Aquaporin 4在脑生理中的作用

水通道蛋白（aquaporin,AQP）是一组具有高度选择性的水跨膜转运通道蛋白家族。自1988年Agre等发现了第一个水通道以来,至今,在人体内已发现有13种AQP（即AQP0-AQP12）。其中,分布于中枢神经系统的水通道蛋白主要有AQP1、AQP4和AQP9。而AQP4在脑生理中的作用尤其突出。     

水通道蛋白在肺的表达及与肺出血的关系

水通道蛋白(AQPs)是一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋白。目前,在哺乳动物中已发现12种AQPs,分布于肺组织的AQPs有6种(AQP1、AQP3、AQP4、AQP5、AQP8及AQP9),分别表达于肺组织的不同部位,其中AQP1、AQP3、AQP4及AQP5在肺泡毛细血管间水的转运中发挥重要的作用,可能参与了出生时肺泡液体的吸收、气道的湿化、肺水容量的调节及肺水肿的形成。就水通道蛋白在肺组织的分布、功能及与肺出血的关系作如下综述。     

肺水通道蛋白与支气管哮喘

水通道蛋白( aquaporins,AQPs)是一组与水的跨膜转运及通透性有关的细胞膜转运蛋白的总称,参与调节水的跨膜转运、维持机体水液代谢平衡。目前为止,在哺乳动物当中共发现13种AQPs,分别被命名为AQP0-12,其中分布于肺组织的有6种,分别为 AQP1、3、4、5、8和 AQP9,称之为肺水通道蛋白[1-3]。     

水通道蛋白1、3、4和5与急性肺损伤关系的研究进展

急性肺损伤（ALI）的显著病理生理学表现为非心源性肺水肿。在多种因素诱导的肺损伤和其他非心源性肺水肿的发生进展中,水通道蛋白1、3、4和5 (AQP1、3、4、5) 发挥了重要作用,尤以AQP1和AQP5为主。应用基因技术发现在ALI中AQP1、3、4和5在细胞迁移、黏蛋白产生等过程和核转录因子κB（NF-κB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中均有参与。多种因素能够干预AQP1和AQP5的表达进而加重或减轻肺水肿。AQP1在ALI的胸水形成中尚发挥一定作用。本文主要从ALI中AQP1、3、4和5在蛋白质水平和基因水平上的参与、多种因素干预以及胸膜水通道蛋白几方面进行综合论述。     

大鼠眼内组织水通道蛋白1的表达

目的：观察水通道蛋白1（AQP1）在正常大鼠眼内组织的表达部位.方法：雄性Wistar大鼠断头放血取出眼球,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋.做矢状面5μm连续切片,每个标本切3张,分别用于AQP1免疫组化染色、阴性对照和HE染色,用已知有AQP1表达的大鼠肾脏肾小管切片为阳性对照.结果：光镜下观察AQP1免疫组化染色切片,细胞中出现棕色粗大颗粒为阳性,反之为阴性.大鼠眼内组织AQP1阳性表达部位有：（1）角膜内皮细胞;（2）虹膜上皮细胞;（3）晶状体上皮细胞;（4）睫状体非色素上皮（NPE）细胞;（5）视网膜神经节细胞层、内核层;（6）视神经胶质细胞.结论：AQP1在眼内与水代谢有关的多个部位呈阳性表达.     

目标导向液体治疗对失血性休克犬输液量及肺水通道蛋白1、5的影响

目的 探讨目标导向液体治疗（goal-directed fluid therapy,GDFT）对失血性休克犬输液量及肺水通道蛋白（Aquaporins,AQP）1、5表达的影响.方法 32只比格犬随机分为4组（每组8只）：假手术组（S组）,目标导向液体治疗组（G组）,中心静脉压指导输液组（C组）及定量输液组（Q组）.G组、C组和Q组建立失血性休克模型并维持休克状态60 min,随后分别采用GDFT、定量输液和中心静脉压指导的输液方案行液体复苏并观察4h.复苏液体乳酸林格氏液与羟乙基淀粉的输液比例为1：1.实验结束后,记录复苏4h的输液量及尿量;测定肺组织的湿/干重量比（W/D）;通过RT-PCR及Western-blot检测肺组织AQP1和AQP5的表达.结果 G组的输液量及尿量多于Q组和C组（P＜0.05）;G组肺组织的W/D高于S组、Q组和C组（P＜0.05）;G组肺组织AQP1和AQP5的表达和S组、Q组及C组比较差异无统计学意义（P＜0.05）.结论 目标导向液体治疗会造成失血性休克犬的输液量增加,但不影响肺组织水通道蛋白1、5的表达.     

