去抗原牛松质骨块/bBMP复合材料修复兔长骨骨缺损

探讨大块异种骨的制备及其在修复节段性骨缺损中的作用。方法将大块的牛松质骨制备成消除抗原性的载体,与牛骨形态发性蛋白（ＢＭＰ）组合构成去抗原牛松质骨块／ｂＢＭＰ复合材料,采用兔桡骨１５ｍｍ节段性骨缺损模型,研究去抗原质骨块／ｂＢＭＰ复合材料在修复骨缺损中的作用。     

复合rhBMP2的异种骨的研制及成骨活性

目的：研制新型具有诱导成骨活性的异种骨植骨材料。方法：在重组合异种骨（RBX）基础上,以基因重组人BMP2（rhBMP2）取代从牛皮质骨中提取的牛BMP,与去抗原牛松质骨载体（BCB）复合,制成复合rhBMP2的异种骨（rhBMP2/BCB）,并采用小鼠股部肌袋模型,通过组织学、骨计量学方法检测rhBMP2/BCB的诱导成骨活性。结果：实验组（rhBMP2/BCB组）术后7d在小鼠肌袋可诱导软骨生成,14d形成纺织骨,21d改建成板状骨并形成大量骨髓;对照组（BCB组）于术后各时间点均未见有软骨成骨形成。实验组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组,有非常显性差异（P＜0．01）。结论：rhBMP2/BCB具有较好的骨诱导能力,是一种较理想的植骨材料。     

猪髂骨不同钙含量骨基质的生物学性质的初步检测

目的 对不同钙含量骨基质的生物学特性进行评价,为进一步研究构建组织工程骨提供新型支架材料. 方法以新鲜猪髂骨为原料制备骨基质,扫描电镜观察超微结构,电子万能实验机进行力学测试,电子探针测定钙含量.结果 随着处理时间的延长,猪松质骨的生物学强度明显降低,超微结构观察显示骨小梁结构完整,孔隙率、孔径大小符合要求.各组间压缩强度、扭转力比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 在处理异种骨块时,必须在去除抗原性物质的同时减少处理时间,尽可能的保留骨块的生物力学特征.异种骨基质作为一种新型的理想的骨替代物,有广泛的应用前景.     

超声辅助酶法去抗原处理猪异种骨的实验研究

目的：采用超声辅助酶法去抗原处理异种骨,期望获得具有免疫原性低、具有良好生物力学性能的理想骨移植材料。方法将猪异种骨用超临界CO2脱脂、深低温冷冻处理后分为3组,分别采用超声波辅助胰蛋白酶法去抗原（A组）、单纯采用超声波法（B组）或胰蛋白酶法（C组）处理异种骨,并取新鲜骨为D组。观察和比较各组的骨材料大体标本和切片、抗原性、材料的生物力学特性。结果超声辅助酶法去抗原处理异种骨速度快,经处理后的猪异种骨材料去抗原更彻底,免疫原性低,孔隙率最高,孔径大小最佳,但材料的生物力学性能有明显下降。结论超声辅助酶法是一种较好的骨材料去抗原处理方法,但处理完后对材料的生物力学性能有明显影响,还需要进一步优化实验参数。     

槟榔水提取物对骨质疏松小鼠骨密度及氧化应激状态的影响

目的：观察槟榔水提取物对骨质疏松小鼠骨密度及氧化应激状态的影响,并初步探讨其机制。方法将24只KM小鼠随机均分为对照组、骨质疏松组和槟榔组共3组,每组8只。骨质疏松组和槟榔组通过切除卵巢建立骨质疏松模型,对照组不建立骨质疏松模型;术后,槟榔组在饮用水中添加槟榔浸出液,对照组和骨质疏松组饮用水中不添加槟榔浸出液。6个月后测量小鼠体重及骨密度,检测小鼠血液中过氧化氢（ H2 O2）、丙二醛（ MDA）、谷胱甘肽（ GSH ）、过氧化氢酶（ CAT ）的含量,及骨保护素（ OPG ）和核因子κB 受体活化因子配体（ RANKL）含量。结果术后6个月,与骨质疏松组比较,槟榔组体重增加（ P＜0．05）,骨密度升高（ P＜0．05）, H2O2和MDA含量下降（P＜0．05）,GSH含量升高（P＜0．05）。骨质疏松组CAT含量较槟榔组下降（P＜0．05）,而槟榔组CAT含量与对照组比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论槟榔可以有效抑制小鼠骨质疏松的进展,其机制可能与其有效抑制OPG的降低和RANKL的升高,及有效抑制氧化应激状态有关。     

