霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞的保护作用

目的:探讨霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞相关蛋白Nephrin及炎性因子单核细胞趋化因子-1表达的影响及机制。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,将模型大鼠随机分为糖尿病肾病组及霉酚酸酯干预组,干预组给予霉酚酸酯15 mg/(kg·d)灌胃,8周末处死动物,常规检测尿蛋白、肾功能、肾质量/体质量,光镜及电镜观察肾小球及肾小管变化,RT-PCR及免疫组化法检测Nephrin及MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾脏组织肾小球肥大、部分纤维化,肾小球滤过膜损伤严重,尿蛋白增加,Nephrin蛋白及mRNA表达减少,MCP-1蛋白及mRNA表达增加;与糖尿病组相比,霉酚酸酯干预组尿蛋白较正常对照组增加,但较糖尿病组有改善(P<0.01),肾小球滤过膜病变较糖尿病组改善,Nephrin蛋白及mRNA表达较糖尿病组增加(P<0.01),MCP-1蛋白及mRNA表达减少(P<0.01)。结论:霉酚酸酯可减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白水平,下调MCP-1等炎症介质,上调Nephrin蛋白。霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞的保护可能通过干预Nephrin蛋白及炎症因子MCP-1的表达实现。     

高碘大鼠甲状腺超微结构的变化及硒对其的干预

目的探讨高碘摄入的大鼠甲状腺超微结构的变化及硒对其的干预作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、高碘组和高碘加硒组,高碘加硒组灌胃给予亚硒酸钠,观察实验结束时各组大鼠电镜下甲状腺的超微结构。结果高碘组大鼠甲状腺滤泡上皮细胞破坏、凋亡,线粒体、高尔基体肿胀,与高碘组相比,高碘加硒组大鼠甲状腺细胞学破坏减轻。结论高碘摄入可造成大鼠甲状腺滤泡破坏、凋亡,提示功能受损,而硒对此有保护作用。     

六味地黄丸对OLETF 鼠糖尿病发病的干预研究

目的通过观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病OLETF大鼠脂肪组织脂联素的影响,探讨六味地黄丸对2型糖尿病发病的干预作用。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组。干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃。定期口服葡萄糖耐量试验。于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠。采用半定量逆转录PCR方法,检测脂肪组织脂联素mRNA表达水平。结果六味地黄丸能够显著降低OLETF鼠血糖升高程度,延缓高血糖的出现。与对照组相比,干预组脂肪组织脂联素mRNA表达量明显增加。干预组糖尿病的发病率显著低于同时期对照组(P<0.01)。LETO组无IGT或糖尿病发生。结论六味地黄丸能明显增加OLETF鼠脂肪组织脂联素表达水平;六味地黄丸可显著降低2型糖尿病动物模型OLETF鼠糖尿病的发病率,有效预防糖尿病的发生。     

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠肾脏脂联素表达的影响

目的 探讨替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠肾脏脂联素(APN)表达的影响.方法 采用高脂饲料喂养10周建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖一高血浆胰岛素钳夹技术评估.光镜及电镜行肾脏形态学检查,逆转录聚合酶链反应方法测定APNmRNA表达,免疫组化染色观察APN蛋白水平变化.结果 胰岛素抵抗大鼠肾脏APN mRNA和蛋白表达明显低于正常对照组(P均<0.05),同时大鼠肾脏出现病理变化;替米沙坦干预后,肾组织APN mRNA和蛋白表达较胰岛素抵抗组升高(P均<0.05),同时肾脏病理变化也得到明显改善.结论 替米沙坦可能通过调节肾脏APN的表达,起到保护胰岛素抵抗相关的肾脏损伤的作用.     

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达COX-2mRNA的调控

目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞(RGMC)表达环氧化酶-2(COX-2)的影响,从而研究硒在抗糖尿病肾病中的作用机制.方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物,高胰岛素和过氧化氢孵育RGMC;先给予亚硒酸钠预处理细胞后,再分别给予上述4种因素孵育RGMC,观察细胞COX-2 mRNA的表达.结果:4种刺激因素均可作为独立因素,导致RGMC COX-2 mRNA表达量的增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的COX-2 mRNA的表达.结论:亚硒酸钠通过抑制COX-2 mRNA在RGMC中的表达,从而有效地防治糖尿病肾病的发生发展.     

