多西紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制及诱导凋亡的研究

<正>多西紫杉醇(DTX)是一种广谱的、半合成紫杉类抗肿瘤的化疗药物。已有研究表明,多西紫杉醇可用于治疗多种癌症如乳腺癌、肺癌、胃癌和头颈部癌等。本实验通过研究不同     

番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移及Ras表达的影响

目的：研究辛伐他汀（SIM）通过抑制法尼基化途径对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移相关能力及Ras信号转导作用的影响。方法：以MTT法、流式细胞技术分析检测SIM对HO-8910PM细胞生长增殖和细胞周期的影响；用Transwell小室法及细胞粘附人工重组基底膜实验检测SIM对HO-8910PM细胞侵袭粘附能力的影响；RT-PCR、Western blot法检测SIM对HO-8910PM细胞Ras、ERK2表达水平的影响；采用7-32P掺人法检测MAPK活性。结果：（1）4～64μmol／L的SIM处理24～72h后，HO-8910PM细胞的生长增殖受到一定的抑制；各给药组内G1期细胞明显增多，G2、S期细胞减少，用药浓度高时有指示细胞凋亡的亚G1期“凋亡峰”出现。以上作用均有浓度一效应和时间依赖关系。（2）SIM能够明显地抑制HO-8910PM细胞的体外趋化运动、侵袭和粘附能力（P〈O．05）。（3）随用药浓度的增高，K-RasmRNA的表达没有明显的变化，细胞膜上Ras蛋白水平逐渐降低，胞浆中Ras蛋白水平逐渐增加，总Ras蛋白的表达变化不大；SIM能明显下调HO-8910PM细胞的ERK2蛋白表达。（4）激酶活性检测结果显示，SIM能明显抑制MAPK活性（P〈O．01）。结论：SIM能抑制人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭、运动和粘附能力。SIM抗肿瘤转移的作用机制与它们抑制某些蛋白（如Ras蛋白）的法尼基化反应有关。SIM能抑制Ras蛋白的法尼基化即抑制它锚定于细胞膜上，抑制了其生物活性，从而影响Ras-MAPK信号转导作用和其下游靶蛋白。     

紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的　研究紫杉醇对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法　 0 .0 0 1～ 1μmol/L的紫杉醇处理SGC 790 1细胞后 ,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率 ,通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率 ,半定量TRAP -银染法测定端粒酶活性变化。结果　不同浓度的紫杉醇对胃癌细胞均有明显抑制作用 ,且呈时间依赖性及剂量依赖性 ,光镜及流式细胞术分析表明 ,0 .0 1μmol/L的紫杉醇处理后 2 4h ,细胞即出现明显的凋亡形态特征及凋亡峰 ,对端粒酶活性的同步检测结果显示 ,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调 ,且随紫杉醇浓度增大 ,抑制作用逐渐增强 ,2 4h酶活性即显著受抑制 ,72h变为阴性。结论　紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用 ,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一 ,端粒酶可作为肿瘤化疗的敏感性指标。     

塞来昔布顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的影响及Survivin、增殖细胞核抗原(PCNA)、COX-2蛋白表达情况。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度塞来昔布单用及其与顺铂联用时HO-8910细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Survivin、PCNA、COX-2蛋白的表达情况。采用方差分析和LSD-t检验进行统计分析。结果塞来昔布、顺铂均可抑制HO-8910细胞的生长(P<0.01);当两者合用时G0/G1期细胞增加,凋亡率增高更加明显(P<0.01),Survivin、PCNA、COX-2蛋白表达下调(P<0.01)。结论塞来昔布、顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910均有抑制作用,塞来昔布能增强顺铂的抗卵巢癌作用。     

紫杉醇联合顺铂治疗晚期卵巢癌的护理

我科于2003年7月～2006年7月对10例晚期卵巢癌患者采用紫杉醇与顺铂联合治疗．效果满意。现将护理体会总结如下：     

紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌的护理

目的探讨进行紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌的护理方法和策略,为卵巢癌的患者提供优质护理,促进患者早日康复。方法对进行紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌的患者,实施心理护理,化疗前护理,化疗期间护理以及康复指导。结果本组64例卵巢癌患者,经过化疗期护理和康复指导,有效58例,无效6例,总有效率90.63%。结论紫杉醇联合顺铂是治疗卵巢癌的较好方法,增加了疾病治愈的成功率,延长了患者的生命,提高了患者的生活质量。化疗期的优质护理和康复指导,对于达到理想的化疗效果,以及增强患者生活信心,起到不可或缺的作用。     

紫杉醇与顺铂联合化疗治疗晚期卵巢癌临床研究

目的观察紫杉醇与顺铂联合化疗治疗晚期及复发性卵巢癌的近期疗效及不良反应。方法42例晚期卵巢上皮癌（Ⅲ期或Ⅳ期,其中11例为复发性）患者采用紫杉醇十顺铂静脉化疗,其中紫杉醇】35mg／ml,顺铂70mg／m^2,至少完成3个疗程观察疗效。结果42例患者中,完全缓解9例,部分缓解24例,稳定4例,进展5例,有效率为78．6％。主要毒副反应为骨髓抑制、骨关节疼痛和脱发。结论紫杉醇联合顺铂治疗晚期及复发性卵巢癌疗效较好,毒副反应可以耐受。     

