一氧化氮合酶在鼻息肉中的表达

一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)有3种亚型^[1]，分别为神经元型一氧化氮合酶(neuronic nitric oxide synthase，nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)。NOS可能在鼻炎和鼻息肉形成中起着重要作用。为了解NOS在鼻息肉组织中分布情况     

富氢生理盐水对变应性鼻炎豚鼠诱导型一氧化氮合酶及其代谢产物水平的影响

目的　探讨富氢生理盐水（hydrogen-rich saline,HRS）对变应性鼻炎（AR）豚鼠iNOS及其代谢产物水平的影响及相关抗炎机制。方法　24只健康雄性豚鼠,随机分3组,对照组、AR组、HRS干预组。以卵清蛋白（OVA）致敏法建立AR豚鼠模型,HRS干预组致敏后HRS干预2周,对照组均同期使用等量生理盐水替代。观察各组豚鼠症状、外周血嗜酸性粒细胞（Eos）计数;分别检测血浆一氧化氮（nitric oxide,NO）水平与血清诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达水平;RT-PCR及Western blot检测鼻黏膜iNOS mRNA与蛋白的表达。结果　AR组豚鼠行为学评分及Eos计数较对照组高,HRS干预后比AR组行为学比分明显降低,差异有统计学意义。AR组血浆中NO含量较对照组高[（61.87±4.25）μmol/L vs（29.49±2.79）μmol/L],HRS干预组较AR组 低[（39.44±2.95）μmol/L vs（61.87±4.25）μmol /L]（P均<0.05）。AR组血清中iNOS含量较对照组明显增加[（292.13±10.95）IU/ml vs（19.72±2.04）IU/ml],HRS干预组较AR组明显下降,差异有统计学意义[（48.24±4.67） IU/ml vs（292.13±10.95）IU/ml]（P 均<0.05）。AR组豚鼠鼻黏膜中iNOS mRNA表达量较对照组高（0.76±0.05 vs 0.11±0.03）,HRS干预组较AR组低（0.21±0.04 vs 0.76±0.05）,差异均有统计学意义（P 均<0.05）。AR组豚鼠iNOS蛋白表达水平高于对照组,HRS干预后,iNOS蛋白量下降。结论　HRS减轻AR炎症,下调AR豚鼠iNOS-NO表达。     

诱导型一氧化氮合酶与PTEN在鼻咽癌中的表达及意义

诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和第10号染色体缺失的与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phospharase and tensill homolog deleted on chromosome ten, PTEN)的联合表达与一些肿瘤的生物学行为有关~([1-2]).     

诱生型一氧化氮合酶在慢性上颌窦炎黏膜的表达

目的 观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)在慢性鼻窦炎病人鼻窦粘膜中的表达。方法 将实验分为两组：对照组为正常成人，无鼻窦病变。实验组为确诊为慢性上颌窦炎的病人。在局麻鼻内镜下行鼻窦黏膜活检，石蜡包埋、切片，用免疫组织化学的方法观察iNOS在两组上颌窦黏膜中的表达。结果 iNOS在正常上颌窦炎黏膜呈阴性表达，在慢性上颌窦炎黏膜呈阳性表达，阳性区域主要在黏膜上皮细胞。结论 iNOS在慢性上颌窦炎黏膜呈阳性表达，提示一氧化氮在慢性上颌窦炎的发病机制中起重要作用。     

变应性鼻炎患者外周血白细胞及鼻黏膜诱导型一氧化氮合酶mRNA 表达的意义

目的　探讨变应性鼻炎 (allergicrhinitis,AR)患者外周血白细胞及鼻黏膜诱导型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase,iNOS)mRNA表达的关系。方法　选择 3 5例AR患者及 3 0例健康人的外周血白细胞。其中 8例变应性鼻炎患者鼻黏膜 ,6例正常鼻黏膜。iNOS mRNA表达采用原位杂交方法。血浆一氧化氮 (nitricoxide,NO)水平采用硝酸还原酶比色法测定。结果　健康人外周血白细胞未见iNOS mRNA表达 ,而AR患者外周血白细胞iNOS mRNA表达高度增强 ,其阳性率达 40 82 %。正常人鼻黏膜上皮、腺体及巨噬细胞可见iNOS mRNA的低度表达 ,而AR患者中上皮、腺体及巨噬细胞增生 ,并iNOS mRNA表达高度增强 (t=2 3 17,P <0 0 0 1)。AR组血浆NO水平显著高于对照组 (t=2 7 89,P <0 0 1)。结论　AR患者血浆NO水平与外周血白细胞及组织内iNOS mRNA表达高度增强有关。提示iNOS NO通路在AR的发病过程中可能起重要作用。本研究为检测体内某些信号提供了简便易行的原位杂交试验方法     

