达增加。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血海马CA1区神经元凋亡和细胞色素C释放的影响

目的　探讨促红细胞生成素 (Erythropoietin ,EPO)的神经保护机制。方法　采用 4 VO法制作大鼠全脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、EPO组。全脑缺血前 3h ,EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素 (recombinantHumanErythropoietin ,rHuEPO) ,生理盐水组则给予生理盐水 ,假手术组只进行假手术处理。观察缺血后 2 4h海马CA1区细胞色素C(CytochromeC ,CytC)的变化 ,及缺血后 72h海马CA1区细胞凋亡情况。结果　EPO组海马CA1区呈现点状分布的CytC表达较生理盐水组增强 (P <0 .0 1) ,并且较生理盐水组呈现较少的凋亡细胞 (P <0 .0 1)。结论　EPO预处理可以抑制海马CA1区CytC从线粒体向胞浆释放及减少神经元凋亡。     

海人酸致痫大鼠海马IL-1β、TNF-α仪的表达

目的立体定向手术建立海人酸（KA）颞叶癫痫大鼠模型，检测海马内IL-1β、TNF-α蛋白及其mRNA的表达。方法大鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组和模型组。模型组大鼠-侧海马CA3区注射KA（生理盐水组注射生理盐水），观察其行为学特征，HE染色和Nissl染色以及电镜观察其病理学改变，免疫组化法检测大鼠海马内IL-1β、TNF-α蛋白的表达，原位杂交法检测TNF-α mRNA的动态表达。结果大鼠注射KA后出现湿狗样抖动、头面部肌阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作等，病理结果显示海马神经元变性、缺失及胶质细胞增生，模型组IL-1β在致痫后3、6h表达水平明显增加并于12h达高峰，之后逐渐下降，7d后与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；TNF-α蛋白与mRNA表达时程基本一致，3h出现，12h达高峰，而后逐渐下降，7d后回归至对照组表达水平，15、30d又高于对照组（P％0.05）。结论（1）大鼠-侧海马注射KA是人类颞叶癫痫理想的动物模型；（2）内源性IL-1β、TNF-α参与了癫痫发病机制。     

人IL—1,IL—1ra及IL—6在人胚雪旺细胞中的表达

分别用LRBM33Ia5、HT－2和KD83细胞株检测人胚雪旺细胞（SC）IL-1和IL-6分泌水平，用原位杂交技术检测上述细胞因子及白细胞介素-1受体拮抗剂（IL－1ra）的mRNA表达。结果表明：人胚雪旺细胞能自发分泌IL－1及IL－6活性蛋白，24h在培养上清中即可出现IL－1和IL－6活性，72h分泌达高峰，IL－1和IL－6分泌水平分别为26．30±8．10和57．40±12．40U／ml；人胚雪旺细胞具有IL－1、IL－1ra及IL－6mRNA的表达。提示IL－1、IL－1ra及IL－6可能参与神经系统的发育、修复等过程。     

托吡酯对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

目的　探讨托吡酯对癫痫发作大鼠海马神经元凋亡的影响及其可能的机制。方法　采用戊四氮致痫模型 ,大鼠癫痫发作后连续给予托吡酯 80mg/ (kg·d)和 4 0mg/ (kg·d) ) ,共 14d。以TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测海马CA1和CA3区的神经细胞凋亡。结果　各组大鼠海马CA1、CA3区均出现TUNEL阳性细胞。对照组 ,海马CA1、CA3区TUNEL阳性细胞数分别为 (35 .83± 4 .5 8)个和(36 .83± 3.87)个 ;4 0mg/ (kg·d)托吡酯组分别为 (31.5 2± 3.4 3)个和 (32 .35±4 .6 9)个 ;80mg/ (kg·d)托吡酯组为 (2 1.17± 3.0 6 )个和 (2 1.16± 3.87)个。 80mg/ (kg·d)托吡酯组与对照组比较存在显著差异(P<0 .0 0 1) ,4 0mg/ (kg·d)托吡酯组TPM组与对照组相比无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　TPM对癫痫发作后神经元凋亡具有一定的保护作用     

