海洋生物面膜对小鼠皮肤的抗辐射作用研究

目的 本文探讨中波紫外线（UVB）照射下海洋生物面膜对小鼠皮肤氧化损伤的保护作用和抗氧化酶的关系及其Bcl-2、NOS的表达。方法 建立UVB（辐照强度为5.15×10-2J·cm-2×30d）对昆明种无毛小鼠氧化损伤模型。昆明种无毛小鼠,随机分为双蒸水未照射组和UVB模型组（双蒸水对照组、10％MFP组、10％维生素C组）。电镜观察皮肤组织超微结构。并应用免疫组织化学的方法测定小鼠表皮细胞的Bcl-2蛋白表达、NOS的活性。酶法测定皮肤匀浆上清液中抗氧化酶（GSH-Px、SOD）活性和MDA的含量及总抗氧化能力（T-AOC）。结果 电镜下UVB损伤的对照组小鼠皮肤的表皮细胞胞质内可见空泡形成,真皮的成纤维细胞内可见囊泡状扩张的滑面内质网,粗面内质网等细胞器减少。①MFP组表皮细胞结构正常,成纤维细胞的粗面内质网增多,②MFP可以增强小鼠表皮细胞内Bcl-2蛋白的表达,并抑制NOS的免疫活性;③MFP可提高小鼠皮肤组织的总抗氧化能力、SOD活性,降低MDA含量,与维生素C的抗氧化作用一致。结论 海洋生物面膜与维生素C一样具有抗UVB氧化损伤的作用。其作用机制可能与海洋生物面膜增强Bcl-2的蛋白表达,降低NOS的活性,提高抗氧化酶含量、清除自由基有关。     

白藜芦醇对中波紫外线致人角质形成细胞损伤的防护作用

目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对中波紫外线(UVB)照射体外培养的人永生化角质形成细胞(HaCaT)的损伤的保护作用。方法:体外培养HaCaT细胞,MTT法检测不同浓度Res对HaCaT细胞增殖活性的影响。UVB照射及Res处理24 h后,采用RT-PCR方法测定细胞中MMP-1,MMP-9和TIMP-1mRNA的相对含量。结果:UVB 30 mJ.cm-2照射后,HaCaT细胞产生的MMP-9 mRNA含量显著增加(P<0.05),TIMP-1 mRNA明显减少(P<0.05);UVB 90 mJ.cm-2照射HaCaT细胞后其MMP-1 mRNA增加(P<0.05)。与UVB照射组相比较,0.5 mmol.L-1Res能显著抑制UVB诱导的HaCaT细胞产生的MMP-1,MMP-9 mRNA含量增加以及UVB对TIMP-1 mRNA的抑制作用(P<0.05)。结论:Res可以显著抑制UVB照射诱导的HaCaT细胞产生的MMP-1,MMP-9及TIMP-1 mRNA含量的变化,对皮肤光老化可有一定的防护作用。     

铁皮石斛多糖对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用

目的 考察铁皮石斛多糖对表皮角质细胞氧化损伤的保护作用及机理,为铁皮石斛多糖的有效应用提供参考.方法 筛选出不影响HaCaT细胞正常生长的铁皮石斛多糖浓度,以及有效损伤HaCaT细胞的H2 O2浓度,观察H2O2对HaCaT细胞存活率和抗氧化相关酶的影响.结果 500 μmol·L-1的H2O2孵育HaCaT细胞2h,...     

氧化还原调控在紫檀芪诱导HeLa细胞内质网凋亡途径中的作用

目的探讨细胞氧化还原调控在紫檀芪引起HeLa细胞凋亡过程中对内质网途径的作用。方法 SRB法评价紫檀芪对HeLa细胞的细胞毒活性。采用细胞形态学和生物化学方法检测细胞凋亡。通过荧光法对细胞内活性氧/GSH的变化进行分析。通过氧化还原相关抑制剂分析凋亡过程中的决定因素。通过半定量RT-PCR表达分析来确定内质网胁迫在紫檀芪诱导HeLa细胞凋亡中的作用。结果紫檀芪对HeLa细胞的IC50为80μmol·L-1。凋亡是紫檀芪对He-La细胞毒活性的主要表现。随着紫檀芪浓度由5μmol·L-1增加至160μmol·L-1,HeLa细胞氧化还原平衡发生明显变化。紫檀芪在80μmol·L-1～120μmol·L-1可引起内质网胁迫分子表达。抑制细胞内过氧化氢的产生会减轻紫檀芪引起的内质网胁迫并最终抑制了紫檀芪所诱导的细胞凋亡。结论细胞内氧化还原平衡的变化在紫檀芪引起HeLa细胞凋亡的内质网途径方面起了决定性的作用。     

