泡沫细胞形成过程中清道夫受体的变化

轻度修饰低密度脂蛋白对小鼠肝、脾中清道夫受体ｍＲＮＡ表达的影响姜传仓，陈兵，范乐明，邵莉君，蔡海江（南京医科大学动脉粥样硬化研究中心，南京２１００２９）小鼠静注轻度氧化修饰ＬＤＬ（ｍｉｌｄｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄＬＤＬ，ｍｍ－ＬＤＬ）可使其肝、脾清道夫受...     

泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4表达的变化

目的：研究人单核细胞系在分化为巨噬细胞及转化为泡沫细胞过程中 TOLL 样受体4(TLR-4)表达的改变及其机制。方法：体外培养人 THP-1单核细胞系,加入佛波酯(PMA)培养48h 使其分化为巨噬细胞,后者再加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)使转化为泡沫细胞,采用免疫细胞化学、蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)方法,检测 TLR-4蛋白表达及 TLR-4mRNA 表达的水平。结果：在单核细胞分化为臣噬细胞的过程中 TLR-4mRNA 及蛋白水平提高,差异具有显著性(P＜0.05)；在进一步转化为泡沫细胞过程中,mRNA 及蛋白水平又增高,与巨噬细胞相比差异有显著性(P＜0.05)。结论：单核细胞分化为泡沫细胞的过程中 TLR-4转录水平上调,蛋白量合成增加,从而可能提高泡沫细胞在动脉粥样硬化中的炎性反应能力。     

单核细胞株THP-1分化为泡沫细胞过程中清道夫受体A变化及阿托伐他汀的干预作用

目的 研究单核细胞株THP-1分化为巨噬细胞、泡沫细胞过程中细胞清道夫受体A（SRA）表达、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）分泌及应用阿托伐他汀干预的情况。方法 佛波醇酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,将其分为对照组、OX-LDL组（泡沫细胞组）、OX-LDL＋阿托伐他汀组（再分为低、中、高浓度3组）。用ELISA法,测定细胞培养液中MCP-1浓度。将SRA特异性结合配体DiI-Ac-LDL与细胞孵育,应用荧光显微镜观察各组细胞SRA蛋白表达及活性情况。并将MCP-1浓度与SRA蛋白活性进行相关性分析。结果400倍光镜下观察到细胞株THP-1在佛波醇酯诱导下转变为泡沫细胞。与对照组相比,OX-LDL组MCP-1表达升高,6h后升高明显（P〈0．05）,12h达高峰（P〈0．01）,24h后逐渐下降（P〈0．01）。阿托伐他汀药物干预,呈剂量依赖性降低MCP．1水平。OX-LDL组SRA蛋白活性水平明显高于对照组（P〈0．01）。阿托伐他汀干预,呈剂量依赖性下调SRA蛋白活性水平。各组细胞12hMCP．1浓度与SRA蛋白活性水平呈明显正相关（r=0．683,P〈0．01）。结论SRA、炎症因子MCP-1在THP-1细胞分化为泡沫细胞过程中发挥重要作用,阿托伐他汀抑制MCP-1与SRA表达,可能是其抗动脉粥样硬化形成的重要机制。     

丹参多酚酸盐对单核细胞分化为泡沫细胞过程中清道夫受体A表达的干预作用

使用佛波醇酯（PMA）诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，将其分为对照组、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）组、ox-LDL＋丹参多酚酸盐组（低、中、高浓度组），应用流式细胞仪测定巨噬细胞SR-A表达水平。结果镜下观察到单核细胞株THP-1在PMA诱导下转变为泡沫细胞；ox-LDL处理组SR-A蛋白表达水平较对照组明显增加（P〈0.01）；丹参多酚酸盐组较其他两组均明显减弱（P均〈0.01），且随浓度增加SR-A表达明显减弱（P均〈0.01）。认为ox-LDL能够明显刺激巨噬细胞表达SR-A，丹参多酚酸盐能够下调ox-LDL刺激的巨噬细胞表达SR-A，可能是其抗动脉粥样硬化斑块形成的机制之一。     