核因子E2相关因子2在晶状体上皮细胞抗氧化损伤中的作用*

目的 探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）在晶状体上皮细胞抗过氧化氢（H2O2）氧化损伤和凋亡中的作用。方法 通过MTT测定不同浓度H2O2对人晶状体上皮细胞（HLECs）活力的影响；流式细胞术检测正常对照组（不加H2O2），不同浓度H2O2处理组（100、200及300?μmol/L）和Nrf2抑制组（GSK-3β+H2O2 300?μmol/L）活性氧（ROS）及超氧化物酶歧化酶（SOD）的含量；Western blotting检测凋亡相关蛋白剪切型Caspase-3（Cleaved-Caspase-3）、Bax、Bcl-2、Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及Nrf2浆蛋白的表达；免疫荧光法检查Nrf2在晶状体上皮细胞的表达和定位。结果 当H2O2浓度为400?μmol/L时，晶状体上皮细胞不可逆死亡。细胞经H2O2处理48?h后，各组ROS的表达量比较，差异有统计学意义（P?<0.05），与正常对照组比较，各处理组ROS含量升高（P?<0.05），Nrf2抑制组与H2O2高浓度组比较，差异无统计学意义（P?>0.05）。处理48 h后，各组SOD的含量比较，差异有统计学意义（P?<0.05）；与正常对照组比较，各处理组的SOD含量降低（P?<0.05），与H2O2高浓度组比较，Nrf2抑制组SOD含量下降（P?<0.05）。处理48?h后，各组Cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的比较，差异有统计学意义（P?<0.05），与正常对照组比较，H2O2各个浓度组Caspase-3、Bax降低（P?< 0.05），Bcl-2升高（P?<0.05），与H2O2高浓度组比较，Nrf2抑制组的Cleaved-Caspase-3、Bax升高（P?<0.05），而Bcl-2降低（P?<0.05）；H2O2各浓度组中Nrf2相对表达相应增多且有核内转移的趋势，Nrf2抑制组无Nrf2表达。结论 Nrf2在人晶状体上皮细胞中的表达及核易位能增加抗氧化酶和抗凋亡蛋白的含量，降低促凋亡蛋白含量，从而起到自身抗氧化损伤和抗凋亡的作用。     

他莫昔芬对去势大鼠松质骨及皮质骨骨密度的影响

目的：选择性雌激素受体调节剂对去势大鼠松质骨,皮质骨骨密度的影响,方法：将21只SD大鼠随机分为3组,每组7只,A组为对照组,B组为去势组,C组为去势＋他莫昔芬组,在去势后5wk给药,术后16wk处死各组大鼠,进行离体骨密度（bone mineral demsity,BMD)测量及组织形态学测量,结果：（1）与对照组相比,去势组去势后16wk股骨头,股骨颈,股骨干,肱骨头,肱骨干,腰椎BND显降低（P＜0．01）,骨小梁体积,骨小梁碍度,椎体皮质骨厚度,结连结密度,结密度亦明显降低（P＜0．05）而游离端密度和结连游离瑞密度增高（P＜0．01）,（2）他莫昔芬治疗后11wk,各部位BMD增加（P＜0．01）,但没有恢复到正常水平（P＜0．05）,腰椎骨小梁连接参数恢复到对照组水平（P＞0．05）,结论：（1）去势后16wk大鼠松质骨,皮质骨骨量均明显下降,腰椎骨小梁三维结构破坏,骨小梁连结程度降低。（2）他莫昔芬治疗后,松质骨,皮质骨骨量均明显增加,但没有恢复到去势前水平,（3）他莫昔芬能增加腰椎椎体皮质骨厚度,增加腰椎骨小染厚度,增加皮质骨,松质骨骨量,还可提高腰椎微构筑的质量,使骨小染连程度增加。     