细胞黏附分子及一氧化氮合酶在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

目的:对细胞黏附分子(CAM)及一氧化氮合酶(NOS)进行原位观察,探讨它们在变应性鼻炎(AR)发病中的作用。方法:采用链霉卵白素-生物素复合体(SABC)法,对AR患者及对照组手术切除的下鼻甲黏膜内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管CAM-1(VCAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1),以及神经型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)和内皮细胞型NOS(eNOS)进行原位检测。结果:AR下鼻甲黏膜内3种CAM表达的阳性细胞数ICAM-1为[(14.4±2.2)个/HP(×400),以下同],LFA-1为(17.2±3.3)个/HP,VCAM-1为(11.5±2.7)个/HP;对照组下鼻甲黏膜内3种CAM表达的阳性细胞数ICAM-1为(8.7±1.8)个/HP,LFA-1为(10.3±2.1)个/HP,VCAM-1为(6.9±1.8)个/HP。t值分别是11.57,10.02和8.07(均P<0.01)。AR及对照组下鼻甲黏膜内nNOS表达的阳性细胞数分别为(9.4±1.7)个/HP和(4.7±1.3)个/HP,t值为12.62,(P<0.01);iNOS表达的阳性细胞数分别为(27.5±3.2)个/HP和(4.3±1.7)个/HP,t值为36.03(P<0.01)。eNOS表达的阳性细胞数分别为(6.5±2.1)个/HP,(6.2±1.9)个/HP,t值为0.62(P>0.05)。结论:CAM在黏膜上皮、腺上皮、血管内皮以及黏膜下的各种炎性细胞等的表达,说明CAM参与AR的发生、发展。nNOS和iNOS在AR的发病过程中可能起重要作用。     

内源性一氧化碳对变应性鼻炎豚鼠诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 制备豚鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)动物模型,研究在AR豚鼠模型中内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法 24只豚鼠以随机数字表法分为4组,每组6只.第1组以生理盐水处理作为正常对照组,第2(AR组)、3、4组以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,制成AR动物模型,第3、4组再分别以血红素氧合酶1(hemeoxygenase 1,HO-1)诱导剂氯化血红素和抑制剂锌原卟啉干预处理,分别作为HO诱导组和HO抑制组,分别测定各组豚鼠血浆中碳氧血红蛋白(carboxyhemoglobin,COHb)的百分含量(用来代表血浆中CO含量),并采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定鼻黏膜中HO-1和iNOS的相对表达量.结果 第2、3、4组豚鼠AR造模成功.血浆COHb含量(x-±s,以下同)第2组(2.27%±1.13%)高于第1组(1.08%±0.24%),差异有统计学意义(q=4.10,P＜0.01);第3组(3.17%±0.68%)高于第2组,差异有统计学意义(q=3.12,P＜0.05).鼻黏膜中HO-1、iNOS的相对表达量(x-±s,以下同)第2组[分别为(7.80±1.60)×10~(-3)和(5.81±0.05)×10~(-3)]高于第1组[分别为(1.96±0.71)×10~(-3)和(0.97±0.05)×10~(-3)],差异有统计学意义(q值分别为5.52、7.21,P值均＜0.01),第3组[分别为(11.89±4.78)×10~(-3)和(7.42±0.70)×10~(-3)]高于第2组,差异有统计学意义(q值分别为3.86、2.22,P值均＜0.05),第4组[分别为(3.82±0.98)×10~(-3)和(2.34±0.04)×10~(-3)]低于第2组,差异有统计学意义(q值分别为3.76、5.18,P值均＜0.05).结论 内源性CO在AR中影响iNOS的表达.     

