吸烟者与不吸烟者骨组织骨桥蛋白表达的差异

目的 探讨吸烟对入骨组织骨桥蛋白(OPN)表达及功能的影响.方法 随机选取吸烟和不吸烟的胫骨骨折健康成年志愿者各10名,分为吸烟组和非吸烟组.吸烟者每天吸烟20支以上,烟龄不少于10年;非吸烟者每天吸烟不超过1支或不吸烟.在胫骨骨折手术中取约1克胫骨近端干骺端松质骨,提取出总RNA和总蛋白,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN mRNA的表达,通过蛋白印迹(Western blotting)测定OPN的表达,通过免疫沉淀法测定OPN的磷酸化程度.结果 吸烟组RT-PCR条带光密度值的OPN/β-肌动蛋白(β-actin)比值高于非吸烟组,差异有显著性(P<0.05).吸烟组OPN蛋白印迹检测的条带光密度值高于非吸烟组(P<0.01).吸烟组OPN免疫沉淀检测的条带光密度值高于非吸烟组(P<0.01).结论 吸烟可导致入骨组织OPN mRNA与OPN表达增加,OPN磷酸化程度增强.     

原癌基因c-fos与骨质疏松

c-fos基因是原癌基因的重要成员.其表达受多种细胞活性物质的影响,通过其表达产物c-fos蛋白参与转录激活蛋白1的组成发挥生物学作用,并可以反过来对细胞因子进行调节,从而参与细胞的生长、增殖、分化途径上环节的调控.本文着重就诱导c-fos基因在骨组织中表达的影响因素及其与骨质疏松的相关性进行了探讨.     

类黄酮对人体外周血破骨细胞分化p38MAPK/c-Fos信号通路调控的研究

目的探讨类黄酮调控p38MAPK/c-Fos信号通路对破骨细胞分化的影响。方法采用人体外周血分离单个核细胞,并诱导形成破骨细胞,干预组应用类黄酮对细胞进行处理,通过细胞形态学观察并检测细胞活性,再分别采用RT-PCR和Western blot两种方法观察p38MAPK通路及下游转录因子c-fos基因和蛋白的表达水平。结果对照组与干预组细胞形态学观察均可见诱导培养的破骨细胞形态明显;与对照组比较,干预组破骨细胞样细胞的形成减少,活性减弱,差异具有统计学意义(P0.05);RT-PCR结果显示,干预组p38MAPK通路下游转录因子c-fos表达水平较对照组下降,差异具有统计学意义(P0.01);Western blot检测结果显示,干预组c-fos蛋白表达水平较对照组降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论类黄酮在体外细胞培养中可抑制破骨细胞形态,并可通过下调p38MAPK通路中c-fos基因和蛋白水平的表达,从而减弱破骨细胞的吸收功能。     

COL2在绝经后女性中的表达与骨质疏松相关性的研究

目的探讨Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ,COL2)表达水平与骨质疏松之间的相关性。方法收集2017年1月至2019年12月在新疆维吾尔自治区人民医院骨科中心关节老年病区行手术治疗的髋部骨折60例患者,按照双能X线骨密度(DXA)检测分为骨量正常、骨量减少、骨质疏松和严重骨质疏松4组,每组15例,分别于术中取患者股外侧肌肉组织行RT-PCR及免疫组化检测COL2 mRNA及蛋白表达水平的差异性,并综合分析COL2表达水平与骨质疏松的相关性。结果 RT-PCR及免疫组化检测结果显示,骨量正常组COL2 mRNA及蛋白表达水平与骨量较少组之间差异无统计学意义(P0.05);骨量减少组COL2 mRNA及蛋白表达水平明显高于骨质疏松组,且差异有统计学意义(P0.05);骨质疏松组COL2 mRNA及蛋白表达水平明显高于严重骨质疏松组,且差异有统计学意义(P0.05)。结论 COL2表达水平与骨质疏松呈负相关,COL2可能是预防绝经后女性骨质疏松性髋部骨折的治疗靶点。     

复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠系膜细胞ERK信号途径的影响

目的：观察复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠系膜细胞中胞外调节蛋白激酶通路相关蛋白表达的影响。方法：大鼠肾小球系膜细胞按1×105/孔接种24孔板,实验分为6组：正常葡萄糖组、高糖对照组、中药糖耐康高、中、低浓度干预组、西药吡格列酮组。每组设平行孔4孔,培养24h后检测指标。用RT-PCR法测定各组细胞cPLA mRNA表达,用蛋白质印迹杂交方法（Western Blot）检测p-ERK、PCK-α、c-fos蛋白的表达。结果：治疗组cPLA mRNA、p-ERK、PCK-α、c-fos蛋白表达的水平比模型组均有不同程度的降低（P〈0.01,P〈0.05）。结论：糖耐康对糖尿病肾病肾脏的保护作用,可能是糖耐康抑制了PKC的活化,阻止了DAG-PKC转导途径向通过ras依赖的ERK的传导,并阻止了转录因子c-fos的活化,使不通过ras途径激活ERK的PKC无法激活相关转录因子。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠曲马多依赖及相关脑区c-fos、△FosB及M5受体表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠曲马多依赖及相关脑区c-fos、△FosB及M5受体表达的影响.方法 雄性成年SD大鼠30只,体重180～220 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):对照组(C组)、曲马多依赖组(T组)和盐酸戊乙奎醚组(P组).T组和P组连续7d交替皮下注射曲马多10mg/kg(9:00)或生理盐水(16:00),诱导大鼠曲马多条件性位置偏爱效应.实验第8天停用曲马多,P组腹腔注射盐酸戊乙奎醚1.5 mg/kg,C组及T组腹腔注射等量生理盐水,30 min后行条件性位置偏爱实验,记录大鼠伴药区停留时间.条件性位置偏爱实验结束后处死大鼠,取出大脑,分离相关脑区(中脑腹侧被盖区、前额叶皮层、伏隔核),采用Western blot法检测c-fos、△FosB蛋白的表达,RT-PCR法检测M5受体mRNA的表达水平.结果 与C组比较,T组伴药区停留时间延长,c-fos、△FosB蛋白和M5受体mRNA表达上调,P组M5受体mRNA和△FosB蛋白表达下调(P＜0.05或0.01),伴药区停留时间和c-fos蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);与T组比较,P组伴药区停留时间缩短,c-fos和△FosB蛋白和地M5受体mRNA表达下调(P＜0.01).结论 盐酸戊乙奎醚可减轻大鼠曲马多依赖,其机制可能与下调相关脑区c-fos、△FosB蛋白和M5受体基因表达有关.     

