针刺对偏头痛大鼠脑内降钙素基因相关肽基因表达的影响

目的 探讨偏头痛大鼠脑内降钙素基因相关肽（CGRP）的表达强度及针刺对CGRP基因表达的调控机制及针刺防治偏头痛的作用机制。方法 参照Knyihar-Csillik方法复制大鼠偏头痛模型，将动物随机分成正常对照组，模型对照组，针刺预防组和针刺治疗组，每组10只，采用放射免疫分析法测定CGRP浓度；采用RT－PCR法测定CGRP mRNA表达。结果 颈静脉血CGRP含量；正常大鼠保持低水平恒定量，模型对照组大鼠CGRP含量显升高（P＜0．01），针刺预防组及针刺治疗组与正常大鼠相近，但与模型对照组比较，显降低（P＜0．01）；脑干及三叉神经节CGRP mRNA的表达变化；正常对照组表达在较低水平，模型对照组表达显增强（P＜0．01），针刺治疗组及针刺预防组与模型对照组比较，表达显减弱（P＜0．01）。结论 实验性偏头痛大鼠脑内CGRP的过度表达，可能是偏头痛发作的分子机制之一，针刺调控CGRP mRNA表达可能是针刺防治偏头痛的机制之一。     

偏头痛大鼠脑内5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶基因的表达变化及针刺的干预效应

目的:前期实验已证实针刺治疗偏头痛疗效优越。观察针刺对偏头痛大鼠脑内5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的调控作用。方法:实验于2005-11/2006-05在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室完成。①选用SD大鼠40只,按随机数字表法分为4组(n=10),除正常对照组外,其余3组均复制大鼠偏头痛模型。模型对照组只造模,不作其他处理;针刺治疗组造模后进行针刺;针刺预防组针刺后造模电刺激20min。针刺方法:针刺大鼠双侧太冲、阳陵泉穴20min。采用疏密波,电流强度0.3～0.6mA,留针20min,1次/d,共5次。②实验完毕后取脑干及三叉神经节匀浆,采用反转录-聚合酶链反应法测定5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达。结果:进入结果分析正常对照组10只,模型对照组、针刺治疗组、针刺预防组各9只,共脱失3只。①与正常对照组比较,模型对照组大鼠诱导型一氧化氮合酶mRNA表达显著增强(P<0.01),5-羟色胺1FmRNA表达显著减弱(P<0.01)。②与模型对照组比较,针刺预防组和针刺治疗组诱导型一氧化氮合酶mRNA表达明显减弱(P<0.01),5-羟色胺1FmRNA表达显著增强(P<0.01)。结论:针刺调控5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达可能是针刺防治偏头痛的分子机制。     

针刺对偏头痛大鼠血浆内皮素与神经肽Y变化的影响

目的观察针刺对偏头痛大鼠血浆内皮素(endothelin,ET)和神经肽Y(neuropeptideY,NPY)的影响,并探讨其在偏头痛治疗中的作用。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、针刺对照组和治疗组;采用放射免疫法测定颈静脉(externaljugularvein,EJV)血中ET和NPY含量。结果与正常对照组比较,模型对照组ET和NPY水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,治疗组ET和NPY水平显著降低(P<0.05)。结论针刺治疗偏头痛可能是通过调节ET和NPY等神经递质的含量而发挥作用的。     

苯噻啶、心得安防治偏头痛的作用机制

目的:探讨苯噻啶、心得安防治偏头痛的作用机制。方法:SD大鼠50只随机分为对照组、生理盐水(NS)组、模型组、苯噻啶组和心得安组。模型组、苯噻啶组和心得安组复制大鼠偏头痛模型,第2次造模后苯噻啶组和心得安组分别给予药物干预,第5次造模后测定颈静脉血CGRP含量和脑干及三叉神经节α-CGRP mRNA的表达量,同时观察大鼠的行为学变化。结果:大鼠行为学观察显示,与模型组相比,苯噻啶组、心得安组对硝酸甘油的耐受性增强;各组间颈静脉血CGRP含量无显著性差异(P>0.05);③苯噻啶组、心得安组大鼠脑干及三叉神经节α-CGRP mRNA表达量明显低于其他组(P<0.05)。结论:苯噻啶、心得安预防偏头痛发作可能与抑制脑干及三叉神经节α-CGRP mRNA表达有关。     