大鼠溺死时肺组织水通道蛋白1的变化

目的 观察溺死大鼠肺组织中水通道蛋白1(aquaporin AQF1)的变化。方法 取对照组、实验组大鼠肺组织,用免疫组织化学法和免疫电镜胶体金法,观察及定位肺组织中水通道蛋白1。结果 免疫组化显示溺死时肺间质的毛细血管内皮、支气管上皮及肺泡上皮AQP1的阳性表达,积分光密度值差别有统计学意义。免疫电镜显示肺泡(型上皮细胞AQP1的胶体金数的差别有统计学意义。结论 AQP1在大鼠溺死时肺组织中表达有阳性意义且定位在Ⅰ型上皮细胞膜上。     

脑水肿与通道蛋白4的关系及进展

脑水肿是神经内外科的一种常见症状,对于它的形成目前还未能全部了解,治疗手段有限,效果不一。水通道蛋白（aquaporin,AQP）是1988年发现的生物体内的一种水的分子通道。水通道蛋白4（aquaporin-4,AQP4）是AQP蛋白的一种,研究发现,AQP4蛋白对脑水肿的形成及预后有非常密切的关系,通过调节AQP4蛋白可影响脑水肿的形成及预后,同时AQP4可能还有一些其他功能。因此,对AQP4蛋白及脑水肿的关系进行深入研究有助于解决脑水肿的发生与治疗问题,同时对水在生物体内的代谢有更深入的了解。     

从肺脾肾不同组织水通道蛋白变化研究中医“水液代谢理论”的实验基础

目的从肺脾肾不同组织水通道蛋白变化研究中医“水液代谢理论”的实验基础。方法通过2%腺嘌呤混悬液灌胃4周制
备肾阳虚大鼠模型,并予肉苁蓉煎液进行干预6周,检测尿17羟皮质醇值含量、尿肌酐和尿渗透压,检测水通道蛋白1（AQP1）基
因在肺、脾、肾的表达量的变化,及AQP1蛋白在各组织的表达情况。结果腺嘌呤模型大鼠尿17羟皮质醇值含量较正常组降
低,符合肾阳虚,同时尿肌酐和尿渗透压降低。AQP1基因在腺嘌呤模型大鼠脾、肾组织的表达下调,肉苁蓉干预组AQP1基因
在肺、肾组织的表达较模型组显著上调。AQP1蛋白在腺嘌呤模型组肺脾肾各组织中表达均增加,经肉苁蓉干预的大鼠肺肾组
织中AQP1蛋白表达减少。结论肺、脾、肾均参与水液调节,AQP1是其分子基础之一,补益肾阳药物肉苁蓉有上调AQP1基因
的作用,AQP1蛋白的表达还受到其他因子的调控。
     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织AQP1和AQP5表达的影响

目的 通过研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）和水通道蛋白5（AQP5）表达的影响,旨在从水液代谢及气道黏液分泌的角度探讨阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘的作用机制。方法 SD大鼠90只随机分为正常组（N）、模型组（M）、阳和平喘颗粒低、中、高剂量治疗组（YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H）和地塞米松治疗组（DXM）,每组15只。其中,M、YHPC-L、YHPC-M、YHPC-H和DXM组采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏及雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,同时应用氢化可的松腹腔注射复制肾阳虚模型,N组则均使用生理盐水作为对照。采取HE染色检测各组大鼠肺组织形态学改变,应用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠肺组织AQP1和AQP5 mRNA及蛋白表达水平的变化,采用免疫组化法检测AQP1和AQP5在肺组织的分布及表达水平变化。结果 与N组相比,M组AQP1和AQP5在mRNA及蛋白表达水平均发生显著下降（P<0.01）;与M组相比,YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H组AQP1和AQP5的表达水平均显著上升（P<0.05~0.01）,且具有一定的剂量依赖效应;与DXM相比,YHPC-L对AQP1和AQP5的作用效果低于DXM（P<0.05）,而YHPC-M和YHPC-H则与之具有相当的作用效果（P>0.05）。结论 阳和平喘颗粒可通过上调AQP1和AQP5的表达而调控水液代谢平衡及气道黏液分泌,进而发挥其治疗支气管哮喘的作用。      

