鼻咽清颗粒抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外增殖及对放疗敏感性的影响

摘 要 目的：体外考察鼻咽清颗粒对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制和放射增敏作用。方法: 以体外培养的鼻咽癌CNE-2细胞为研究对象,MTT法考察鼻咽清颗粒对CNE-2细胞的增殖抑制作用,克隆形成实验检测鼻咽清颗粒对CNE-2细胞的放射增敏效应,流式细胞仪检测鼻咽清颗粒对CNE-2细胞周期和细胞凋亡的影响。 结果: 鼻咽淸颗粒浓缩液能抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈时间 剂量依赖性;24,48和72 h的IC₅₀分别70.79,60.13,51.63 mg·mL^-1（按主药材质量计）;集落形成实验表明鼻咽清颗粒的浓缩液联合放射能明显降低CNE-2细胞集落形成,随着主药浓度的增加,CNE-2细胞集落形成减少,阴性对照组、单纯放射组、10 mg·mL^-1和20 mg·mL^-1 （按主药材的重量计）鼻咽清浓缩液的集落形成数差异具有统计学意义（P<0.05）;随着培养基中鼻咽清主药含量的增加,G2/M期所占的百分比提高,凋亡细胞所占的比例也相应增加,与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:鼻咽清颗粒可抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖,将CNE-2细胞阻滞于G2/M期,诱导鼻咽癌细胞凋亡,具有放疗增敏作用。     

埃克替尼联合放疗对鼻咽高分化鳞癌细胞系的增敏效应

目的探讨埃克替尼对鼻咽高分化鳞癌细胞系CNE-1的放射增敏作用。方法细胞培养鼻咽癌CNE-1,分为空白对照组、埃克替尼组(0.094、0.188、0.376μmol·L-1)、照射组(照射剂量分别为0、2、4、8 Gy)和实验组(各浓度埃克替尼+各剂量照射组),利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,MTT法观察药物对体外培养的CNE-1细胞凋亡的影响,荧光染色法检测凋亡细胞,流式细胞术分析药物对CNE-1细胞周期的影响,高倍光镜下观察细胞形态。结果埃克替尼作用后,0.094、0.188、0.376μmol·L-1的放射增敏比分别为1.095、1.433、1.639,随药物浓度增加而变大;通过流式细胞仪检测发现,埃克替尼和放射治疗具有协同作用,可使CNE-1细胞周期发生改变,凋亡指数增加,0.376μmol·L-1埃克替尼+照射8Gy的凋亡指数达(50.82±6.54)%。结论埃克替尼对鼻咽高分化鳞癌细胞系CNE-1有明显的放射增敏效应。     

检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制

目的 检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.方法 实验分对照组、单纯加热组、单纯照射组和联合处理组.采用流式细胞仪分析G2/M期分布比例及凋亡百分比,Western-Blotting检测CyclinB1的表达,改良的荧光染色法观察核碎片形态.结果 联合处理组G2/M期分布比例较高,CyclinB1表达较高,并产生更多的核碎片,放射诱导的凋亡百分比并不增加.结论 G2/M期分布比例增高,CyclinB1表达增加是温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.     

检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制

目的 探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.方法 实验分4个组,对照组、单纯加热组、单纯照射组和联合处理组.采用流式细胞仪分析G2/M期分布比例及凋亡百分比,Western-Blotting检测CyclinB1的表达,改良的荧光染色法观察核碎片形态.结果 联合处理组G2/M期分布比例较高,CvclinB1表达较高,并产生更多的核碎片,放射诱导的凋亡百分比并不增加.结论 G2/M 期分布比例增高,CyclinB1表达增加是温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.     

减毒沙门菌SGN1对鼻咽癌的抑制作用及机制研究北大核心CSCD

目的探讨高表达甲硫氨酸酶减毒沙门菌SGN1对鼻咽癌的抑制作用及其机制研究。方法通过甲硫氨酸限制培养,检测对人鼻咽癌细胞HNE-2、5-8F和CNE-2细胞增殖、迁移能力、克隆形成率以及细胞周期凋亡的影响;将SGN1与鼻咽癌细胞HNE-2、5-8F和CNE-2共培养,观察其增殖情况;构建5-8F人鼻咽癌细胞系皮下移植瘤模型,观察SGN1对体内鼻咽癌移植瘤的抑制作用;结果甲硫氨酸限制显著抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移能力、单克隆形成以及阻滞细胞周期G 2/M期并诱导细胞发生凋亡。SGN1能抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导凋亡,体内实验结果表明SGN1治疗后,小鼠皮下移植瘤生长受到抑制(P<0.05)。结论SGN1可促进鼻咽癌细胞发生凋亡且抑制肿瘤细胞迁移,为临床治疗提供一个新的治疗策略。     