川芎嗪对顺铂所致大鼠肾氧化损伤的保护作用

目的探讨川芎嗪（TMP）对顺铂（DDP）所致大鼠肾氧化损伤影响。方法将32只SD大鼠随机分成4组各8只：DDP+TMP 50 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1组和DDP+TMP 100 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1组分别腹腔注射TMP 50和100 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1,连续5 d;对照组和DDP组给予0.9%氯化钠溶液,均5 mL&#8226;kg－1。给药第3天,除对照组外,其他3组腹腔注射DDP,8 mg&#8226;kg－1。实验第5天收集代谢笼中大鼠24 h尿,测尿蛋白含量;处死大鼠后测血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、24 h尿蛋白、肾皮质丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、过氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽 S 转移酶（GST）活性及肾皮质一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性。结果与DDP组比较,DDP+TMP50 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1组和DDP+TMP100 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1组大鼠24 h尿蛋白分别下降41.45%和65.33%;BUN分别下降18.12%和57.51%;SCr分别下降14.39%和48.89%（P＜0.05或P＜0.01）;与DDP组比较,DDP+TMP 100 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1组大鼠肾皮质MDA、NO含量及NOS活力分别降低36.73%,45.39%,22.86%（P＜0.05）,GSH含量和SOD、GST活性分别为DDP组的1.33,1.66,1.57倍（P＜0.05）。结论TMP对DDP所致大鼠肾氧化性损伤具有保护作用。     

白藜芦醇诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的:观察白藜芦醇对宫颈癌HeLa细胞凋亡作用.方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测白藜芦醇对HeLa细胞的抑制效应,并采用末端标记法(TUNEL)对凋亡细胞进行定量检测.结果:白藜芦醇对HeLa细胞48h的抑制效应为20.15%,72h的抑制效应为38.60%.TUNEL检测结果为白藜芦醇促进HeLa细胞凋亡.结论:白藜芦醇抑制HeLa细胞增殖,对指导临床药物治疗宫颈癌具有重要意义.     

扇贝多肽保护Hela细胞免受紫外线UVA氧化损伤

目的:建立紫外线UVA(辐照强度为3650μJ·cm~(-2)对Hela细胞氧化损伤模型.探究扇贝多肽(PCF)对Hela细胞紫外线UVA氧化损伤的保护作用.方法:MTT法测定细胞活性;酶法测定抗氧化酶(GSH-Px、CAT、SOD)活性;流式细胞仪AnnexinV法测定细胞的凋亡率和死亡率;Fluo-3 AM为荧光染料,流式细胞仪测定细胞内游离Ca~(2 )的含量.结果:PCF(0.5％-2％)能明显增加 Hela细胞的增殖活性和细胞内游离Ca~(2 )的浓度.显著提高Hela细胞GSH-Px、CAT、SOD活性,且呈量效关系.同时降低Hela细胞的凋亡率和死亡率.PCF组与模型对照组比较各项指标均有统计学意义(P< 0.0 5,P<0.01).结论:扇贝多肽具有抗紫外线UVA对Hela细胞氧化损伤的作用.其机制与扇贝多肽提高抗氧化酶含量,抑制脂质过氧化有关.     

静脉丙种球蛋白对兔心肌缺血——再灌注损伤保护作用的研究

心肌缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤和炎症反应的关系是目前对心肌I/R损伤的机制研究的一个重要方面.已有越来越多的证据显示了以中性粒细胞浸润为主的炎症是造成心肌I/R损伤的重要机制之一[1,2].     

人参皂苷Rg1和Rb1对UVB照射引起的HaCaT细胞损伤的保护作用

过量紫外线辐射是危害人类健康的环境因素之一，它对皮肤的损伤更为显著，可以引起皮肤损伤等一系列生物反应。日光中的紫外线辐射到地面后主要是中波紫外线（UVB，波长280～320nm）和少量的长波紫外线（UVA，波长320～390nm），UVB对DNA嘧啶二聚体的形成、诱发突变等方面的生物学效应远大于UVA。环境污染、臭氧层稀薄等因素导致人类受到辐射增多的危险。     

