银屑病患者外周血肝细胞生长因子和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子水平改变

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与银屑病的关系。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测寻常性银屑病患者和正常人血清中HGF和GM-CSF水平。结果 进行期寻常性银屑病患者血清中HGF水平明显高于静止期及正常人对照(P<0.01),而静止期患者血清中HGF水平与正常人对照比较差异无统计学意义(P>0.05);进行期银屑病患者血清中GM-CSF水平明显高于正常人对照及静止期(P<0.01),静止期患者血清中GM-CSF水平亦高于正常人对照(P<0.05);进行期泛发性与局限性皮损患者之间血清HGF及GM-CSF水平差异均无统计学意义;患者血清HGF和GM-CSF水平与PASI计分均呈正相关(分别为r=0.38和r=0.30,P<0.002和P<0.02)。结论 寻常性银屑病患者外周血循环HGF和GM-CSF水平明显增高,HGF和GM-CSF可能参与银屑病发病。     

血管内皮生长因子及其受体在银屑病发病中的作用及意义

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体在银屑病皮损中的表达。方法 采用原位杂交和免疫组化SABC法,检测42例寻常性银屑病患者皮损和15例正常人皮肤组织VEGFmRNA和其蛋白、VEGF受体2(KDR蛋白)、微血管密度(MVD),分析其表达情况。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者和正常人血清中VEGF水平。结果 ①寻常性银屑病患者皮损处的VEGFmRNA及其蛋白、KDR和MVD表达明显强于正常人对照组(P<0.001);皮损处与非皮损组相比,VEGFmRNA和其蛋白的表达差异无统计学意义,但KDR、MVD的表达差异有统计学意义;进行期与静止期比较四者差异均有统计学意义。②高密度组(MVD≥17.88)与低密度组(MVD<17.88)的VEGFmRNA及其蛋白表达差异无统计学意义,但KDR表达差异有统计学意义(P<0.01),且PASI评分差异也有统计学意义(P<0.001)。③患者血清中VEGF水平明显高于正常人对照组。结论 ①VEGF及其受体在银屑病新生血管形成中起重要作用。②MVD值可反映寻常性银屑病的严重程度,可作为判断病情和预后的指标。     

寻常性银屑病患者皮损中维A酸受体αmRNA的表达

目的 探讨维A酸受体αmRNA在寻常性银屑病皮损中的表达状况。方法 应用RT-PCR方法检测20例寻常性银屑病患者皮损部位和10例正常人表皮中维A酸受体αmRNA的表达情况。结果 维A酸受体αmRNA的表达在寻常性银屑病表皮中较正常人低,且差异有显著性(P<0.01)。结论 维A酸受体αmRNA的表达降低可能和银屑病发病有关。     

寻常型银屑病患者皮肤中诱生型一氧化氮合酶、核因子-κBp65表达及其临床意义

目的 研究诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA、iNOS和核因子(NF)-κBp65蛋白在寻常型银屑病患者皮肤中的表达。方法 用原位杂交和免疫组化的方法检测了20例寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区和12例正常人表皮中iNOSmRNA、iNOS和NF-κBp65蛋白的表达和分布;用银屑病面积和严重程度指数计分法评定患者的临床病情程度。结果 ①寻常型银屑病患者皮损区表皮中iNOSmRNA和iNOS蛋白表达均较非皮损区和正常人表皮中的表达明显增强(P<0.01),正常人表皮中仅少部分基底层有微弱表达,而寻常型银屑病患者皮损区的表达为基底层全层和棘层局灶性表达。②寻常型银屑病患者皮损中有一致性的iNOS和NF-κBp65高表达,两者表达水平呈显著正相关(P<0.01)。③寻常型银屑病患者皮损中iNOSmRNA的表达水平与相应患者的PASI计分呈显著正相关(P<0.01)。结论 ①寻常型银屑病患者皮损中有iNOS和NF-κBp65的高水平表达。②活化的NF-κB可能参与了寻常型银屑病的病理过程,高水平的iNOS表达可能导致了NF-κB的活化。③寻常型银屑病患者皮损中iNOS的表达水平与临床病情呈正相关。     