葛根素对低O2高CO2肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞线粒体途径凋亡的影响

目的：研究在慢性低O2高CO2情况下，葛根素对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）线粒体途径凋亡的影响。方法：雄性SD大鼠40只，随机分为正常对照组（N组）、慢性低O2高CO2周组（H2w组）、慢性低O2高CO2 4周组（H4w组）、慢性低O2高CO2 4周＋葛根素组（H4w＋G组），每组10只。TUNEL法检测PASMCs凋亡；免疫组化测定PASMCs线粒体细胞色素C（Cyt—c）释放量及胞浆Bcl-2、Bax含量；分光光度法检测肺组织匀浆caspase 9酶活性。结果：①H2w组、H4w组和H4w＋G组mPAP、RV／（LV＋S）、PAMT、PASMCs胞浆Bcl-2含量均显著高于N组（P〈0．01），Cyt—c释放量、Bax含量及肺组织匀浆caspase 9酶活性均显著低于N组（P〈0．01）；H2w组、H4w组各级PASMCs和H4w＋G组肺弹力型动脉和肺微细动脉PASMCs凋亡指数显著低于N组（P〈0．01）。②H4w＋G组mPAP、RV／（LV＋S）、PAMT、肺弹力型动脉和肺微细动脉PASMCs中Bcl-2含量均显著低于H4w组（P〈0．01）；弹力型动脉和肌型动脉PASMCs凋亡指数、Cyt—c释放量，肺组织匀浆caspase 9酶活性均显著高于H4w组（P〈0．01）；Bax含量在H4w＋G组与H4w组间差异无显著性（P〉0．05）。结论：葛根素有抑制慢性低O2高CO2肺动脉高压和肺血管重建的作用，促进PASMCs通过线粒体途径凋亡可能是其作用机制之一。     

白藜芦醇通过ERK1／2通路对H9c2心肌细胞抗氧化应激损伤的研究

目的培养H9c2心肌细胞建立氧化应激模型,同时选择并选用ERK1／2途径作为研究对象,利用ERK1／2通路特异性阻断剂U0126进一步探讨可能的作用机制,观测白藜芦醇对心肌细胞抗氧化应激损伤的保护及机制。方法通过传代方法培养心肌细胞细胞。实验分为以下5组：正常对照组、过氧化氢（H2O2）组、白藜芦醇＋H2O2组、白藜芦醇＋UO126＋H2O2组、UO126＋H2O2组,实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态的变化,测定乳酸脱氢酶（LDH）的释放,测定超氧化物歧化酶（SOD）的活性,通过流式细胞术来检测心肌细胞的凋亡。结果H2O2组心肌细胞LDH量较对照组有所增加（99808±23．07Vs477．11±17．78,P〈0．05）,SOD活性较对照纽有所下降（15．43±4．52vs35．03±2．17,p〈0.05）;白藜芦醇＋H2O2组LDH的量较H2O2组下降（208．51±1784Vs998．08±23．07,P〈005）,SOD的量较H2O2组下降（29．03±3．18Vs15．43±4．52,p〈0．05）;而白藜芦醇＋u0126＋H。02组与白藜芦醇＋H20,组相比LDH的量有所下降（617．3±11．23Vs708．51±1784,P〈0．05）,SOD的量有所下降（25．12±2．23Vs29．03±318,P〈0．05）,U0126＋H2O2组与H2O2组比较差异有统计学意义,P〈0．05。凋亡率结果显示,空白组细胞生长良好,对照组细胞集中在B3区,在B4区和B2区内无分布或分布甚少,凋亡率极低为6．73±2．38;H2O2组出现大量凋亡细胞,其凋亡率为56．2±4．73,与空白对照组相比差别有统计学意义（P〈0．05）;白藜芦醇＋H2O2组其凋亡率显著降低为48．17±308,与H2O2组相比差别有统计学意义（P〈005）;而白藜芦醇＋UO126＋H2O2组与白藜芦醇＋H2O2组相比凋亡率有所下降（4817±3．08Vs40．9±1．66,P〈0．05）,差别均有统计学意义。结论H2O2可以诱导心肌细胞的损伤及凋亡;白藜芦醇可以减轻H2O2所致的心肌细胞损伤及凋亡作用,ERK1／2通路可能为白藜芦醇发挥保护作用的途径之一。     

人工加载对悬吊和去势SD大鼠胫骨力学性能影响的实验研究

目的 进一步探讨力负荷对骨力学性能的影响。方法 我们进行了人工加载对悬吊和去势SD大鼠胫骨力学性能影响的实验研究。实验选取9月龄雌性SD大鼠42只，分为对照组、悬吊组、悬吊加载组、假手术组、去势组、去势加载组，采用自行研制的动态活体加载装置每日对悬吊加载组和去势加载组大鼠加载15min，频率选取5Hz，外部载荷先取3N。4周后处死大鼠，分别取胫骨皮质骨和松质骨进行横断面测量及压缩试验，分析胫骨的力学性能。结果 悬吊组大鼠松质骨最大载荷及弹性模量较对照组明显下降（P〈0．05），悬吊加载组最大载荷较悬吊组明显增大（P〈0．05）：去势组及去势加载组大鼠松质骨最大载荷及弹性模量较假手术组明显下降（P〈0.05）；悬吊组大鼠密质骨最大载荷及骨密质骨面积较对照组有所减小（P〈0．05），去势组及去势加载组大鼠密质骨最大载荷较假手术组有所下降（P〈0．05），去势组密质骨面积较假手术组有所减小（P〈0．05），各组密质骨弹性模量无显著性差异（P〉0．05）。结论 人工加载能显著提高悬吊大鼠胫骨的力学性能。去势大鼠骨重建闭值已经升高，需更大的负荷才能维持去势前的骨量与力学性能。     