GLP-1对1型糖尿病大鼠肾脏AdipoR1和MCP-1表达的影响

目的观察胰升糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏组织脂联素受体1(adipoR1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制。方法 30只雄性SD大鼠,随机分为健康对照组(A组,7只)和糖尿病造模组(23只)。采用链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病大鼠模型,共有19只大鼠造模成功。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(B组,10只)和艾塞那肽治疗组(C组,9只)。C组予以艾塞那肽10μg/(kg·d)皮下注射治疗8周。用实时荧光定量PCR方法测定大鼠肾脏组织Adipo R1和MCP-1 mRNA的表达,用免疫组织化学染色法检测Adipo R1在肾脏组织中的分布及表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆脂联素水平。结果与A组比较,B组糖尿病大鼠血糖、血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数、肾脏组织Adipo R1 mRNA和蛋白表达以及MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05),而血浆脂联素水平显著降低(P<0.05)。经艾塞那肽干预后,C组大鼠血浆脂联素水平较B组显著升高(P<0.05),血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数、肾脏组织Adipo R1 mRNA和蛋白表达以及MCP-1 mRNA表达较B组显著降低(P<0.05),而血糖无明显变化(P>0.05)。结论艾塞那肽可能通过上调1型糖尿病大鼠血浆脂联素水平和下调肾脏组织AdipoR1和MCP-1表达,抑制免疫炎症反应,改善肾功能及减轻肾脏病理损害,产生肾脏保护作用。     

1,25-(OH)2D3在2型糖尿病大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA的影响

目的 通过观察1,25-(OH)2D3在2型糖尿病(T2DM)大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA表达的影响,探讨维生素D在T2DM发病机制中的作用.方法 选取8周龄雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、1,25-(OH)2D3干预组(VD干预组)、糖尿病组.正常对照组大鼠饲普通饲料,VD干预组和糖尿病组饲高脂高糖饲料.6周后VD干预组和糖尿病组大鼠予以链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射建立T2DM动物模型,测定体质量、空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、总胆固醇,用ELISA法检测血清脂联素,用RT-PCR法检测脂肪组织脂联素mRNA.结果 糖尿病组大鼠血清脂联素水平[(3.36±1.28)ng/ml]、脂肪组织脂联素mRNA的表达(0.24±0.15)均较正常对照组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),使用维生素D干预后得到有效改善[VD干预组血清脂联素(5.27±1.37)ng/ml,脂联素mRNA(0.50±0.29),P＜0.05];糖尿病组和VD干预组空腹胰岛素均显著高于正常对照组,VD干预组空腹胰岛素显著低于糖尿病组(P＜0.05).脂肪组织脂联素mRNA的表达与血清空腹胰岛素呈负相关(r=-0.417,P＜0.05).结论 1,25-(OH)2D3可以明显改善T2DM大鼠在发病过程中血清脂联素及脂肪组织脂联素基因表达的下降,从而从分子水平对T2DM大鼠的发病起到保护作用.     