血管内皮舒张因子对豚鼠耳蜗功能的影响

目的 探讨血管内皮性一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)对耳蜗电位的影响.方法 健康豚鼠100只,随机等分为10组:①人工外淋巴液组;②L-精氨酸组;③Ca2+-ATP酶抑制剂组;④Ca2+-ATP酶抑制剂+L-精氨酸组;⑤Ca2+-ATP酶抑制剂+环磷酸鸟苷(c...     

氧自由基与分泌性中耳炎

分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)是以鼓室积液及听力下降为主要特征的中耳非化脓性炎性疾病。关于SOM的发病机理至今未明确，其中以各种原因所致咽鼓管功能障碍最受重视。关于一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)及氧自由基(oxygen free radical，OFR)在SOM中作用的研究较少，本文就此做简要概述。     

一氧化氮、诱生型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子C在鼻咽癌中的作用

目的检测鼻咽癌组织中诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）及血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C,VEGF-C）表达的意义以及它们之间的关系,并检测一氧化氮（nitric oxide,NO）对鼻咽癌细胞株生长的影响及对VEGF-C表达的调节作用。方法用免疫组化法检测57例鼻咽癌标本以及20例非鼻咽癌鼻咽上皮组织标本中VEGF-C以及iNOS的表达,另以NO供体S-亚硝基-N-乙酰基-DL-青霉胺（S-nitroso-N-acetylpenicillamine,SNAP）对鼻咽癌细胞系TWO3进行处理,通过MTT法检测NO对TWO3生长的影响,并通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测NO对TWO3的VEGF-C表达调控作用。结果VEGF-C和iNOS在鼻咽癌组中表达阳性率显著高于对照组（P〈0.05）,鼻咽癌组织中VEGF-C表达在不同T、N以及临床分期组差异有统计学意义（P〈0.05）,但是不同年龄性别组表达差异无统计学意义（P〉0.05）。鼻咽癌组织中iNOS的表达在不同T、N级,临床分期,年龄以及性别组中表达差异无统计学意义（P〉0.05）;鼻咽癌组织中iNOS与VEGF-C表达显著相关（P〈0.05）;高浓度NO能抑制TWO3生长,且NO能调节TWO3的VEGF-C的转录表达。结论VEGF-C及iNOS可能对鼻咽癌的发展起促进作用,且在鼻咽癌中NO可能调节VEGF以及VEGF-C表达调节。     

变应性鼻炎与一氧化氮的关系探讨

目的;探讨变应性鼻炎（ＡＲ）与一氧化氮（ＮＯ）的关系。方法：采用硝酸还原酶比色法测定了５０例ＡＲ患者（ＡＲ组）和３０例正常人（对照组）血清ＮＯ水平。结果：ＡＲ组血清ＮＯ水平显著高于对照组（Ｐ〈０．０１）。结论：血清ＮＯ水平与ＡＲ有一定关系,提示ＮＯ在ＡＲ的发病过程中可能起着有害作用。     

一氧化氮和降钙素基因相关肽在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者咽组织及血浆中的分布及变化

目的 了解NO、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的含量与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea and hypopnea syndrome,OSAHS)的关系。方法 用放射免疫法和酶还原法检测血浆中CGRP和NO含量;用免疫组化的方法观察一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、CGRP在咽部软组织中的分布、变化情况。结果 咽部软组织匀浆NO含量平均值为重度OSAHS组(20例)高于正常对照组(20例),P<0.001,CGRP含量平均值为重度OSAHS组低于正常对照组,P<0.001。血浆NO含量平均值(每组各20例)正常对照组高于中、重度OSAHS组,P<0.001;重度OSAHS行UPPP术后痊愈组与轻度OSAHS组相当,P>0.05;血浆CGRP含量平均值正常对照组和UPPP术后痊愈组高于中、重度OSAHS组,P<0.001;正常对照组与UPPP术后痊愈组差异无显著性,P>0.05。NOS免疫组化标记观察(各20例):重度OSAHS组黏膜鳞状上皮表达弱阳性或为阴性,部分唾液腺上皮呈强阳性表达或唾液腺上皮散在强阳性表达,横纹肌、血管壁、小血管壁呈阳性,少数腺体间导管上皮有局灶性阳性;对照组仅见局部导管上皮局灶性阳性反应,横纹肌细胞节段性片状阳性。CGRP免疫组化标记观察:重度OSAHS组黏膜鳞状上皮及唾液腺腺泡上皮及导管上皮细胞全部阴性,部分纤毛柱状上     