Reconstitution of osteoinductive bone xenograft: bioassay in mice]

How to eliminate the antigenicity of bone xenograft while retaining its osteoinductive activities is an unsolved problem in the orthopaedic field. This paper reports an encouraging approach to the question by the following procedures extracting the bone morphogenetic protein (BMP) from cortical bone; eliminating the antigenicity of cancellous bone by chemical extraction; and reconstituting the graft with the treated cancellous bone serving as a delivery medium for BMP. This composite graft is accepted immunologically, and is also osteoinductive in the heterogenous host. In point of delivery medium of BMP, the cancellous bone xenograft is the best choice due to its abundant sources. Bioassay in mouse showed that the reconstituted graft, including only 0.5 mg BMP, demonstrated a definitive osteoinductive ability. In addition, this paper first furnished the information that the BMP aggregate from chemical extraction as described in the literature is also antigenic in the heterogenous host.     

脱细胞保鲜异种骨移植免疫反应的实验研究

目的　研究脱细胞保鲜异种骨移植的免疫排斥反应。方法　以大鼠为动物模型 ,分别植入脱细胞保鲜牛皮质骨(PBCTB)和松质骨 (PBCCB)、新鲜骨 (FBC)、去抗原牛松质骨 (BCB) ,采用体外二次刺激增殖实验 ,酶联免疫吸附实验及局部组织学观察 ,研究移植后大鼠体内的细胞免疫、体液免疫及宿主对该移植物的局部病理反应。结果　保鲜牛皮质骨、松质骨显著降低了异种骨的抗原性、其中保鲜松质骨尤佳 ,与BCB相比较 ,没有统计学差异。结论　脱细胞处理的保鲜松质骨显著降低了细胞的免疫原性 ,同时可以避免化学毒物的残留 ,是一种理想的植骨材料。     

Iminodipeptiduria: a genetic defect in recycling collagen; a method for determining prolidase in erythrocytes.

A 39-month-old girl was found to have a genetic deficiency of prolidase. This enzyme specifically splits dipeptides with proline or hydroxyproline at the C-terminus. Absence of the enzyme leads to massive urinary excretion of iminodipeptides. Clinical symptoms include some that can be ascribed to collagen defects. Previously we had demonstrated that the efficient recycling of proline by the breakdown and resynthesis of collagen is a normal physiological process. The collagen defects in this condition could result from interference with the normal recycling of collagen.     

氨基酸聚合物/硫酸钙生物工程骨的生物相容性研究

目的 评价氨基酸聚合物[poly(amino acid),PAA]/硫酸钙(calcium sulfate,CaSO4)生物工程骨的生物相容性.方法 制备PAA/CaSO4.通过急性毒性实验、溶血实验、微核实验、热原实验、皮内刺激实验、细胞毒性实验研究该复合材料的生物相容性.结果 急性毒性实验中各组小鼠活动正常,7 d内小鼠无死亡,各组动物未见中毒症状或不良反应,7 d 后各组小鼠体质量日平均增加差异无统计学意义(P>0.05).材料浸提液的溶血率为2.01%,符合<5%的国家标准.微核实验中3个实验组与阴性对照组微核率无明显差异(各组的微核率均介于0.4～0.6之间),材料无潜在致突变性.热原实验中3只动物中体温升高最高为0.4℃,体温升高的总数为1.1℃,符合热源实验国家标准.皮内刺激实验观察显示,注射材料生理盐水浸提液和生理盐水处无明显红斑、水肿和皮肤坏死,PII 为0.01～0.02,属极轻微刺激.细胞毒性实验中A、B、C组的BMSC的相对增殖率均>90%,细胞毒性为0～1级,材料无细胞毒性.结论 PAA/CaSO4具有良好的生物相容性.     