丙泊酚诱导Fos蛋白与脑啡肽在大鼠脊髓共同表达

目的;研究丙泊酚在脊髓的镇痛机制。方法：SD大鼠12只,随机分为对照组,丙泊酚I组（20mg/kg),丙泊酚II组（100mg/kg),药物经腹腔注射,运用免疫组织化学双标法观察丙泊酚诱导大鼠脊髓内Fos蛋白与脑啡肽（ENK）的表达。结果：对照组脊髓中可见较多ENK染色阳性神经元（ELIN）,偶见Fos染色阳性神经元（FLIN）散在分布,无Fos,ENK双标记神经元（ELI／ELIN）;丙泊酚组可见较多ELIN,FLIN分布,而且可见FLI／ELIN,主要分布于脊髓后角,三种染色阳性神经元数量明显大于对照组（P＜0．05）,而且丙泊酚两组音差异显著（P＜0．05）,结论：丙泊酚可增加脊髓内ENK含量,诱导Fos蛋白与脑啡肽共同表达,诱导c-fos基因表达调节前脑啡肽基因,增加ENK含量可能是丙泊酚在脊髓重要的镇痛机制。     

硬变肝组织VEGF的表达与原癌基因c-fos,c-myc 以及肝功能分级的相关性研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）在肝硬化发生发展中的作用以及肝脏原癌基因（c-fos,c-myc)与肝功能Child分级的相关关系。方法 通过对54例硬变肝组织中VEGF、c-fos、c-myc蛋白的免疫组化检测,观察VEGF的蛋白水平表达与肝脏功能Child分级的相关性,同时分析VEGF阳性病例组与阴性病例组c-fos、c-myc的不同表达,来了解二者的相互作用关系。结果 Child A级与Child B级VEGF的表达显著高于Child C级和对照组（P＜0．05）,而Child A级与Child B级之间差异无显著性意义（P＞0．05）。c-fos及c-myc的表达在VEGF阳性组和阴性组差异无显著性意义（P＞0．05）。结论 VEGF的水平可以反映肝脏功能的代偿状态,可能在肝硬化的进程中起着保肝作用;原癌基因c-fos、c-myc与VEGF作用在不同环节。     

雌、孕激素对人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞系中TMEM16A的表达调节

目的探讨雌、孕激素在体外培养的人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞系中对跨膜蛋白16A(TMEM16A)的表达调节。方法通过免疫荧光技术检测TMEM16A在人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞系中的表达及定位。体外培养Ishikawa细胞系48h后,根据加入药物的不同分为实验组:E2组、P4组和E2+P4组,而加入0.1%二甲基亚砜(DMSO)的作为空白对照组。采用实时荧光定量(Q-PCR)和免疫印记试验(Western blotting)检测各组Ishikawa细胞系中TMEM16A mRNA和蛋白的表达情况。结果免疫荧光结果显示TMEM16A主要表达定位于Ishikawa细胞系的细胞膜上,少量定位于部分细胞质中;Q-PCR和Western blotting结果显示,与空白对照组相比,E2组、P4组及E2+P4组的TMEM16A mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P均0.05)。E_2+P_4组的TMEM16A mRNA和蛋白表达水平较E2和P4组均显著升高(P均0.05);P4组的TMEM16A mRNA和蛋白表达水平显著高于E2组(P均0.05)。结论E2和P4可能通过上调人子宫内膜TMEM16A的表达来调节子宫内膜容受性。     

白血病抑制因子对人早孕绒毛滋养层细胞c-jun、c-fos基因表达的调节

目的探讨重组人白血病抑制因(LIF)对人早孕滋养层细胞着床相关分子原癌基因c-jun、c-fos表达的影响及其作用环节。方法将人早孕滋养层细胞培养于DMEM培养液中,加入不同浓度LIF(1、10和100 ng)作用1 h后,分别提取总RNA;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原癌基因c-jun和c-fos的表达。结果正常培养的人早孕滋养层细胞有一定水平的c-jun、c-fos基因表达;LIF对人早孕滋养层细胞c-jun、c-fos的表达均有上调作用,c-jun、c-fos mRNA水平增加1．5～3倍,并且调节呈剂量依赖性。结论LIF可能通过调节滋养层细胞原癌基因c-jun和c-fos表达而影响胚胎的植入。