洛铂对肝癌细胞HepG2的放疗增敏效应

目的 探讨洛铂对肝癌细胞的放疗增敏效应.方法 用MTT法确定洛铂对肝癌细胞株HepG2半数抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测1/4 IC50、1/8 IC50洛铂对HepG2细胞周期、凋亡的影响,蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,细胞克隆形成实验研究洛铂对HepG2的放射增敏比.结果 洛铂对肝癌细胞株HepG2细胞毒作用呈剂量依赖性,半数抑制浓度为1.85μg/ml,不同浓度洛铂组(1/4 IC50组、1/8 IC50组)均观察到HepG2细胞凋亡和G2/M期阻滞明显增加(P＜0.05);两组洛铂干预组肝癌细胞Bcl-2表达下降,Bax、Caspase-3表达水平升高;洛铂对肝癌细胞HepG2的放疗增敏比分别是1.12、1.28.结论 洛铂具有放射增敏作用;其机制可能与促进肝癌细胞凋亡以及细胞G2/M期阻滞相关.     

靶向NBS1的RNA干扰对鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用的研究

目的:研究靶向NBS1的RNA干扰对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用。方法:靶向NBS1的小干扰RNA转染鼻咽癌CNE-2细胞48小时后,4Gy剂量X射线照射。照射后24小时,流式细胞仪分析鼻咽癌细胞凋亡率。结果:X线照射+RNAi-NBS1组的细胞凋亡率显著高于单独X线照射组和X线照射+RNAi-阴性对照组(P<0.01)。结论:靶向NBS1的RNA干扰在鼻咽癌CNE-2细胞中有显著的放射增敏作用,诱导细胞凋亡是其放射增敏的重要机制之一。     

多西紫杉醇对非小细胞肺癌细胞株A-549放疗增敏作用及机制

目的：研究多西紫杉醇对体外培养非小细胞肺癌细胞的细胞周期改变和凋亡影响,及其放疗增敏的作用及机制。方法：以非小细胞肺癌细胞株A-549为实验对象,MTT法观察多西紫杉醇对A-549细胞增殖抑制;克隆形成实验分析细胞放射敏感性;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果：多西紫杉醇对A-549细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性,在较低浓度（1μg/ml）时即可降低A-549细胞的克隆形成率。各处理组细胞的细胞周期和凋亡率结果表明,多西紫杉醇＋放疗组G2/M期细胞比例较其他组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;细胞凋亡率差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论：多西紫杉醇在低细胞毒性浓度下对非小细胞肺癌细胞株A-549有放射增敏作用;多西紫杉醇对A-549细胞增敏其机制可能与其能改变细胞生长周期并诱导其凋亡有关。     

雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡作用

目的探讨雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用及机制。方法 MTT测定雷公藤甲素对CNE-2Z细胞的抑制作用;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色测定雷公藤甲素对鼻咽癌细胞凋亡的影响;Western blot测定葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP-78)、Akt的表达及Akt的磷酸化水平;ROS荧光探针-二氢乙啶测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平。结果 MTT显示,雷公藤甲素对鼻咽癌细胞CNE-2Z的抑制作用随浓度增加及时间延长而增强;PI结果显示,雷公藤甲素能明显诱导鼻咽癌细胞的凋亡,25、50和100 nmol·L-1的雷公藤甲素作用细胞24 h,CNE-2Z细胞的凋亡率分别为14.0%、26.9%和34.4%;Western blot显示,雷公藤甲素对CNE-2Z细胞GRP-78表达无明显影响,但可减弱Akt的表达及磷酸化水平;氧化应激实验结果表明,雷公藤甲素作用4 h后,能增加鼻咽癌细胞CNE-2Z内ROS的水平。结论雷公藤甲素具有抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的作用,且具有浓度与时间依赖性。其机制可能是雷公藤甲素通过诱导氧化应激,抑制细胞内Akt的表达及其磷酸化,调节下游的信号通路,进而促进CNE-2Z细胞的凋亡。     

白藜芦醇对人肝癌细胞系HepG2抑制作用的探讨

目的:观察白藜芦醇(Res)对体外培养的人肝癌细胞系HepG2生长增殖的影响.方法:采用MTT法、流式细胞仪分析Res对肝癌细胞系HepG2细胞生长的影响及其细胞周期的变化,并且检测端粒酶的活性.结果:Res对肝癌细胞系HepG2的增殖具有抑制作用,IC50为5.91mg/L,流式细胞仪显示,Res能引起肝癌细胞系HepG2细胞的S期阻滞,Res也能显著地抑制端粒酶的活性.结论:Res通过改变肝癌细胞系HepG2细胞的细胞周期分布来抑制人肝癌细胞系HepG2细胞的生长.     