凋亡在肺缺血再灌注损伤中作用机制的研究进展

随着肺移植、体外循环以及肺外科中单侧肺循环阻断技术的广泛应用,肺缺血再灌注损伤（LIRI）对于术后肺功能的影响日益受到关注。术中因肺缺血而引起的肺组织坏死一直被认为是影响肺功能的最重要原因,然而近年的研究表明细胞凋亡尤其是肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）的凋亡也起重要作用,凋亡在肺缺血再灌注损伤中的机制成为研究热点。文中对该领域的最新进展进行综述。     

AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选

目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。     

大鼠肺内NOS之分布及缺氧对其活性的影响

本文以组织化学方法对大鼠肺内一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）进行定位研究，并观察了不同时间（８小时～２８天）缺氧时肺内ＮＯＳ活性的变化。结果显示：①正常大鼠各级支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞呈ＮＯＳ强阳性反应；肺血管内膜呈ＮＯＳ阳性反应。②缺氧８小时，肺血管内膜ＮＯＳ阳性反应开始降低，且缺氧时间越长，ＮＯＳ阳性反应越低。③缺氧１４天时，肺泡间质和肺血管周围炎性细胞呈ＮＯＳ阳性反应；缺氧２８天时，炎性细胞ＮＯＳ阳性反应增强。④缺氧对支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞ＮＯＳ的活性无明显影响。从而提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理学作用，而且可能参与缺氧时肺的某些病理学过程。     

浅谈异分化在放射诱导肺纤维化中的作用

肺纤维化即损伤后的肺上皮细胞为胶原和细胞外基质所取代,其过程不可逆,5 年生存率仅为 20% ～ 30%,患者最终死于肺衰竭。在不同治疗阶段,60% 肺癌患者需接受放射治疗;30% 患者发生肺损伤, 最终可能会诱导纤维化发生。目前对放疗导致的纤维化确切机制缺乏了解,该文主要对放射性肺纤维化的研 究进展,以及笔者正在从事的相关研究进行综述,以期了解发生肺纤维化的可能机制。     

Effect of cigarette smoke extraction on the expression of found in inflammatory zone 1 in rat lung epithelial L2 cells

Background Found in inflammatory zone 1 （FIZZ1） protein increased in pulmonary epithelial cells and in limited amounts of other lung cells.FIZZ1 increased in murine model of smoke induced chronic obstructive pulmonary disease.However,the direct role of FIZZ1 produced by pulmonary epithelium stimulated with cigarette smoke extraction has not been determined.We examined the expression and function of FIZZ1 in rat lung epithelial L2 cells.Methods The rat lung epithelial L2 cells （CCL 149） were exposed to cigarette smoke extraction,expression of FIZZ1 mRNA was investigated by RT-PCR.Levels of FIZZ1 protein were detected by Western blotting and laser confocal microscope.CCL 149 cells were treated with different concentrations and for different time of recombinant protein FIZZ1.After treatment,the expression levels of interleukin 8 （IL-8） were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.Results When CCL 149 cells were exposed to cigarette smoke extraction,FIZZ1 mRNA and protein levels expressed significantly higher than control group.Recombinant protein FIZZ1 promoted the expression of IL-8 in a dose and time dependent manner in a certain range.Conclusions Cigarette smoke extraction activates FIZZ1 at mRNA and protein levels in CCL 149 cells.Recombinant protein FIZZ1 induces the expression of IL-8 and may thus participate in the process of chronic obstructive pulmonary disease airway inflammation and airflow obstruction.Generally,immune cells such as macrophages,neutrophils and lymphocytes are unavoidably involved in airway inflammatory and immune responses to cigarette smoke,but it is still unclear whether their involvement in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease is based on the specific expression in lung epithelial cells of FIZZ1.     