琼六糖对抗霉素A引起的肝细胞内间接氧化损伤的保护作用

目的研究琼六糖对肝细胞的间接氧化损伤的保护作用。方法利用抗霉素A诱导肝细胞内的活性氧爆发，通过二乙酰基2,7-二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内的氧化状况，利用荧光显微镜和流式细胞仪记录荧光变化情况，并对抗霉素A氧化所造成的细胞凋亡现象进行形态及TUNEL实验观测。结果琼六糖能够明显减少氧化细胞的数量及荧光强度。细胞凋亡研究结果发现，琼六糖能够改善细胞形态，降低由氧化所造成的细胞凋亡的出现。结论琼六糖能够有效地抑制肝细胞内活性氧的进一步爆发，并减少细胞的氧化损伤。     

扇贝多肽对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用

目的：研究扇贝多肽(polypeptide ftom Chlamys，farreri)对中波紫外线(UVB)辐射损伤小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用。方法：UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞，MTT法检测胸腺淋巴细胞的活性；酶生化法检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性；流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的产生量以及细胞凋亡率。结果：PCF能明显减轻UVB辐射对小鼠胸腺淋巴细胞的损伤；提高细胞GSH-Px、SOD和CAT活性；降低细胞中ROS的产生量和细胞凋亡率。结论：PCF对小鼠胸腺淋巴细胞具有明显的辐射保护作用。     

咖啡酸对UVB损伤人角质形成细胞的保护作用机制研究

目的 分析咖啡酸对UVB损伤人角质形成细胞HaCaT的保护作用机制。方法 采用UVB灯照射建立HaCaT细胞UVB损伤模型。HaCaT细胞中分别加入浓度梯度为0（对照组）、5、10、20、40、80、160μmol/L的咖啡酸,计算细胞存活率,选择最佳浓度进行后续试验。将处于对数生长期HaCaT分为对照组、模型组、咖啡酸（10μmol/L）组,进行苏木精–伊红（HE）染色,显微镜观察细胞形态。按照试剂盒说明书操作,采用样本蛋白浓度计算方法,测定细胞中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。蛋白免疫印记检测促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路相关蛋白的表达。结果咖啡酸10μmol/L组能够减轻UVB对HaCaT细胞造成的损伤,修复HaCaT的细胞形态,增加抗凋亡蛋白Bcl-2在HaCaT细胞中的表达,减少细胞的凋亡。咖啡酸10μmol/L组能够显著升高HaCaT中SOD、CAT含量,增强细胞中的抗氧化能力,降低MAPK亚族p38信号通路p-p38和p53蛋白在细胞中的表达。结论 咖啡酸可以抑制UVB对细胞的损伤,修复细胞的形态结构,减少细胞的凋亡和增强细胞的抗氧化性,且可能...     

冬凌草甲素通过诱导人宫颈癌HeLa细胞自噬下调凋亡的机制

研究冬凌草甲素通过诱导人宫颈癌HeLa细胞自噬拮抗凋亡的机制。MTT法测定冬凌草甲素对HeLa细胞的细胞毒作用。通过相差显微镜观察细胞形态学变化，用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化，用流式细胞仪检测细胞自噬和凋亡水平，用Western blotting检测分析药物对蛋白质表达的影响。冬凌草甲素明显抑制HeLa细胞的增殖，诱导HeLa细胞凋亡，同时诱导HeLa细胞发生自噬。Western blotting检测结果表明，冬凌草甲素作用24 h后，促凋亡蛋白Bax、细胞色素c和控制Bax活力的去乙酰化酶SIRT-1的表达明显改变。冬凌草甲素(64 μmol·L^-1)诱导的自噬通过影响SIRT-1和线粒体途径蛋白的表达下调凋亡。     

Isoliquiritigenin treatment induces apoptosis by increasing intracellular ROS levels in HeLa cells

This study focuses on the relationship between the apoptosis induced by isoliquiritigenin (ISL) and the production of reactive oxygen species (ROS). Cell viability was evaluated using sulforhodamine B assay. The apoptotic rate was determined via flow cytometry. Intracellular ROS level was assessed using the 2,7-dichlorofluorescein probe assay. Poly-ADP-ribose polymerase (PARP) protein expression was examined using Western blot analysis. The results showed that ISL treatment inhibited cell proliferation by inducing apoptosis. The increased apoptotic rate and ROS production induced by ISL were inhibited by the co-treatment of ISL and free radical scavenger N-acetyl-cysteine (NAC), catalase (CAT), and 4,5-dihydroxyl-1,3-benzededisulfonic acid (Tiron). On the contrary, the increased apoptotic rate and the ROS production were compensated by the co-treatment of ISL and l-buthionine-(S,R)-sulfoximine (BSO). ISL treatment increased the degradation of PARP, which was counteracted by antioxidants (NAC or CAT), whereas the combination treatment of ISL and pro-oxidant (BSO) enhanced the PARP degradation induced by ISL. Our findings suggested that ISL treatment induced apoptosis by increasing intracellular ROS levels in HeLa cells.     