健脾化湿通络法对佐剂性关节炎大鼠血清及脑组织内皮素-1、降钙素基因相关肽的影响

目的通过佐剂性关节炎(AA)大鼠血清及脑组织内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量的测定,从血管舒缩功能角度探讨其在RA病变过程中的变化及中药干预机制。方法将84只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、雷公藤苷片(TPT)组、新风胶囊(XFC)低、中、高剂量组,每组12只,除正常组外,向每只大鼠右足跖皮内注射FCA0.1 ml致炎,复制AA大鼠模型,致炎后第19天开始分组处理30 d。采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及脑组织中ET-1、CGRP含量。结果(1)AA大鼠血清及脑组织ET-1含量明显升高,CGRP含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);(2)XFC中、高剂量组血清ET-1水平明显下降,CGRP水平明显上升,优于其他药物对照组(P<0.05或P<0.01),XFC组间比较未见明显差异(P>0.05);(3)XFC高、中剂量组脑组织ET-1显著降低,CGRP明显升高,优于其他药物对照组及XFC低剂量组(P<0.05或P<0.01),呈现一定的量效关系。结论健脾化湿通络中药新风胶囊能有效调整ET-1与CGRP的平衡,是其治疗RA的可能机制之一。     

电针对6-羟多巴胺毁损大鼠黑质铁含量变化的影响

目的探讨电针疗法治疗帕金森病(PD)神经保护作用的机制。方法采用6-羟多巴胺(6-OHDA)偏侧黑质毁损大鼠模型,实验大鼠分为正常组、正常电针组、PD模型组、电针组、假电针组,每组9只大鼠。大鼠进行电针处理2周后,利用原子吸收分光光度法测定各组大鼠黑质铁含量,观察针刺某些特定穴位对偏侧毁损大鼠脑黑质铁含量的影响。结果 PD模型组大鼠黑质铁含量较正常组明显升高(P<0.05),旋转行为学明显异常;而电针组大鼠黑质铁含量较PD模型组显著减少(P<0.05),旋转行为学明显改善。结论电针疗法可以降低6-OHDA偏侧毁损大鼠脑黑质内铁的含量,改善大鼠的旋转行为学,研究结果提示电针疗法对6-OHDA偏侧毁损大鼠脑黑质内铁代谢有调节作用,这也可能是针刺治疗PD神经保护作用的机制之一。     

调神益气针法对多发梗死性痴呆大鼠脑内兴奋性氨基酸含量变化的影响

目的:各种奋性氨基酸在学习记忆中具有不同的地位和作用,针刺可特异性地调节某些氨基酸的含量,使之在脑内重新分布,本实验观察调神益气针法对多发梗死性痴呆大鼠脑内兴奋性氨基酸含量变化的影响。方法:实验于2003-03/2004-03在天津中医学院第一附属医院老年病研究室完成。选用雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组,正常组8只、假手术组8只、模型组7只、针刺组9只和非穴位组8只。通过栓子注入法对模型组、针刺位组和非穴位组大鼠制作为多发梗死性痴呆模型;假手术组手术方法同模型制作,只在注射时以生理盐水0.3mL代替栓子溶液;正常组未进行手术及造模。针刺组、非穴位组于造模2周后开始针刺,1次/d,治疗6d,休息1d,3周共治疗18次。模型组、假手术组和正常组进行与针刺组和非穴位组相同时间、相同程度的捉抓刺激。检测各组大鼠干预后不同脑区谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺含量。结果:大鼠40只均进入结果分析。①谷氨酸含量变化:在皮质区及纹状体区,各组之间无明显差异(P>0.05);在海马区,模型组及非穴位组均明显高于正常组(P<0.05),而针刺组谷氨酸含量明显低于模型组(P<0.05)及非穴位组(P<0.05)。②谷氨酰胺含量变化:在皮质区及海马区,各组之间无明显差异(P>0.05)。模型组纹状体区明显高于正常组(P<0.01),而针刺组明显低于模型组(P<0.01)。③天冬氨酸含量变化:在各脑区,与正常组比较,模型组(除外皮质)及非穴位组均明显升高(P<0.01);而针刺组均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)及非穴位组(P<0.01)。④天冬酰胺含量变化:模型组及非穴位组大鼠皮质及纹状体区明显高于正常组(P<0.01);针刺组皮质明显低于模型组(P<0.01)及非穴位组(P<0.01),在纹状体亦低于非穴位组(P<0.05);在海马区,各组之间无明显差异(P>0.05)。结论:调神益气针法可调节多发梗死性痴呆大鼠脑内兴奋性氨基酸的异常代谢,从而降低氨基酸类神经递质所介导的兴奋性神经毒性作用,趋于正常水平,这可能是针刺改善痴呆的作用机制之一。     