突发性聋患者血浆一氧化氮、脂质过氧化酶、丙二醛水平的测定

目的 探讨突发性聋患者体内一氧化氮（NO），超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)，丙二醛（MDA）水平的变化及其临床意义。方法 测定30例突发性聋患者和20例正常健康人血浆NO，SOD，GSH－Px,MDA的浓度。结果 与正常对照组相比，突发性聋患者血浆NO，SODH，GSH－Px浓度显著低于正常对照组，而MDA水平显著高于正常对照组（P＜0．01）；不同程度耳聋组之间NO，GHS－Px无显著性差异，而在SOD，MDA之间的差异有显著性。治疗后血浆NO，SOD，GSH－Px的活性明显升高。MDA水平明显降低，与治疗前相比有显著性差异。结论 突发性聋患者体内NO，SOD，GSH－Px含量下降，而MDA水平增高，建议治疗该病可应用NO合成诱导剂和外源性SOD或其他抗氧化剂，以提高突发性聋的治疗效果。     

冷束缚应激对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞及白细胞介素2和6表达的影响

目的 探讨冷束缚应激对实验大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型鼻黏膜中嗜酸粒细胞及白细胞介素(interleukin,IL)2和IL-6表达的影响.方法 选健康雌性大鼠50只,以随机数学表法分为5组,每组10只:空白对照组(A组)、AR模型组(B组)、先应激后AR造模组(C组)、先AR造模后应激组(D组)、应激与AR造模同时进行组(E组).空白对照组及各实验组造模后,取大鼠鼻中隔两侧的呼吸区黏膜制备成石蜡切片后进行HE染色及IL-2、IL-6免疫组织化学染色,显微镜下利用图像分析系统,取5个视野嗜酸粒细胞、IL-2、IL-6阳性细胞计数的平均值进行分析.结果 经冷束缚应激后的C、D、E组大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞计数(x-±s,以下同)高于B组(14.1±3.2)及A组(2.3±1.4),差异有统计学意义(F值分别为7.06和8.54,P值分别＜0.05和0.01);C、D、E组IL-6阳性细胞数高于B组(15.3±4.8)及A组(4.9±2.4),差异有统计学意义(F值分别为7.14和8.20,P值分别＜0.05和0.01);C、D、E组IL-2阳性细胞数低于B组(14.4±3.5)及A组(15.4±4.1),差异有统计学意义(F值分别为7.27和7.32,P值分别＜0.05和0.01).C、D、E三组间,嗜酸粒细胞计数、IL-2和IL-6阳性细胞数3项指标差异均无统计学意义(F值分别为2.90、3.12、3.20,P值均＞0.05).结论 鼻黏膜组织中嗜酸粒细胞及IL-6在空白对照组几乎不表达,在AR组中度表达,在经过冷束缚应激的AR大鼠中高度表达,且冷束缚应激与AR造模的先后时间顺序对嗜酸粒细胞及IL-6的表达没有影响.冷束缚应激的AR各组大鼠鼻黏膜组织中IL-2表达明显减少.     

紧密连接蛋白Occludin与变应性鼻炎发病机制相关性探讨

目的研究紧密连接蛋白中闭合蛋白（Occludin）在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达,初步探讨其在变应性鼻炎发病机制中的作用。方法按照2009年武夷山标准选取变应性鼻炎患者32例作为实验组,同时以22例单纯鼻中隔偏曲患者作为正常对照组。所有患者术前收集静脉血清,用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血中IL-4、IFN-γ,术中取AR组和对照组下鼻甲黏膜,行免疫组化检测Occludin的表达,比较两组间Occludin表达强度,并对两组患者血清中IL-4、IFN-γ与鼻黏膜Occludin的表达强度进行相关性分析。结果 1变应性鼻炎患者血清IL-4平均含量（53.65±20.63）ng/L显著高于对照组（15.65±9.50）ng/L,而变应性鼻炎组血清IFN-γ平均含量（19.38±11.28）ng/L显著低于对照组（180.26±65.10）ng/L,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;2免疫组化结果显示变应性鼻炎鼻黏膜中Occludin表达评分（2.78±1.96）较正常组（5.59±2.86）低,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;3Occludin蛋白的表达强度与IL-4含量呈负相关（r=0.783,P〈0.05）,与IFN-γ含量呈正相关（r=0.748,P〈0.05）。结论紧密连接蛋白Occludin在变应性鼻炎患者鼻黏膜中表达强度明显下降,提示其表达下降在变应性鼻炎的发病机制中可能发挥关键作用。     