斑块状银屑病表皮干扰素-γ受体mRNA表达的研究

目的 探讨斑块状银屑病患者表皮干扰素-γ受体mRNA的表达及其在发病机制中的作用.方法 采集28例斑块状银屑病患者皮损及周围外观正常皮肤,28例正常人皮肤作为对照,分离表皮,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测干扰素-γ受体mRNA表达水平.PASI评分法评估银屑病的严重程度.结果 斑块状银屑病患者皮损和非皮损表皮干扰素-γ受体mRNA的表达率为100%,对照样本的表达率为17.86%(5/28);患者皮损、非皮损和对照表皮干扰素-γ受体mRNA的表达水平均值分别为1.002±0.563、0.188±0.095、0.005±0.012,皮损处的表达水平明显高于非皮损处(t=7.54,P<0.01),非皮损处明显高于正常人对照;进行期与稳定期皮损的表达水平分别为1.210±0.489和0.379±0.163,进行期显著高于稳定期(t=4.37,P<0.01);而皮损处的表达水平与PASI评分值无相关性.结论 表皮干扰素-γ受体mRNA的表达可能与银屑病皮损的形成和病情的活动性有关.     

干细胞因子及其受体在寻常型白癜风表皮中的表达

目的 探讨SCF/c-kit信号通路在白癜风发病中的作用。方法 采用免疫组化和RT-PCR法检测17例寻常型稳定期白癜风患者和10例正常对照标本中表皮角质形成细胞的干细胞因子表达及基底层黑素细胞c-kit的表达情况。结果 白癜风非皮损区干细胞因子、c-kit蛋白表达与正常对照无明显差异(P>0.05),皮损区干细胞因子表达显著高于正常对照皮肤(P<0.05),而c-kit表达显著低于正常对照皮肤(P<0.05)。白癜风非皮损区表皮干细胞因子、c-kit mRNA表达平均水平与正常对照近似(P>0.05);皮损区干细胞因子mRNA表达水平高于非皮损区及正常对照组差异有统计学意义(P<0.05);皮损区c-kit mRNA表达水平显著低于非皮损区及正常对照组(P<0.05)。结论 SCF/c-kit的异常表达可能与白癜风的发病有关。     

银屑病角质形成细胞p16启动子甲基化的研究

目的 探讨p16启动子甲基化与银屑病发生发展的关系.方法 采用甲基化特异性PCR及基因测序技术检测p16启动子.结果 26例银屑病患者皮损和非皮损甲基化率分别为23.08%(6/26)和19.23%(5/26),明显高于正常对照(P<0.05);12例进行期皮损和非皮损p16启动子甲基化率均为41.67%(5/12),14例静止期分别为7.14%(1/14)和0,进行期甲基化率明显高于静止期(P<0.05).结论 p16启动子甲基化与银屑病的发生发展相关,且与病期相关.     

寻常型银屑病患者皮损中维A酸受体mRNA的表达

目的 探讨维A酸受体(RARγ/RXRα)mRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达。方法 应用RT-PCR方法检测20例寻常型银屑病患者皮损部位和10例正常人表皮中RARγ/RXRαmRNA的表达。结果 在寻常型银屑病患者皮损中,RXRαmRNA的表达水平为0.1976±0.0933,较正常对照组低(正常对照组为0.5867±0.0132),在统计学上差异有显着性(P<0.01);RARγmRNA在银屑病患者和正常人表皮中的表达水平分别为0.5037±0.0883和0.5624±0.0767,两者差异无显着性。结论 RXRαmRNA表达水平的降低可能和银屑病的发病有关。     

银屑病皮损中Toll样受体4、NF-κBp65、HSP60的表达

目的 研究Toll样受体4(TLR4)、NF-κBp65、HSP60在银屑病患者皮损中的表达水平及其与银屑病严重程度的关系.方法 采用S-P免疫组化法检测30例进行期寻常性银屑病皮损及10例正常皮肤石蜡标本中的TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达,对其在皮损中的表达水平进行相关性分析,并将结果与PASI评分进行相关性分析.结果 与正常人对照组相比,寻常性银屑病皮损角质形成细胞中的TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05).TLR4、NF-κBp65与HSP60表达水平与患者PASI评分之间均存在正相关(P<0.01).银屑病患者TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达水平间均呈正相关(P<0.05).结论 TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达上调可能与银屑病发病及严重程度有关.HSP60可能与TLR4/NF-κBp65信号转导途径有关.     