戊四氮致惊厥大鼠海马神经元Cyclin D1表达改变和意义

目的 探讨戊四氮致惊厥大鼠海马细胞周期素Cyclin D1与神经细胞凋亡的关系。方法 利用寡核苷酸探针原位组织杂交技术观察各组海马Cyclin D1 mRNA的表达水平。同时采用TUNEL原位末端标记方法观察神经元凋亡。结果 戊四氮致惊厥后6h,大鼠海马内Cyclin D1 mRNA表达开始增强,12h达到高峰,24h开始回落。同时,观察到戊四氮致惊厥大鼠海马神经元凋亡数量有类似改变。结论 Cyclin D1 mRNA表达水平的增高可能表明戊四氮致惊厥大鼠海马神经元重新进入细胞周期,可能与神经细胞凋亡有关。     

亚低温对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA3区HSP70表达及细胞凋亡的影响

目的 观察亚低温对大鼠弥漫性脑损伤(DBI)后海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡上的影响,探讨亚低温脑保护分子生物机制。方法 将大鼠随机分成空白对照、假手术、单纯DBI和DBI后亚低温治疗四组,按Marmarou氏方法制作大鼠DBI模型,采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FCM),分别观察各组动物脑海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡率。结果 与对照组相比,大鼠DBI后海马CA3区HSP70表达水平及细胞凋亡率均升高(P<0.05);亚低温治疗后,大鼠脑海马CA3区HSP70表达水平较单纯DBI组显著增高(P<0.01),而细胞凋亡率则明显降低(P<0.05)。结论 亚低温对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与促进HSP70表达,并减少神经细胞凋亡有关。     

急性脊髓损伤模型大鼠白细胞介素1β和核因子κB的表达

背景：在脊髓损伤后的继发性损伤过程中,白细胞介素1β参与刺激其他细胞因子和损伤介质的合成。 目的：观察白细胞介素1受体拮抗剂对急性脊髓损伤模型大鼠损伤脊髓白细胞介素1β与核因子κB表达的影响。 方法：采用改良Allen法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型,造模后分别在损伤处敷含白细胞介素1受体拮抗剂或仅有生理盐水的明胶海绵,于脊髓损伤1,48,72 h取损伤段脊髓标本,免疫组织化学染色检测白细胞介素1β与核因子κB的表达。 结果与结论：经白细胞介素1受体拮抗剂治疗后,损伤脊髓组织白细胞介素1β和核因子κB的表达均显著降低。说明白细胞介素1受体拮抗剂可通过抑制白细胞介素1β和核因子κB的表达,减轻局部炎症反应,对急性脊髓损伤大鼠损伤段脊髓发挥保护作用。     

白细胞介素1受体拮抗剂对大鼠外伤性脑水肿的治疗作用

目的 观察白细胞介素1受体拮抗剂(IL—1ra)对于外伤性脑水肿的影响。方法 液压伤致大鼠外伤性脑水肿。伤后脑室注射IL-1ra。伤后24h磁共振，脑组织干湿重，HE病理图像分析及电镜等方法观察鼠脑水肿情况。结果 经IL-1ra治疗，与创伤组或治疗对照组相比在磁共振T2加权像上可以水肿减轻；创伤部位脑含水量减低；病理切片可见相同的变化；超微病理发现IL—1ra具有保护作用。结论 IL-1ra对于外伤性脑水肿有治疗作用，内源性IL-1参与了外伤性脑水肿的发生。     

睡眠剥夺对大鼠海马和皮质IL-1βmRNA表达的影响

目的:研究完全睡眠剥夺对大鼠海马和皮质IL-1βmRNA表达的影响。方法:将大鼠放入1转／分钟转笼中,制作经历不同持续时间的完全睡眠剥夺(TSD)模型。30只大鼠随机分为5小组:对照组(正常对照CC组,环境对照 TC组)和睡眠剥夺组[TSD6h组,TSD1d组,TSD3d组(n=6只)]。采用RT-PCR方法检测大鼠海马和皮质IL- 1βmRNA表达。结果:大鼠海马区,TSD6h组和TSD1d组IL-1βmRNA的表达明显高于对照组,TSD3d组更为明显;皮质区TSD3d组表达也明显增多。结论:完全睡眠剥夺大鼠海马和皮质IL-1βmRNA表达增高,且随时间的延长而逐趋明显。睡眠短期剥夺IL-1βmRNA表达增高可能对脑细胞具有应激性保护作用,而长期剥夺后IL-1β持续增高可能对神经元有损伤作用。     