迷走神经切断对鼠肺降钙素基因相关肽的影响

目的:探讨切断左侧迷走神经对大鼠血清降钙素基因相关肽含量和降钙素基因相关肽(CGRP)基因表达及调控机制的影响.方法:30只SD大鼠切断左侧迷走神经并按术后取样时间随机分为术后1周组、术后1个月组、术后3个月组,每组10只;另设10只SD大鼠作为正常对照组.采用放射免疫分析法测定血清中CGRP浓度,RT.PCR法测定肺内CGRP mRNA表达.结果:迷走神经切断术后1周和1个月血清CGRP含量比正常对照组显著降低(P＜0.01),随着时间延长,血清中CGRP含量逐渐增加,至3个月时接近正常对照组(P＞0.05):而肺组织CGRP mRNA表达在术后1周和1个月均明显高于对照组(P＜0.01),随着时间的延长,其表达量逐渐减少,至术后3个月时接近正常对照组(P＞0.05).结论:迷走神经切断后血清内CGRP浓度下降及肺内CGRP mRNA表达量增加,表明迷走神经对CGRP基因的表达和神经活性物质CGRP的分泌具有调节作用.     

异丙酚促进大鼠脑缺血/再灌注中CGRP释放的机制研究

【目的】探讨异丙酚在大鼠脑缺血/再灌注(IR)损伤中是否促进内源性保护物质降钙素基因相关肽(CGRP)的释放及其调节机制。【方法】实验大鼠分为对照组、假手术组、脑IR组及脑IR 异丙酚治疗组,测定CO、放射免疫测定大鼠脑组织中CGRP、cGMP含量,免疫组化测定HO-1的表达。【结果】脑IR期间,脑IR 异丙酚治疗组的HO-1、CO、cGMP和CGRP显著高于脑IR组和假手术组(P<0.05),且HO-1与CO、CO与cGMP、cGMP与CGRP的表达变化呈正相关(P<0.05),假手术组和对照组间相比较差异无显著性。【结论】异丙酚能促进IR期间CGRP的升高,对大鼠脑IR损伤具有明显的保护作用,作用机制之一可能是通过HO-1-CO-cGMP途径促进CGRP的合成和释放,减轻缺血再灌注的损伤反应。     

头痛宁对电刺激三叉神经节大鼠脑膜血流与CGRP的影响

目的:观察头痛宁对偏头痛大鼠模型硬脑膜动脉血流和外周血中降钙素基因相关肽(calcitontin gene-related peptide,CGRP)的调节作用.方法:24只雄性SD大鼠随机分成四组:生理盐水组(N组)、头痛宁组(T组)、舒马曲坦组(S组)、假手术组(Sham组).电刺激三叉神经节建立偏头痛大鼠模型,放射免疫分析法测定大鼠外周血中CGRP含量,利用激光多普勒脑血流仪检测大鼠硬脑膜动脉血流量.结果:电刺激三叉神经节时,T组与N组比较其CGRP含量明显低于N组,差异非常显著(P＜0.01),而与S组比较差别不大(P＞0.05),N组与Sham组比较差异非常显著(P＜0.01).电刺激三叉神经节时,T组与N组比较其脑膜血流量明显低于N组,差异非常显著(P＜0.01),而与S组比较差别不大(P＞0.05),N组与Sham组比较差异非常显著(P＜0.01).结论电刺激三叉神经节可导致大鼠外周血中CGRP含量及脑膜血流量增加.头痛宁能明显抑制CGRP的表达与减少脑膜血流量,从而有效地治疗偏头痛.     