去甲斑蝥素诱导人鼻咽癌细胞CNE1凋亡的实验研究

目的检测去甲斑蝥素对人鼻咽癌细胞CNE1增殖、凋亡的影响,为临床应用NCTD治疗鼻咽癌细胞提供实验基础。方法体外常规培养CNE1细胞用于实验,经NCTD作用后,采用MTT比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪观察鼻咽癌细胞凋亡、细胞周期。结果 NCTD对鼻咽癌细胞的生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);NCTD可剂量和时间依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡;NCTD可剂量依赖性地诱导肿瘤细胞周期发生改变,将鼻咽癌细胞阻滞在G2期。结论 NCTD对体外培养的CNE1细胞的生长有明显抑制作用和诱导凋亡的作用。     

神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的　了解第二信使神经酰胺信号转导对鼻咽癌细胞生长的影响。方法　采用MTT法检测神经酰胺对鼻咽癌细胞株 (CNE 2 )增殖的抑制作用。光镜观察、荧光染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变。Westernblot法检测p2 1WAF1的表达。结果　神经酰胺在 6 2 5、12 5、2 5、5 0 μm浓度下 ,对CNE 2细胞生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪检测发现亚G1峰出现 ,荧光染色可见核荧光强度增加、核片段化和凋亡小体。p2 1WAF1蛋白表达明显上调。结论　神经酰胺能诱导鼻咽癌细胞株CNE 2凋亡 ,且上调 p2 1WAF1蛋白表达。p2 1WAF1可能是神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡中起作用的因素之一。     

PIAsxα对鼻咽癌细胞系CNE1凋亡的影响及其机制探讨

目的　探讨PIAsxα 对鼻咽癌细胞凋亡和成瘤能力的影响及可能机制。方法　采用实时定量PCR,流式细胞术以及裸鼠成瘤实验分析PIAsxα 在鼻咽癌组织中的表达情况,PIAsxα 对鼻咽癌细胞系CNE1 凋亡和cyclin D、CDK 表达及其成瘤能力的影响。结果　鼻咽癌组织中PIAsxα mRNA 的表达水平显著低于邻近正常鼻咽组织。过表达PIAsxα 的CNE1 细胞凋亡率及G2/M 期细胞比例均明显增高,cyclin D1、cyclin D3、CDK4、CDK6 和CDK8 的mRNA 表达均显著降低且在裸鼠体内的成瘤能力亦受到抑制。结论　PIAsxα 的表达下调可能通过增加cyclin D 和CDK 的表达,抑制鼻咽癌细胞的凋亡,促进鼻咽癌的发生和发展。     

黄芪提取物抑制胃癌细胞对腹膜间皮细胞损伤的实验研究

目的观察黄芪提取物抑制胃癌细胞上清对腹膜间皮细胞的凋亡作用。方法将胃癌细胞(MKN45)上清单独或与黄芪提取物联合作用于人腹膜间皮细胞HMrSV。光镜下观察人腹膜间皮细胞形态学变化;MTT检测黄芪作用后人腹膜间皮细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果 MTT及流式细胞仪检测出胃癌细胞(MKN45)上清诱导人腹膜间皮细胞凋亡呈时间依赖性;荧光显微镜观察胃癌细胞(MKN45)上清作用后,间皮细胞出现典型凋亡特征。结论黄芪提取物明显抑制胃癌上清促间皮细胞凋亡作用。     

吉非替尼(Iressa)对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系抑制作用的研究

目的研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Iressa)在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系的抑制作用。方法MTT法检测Iressa对CNE-Ⅰ细胞的吸光度A550值并计算抑制率;培养瓶克隆形成率实验;流式细胞术检测CNE-Ⅰ细胞在10,30μg/mL的Iressa作用后24,48h细胞周期和凋亡率变化。结果MTT数据显示CNE-Ⅰ细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,随Iressa浓度升高,抑制作用越明显,经计算IC50=13.155μg/mL。培养瓶克隆形成率实验,对照组克隆形成率为33.2±1.8%,而10μg/mL Iressa组、30μg/mL Iressa组均为0,提示Iressa能明显抑制CNE-Ⅰ细胞增殖。流式细胞术分析显示Iressa处理48h使CNE-Ⅰ细胞凋亡率明显升高,且随浓度升高凋亡率升高越明显(P<0.001),细胞周期结果显示Iressa使细胞周期G0-G1期比例升高,S期和G2-M期比例下降,但除10μg/mL Iressa组G2-M期比例下降明显以外(P=0.042),其他各组间差异无显著性。结论Iressa在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞有显著抑制增殖和促进凋亡作用。     

紫杉醇体外抗肝癌活性(英文)