巨噬细胞源性泡沫细胞形成过程中载脂蛋白E基因表达的变化

研究单核－巨噬细胞源性泡沫细胞形成过程中细胞载脂蛋白E表达的变化,以佛波醇酯（10^-7mol/L)诱导人单核细胞性THP－1细胞分化为巨噬细胞（72h),再以氧化型低密度脂蛋白（50mg/L)刺激巨噬细胞形成泡沫细胞（48h),用逆转录－聚合酶链反应检测这一过程中载脂蛋白E在mRNA水平上的变化。结果显示,单核细胞分化为巨噬细胞的同时伴随着载脂蛋白E表达的增加,巨噬细胞吞噬脂质转化为泡沫细胞后载脂蛋白E的表达进一步增加。     

肺炎衣原体通过上调清道夫受体A1诱导THP-1源性泡沫细胞形成

目的观察清道夫受体A1和CD36在肺炎衣原体诱导THP-1源性泡沫细胞形成中的作用。方法给予不同浓度的肺炎衣原体(1×105～1×106IFU)感染THP-1源性巨噬细胞0～72h。运用油红O染色观察细胞质内脂滴的变化,酶荧光学法检测细胞内胆固醇酯含量的变化。分别运用逆转录聚合酶链反应和Western-Blot检测清道夫受体A1和CD36的mRNA和蛋白表达。结果高浓度的肺炎衣原体(5×105和1×106IFU)感染负荷低密度脂蛋白的THP-1源性巨噬细胞48h后,细胞质内的脂滴明显增多,胆固醇酯占总胆固醇百分比明显增加(>50%)。在负荷低密度脂蛋白的THP-1源性巨噬细胞上,肺炎衣原体感染呈浓度和时间依赖性地上调道夫受体A1 mRNA和蛋白表达,但不影响CD36 mRNA和蛋白表达。结论清道夫受体A1表达上调是肺炎衣原体诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制之一,这可能为进一步阐明肺炎衣原体感染促进动脉粥样硬化发生发展提供一个新的理论依据。     

清道夫受体CD36在CML抑制泡沫细胞迁徙中的作用

目的探讨清道夫受体CD36在羧甲基赖氨酸(CML)抑制泡沫细胞迁徙中的作用。方法 (1)首先观察CML对RAW264.7巨噬细胞脂质蓄积和细胞迁移的影响,继之观察泡沫细胞中CML与CD36的相互作用,实验分为:对照组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)组(40 mg/L ox-LDL)、CML组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML);(2)观察CD36在CML抑制泡沫细胞迁移中的作用。实验分两部分:首先观察CD36抑制剂SSO对RAW264.7泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML)和SSO组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+25μmol/L SSO);其次观察不同受体阻断对CML抑制泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML),anti-CD36组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-CD36),anti-RAGE组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-RAGE),mal BSA组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+400 nmol/L mal BSA)。连续24 h 1%BSA的培养基培养干预后进行相关检测(油红O染色、Transwell细胞迁移实验、免疫共沉淀实验、CD36免疫荧光染色等)。结果胆固醇氧化酶法定量及油红O染色定性显示CML可以有效促进RAW264.7巨噬细胞脂滴的蓄积并形成动脉粥样硬化斑块的关键组分泡沫细胞。Transwell细胞迁移实验和定量分析结果显示:与对照组相比,ox-LDL组中迁移泡沫细胞数减少43.5%(P0.05);与ox-LDL组相比,CML使泡沫细胞迁移数目减少49.2%(0.287±0.031比0.565±0.061,P0.05),表明CML抑制RAW264.7源性泡沫细胞迁移。免疫共沉淀实验及免疫荧光染色结果显示泡沫细胞中CML-CD36存在显著的相互作用。进一步的,用SSO或中和性抗体anti-CD36阻断CD36和清道夫受体抑制剂mal BSA阻断所有清道夫受体情况下,迁移的细胞数均较对照组显著增加(P0.05)。统计学分析显示,anti-CD36组细胞迁移指数为mal BSA组的81.3%(2.35±0.39比2.89±0.41,P0.05)。结论清道夫受体CD36是CML抑制RAW264.7泡沫细胞迁移的关键受体。     