睡眠剥夺对大鼠海马和皮质IL-1β蛋白表达的影响

目的:研究完全睡眠剥夺对大鼠海马和皮质IL-1β蛋白表达的影响。方法:将大鼠放入1转/分钟转笼中,制作经历不同持续时间的完全睡眠剥夺(TSD)模型。30只大鼠随机分为5组:对照组(正常对照CC组,环境对照TC组)和睡眠剥夺组[TSD6h组,TSD1d组,TSD3d组(n=6只)]。采用免疫组化方法检测大鼠海马和皮质IL-1β蛋白表达。结果:IL-1β阳性细胞大多在细胞浆,胞核内也有表达;主要分布在海马CA3、CA1及齿状回细胞核和细胞浆,在大脑皮质分布于各层。结论:完全睡眠剥夺大鼠海马和皮质IL-1β蛋白表达增高,且随时间的延长而逐趋明显。睡眠短期剥夺,IL-1β蛋白表达增高可能对脑细胞具有应激性保护作用,而长期剥夺后IL-1β持续增高可能对神经元有损伤作用。     

电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响

目的:探讨电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响及机制.方法:采用递增法建立海洛因成瘾大鼠模型,设对照组、成瘾组、成瘾+电针处理组(电针组).三组大鼠跳台实验测试大鼠学习记忆,并取三组大鼠脑海马组织,运用流式细胞仪检测细胞凋亡).结果:跳台实验结果表明:与对照组比较,成瘾组大鼠学习记忆成绩降低(P<0.0...     

侧脑室注射IL-1ra后脑缺血大鼠下丘脑室旁核CRH的表达

目的探讨白介素－１（ＩＬ－１）是否参与脑缺血大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡ）的激活。方法选用成年ＳＤ大鼠，分为１７组（Ａ～Ｑ组），Ａ组为正常对照组，Ｂ～Ｏ组大鼠脑缺血时间分别为１、３、６、２４、４８、７２ｈ及１、２、３、４、５、６、７、８周；Ｐ组的处理为：用微量注射泵将ＩＬ－１受体拮抗剂（ＩＬ－１ｒａ）注入大鼠侧脑室，之后建立脑缺血模型；Ｑ组为Ｐ组的对照组，用微量注射泵将生理盐水注入大鼠侧脑室，之后建立脑缺血模型。用免疫组化法显示各组大鼠下丘脑室旁核（ＰＶＮ）促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）的表达。结果正常大鼠ＰＶＮ有少量ＣＲＨ表达，脑缺血４８ｈ内ＰＶＮ无ＣＲＨ表达。从脑缺血７２ｈ起，ＰＶＮ之ＣＲＨ的表达开始增多，并且持续至脑缺血第８周。Ｐ组大鼠ＰＶＮ有较多ＣＲＨ表达，而Ｑ组大鼠ＰＶＮ无ＣＲＨ表达。结论ＩＬ－１可能通过促进下丘脑ＰＶＮ释放ＣＲＨ而参与脑缺血时下丘脑－垂体－肾上腺轴的激活。     

氯胺酮对抑郁大鼠前额皮层及海马IL-1β和IL-6表达的影响

目的 检测抑郁大鼠给予氯胺酮后,前额皮层及海马区组织内IL-1β和IL-6表达的变化.方法 Wistar大鼠雄性20只按照随机方式分为2组,各10只,给予生理盐水的大鼠入对照组（C组）,给予10 mg/kg氯胺酮的大鼠为K组.应用行强迫游泳实验15 min的方法建立大鼠抑郁模型.次日,腹腔注射氯胺酮或等体积生理盐水,注射30 min后再次进行强迫游泳实验5 min,记录不动时间.并分别采用Western Blot法和双抗体夹心ABC-ELISA法检测大鼠前额皮层及海马组织中IL-1β和IL 6的表达情况.结果 与对照组比较,应用氯胺酮后大鼠强迫游泳不动时间明显减少（P＜0.01）,大鼠前额皮层及海马区的IL-1β和IIL-6表达均明显下调（P＜0.05）.结论 氯胺酮对抑郁大鼠的抗抑郁作用可能与前额皮层及海马IL-1和IL-6的表达下调有关.