针刺对局部脑缺血大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的：观察针刺对局部脑缺血大鼠大脑皮层基质金属蛋白-2（MMP-2）表达的影响。方法：Wistar大鼠24只,分为A、B、C3组各8只,A组大鼠不做任何处理,B、C组建立大鼠大脑中动脉阻塞模型（MCAO）,C组于造模结束30min后针刺大鼠肢体,5h后再针刺1次,以后每天1次,均20min。3组大鼠均采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）观察大鼠皮层MMP-2 mRNA的表达,免疫组化观察MMP-2蛋白的表达。结果：A组大鼠大脑皮层MMP-2 mRNA和MMP-2蛋白有少量表达,B组增高明显（P〈0.01）;与B组比较,C组MMP-2 mRNA及MMP-2蛋白表达也明显降低（P〈0.01,0.05）。结论：针刺可能通过降低MMP-2表达,减少脑水肿,保护脑组织。     

针灸对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用及相关信号通路研究

目的 研究针灸对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用及相关信号通路。方法 取40只SD大鼠,随机分为对照组(正常大鼠,不处理)、假手术组(大鼠双侧海马CA1区注射等量生理盐水)、模型组(建立阿尔茨海默病模型)、干预组(建立阿尔茨海默病模型+针灸),每组各10只。取各组大鼠脑组织,经苏木精-伊红染色行病理学检查;比较各组大鼠脑皮层区Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和炎性细胞因子白细胞介素1 (IL-1)、白细胞介素6(IL-6)阳性细胞数比率;采用免疫印迹法检测大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达情况。结果 病理学检查提示,模型组和干预组大鼠均出现不同程度的病理改变,且干预组的病理损伤程度明显轻于模型组。模型组、干预组大鼠脑皮层区JAK2、STAT3、IL-1和IL-6阳性细胞数比率较对照组、假手术组均明显升高(P <0. 01);干预组大鼠脑皮层区JAK2、STAT3、IL-1和IL-6阳性细胞数比率较模型组明显下降(P <0. 01)。免疫印迹法检测可知,相比对照组、假手术组,模型组、干预组大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达水平均明显升高(P <0. 01);相比模型组,干预组大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达水平均明显下降(P <0. 01)。结论 针灸治疗可有效减轻阿尔茨海默病大鼠脑损伤,其原因可能在于针灸治疗可下调JAK2和STAT3蛋白表达,阻滞JAK2/STAT3信号通路的异常活化,抑制炎性细胞因子的表达,从而可抑制慢性炎症反应的进展,减轻病情程度,起到良好的治疗作用。     

脑出血模型大鼠针刺穴位后其血清对脑源性神经干细胞膜相关蛋白Numb表达的影响

[目的]探讨脑出血模型大鼠针刺穴位后其血清对脑源性神经干细胞膜相关蛋白Numb表达的影响.[方法]将实验大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、模型针刺血清组,制备针刺血清培养神经干细胞,并采用免疫细胞化学染色法检测神经干细胞膜相关蛋白Numb的表达情况.[结果]正常对照组、模型对照组和模型针刺血清组神经干细胞都可见到Numb蛋白的表达.模型对照组Numb蛋白表达明显下调,与正常对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);模型针刺血清组Numb蛋白表达明显上调,与模型对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05).[结论]针刺血清能上调脑源性神经干细胞膜相关蛋白Numb的表达,加速神经干细胞的分化,促进脑损伤组织的修复.     

针刺提高2型糖尿病模型大鼠胰岛β细胞胰岛素的表达

背景:针刺治疗2型糖尿病具有很好的疗效。目的:观察针刺对2型糖尿病模型大鼠胰岛β细胞胰岛素表达的影响。方法:将糖尿病模型大鼠按随机化原则分为针刺组、西药组、模型组,同时设置正常对照组。针刺组大鼠取足三里、内庭和胰俞穴给予针刺治疗,西药组用罗格列酮0.2mg/kg灌胃,模型组用双蒸水2mL/kg灌胃,均1次/d,连续4周。结果与结论:①血糖:针刺组明显低于模型组、西药组(P<0.05)。②血脂:针刺组胆固醇和三酰甘油低于模型组(P<0.05);高密度脂蛋白胆固醇明显高于模型组(P<0.01)。针刺组三指标与西药组比较差异无显著性意义。③胰岛β细胞胰岛素表达:针刺组显著高于模型组和西药组(P<0.05)。④胰岛形态:模型组与西药组胰岛结构不完整,结构破坏,胰岛素染色效果差;针刺组胰岛结构趋向完整,胰岛素染色颗粒明显。说明针刺可显著提高2型糖尿病模型大鼠胰岛β细胞胰岛素表达水平,有效改善胰岛β细胞功能。     