洛伐他汀对THP-1细胞分化成泡沫细胞过程中清道夫受体A表达及MCP-1、TNF-α水平的影响

目的 观察洛伐他汀对THP-1细胞株分化成泡沫细胞过程中清道夫受体A(SRA)表达及MCP-1和TNF-α的水平的影响.方法 培养THP-1细胞,佛波脂(PAM)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白使巨噬细胞形成泡沫细胞,将其分为巨噬细胞组(对照组)、泡沫细胞组、泡沫细胞+洛伐他汀组,各组细胞孵育24 h,用ELISA法检测各组细胞培养液中MCP-1、TNF-α水平.将SRA特异性配体DiI-Ac-LDL与细胞孵育6 h,用荧光显微镜观察各组细胞SRA的表达.结果 THP-1细胞经佛波脂和氧化型低密度脂蛋白孵育后,有大量泡沫细胞形成.与对照组相比,泡沫细胞组,SRA蛋白活性及MCP-1、TNF-α水平明显升高(P＜0.05),洛伐他汀干预后,其水平较泡沫细胞组显著降低(P＜0.05).结论 SRA、MCP-1及TNF-α在THP-1细胞分化成泡沫细胞过程中发挥着重要作用;洛伐他汀可抑制SRA、MCP-1及TNF-α的表达,这可能为其抗动脉粥样硬化的机制之一.     

极低密度脂蛋白受体在泡沫细胞形成中的作用地位

为探讨极低密度脂蛋白受体在摄取富含甘油三酯的脂蛋白及泡沫细胞形成中的作用，在体外实验中，将极低密度脂蛋白、β极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白分别与小鼠腹腔巨噬细胞孵育24及48h后，检测细胞内甘油三酯及总胆固醇的含量，油红O染色观察泡沫细胞的形成，半定量逆转录聚合酶链反应检测极低密度脂蛋白受体、LRP及极低密度脂蛋白受体的mRNA表达变化。结果发现，三种脂蛋白与巨噬细胞均能升高细胞内甘油三酯、总胆固醇含量；极低密度脂蛋白受体受极低密度脂蛋白、β极低密度脂蛋白的刺激表达上调，低密度脂蛋白受体表达下调，LRP表达略有上调。在稳定表达极低密度脂蛋白受体细胞中的实验表明，极低密度脂蛋白受体介导对富含甘油三酯的脂蛋白的摄取在胞内脂质聚集及泡沫细胞形成过程中具有重要作用。     

A类清道夫受体参与动脉粥样硬化形成的机制

A类清道夫受体是单核巨噬细胞表面的一种跨膜糖蛋白的三聚体,调节巨噬细胞内脂质沉积,参与动脉粥样硬化斑块的形成。现综述且整理相关A类清道夫受体的最新进展,通过炎症调控、内质网应激、巨噬细胞由M1向M2型转化以及胰岛素抵抗等途径,阐明A类清道夫受体在动脉粥样硬化形成中的作用,同时简述了饮食及药物对A类清道夫受体水平的影响。     

清道夫受体与糖尿病

清道夫受体(SR)是主要存在于巨噬细胞膜表面的一种糖蛋白，能特异性结合并摄取氧化低密度脂蛋白等多种配体从而介导脂类代谢。本文主要介绍与糖尿病相关的SRA、SRB-Ⅰ和CD36的结构、分布和功能，以及细胞因子等对其调节作用。在2型糖尿病中CD36表达的水平增加，CD36和SRA-Ⅰ在糖尿病动脉粥样硬化的形成中介导胆固醇的摄取，SRA-Ⅱ作为糖基化终末产物的受体在糖尿病肾病中有促进肾小球硬化的作用。     

清道夫受体与糖尿病

清道夫受体 (SR)是主要存在于巨噬细胞膜表面的一种糖蛋白 ,能特异性结合并摄取氧化低密度脂蛋白等多种配体从而介导脂类代谢。本文主要介绍与糖尿病相关的SRA、SRB Ⅰ和CD36的结构、分布和功能 ,以及细胞因子等对其调节作用。在 2型糖尿病中CD36表达的水平增加 ,CD36和SRA Ⅰ在糖尿病动脉粥样硬化的形成中介导胆固醇的摄取 ,SRA Ⅱ作为糖基化终末产物的受体在糖尿病肾病中有促进肾小球硬化的作用。     