黄芪葛根汤对高血脂症大鼠血脂、LEP、脂联素、Adipo R2、PPARαmRNA 及蛋白表达的影响

目的探讨黄芪葛根汤对高血脂症模型大鼠血脂,血清瘦素(LEP)、脂联素、脂联素受体2(Adipo R2)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)mRNA和蛋白表达的影响。方法选取80只SPF级成年雄性SD大鼠,随机选取20只作为对照组,其余大鼠随机分为模型组、黄芪葛根汤组、黄芪组、葛根组共4组,每组15只。造模成功后第2天,黄芪葛根汤组、黄芪组、葛根组按照10 m L/kg进行灌胃给药,2次/d;模型组和对照组给予等量生理盐水,连续给药30 d。给药过程中,对照组喂养基础饲料,其余大鼠给予高脂饲料喂养。对所有组大鼠的血脂、LEP表达、脂联素、脂联素受体2、PPARα的mRNA和蛋白的表达情况进行观察对比。结果以高脂饲料喂养大鼠8周后,大鼠血清中血脂,LEP表达显著升高,脂联素、脂联素受体2、PPAR的mRNA和蛋白的表达均显著降低,与对照组相比差异显著(P0.05)。大鼠高血脂症模型建立后,给予黄芪,葛根及黄芪葛根汤治疗,实验组大鼠血脂、LEP水平显著降低,脂联素、脂联素受体2、PPAR的mRNA和蛋白水平均显著升高(P0.05),而相较于黄芪组和葛根组,黄芪葛根汤治疗组大鼠的各项指标均接近正常大鼠水平。结论黄芪葛根汤能够有效改善高血脂症大鼠的各临床指标,有显著的降血脂作用。     

汉黄芩素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及肾组织RAGE、S100A8表达的影响

目的 探讨汉黄芩素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及肾组织晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、髓样相关蛋白8(S100A8)表达的影响。方法 SD大鼠60只随机分为对照组、模型组、厄贝沙坦组(15mg/kg)、汉黄芩素低、高剂量组(50、100mg/kg),每组12只;模型组、厄贝沙坦组、汉黄芩素低、高剂量组建立糖尿病肾病大鼠模型,厄贝沙坦组、汉黄芩素低、高剂量组于建模成功后第1天开始灌胃给予相应药物,持续给予8周,对照组和模型组给予等体积生理盐水,试验结束后,测定24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血糖,观察大鼠肾脏病理改变,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WB)法测定肾脏RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平。结果 模型组大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平高于对照组(P<0.05);厄贝沙坦组、汉黄芩素低、高剂量组大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平低于模型组(P<0.05),且随着汉黄芩素剂量的增加,汉黄芩素低、高剂量组大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05);汉黄芩素低、高剂量组大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平高于厄贝沙坦组(P<0.05)。结论 汉黄芩素对大鼠糖尿病肾病具有明显治疗效果;其机制可能与汉黄芩素可对糖尿病肾病大鼠肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白产生抑制作用有关。     

替米沙坦对2型糖尿病大鼠主动脉脂联素受体1、MCP-1和NF-κB表达的影响

目的观察替米沙坦对2型糖尿病大鼠主动脉脂联素受体1(AdipoR 1),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨替米沙坦对糖尿病大血管病变保护作用及机制。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组),糖尿病组(DM组)及糖尿病替米沙坦治疗组(DT组)。用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型。成模后,DT组予以替米沙坦(5 mg/kg.d)灌胃12周。12周后,用酶联免疫法检测血浆脂联素水平,用R T-PCR方法检测主动脉脂联素受体1 mR NA表达,用免疫组织化学法检测主动脉MCP-1和NF-κB蛋白表达。结果与NC组比较,DM组大鼠血浆脂联素水平和主动脉脂联素受体-1 mRNA表达显著降低,主动脉MCP-1和NF-κB表达显著增加,主动脉病理改变加重。经替米沙坦治疗后,DT组糖尿病大鼠血浆脂联素水平和主动脉脂联素受体1 mRNA表达显著增加,主动脉MCP-1和NF-κB表达显著降低,主动脉病理改变减轻。结论替米沙坦上调2型糖尿病大鼠主动脉脂联素受体1的表达,降低主动脉MCP-1和NF-κB的表达,减轻动脉粥样硬化程度,对糖尿病大鼠大血管产生保护作用。     