臂丛端侧吻合术后供体神经元和运动终板中CGRP的变化

目的研究臂丛端侧吻合术后供体神经元和运动终板中CGRP的变化。方法Wister大白鼠60只,随机分为3组,每组20只,每只右侧神经外膜开窗(0.2 cm×0.2 cm),将臂丛后束损伤后的桡神经远断端端侧吻合于外膜开窗的内侧束远端0.5 cm部位,左侧不做吻合。分别于术后4、8、12周在麻醉下解剖取C4～T2脊髓节段,并将脊髓节段于正中矢状面分开,及肱三头肌,分别检测CGRP蛋白及mRNA的表达。结果神经端侧吻合后,随时间的延长,脊髓及运动终板中CGRP的表达均显著升高(P0.01),而不做吻合的对照组中,脊髓CGRP表达维持较低水平,且呈下降趋势,但差异性不显著,运动终板中无CGRP的表达。结论提高供体神经元及运动终板中CGRP的表达可能是端侧吻合促进臂丛损伤神经再生,保护靶肌肉及其运动终板的作用机制之一。     

夹脊电针治疗对神经根型颈椎病模型鼠颈神经根组织形态学及脊髓背角环氧化酶-2mRNA含量的影响

目的观察夹脊电针治疗对神经根型颈椎病模鼠颈神经根组织形态学及脊髓背角环氧化酶-2mRNA含量的影响。方法取成年Wistar大鼠40只,随机分为健康对照组、模型对照组、手针对照组和电针治疗组。采用手术方法将浸有甲醛的定量滤纸片放在颈6-7神经根肩上,导致颈神经根的炎症,从而造成大鼠的神经根型颈椎病模型。电针治疗组予以夹脊电针治疗,治疗3周后处死,检测模鼠颈神经根组织形态学的电镜观察及脊髓背角COX-2mRNA含量的表达,观察夹脊电针治疗对模鼠颈神经根组织形态学的电镜下表现及脊髓背角COX-2mRNA表达的影响。结果电针治疗组大鼠颈神经根组织形态学的电镜观察及脊髓背角COX-2mRNA含量表达较模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论夹脊电针治疗能降低神经根型颈椎病大鼠脊髓背角COX-2mRNA的表达,对神经根组织具有保护作用。     

Nrf2/ARE信号通路激活对偏头痛大鼠神经源性炎症的影响

目的探讨核因子E2相关因子2/抗反应元件(Nrf2/ARE)通路激活对硝酸甘油(NTG)诱导的偏头痛模型大鼠神经源性炎症的影响。方法将大鼠随机分为NS组、莱菔硫烷(SFN)+NS组、NTG组、H₂O+NTG组及SFN+NTG组,6只/组。拍摄大鼠挠头视频,应用ELISA检测颈静脉血CGRP浓度,应用Western Blot检测大鼠硬脑膜Nrf2、HO1、NQO1、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达。结果SFN+NTG组各时间段大鼠挠头次数少于H₂O+NTG组(P<0.01)。SFN+NTG组的核Nrf2及下游HO1、NQO1蛋白的表达均高于NTG组与H₂O+NTG组,颈静脉血CGRP浓度低于H₂O+NTG组,硬脑膜NF-κB及TNF-α、IL-1β表达均低于NTG组与H₂O+NTG组(P<0.01)。结论Nrf2/ARE信号通路的激活可减少NTG诱导的偏头痛大鼠挠头次数,降低颈静脉CGRP的浓度,抑制硬脑膜炎症因子的表达,发挥神经保护作用。     

天子饮治疗偏头痛的临床研究

目的:观察天子饮治疗偏头痛的临床疗效。方法:168例偏头痛患者分成天子饮组107例和太极液组 61例,分别口服天子饮和太极通天液。治疗前后评定临床疗效;检测颈静脉血中降钙素基因相关肽(CGRP)和5 羟色胺(5 HT)的含量,并与健康志愿者(正常组)30例对照。结果:天子饮组总有效率和显效率均明显优于太极液 组(P<0.01及P<0.05)。治疗前CGRP天子饮组较正常组明显升高,5 HT则明显降低(均P<0.01);治疗后 CGRP明显降低,5 HT则明显升高(均P<0.05)。结论:天子饮不仅对偏头痛有良好的疗效,且能调节偏头痛患 者血中CGRP和5 HT等神经递质的合成与释放。