“肺与大肠相表里”的黏膜免疫调节机制及中药干预作用研究进展

“肺与大肠相表里”是中医学经典理论之一,揭示了肺与大肠在生理、病理上的密切相关性,在肺、肠疾病治疗上具有重要指导意义。现代医学已揭示肺与大肠在组织来源、黏膜免疫上的联系,初步明确了“肺与大肠相表里”的物质基础及可能的调节机制,并将此理论应用于2019冠状病毒病、溃疡性结肠炎等肺肠难治病的治疗,获得可靠疗效。现有研究结果表明,肺与大肠解剖上的同质性促使了肺-肠黏膜免疫功能的相关性,黏膜免疫及固有淋巴细胞的迁移归巢是肺与大肠共享生理病理的调节机制之一。部分清热解毒类中药和补益类中药通过调节肺-肠黏膜免疫功能治疗肺、肠疾病,成为“肺肠同治”创新药物研发的候选药物。然而,上述两类中药现有免疫调节相关研究主要集中于对分泌型IgA、细胞因子等表达水平及固有淋巴细胞、B淋巴细胞等免疫细胞数量的变化上,对与之相关的气道、肠道黏液高分泌、肺及肠道黏膜屏障免疫细胞功能改变、肺-肠黏膜免疫相互作用动态过程及肺-肠局部微生态的干预作用,以及清热解毒、补益功效与其调节肺-肠黏膜免疫作用间的相关性和生物学基础等尚缺乏深入研究。本文试从肺、肠共同拥有的黏膜免疫系统切入,从黏膜固有淋巴细胞归巢角度分析肺肠相关疾病的内在联系,并综述对肺、肠黏膜免疫具有调节作用的中药复方及其有效成分的作用特点和规律,为“肺与大肠相表里”理论内涵的深入阐释及相关疾病治疗药物的研发提供参考。     

小鼠肺纤维化模型中衰老对肺干细胞的影响

目的 研究衰老对肺干细胞在博来霉素致肺纤维化小鼠模型中修复能力的影响.方法 利用博来霉素处理年轻,年老小鼠建立肺纤维化模型,通过流式细胞术等方法比较肺组织干细胞在年轻、年老小鼠肺纤维化模型中的比例及增殖情况,研究衰老对肺组织干细胞的损伤修复能力的影响.结果 在博来霉素致肺纤维化的模型中,年老小鼠相对年轻小鼠肺组织干细胞增殖明显降低,肺上皮干细胞和肺间质干细胞比例显著下降.结论 在衰老过程中肺组织干细胞在肺纤维化损伤后修复能力明显减弱.     

慢性阻塞性肺疾病与自噬相关性研究进展

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种慢性进展性的肺部疾病,其发病机制包括气道慢性炎症、肺组织的破坏、肺重塑等。自噬是细胞内的一种分解代谢过程,大量研究提示,自噬与COPD的发生发展关系密切,而这一具体机制尚未得到阐明。本文将对COPD与自噬的相关性研究进展作一综述。     

低氧对大鼠肺组织一氧化氮合酶分布及活性的影响

本研究利用低压缺氧性肺动脉高压大鼠模型，通过NADPH－d组织化学染色对肺组织一氧化氮合酶（NOS）进行定性及定位分析、并利用3H－L一精氨酸转化实验定量测定肺组织NOS的活性，以观察低氧对大鼠肺组织NOS分布及活性的影响，旨在探讨NO及NOS在缺氧性肺动脉高压形成中的作用。酶活性测定结果表明缺氧2周大鼠肺组织总NOS活性略有升高，其中原生型NOS（CNOS）活性显著降低（P＜0．05），诱生型NOS（iNOS）活性极显著升高（P＜0．01），NADPH－d染色结果显示肺血管内皮及平滑肌细胞NOS活性均明显增强。提示缺氧可能使肺血管内皮CNOS活性降低，NO生成减少，从而导致肺血管收缩反应增强，肺动脉压升高；缺氧还可能诱导肺血管内皮和平滑肌细胞iNOS表达和活性增加，在缺氧性肺血管收缩反应和结构重组中起到一定的调节作用，从而限制肺动脉压的过度升高。     

Reperfusion pulmonary edema

Reperfusion following lower-torso ischemia in humans leads to respiratory failure manifest by pulmonary hypertension, hypoxemia, and noncardiogenic pulmonary edema. The mechanism of injury has been studied in the sheep lung lymph preparation, where it has been demonstrated that the reperfusion resulting in pulmonary edema is due to an increase in microvascular permeability of the lung to protein. This respiratory failure caused by reperfusion appears to be an inflammatory reaction associated with intravascular release of the chemoattractants leukotriene B4 and thromboxane. Histological studies of the lung in experimental animals revealed significant accumulation of neutrophils but not platelets in alveolar capillaries. We conclude that thromboxane generated and released from the ischemic tissue is responsible for the transient pulmonary hypertension. Second, it is likely that the chemoattractants are responsible for leukosequestration, and, third, neutrophils, oxygen-derived free radicals, and thromboxane moderate the altered lung permeability.