血清脂联素检测对2型糖尿病肾病早期诊断的应用价值

目的探讨脂联素在2型糖尿病肾病不同阶段的水平变化及临床诊断应用价值。方法选择2型糖尿病住院患者120例作为观察对象,并根据尿清蛋白排泄量分为4组：单纯糖尿病组、极微量清蛋白尿组、微量清蛋白尿组、大量清白蛋白尿组;同时选择健康体检者30例作为正常对照组。测定血清脂联素水平,同时测定空腹血糖（FBG）、血清肌酐（Scr）、血清尿素（BUN）、尿微量清蛋白（mAlb）、尿β2-微球蛋白（β2-MG）,比较各组间的差异。结果 2型糖尿病组血清脂联素水平明显低于正常对照组（P〈0.05）,大量清蛋白尿组血清脂联素水平明显高于单纯糖尿病组（P〈0.05）,血清脂联素水平与血清肌酐、血清尿素、尿微量清蛋白、尿β2-微球蛋白水平呈正相关（P〈0.05）。结论脂联素与糖尿病肾病发生、发展有关,检测血清脂联素对于2型糖尿病早期肾损伤的诊断有重要参考价值。     

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响

目的观察亚硒酸钠对HBZY-1细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的作用机制.方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGE)刺激HBZY-1细胞;先加入100 nmol/L亚硒酸钠预处理后,再分别给予以上4种刺激因素孵育HBZY-1细胞,分别检测HBZY-1细胞MCP-1 mRNA的表达并比较.结果4种刺激因素均可作为独立因素,导致HBZY-1细胞MCP-1 mRNA表达量增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的MCP-1mRNA的表达.结论亚硒酸钠通过抑制MCP-1 mRNA在HBZY-1细胞中的表达,从而有效防治糖尿病肾病的发生发展,表明硒在糖尿病肾病的防治过程中发挥积极作用.     

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF的调控

目的 观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法 分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物孵育细胞系HBZY-1;先给予亚硒酸钠预处理细胞后,再分别给予上述4种因素孵育细胞系HBZY-1,观察细胞系HBZY-1VEGF蛋白表达。结果 4种刺激因素均可作为独立因素,导致细胞系HBZY-1VEGF蛋白表达量增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的VEGF蛋白表达。结论 亚硒酸钠通过抑制VEGF在细胞系HBZY-1中的表达,从而有效地防治糖尿病肾病的发生发展。     

2型糖尿病肾病患者不同分期血清脂联素水平变化及其影响因素

目的观察2型糖尿病肾病（DN）不同阶段血清脂联素（ADPN）的变化趋势,探讨血清ADPN与影响因素的关系。方法选择30例健康体检者作为对照组,89例DN患者根据尿白蛋白排泄率分为三组：正常白蛋白尿组（35例）;微量白蛋白尿组（32例）;大量白蛋白尿组（22例）。检测血清ADPN（ELISA法）,同时测定BMI、WHR、HbAlc、血脂水平、尿白蛋白排泄率等指标,比较各组间的差异。结果 （1）DN患者血清ADPN水平低于正常人群;DN患者各组间比较,大量白蛋白尿组的血清ADPN水平最高,差异具有统计学意义（P〈0.05）。（2）多元逐步回归分析显示：BMI、病程、UAER、DBP、2hPG、HbA1c与脂联素水平密切相关。（3）相关分析提示：血清ADPN与BMI、WHR、HbA1c、FPG、2hPG呈负相关,与年龄、病程、UAER呈正相关。结论 （1）DN患者血清ADPN水平低于正常人群。其血清ADPN水平与年龄、病程、UAER、HDL呈正相关,与血糖控制状态（FPG、2hPG和HbA1c）、BMI、WHR呈现负相关关系。（2）DN患者血清脂联素随着尿蛋白排泄率增加而逐步升高。     

2型糖尿病肾病患者血清超敏C-反应蛋白、脂联素测定的临床意义

目的 探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及脂联素在2型糖尿病肾病诊断中的水平变化、相互关系及临床应用价值.方法 选择2型糖尿病住院患者136例作为观察对象,并根据尿白蛋白排泄量分为3组:极微量白蛋白尿(n=42),微量白蛋白尿组(n=44),大量白蛋白尿组(n=50);同时选择健康体检者50例作为正常对照组.随后分别用胶乳增强免疫比浊法测定hs-CRP、ELISA法测定脂联素,同时测定空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、血脂水平、尿白蛋白(UAlb),比较各组间的差异.结果 2型糖尿病肾病组hs-CRP水平随尿白蛋白排泄量和Scr水平的增加而升高,而hs-CRP与血清脂联素水平呈负相关. 结论 hs-CRP及脂联素联合监测对于2型糖尿病早期肾损伤诊断有重要参考价值.     