苦参素注射液联合顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及wtp53、hTERT mRNA表达的影响

目的:观察苦参素注射液联合顺铂(DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性、野生型p53(wtp53)、端粒酶逆转录酶(h TERT)m RNA表达的影响。方法:将Dulbecco改良Eagle培养基培养的人肝癌SMMC-7721细胞分为苦参素组、DDP组、联合组和对照组。苦参素组低、中、高质量浓度分别为0.75、1.5、3.0 mg/ml,DDP组低、中、高质量浓度分别为1、2、4 mg/ml,联合组浓度按两药联合用药1∶1的比例应用,对照组加入200μl磷酸缓冲盐溶液(PBS),不给予药物干预。观察4组人肝癌SMMC-7721细胞凋亡率及药物间的相互作用,端粒酶活性吸光度差值(ΔA),wtp53和h TERTm RNA相对表达量。结果:联合组人肝癌SMMC-7721细胞凋亡率>苦参素组>DDP组>对照组,4组比较差异有统计学意义(P<0.01),q值提示苦参素与DDP存在单纯相加或协同作用。苦参素组、DDP组及联合组SMMC-7721细胞端粒酶活性ΔA、h TERTm RNA均显著低于对照组,且联合组DDP组>苦参素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:苦参素注射液联合DDP可增加人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡,其机制可能与wtp53表达上调、h TERTm RNA表达下调,从而影响端粒酶活性有关。     

紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌的临床护理

目的探讨紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌的临床护理策略。方法对92例卵巢癌患者施行紫杉醇与顺铂联合治疗,并采取积极的心理策略及饮食相关护理措施,降低不良反应发生。结果 92例接受治疗的患者60例完全缓解,占65.22%,部分缓解22例,占23.91%,稳定10例,占10.87%。结论通过有效的护理,可以提高紫杉醇联合顺铂治疗卵巢癌患者的康复率,降低化疗不良反应,显著提高患者生活质量,值得临床推广。     

全硫代反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生长抑制作用

目的采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸（antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN）对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法将实验分为空白对照组、脂质体对照组、端粒酶全硫代正义寡聚脱氧核苷酸（Phosphorathioatesense oligodeoxy nucleotides,PS-SODN）组和不同剂量的全硫代反义寡聚脱氧核苷酸（Phosphorat-hioate an-tisense oligodeoxy nucleotides,PS-ASODN）组;②脂质体介导的细胞转染后,PS-ASODN和PS-SODN分别作用于卵巢癌HO-8910细胞后并培养24、48、72h,分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）、吖啶橙染色法、四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）、流式细胞术检测HO-8910细胞的端粒酶活性、细胞形态、体外增殖、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果ELISA法检测结果显示端粒酶PS-ASODN作用卵巢癌HO-8910细胞72h后端粒酶活性表达为阴性,说明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性;②吖啶橙染色观察细胞形态：PS-ASODN作用的卵巢癌HO-8910细胞有明显凋亡现象,凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩,说明PS-ASODN能够促进卵巢癌HO-8910细胞凋亡;③MTT实验：PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖（P〈0.0l）,并呈一定剂量和时间依赖关系;④流式细胞仪检测细胞凋亡和周期：与空白对照组比较,PS-ASODN组G0/G1期细胞明显增多,差异显著（P〈0.01）;在G0/G1期前出现亚二倍体凋亡峰,表明细胞被阻止在G1/S期。结论PS-ASODN作用于卵巢癌HO-8910细胞后,卵巢癌HO-8910细胞增殖受到明显抑制,并出现凋亡;②PS-ASODN对端粒酶活性的抑制率与PS-ASODN的浓度和作用时间呈依赖关系,即抑制率随着反义寡核苷酸的浓度和作用时间的增加而增大;③以端粒酶RNA模板区为靶点的PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖,其机制可能是通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞的凋亡,PS-ASODN对卵巢癌的治疗具有重要价值。     

The effect of 17 sesquiterpenes on cell viability and telomerase activity in the human ovarian cancer cell line HO-8910

Using the MTT assay and the telomeric repeat amplification protocol (TRAP)-based PCR-ELISA assay, the cytotoxicity and telomerase inhibiting ability of 17 sesquiterpenes (extracted from Chinese herbs) were tested in the human ovarian cancer cell line HO-8910. The results indicated that seven sesquiterpenes inhibited cell proliferation without having an effect on telomerase activity; two sesquiterpenes inhibited neither cell proliferation nor telomerase activity; and the other eight sesquiterpenes inhibited both cell proliferation and telomerase activity to a certain extent. Without exception, none of these 17 sesquiterpenes could only inhibit telomerase activity without inhibiting cell proliferation. This indicated that the telomerase inhibiting activity is not a universal mechanism for all anticancer drugs but is only one of several possible mechanisms. The structure-activity relationships of 5 groups of sesquiterpenes are also discussed. This study may help to develop anticancer drugs.     