银屑病患者皮损中转化生长因子-β1及受体基因表达的研究

目的 研究银屑病患者皮损及非皮损处转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体(TGF-βRⅡ)及CD105的基因(mRNA)表达,并初步探讨其临床意义。方法 采用异硫氰酸胍法抽提皮肤组织中的RNA;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮肤组织中mRNA的表达。结果 银屑病患者皮损组织TGF-β1及TGF-βRⅡmRNA的表达均低于非皮损组织及正常人(P<0.05);非皮损组织及正常人皮肤组织中mRNA的表达量差异无显著性(P>0.05)。而银屑病皮损组织CD105的mRNA表达量高于非皮损组及正常人(P<0.05);非皮损组织和正常人皮肤组织比较P>0.05。结论 银屑病皮损中TGF-β1及TGF-βRⅡ表达降低和CD105的表达上调可能与银屑病的表皮过度增殖及真皮炎症细胞浸润有关。     

银屑病患者血清及皮肤中补体及其活化成分的变化

目的 研究银屑病患者血清及皮肤中补体及其活化成分的变化,以探讨其与银屑病皮损形成的关系。方法 采用双抗体夹心ELISA法和免疫比浊法检测了57例银屑病患者血清补体活化片段C3d及可溶性补体激活片段sC5b-9及补体C3、C4的变化;采用免疫组化法(ABC法)检测了37例银屑病患者皮损组织、非皮损组织及20例正常皮肤组织C5b-9的原位表达。结果 银屑病患者血清中C3、C4水平明显下降;C3d、sC5b-9水平明显增高,与对照组比较差异有非常显著性,进行期患者血清中C3、C4明显低于静止期,而C3d、sC5b-9明显高于静止期,差异均有显著性。银屑病皮损组织中角质层和真表皮交界处C5b-9阳性数显著高于非皮损组织和正常组织;进行期银屑病患者皮损组织角质层和真表皮交界处C5b-9阳性表达数差异无显著性。结论 银屑病的发病以及皮损的严重程度与补体的活化可能有关。     

银屑病皮损及非皮损中垂体腺苷酸环化酶激活肽及其受体的研究

目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其受体(PACAP-R)在银屑病发病中的意义。方法 采用免疫组化的方法研究寻常性银屑病患者皮损及非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达情况。结果 银屑病患者皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达均明显低于非皮损部位,表现为皮损组PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值显著低于正常人对照组(均为P<0.01);与正常人相比,非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达也呈下调表达,即非皮损组的PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值明显低于正常人对照组(P<0.05)。结论 PACAP及PACAP-R在银屑病皮损中下调表达,提示PACAP可能与银屑病表皮细胞的过度增殖有关。     

The Increased Expression of Matrix Metalloproteinase-9 Messenger RNA in the Non-lesional Skin of Patients with Large Plaque Psoriasis Vulgaris

Background

A difference of the interleukin-18 (IL-18) mRNA expression among several proinflammatory genes was previously observed between large plaque (LP) psoriasis patients (more than 5 cm lesions are typical) and small plaque (SP) psoriasis patients (1~2 cm lesions are typical). Therefore, it is necessary to test whether there is any difference in the expression of the genes that activate IL-18 or the expression of genes that are induced by IL-18.

Objective

To test the differential mRNA expressions of caspase-1, STAT-6, MMP-1, MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 according to the clinical types of psoriasis vulgaris lesions in Korean patients, we have analyzed the skin samples of psoriasis vulgaris patients.

Methods

The total cellular RNA of skin samples from groups of patient with LP and SP psoriasis was analyzed by performing real-time PCR (the Taqman method) to compare the differences in the mRNA expressions.

Results

The caspase-1 and STAT-6 mRNA expression levels from the SP lesional skin of the patients were increased compared with the caspase-1 and STAT-6 mRNA expression levels from SP non-lesional skin or normal skin, but these expression levels from the SP non-lesional skin were not significantly different from those of the LP non-lesional skin. Among MMP-1, MMP-2, MMP-9 and TIMP-1, the expressions of MMP-1, MMP-2 and MMP-9 mRNA were increased in the SP lesional skin compared with those of the SP non-lesional skin. The MMP-1 mRNA expressions in both the LP and SP lesional skin were increased compared with those in the normal skin (p=0.028 and p=0.007 respectively). The MMP-9 mRNA expression in the LP non-lesional skin was elevated compared with the MMP-9 mRNA expression in the SP non-lesional skin (p=0.047). The TIMP-1 mRNA expression levels from the non-lesional skin and the lesional skin of the psoriasis patients and the normal skin samples were not significantly different.

Conclusion

The increased expression of MMP-9 mRNA in the LP non-lesional skin compared to that of the SP non-lesional skin in the psoriatic skin suggests that the increased MMP-9 mRNA expression is related to the large size type of lesion.     