目的:研究紫杉醇在体外对SMMC-7721人肝癌细胞的抑制作用及其机理。方法:用MTT比色法测定细胞生长。用流式细胞仪及显微镜观察进行细胞周期动力学和凋亡的分析。结果:紫杉醇抑制人肝癌细胞生长的IC_(50)为18.96nmol·L~(-1),并有一定的浓度和时间依赖关系。经紫杉醇10nmol·L~(-1)处理后细胞积聚在G_2/M期并发现明显的凋亡,形态学观察可见多个多核细胞。结论:紫杉醇通过引起细胞周期阻滞、异常的有丝分裂以及细胞凋亡抑制人肝癌细胞生长。     

鼻咽清颗粒对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及机制研究

目的 体内考察鼻咽清颗粒对人鼻咽癌细胞（CNE-2）裸鼠种植瘤的放疗增敏作用并对其可能机制进行初步探索。方法 建立CNE-2细胞的裸鼠种植瘤模型,取荷瘤成功裸鼠30只,随机分成5组,分别为模型组,鼻咽清颗粒低、高剂量（生药剂量5.2、10.4 g/kg）组,放疗组,鼻咽清颗粒（生药剂量5.2 g/kg）+放疗组,每天2次ig给药;放疗照射剂量为4 GY,隔日1次,连续2周。给药期间每5天测量肿瘤体积,至给药30 d处死,取瘤组织,称质量并计算抑瘤率;免疫组化检测P53、Bcl-2蛋白表达。结果 与模型组比较,各治疗组均对移植瘤体积、质量发挥显著抑制作用（P<0.05、0.01）;鼻咽清颗粒+放疗组瘤体积、质量均显著低于放疗组（P<0.05、0.01）。免疫组化结果提示,与模型组比较,各治疗组移植瘤组织中P53、Bcl-2蛋白表达阳性细胞率均显著降低（P<0.05、0.01）;与放疗组比较,鼻咽清颗粒+放疗组P53、Bcl-2蛋白表达阳性细胞率显著降低（P<0.01）。结论 鼻咽清颗粒抑制鼻咽癌的生长且具有放疗增敏作用,可能与同时抑制突变性P53和Bcl-2蛋白表达相关。     

蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞系BEL-7402细胞,MTT法测定细胞的生长抑制率。以终浓度为5.0μmol·L^-1的MG132作用BEL-7402细胞不同时间后用流式细胞仪检测其细胞凋亡率和细胞周期。结果流式细胞仪检测细胞周期随MG-132作用时间延长,G2/M期阻滞明显,并引起细胞凋亡。结论蛋白酶体抑制剂MG132能有效抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖并将细胞阻滞在G2/M期,促进细胞发生凋亡。     

吉非替尼(Iressa)对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系抑制作用的研究

目的研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Iressa)在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系的抑制作用。方法MTT法检测Iressa对CNE-Ⅰ细胞的吸光度A550值并计算抑制率;培养瓶克隆形成率实验;流式细胞术检测CNE-Ⅰ细胞在10,30μg/mL的Iressa作用后24,48h细胞周期和凋亡率变化。结果MTT数据显示CNE-Ⅰ细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,随Iressa浓度升高,抑制作用越明显,经计算IC₅₀=13.155μg/mL。培养瓶克隆形成率实验,对照组克隆形成率为33.2±1.8%,而10μg/mL Iressa组、30μg/mL Iressa组均为0,提示Iressa能明显抑制CNE-Ⅰ细胞增殖。流式细胞术分析显示Iressa处理48h使CNE-Ⅰ细胞凋亡率明显升高,且随浓度升高凋亡率升高越明显(P<0.001),细胞周期结果显示Iressa使细胞周期G0-G1期比例升高,S期和G2-M期比例下降,但除10μg/mL Iressa组G2-M期比例下降明显以外(P=0.042),其他各组间差异无显著性。结论Iressa在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞有显著抑制增殖和促进凋亡作用。     

黄芪对喉癌细胞增殖和凋亡的影响

目的体外观察黄芪对人喉癌细胞系Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用并探讨其作用机制。方法用20、100、200μg/mL的黄芪作用于Hep-2细胞24 h,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,光学显微镜观察细胞形态学变化。结果 MTT结果显示,黄芪可显著抑制Hep-2细胞增殖且存在剂量依赖性;流式细胞仪检测发现,细胞凋亡率随着黄芪浓度增高逐渐升高,各实验组之间及其与对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);用药后光镜观察细胞数量减少,荧光显微镜观察可见典型细胞凋亡。结论黄芪可调控喉癌细胞周期,形成G2/M期阻滞,通过抑制增殖和促进凋亡发挥其抗癌作用。