GLP-1诱导的自噬对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用

目的 研究GLP-1通过调控mTOR信号通路诱导的自噬对糖尿病大鼠视网膜病变是否存在保护作用。方法 建立符合要求的糖尿病视网膜病变大鼠模型,分为模型组、胰岛素组和GLP-1组,每组6只,于造模后即刻、4周、8周、12周测定大鼠空腹血糖水平,12周后处死,取视网膜组织行HE染色,免疫组化法测LC3、P53的表达,超氧化物歧化酶法测定血清氧化应激产物ROS、MDA的含量,Western blotting法测定mTOR蛋白表达。结果 与模型组相比,胰岛素组和GLP-1组可以明显降低空腹血糖,差异有统计学意义,而两组内比较差异无统计学意义。HE染色显示模型组视网膜神经节细胞排列紊乱,细胞减少或缺失,而胰岛素组和GLP-1组视网膜神经节细胞排列较规整,数量无明显减少,接近正常。免疫组化显示GLP-1组LC3、P53蛋白表达较其他组升高分别为(2.34±0.13,0.46±0.03),与各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。GLP-1组氧化应激产物ROS、MDA含量分别为(74.68±4.08,55.60±1.50),较其他组减少,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。W...     

突发性耳聋患者治疗前后NO/NOS和ET的含量变化及其临床意义

目的：探讨血NO、NOS、ET含量与突发性耳聋的关系。方法：应用酶法和放免法检测突发性耳聋患者治疗前后NO、NOS及ET的含量，并与30例正常健康志愿者相比较。结果：突发性耳聋患者治疗前血NO水平低于正常组（P＜0.05），而NOS、ET高于正常组（P＜0.01）；治疗1个月后血NO、NOS与正常人比较差异无统计学意义（P＞0.05），而ET与正常人比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：突发性耳聋患者血NO、NOS、ET水平的检测对了解病情观察其预后有一定的临床价值。     

上下气道一氧化氮检测在持续性变应性鼻炎患者气道炎症评价中的意义

目的通过对持续性变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者上、下气道一氧化氮含量（ni-tric oxide,NO）的检测,为AR患者的临床诊断、治疗及病情的评估提供帮助。方法使用NO检测系统对67例持续性AR患者（其中轻度持续性AR患者28例,中重度持续性AR患者39例）进行上、下气道呼出NO含量测定,同时选择30例健康成人作为对照组。并采用肺功能仪评估肺功能。结果①持续性AR患者上气道NO含量（88.4±3.5）ppb,对照组上气道NO含量（84.2±2.6）ppb;持续性AR患者上气道NO含量与正常对照组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。②持续性AR患者下气道NO含量为（44.2±3.6）ppb,对照组下气道NO含量为（15.7±5.2）ppb;持续性AR患者下气道NO含量显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P=0.000）。③轻度持续性AR患者下气道NO含量（22.7±9.9）ppb,中重度持续性AR患者下气道NO含量（59.7±4.0）ppb;中重度持续性AR患者下气道NO含量明显高于轻度AR患者,差异具有统计学意义（P=0.000）。④持续性AR患者上、下气道呼出NO含量之间不存在相关性（P=0.354）。结论 NO检测方便、快捷,可以及时监测持续性AR患者下气道炎症程度,对于临床尚无下气道炎症临床症状、肺功能正常,但下气道呼出NO升高的持续性AR患者,可以将下气道NO作为气道炎症及病情的监测指标,指导临床治疗。上气道NO检测在变应性鼻炎患者气道炎症评价中的意义有待进一步研究评价。