肝素结合表皮生长因子样生长因子在银屑病早期皮损中的意义

目的：探讨肝素结合表皮生长因子样生长因子（HB－EGF）在银屑病发上期中的作用机制。方法：用原位杂交和免疫组化的方法检测正常组织、进行期银屑病皮损及其未受累皮肤中HB－EGF mRNA的蛋白表达。结果：在正常人皮肤组织中，HB－EGF mRNA和蛋白位于基底层（100％），基底上层仅有少量表达（16．67％）；在未受累表皮和银屑病皮损的周围部分中，HB－EGF的表达不仅位于基底层，且以灶状高表达于基底上层（分别为88．00％、80．00％）；在银屑病皮损的中央部分，基底上层无HB－EGF表达，基底层几乎不表达（4．00％）。结论：HB－EGF可能在银屑病发病的早期阶段起重要作用。     

寻常性银屑病患者表皮中DNA甲基化转移酶2和3a mRNA的表达

目的 检测寻常性银屑病患者表皮中DNA甲基化转移酶（DNMT2和DNMT3a）mRNA表达。方法 利用实时定量PCR技术检测2009年3月至2010年12月来自中国医学科学院皮肤病医院皮肤科及宜兴市人民医院皮肤科门诊的46例寻常性银屑病患者皮损和非皮损表皮以及来自中国医学科学院皮肤病医院皮肤外科的28例健康对照表皮中DNMT2和DNMT3a mRNA的表达。结果 在银屑病患者皮损、非皮损和对照组表皮DNMT2 mRNA表达水平（2-ΔΔCt值）分别是0.62 ± 0.02、0.36 ± 0.05和0.15 ± 0.11,皮损组明显高于非皮损组（t = 6.23,P < 0.01）,非皮损组明显高于对照组（t = 7.33,P < 0.01）;DNMT3a mRNA表达水平（2-ΔΔCt值）分别是0.85 ± 0.03、0.43 ± 0.04和0.18 ± 0.09,皮损组明显高于非皮损组（t = 5.66,P < 0.01）,非皮损组明显高于对照组（t = 8.62,P < 0.01）。结论 寻常性银屑病患者表皮DNMT2和DNMT3a mRNA均异常高表达。     

神经生长因子受体P75和P140trkAmRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)受体P75和P140trkA在寻常型银屑病发病机制中的作用.方法应用原位杂交技术检测了33例寻常型银屑病患者(18例为进展期,15例为静止期)和10例正常人皮肤组织中两受体(P75和P140trkA)mRNA的表达情况.结果与正常人皮肤比较,寻常型银屑病皮损及非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P＜0.01);进展期患者皮损与非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达分别高于静止期患者的皮损与非皮损区(P＜0.01).结论神经生长因子及其两受体可能是参与银屑病病理机制的重要因子.     

神经生长因子及其高亲和受体酪氨酸激酶、低亲和公共受体p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达及意义

【摘要】 目的 检测神经生长因子（NGF）及其受体TrkA、p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达。 方法 应用免疫组化ABC法检测32例扁平苔藓皮损和12例健康人皮肤石蜡标本NGF及其受体TrkA、p75NTR表达状况。 结果 NGF及TrkA在32例扁平苔藓皮损表皮角质形成细胞中均有不同程度的表达（++ ～ +++）,表达部位为细胞质,高于健康人皮肤NGF（- ～ +）及TrkA（- ～ +）的表达,两组间差异均有统计学意义（P < 0.01）;而p75NTR的表达两组差异无统计学意义。扁平苔藓皮损中NGF与TrkA表达呈正相关（R2 = 0.535,P < 0.01）。NGF及其受体TrkA、p75NTR在扁平苔藓不同发病年龄、部位以及不同性别患者角质形成细胞中的表达差异均无统计学意义。 结论 NGF通过其高亲和受体TrkA在扁平苔藓的发病中可能起着一定的作用。     

窄谱中波紫外线对寻常型银屑病神经生长因子及其受体mRNA的影响

目的：观察窄谱中波紫外线（NB—UVB）治疗寻常型银屑病的疗效及治疗前后皮损中神经生长因子（NGF）及受体的表达。方法：用NB—UVB治疗23例寻常型银屑病患者,每周3次,连续21次,以PASI评价疗效,并以原位杂交技术和图像分析系统分析皮损部位光疗前后NGF及受体mRNA的表达情况。结果：临床总有效率为91％,光疗后PASI评分较光疗前显著降低（P〈0．001）;光疗前银屑病皮损处NGFmRNA在从基底层到颗粒层均有阳性表达,P140TrkAmRNA在表皮各层均有染色,以棘细胞层和颗粒层染色较强,P75mRNA在棘细胞层和颗粒层有较强染色;光疗后三者mRNA表达强度明显降低（P〈0．01）。结论：NB—UVB是治疗银屑病的安全有效的方法,下调皮损中NGF及受体的表达可能是NB—UVB治疗寻常型银屑病的机制之一。