动脉粥样硬化与清道夫受体

动脉粥样硬化是一种常见的全身性疾病 ,它可以引起严重的心脑血管病。近年来对动脉粥样硬化的研究表明 ,清道夫受体有极其重要的作用。文章综述了近年来研究较多的受体及其在动脉粥样硬化中的作用。     

清道夫受体研究新进展

清道夫受体由多成员组成，其配基识别广泛，功能多样，与许多细胞事件都有不同程度的关联，同时作为一种受体，其在信号传递上也有着不可忽视的作用。本文综述了清道夫受体的分类、结构、功能以及清道夫受体在信号转导方面的展望。     

动脉粥样硬化与清道夫受体

动脉粥样硬化是一种常见的全身性疾病,它可以引起严重的心脑血管病。近年来对动脉粥样硬化的研究表明,清道夫受体有极其重要的作用。文章综述了近年来研究较多的受体及其在动脉粥样硬化中的作用。     

动脉粥样硬化中单核细胞招募与泡沫细胞形成

动脉粥样硬化是一种慢性炎症疾病,单核细胞和激活的内皮细胞间的相互作用在动脉粥样硬化病变进程中起着关键性的作用.在动脉粥样硬化的早期阶段,单核细胞在黏附分子和细胞因子的作用下进入内膜并分化为巨噬细胞.在受体和胞饮介导下,分化而来的巨噬细胞对内膜下的脂质进行摄取,脂质负荷的巨噬细胞转化为泡沫细胞,大量泡沫细胞的蓄积将形成动脉粥样硬化的脂质核心.     

清道夫受体A的研究进展

清道夫受体A(SR-A)是一种跨膜糖蛋白受体,有三种亚型,表达于巨噬细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞,与之结合的配体主要有修饰化的脂蛋白(ac-LDL,ox-LDL等)、多聚核苷酸(Poly I和PolyG)、脂多糖、阴离子磷脂、磷壁酸、糖酐酯以及原核生物的细胞壁成分等。SR-A与配体结合后参与宿主的防御、吞噬凋亡细胞和促进细胞等多种生物学功能,并在动脉粥样硬化(As)的发生发展中发挥重要作用。本文综述了近年有关SR-A的结构、表达调控、主要生理功能以及与As关系的最新研究进展,为人们进一步认识SR-A提供参考资料。     

巨噬细胞在泡沫细胞化过程中的代谢活性变化

本实验在氧化型低密度脂蛋白作用下于小腹膜巨噬细胞的基础上，应用四氮唑蓝比色分析法，探讨巨噬细胞在向巨噬细胞源性泡沫细胞转化过程的代谢活性的变化规律。     

清道夫受体BI与动脉粥样硬化

清道夫受体B族I型(SR-BI)是细胞膜上首个被定义为高密度脂蛋白(HDL)受体的糖蛋白,其介导细胞选择性摄取高密度脂蛋白胆固醇(HDLC),影响细胞胆固醇平衡、炎症表型。肝脏SR-BI在胆固醇逆向转运中扮演重要角色,而与HDL的代谢及其抗动脉粥样硬化(As)作用密切相关,并且已发现人类存在SR-BI基因多态性。本文重点从SR-BI结构、功能、调节及其对As的作用进行综述。     

清道夫受体A与动脉粥样硬化

清道夫受体A是一种细胞表面的糖蛋白,主要分布在巨噬细胞上,具有广泛的配体识别谱,最初是作为脂蛋白受体被发现的,可以内吞修饰的脂蛋白,促进动脉粥样硬化斑块的形成。近年研究发现,清道夫受体A还在介导巨噬细胞对内毒素清除及凋亡细胞的识别、细胞黏附以宿主防御等起重要作用。与对清道夫受体A的分子结构,表达调空和生物学功能等做一综述。