阿法骨化醇对去卵巢大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究

目的 探讨从骨量、骨结构、骨力学和骨转换等方面研究阿法骨化醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用。方法 ５３只健康雌性未交配６个月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为６组（１）基线组（Ｂａｓｅ）６个月龄时处死;（２）假手术组（Ｓｈａｍ）;（３）去卵巢（ＯＶＸ）治疗前对照组（ＯＶＸｂ）;（４）ＯＶＸ治疗末对照组（ＯＶＸｅ）;（５）ＯＶＸ后雌激素治疗组（Ｏ＋Ｅ）;（６）ＯＶＸ后阿法骨化醇治疗组（Ｏ＋ＶＤ）ＯＶＸ后６周开     

血清羟脯氨酸浓度和脯肽酶活性在判断肾纤维化病程中的意义

目的：探讨血清羟脯氨酸浓度和脯肽酶活性在反映肾纤维化中的意义。方法：经肾活检证实的有（纤维化组）和无（无纤维化组）肾小球硬化与肾间质纤维化的肾脏病人各１０例,健康献血员（对照组）１０例,测血清羟脯氨酸浓度、血清脯肽酶活性等指标。结果：纤维化组血清羟脯氨酸浓度显著高于纤维化组（Ｐ〈０．００１）和健康对照组（Ｐ〈０．００１）,以此指标显著增高判断肾纤维化,敏感性１００％,特异性９１％,假阳性９％,与肾     

D—氨基酸氧化酶／D—丙氨酸系统杀伤K562e细胞的作用机制探讨

目的：探讨D－氨基酸氧化酶（DAAO）／D－丙氨酸（D－Ala)系统用作自杀基因治疗白血病的作用机制。方法：以D－Ala杀伤稳定表达DAAO和绿荧光蛋白（GFP）的高致瘤性K562e单克隆细胞KDfGd,KDfGC,应用MTT法检测细胞存活率，并用酚红氧化法测定培养上清H2O2和Lowry法测定细胞蛋白数量，流式细胞仪测定细胞GFP的荧光强度。结果：在25mmol/L D-Ala作用下24h好可完全杀死KDfGd细胞，当D－Ala为20mmol/L时延长作用时间至48h，杀伤率由64％增加至96．8％，而D－Ala≤15mmol/L时杀伤率增加不明显。低于20mmol/L,D-Ala对K562e几乎无杀伤作用。培养上清的H2O2变化与杀伤转基因细胞作用相一致。结论：DAAO／D－Ala系统可能是通过产生H2O发挥杀伤转基因K562e白血病细胞的作用。     

2型糖尿病患者胸椎椎体松质骨CT值与冠状动脉钙化的相关性分析

目的： 探究2型糖尿病（diabetes mellitus type 2，T2DM）患者单次冠状动脉螺旋CT扫描同时获取的胸椎椎体松质骨CT值与冠状动脉钙化数据的相关性。方法： 选取2018年7月至2019年11月期间行256排Revolution螺旋CT扫描的T2DM患者72例作为研究对象，并分为冠脉钙化阴性组与阳性组，分析两组患者临床资料、胸椎椎体松质骨CT值的差异，Spearman秩相关分析胸椎椎体松质骨CT值与冠状动脉钙化程度相关指标（累及分支数、严重程度）的相关性。结果： 冠状动脉螺旋CT扫描可一次性同步获取T2DM患者冠脉钙化数据及胸椎椎体松质骨CT值并完成一站式靶向分析。T2DM患者冠脉钙化阴性组和阳性组间年龄、性别、高血压史、糖尿病病程及胸椎椎体松质骨CT值差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.001）。T2DM患者胸椎椎体松质骨CT值与冠状动脉钙化累及分支数（rs=-0.748,P＜0.001）、严重程度（rs=－0.846,P＜0.001）呈显著负相关。结论： 在评估T2DM患者冠状动脉钙化严重程度与骨密度的关系时，可利用螺旋CT冠状动脉扫描同步获取胸椎椎体松质骨CT值反映患者骨密度，从而使患者避免多次接受辐射检查的风险，并节省了时间，降低了成本。     

骨形态发生蛋白的提纯及功能研究

1目的　提纯牛骨形态发生蛋白 (BMP) ,测定其分子质量和氨基酸组成 ,分析其功能。2方法　 BMP经 Sephacryl S- 2 0 0柱层析纯化 ,SDS- PAGE测定其分子质量 ,氨基酸分析仪测定氨基酸组成。 3结果　 BMP分子质量范围为 13.9～ 6 3.5 ku,主要由 13.9,18.4,2 5 .8,35 .7ku等 4种分子质量的组分组成 ;氨基酸分析表明 BMP主要由 17种氨基酸组成 ,其中以甘氨酸、脯氨酸、谷氨酸、丙氨酸等含量最高。4结论　 BMP的 4种组分均由甘氨酸、脯氨酸、谷氨酸、丙氨酸等 17种氨基酸组成。部分纯化 BMP中 ,不溶性非胶原蛋白和非蛋白类物质对 BMP发挥其骨诱导活性可能具有一定的增效作用