五没食子酰基葡萄糖对卵巢癌HO-8910细胞凋亡调控基因表达与胱天蛋白酶凋亡途径的影响

目的探讨五没食子酰基葡萄糖(PGG)诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡的作用及诱导胱天蛋白酶凋亡途径的机制。方法 PGG 10,20,40和80μmol·L-1处理HO-8910细胞48,72和96 h后,MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察HO-8910细胞核形态改变,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹法检测细胞内胱天蛋白酶酶原及活性形式;RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2、Bcl-XL、凋亡抑制因子1(CIAP-1)、CIAP-2、存活蛋白、神经元凋亡抑制蛋白(NIAP)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和细胞周期蛋白D1 mRNA表达。结果 PGG 10～80μmol·L-1分别作用48,72和96 h,随浓度的增加,细胞存活率明显降低,r分别为0.93,0.95和0.86(P<0.05)。PGG 40μmol·L-1使HO-8910细胞的细胞核染色质固缩,出现凋亡形态学改变,早期凋亡率从正常对照组的(0.6±0.1)%分别增加到(3.4±1.1)%,(9.8±3.7)%和(19±4.5)%,对晚期凋亡率影响不明显。PGG 20～80μmol·L-1使HO-8910细胞内胱天蛋白酶3,胱天蛋白酶7和胱天蛋白酶9及其底物多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切水平增加,PGG20～80μmol·L-1均抑制死亡受体FAS的蛋白表达水平并使胱天蛋白酶8总剪切水平降低。PGG 20～80μmol·L-1抑制HO-8910细胞中细胞周期蛋白D1,Bcl-2,Bcl-XL和NIAP mRNA的表达,上调CIAP-1 mRNA的表达,对基因Bax,CIAP-2和XIAP mRNA表达影响不明显;PGG 20μmol·L-1抑制存活蛋白基因mRNA的表达,但是增加处理浓度却上调存活蛋白基因mRNA的表达。结论 PGG可能通过抑制凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-XL的表达从而诱导HO-8910细胞内胱天蛋白酶9依赖的内源性凋亡途径,并诱导细胞凋亡。     

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系 HO-8910PM的抑制作用

［摘要］目的观察参一胶囊（Rg3）对高转移人卵巢癌细胞系HO 8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组：阴性对照组（A组）：只加新鲜的全培养液；低浓度组（B组）：含10 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；中浓度组（C组）：含20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；高浓度组（D组）：含40 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；顺铂阳性对照组（E组）：含10 μg &#8226;mL 1顺铂的培养液；顺铂+Rg3联合用药组（F组）：含10 μg&#8226;mL 1顺铂+20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制（CCK 8法）进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO 8910PM细胞有明显的抑制作用，显示了较好的细胞毒活性作用（P＜0.05）。Rg3与顺铂联合用药时，细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似，但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用，Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用，这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。     

活性维生素D_3 顺铂对卵巢癌HO-8910细胞株的凋亡研究

目的观察1,25(OH)2维生素D3单独及其与顺铂合用对人卵巢癌细胞株凋亡的影响及Bax蛋白的表达情况。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞术测定细胞周期及凋亡率,免疫组织化学法检测Bax蛋白表达情况。结果1,25(OH)2维生素3、顺铂均可抑制HO-8910细胞的生长(P<0.01)、均可阻滞细胞于G0/G1期并诱导HO-8910细胞凋亡(P<0.01),当两者合用时上述作用加强,凋亡率明显上升(P<0.01),两者均可上调Bax蛋白表达(P<0.01),两者合用时Bax蛋白表达增强(P<0.01)。结论1,25(OH)2维生素D3与顺铂合用能协同抑制HO-8910细胞的生长并进一步诱导其凋亡。     

双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠移植瘤的作用及P53表达的影响

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤的作用及P53表达的影响。方法将人卵巢癌细胞株HO-8910注入裸鼠的腋下,建立人卵巢癌移植瘤的动物模型,随机分为空白组,低剂量DHA组、中剂量DHA组、高剂量DHA组、顺铂阳性对照组,观察干预后各组移植瘤抑瘤率;免疫组织化学法和蛋白印迹法检测肿瘤细胞内P53蛋白的表达;应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定移植瘤中P53 mRNA的表达。结果①DHA对裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用,并具有浓度依赖性。②病理学观察见细胞的体积较大,胞质疏松,核深染,可有不同程度的核固缩、核碎裂及核溶解,细胞中可见局灶性坏死。③免疫组织化学法结果证实随着DHA剂量的增加突变型P53蛋白表达减弱;蛋白印迹法检测到DHA组野生型P53蛋白表达上调。④RT-PCR法检测到DHA组野生型P53基因表达上调。结论 DHA对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与剂量有一定的关系,其机制可能与上调野生型P53的表达导致细胞凋亡有关。