糖尿病肾病患者血清胃促生长素和脂联素水平变化及临床意义

目的 探讨血清胃促生长素(ghrelin)、脂联素在2型糖尿病肾病(DN)发生、发展中的作用.方法 选择2型糖尿病(T2DM)患者90例,根据尿微量清蛋白排泄率(UAER)分为单纯糖尿病组30例、早期DN组30例、临床DN组30例,同时选取30例健康体检者作为正常对照组.测定所有受试者血清胃促生长素、脂联素水平,并分析其与UAER等指标的关系.结果 (1)单纯糖尿病组患者血清胃促生长素、脂联素水平均显著低于正常对照组(P＜0.05),而早期DN组、临床DN组患者血清胃促生长素水平均显著高于单纯糖尿病组(P＜0.01),临床DN组患者血清胃促生长素又显著高于正常对照组(P＜0.05).血清脂联素水平在单纯糖尿病组、早期DN组及临床DN组中随病情进展逐渐升高(P＜0.05).(2)在DN阶段,血清胃促生长素、脂联素水平均与体质指数(BMI)、空腹血糖、UAER、血肌酐水平相关.(3)逐步回归分析显示,糖尿病血清胃促生长素、脂联素受UAER、BMI的影响较大.结论 胃促生长素、脂联素与DN发生、发展有关,检测其血清水平可能对早期诊断和评估DN有作用.胃促生长素、脂联素有望成为治疗DN的新靶点.     

2型糖尿病肾病不同分期尿液脂联素变化及相关因素

目的：探讨2型糖尿病肾病(DN)不同分期尿脂联素(UAPN)的变化及相关因素。方法选择2013年在重庆医科大学附属永川医院住院的119例2型糖尿病肾病患者为研究对象,根据24 h 尿蛋白排泄量(UAER)将其分为尿蛋白正常组、微量蛋白尿组和大量蛋白尿组,并选取45例健康体检者作为健康对照组。比较各组 UAPN 水平的变化情况,同时分析患者 UAPN与各参数之间的关系。结果正常蛋白尿组的 UAPN 明显低于微量蛋白尿组和大量蛋白尿组(P <0.01);微量蛋白尿组的 UA-PN 明显低于大量蛋白尿组(P <0.01),而明显高于健康对照组(P <0.01);大量蛋白尿组的 UAPN 明显高于健康对照组(P <0.01)。多元线性回归结果显示,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、UAER 均对患者的UAPN 产生不同程度的影响。结论DN 患者 UAPN 水平与2型糖尿病肾病有关,其水平增高与 HDL-C、FPG、HbA1c、UAER有关。     

脂联素基因多态性与2型糖尿病肾病的关系

目的研究脂联素(APN)基因+45位点与+276位点单核苷酸多态性(SNP)与中国浙江地区汉族人群2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法根据尿白蛋白排泄率(UAER)将82例2型糖尿病患者分成糖尿病正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组;用直接测序法分析SNP+45和+276两位点基因型和等位基因频率,并分析与其他指标的关系。结果脂联素基因SNP+45和+276两多态性位点的基因型和等位基因频率分别在正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组3组间无统计学差异(P>0.05)。结论脂联素基因SNP+45T/G和SNP+276G/T与浙江地区汉族人群中2型糖尿病肾病无相关性。这两位点的基因多态性不能预测2型糖尿病肾病的易感性。     

山西地区60例2型糖尿病肾病患者血清Adiponectin水平分析

山西地区患者,血清adiponectin水平,糖尿病肾病（DN）组较单纯糖尿病组显著升高;白蛋白尿组血清adiponectin水平较正常对照组、单纯糖尿病组、早期DN组显著升高。Adiponectin水平与尿白蛋白排泄率呈正相关,与腰臀比呈负相关。DN大量白蛋白尿期血清脂联素水平显著升高。