扇贝多肽对抗UVB辐照所致小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的研究

目的研究扇贝多肽(PCF)对中波紫外线(UVB)辐照损伤小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用。方法以UVB辐照制备损伤模型,预先给予PCF,应用透视电镜观察细胞超微结构的变化;免疫细胞化学检测细胞p53,Bcl-2,Bax基因蛋白的表达;原位杂交检测细胞P38mRNA的基因表达。结果UVB辐照引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,PCF能明显减轻UVB辐射损伤引起的细胞超微结构改变。PCF还能抑制突变型p53蛋白和促凋亡蛋白Bax的表达,增强凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达以及抑制P38 mRNA基因的表达。结论PCF对UVB辐照的体外小鼠胸腺淋巴细胞具有明显的保护作用。     

Je-chun-jun induced apoptosis of human cervical carcinoma HeLa cells

AIM: To study the mechanism of Je-Chun-Jun (JCJ)-inducing the apoptosis of the human cervical carcinoma, HeLa cells. METHODS: The cell viability was assessed using MTT assay. The optical density was measured at 570 nm. The caspase activity was measured using 50 mmol/L of fluorogenic substrate, AC-DEVD-AMC (caspase-3), AC-VEID-AMC (caspase-8) or AC-LEHD-AFC (caspase-9). To confirm the expression of proteins, Western blotting was performed. To detect the characteristic of apoptosis chromatin condensation, HeLa cells were stained with Hoechst 33258 in the presence of JCJ. For the cell cycle analysis, HeLa cells were incubated with Propidium iodide (PI) solution. Fluorescence intensity of cell cycle was measured using flow cytometry system. RESULTS: The loss of viability occurred following the exposure of 10 g/L JCJ. Cells treated with 10 g/L JCJ for 3 d exhibited the apoptotic morphology (brightly blue-fluorescent condensed nuclei by Hoechst 33258-staining) and the reduction of cell volume. Cells incubated with JCJ for 48 h were arrested at the G1 phase of cell cycle and their G1 checkpoint related gene products such as cyclin D1 were transiently decreased. We showed that JCJ induced the p38 MAPK activation in HeLa cells. The p38 MAPK inhibitor, SB203580 protected Hela cells from the JCJ-induced death as well as intervened the JCJ-induced accumulation of cells at the G1 phase. In contrast, MEK1 (-ERK upstream) inhibitor, PD98059 had no effect on HeLa cells. CONCLUSION: JCJ induced cell cycle arrest and apoptosis of HeLa cells through p38 MAPK pathway.     

Diosgenin induces apoptosis in HeLa cells via activation of caspase pathway

AIM: To investigate the mechanism of diosgenin-induced HeLa cell apoptosis. METHODS: HeLa cell growth was measured by MTT method. Apoptosis was detected by electron microscopy and agarose gel electrophoresis. Ratio of apoptotic cells was measured by APO-BRDU kit. Cell cycle distribution and changes of mitochondrial membrane potential were monitored by flow cytometry. Caspase activities were assayed by caspase apoptosis detection kit. Western blot analysis was used to evaluate the level of mitochondrial Bcl-2 expression. RESULTS: Diosgenin inhibited HeLa cell growth. HeLa cells treated with diosgenin showed typical characteristics of apoptosis including the morphological changes and DNA fragmentation. Caspase family inhibitor (z-VAD-fmk), caspase-9 inhibitor (Ac-AAVALPAVLLALLAPLEHD-CHO), and caspase-3 inhibitor (z-DEVD-fmk) partially prevented diosgenin-induced apoptosis, but not caspase-8 inhibitor (z-IETD-fmk) and caspase-10 inhibitor (z-AEVD-fmk). Diosgenin caused reduction of mitochondrial membrane po     

姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的：探讨姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制。方法：以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用^3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果：姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、^3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5-Fu 20μg/ml对该细胞的掺入抑制率。结论：姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外膜的性质抑制肿瘤细胞增殖。