胆固醇7α-羟化酶在胆汁淤积中的调节机制研究进展

胆汁淤积是由多种原因所致的胆汁酸异常积聚,临床表现为黄疸或黄斑瘤等。胆固醇7α-羟化酶( cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)是体内催化胆固醇合成胆汁酸的限速酶,其活性与胆汁酸的合成量密切相关。机体中由FXR介导的FXR/SHP信号通路和FXR/FGF19/FGFR4信号通路以及由PXR介导的信号通路是重要的CYP7A1调节路径。上述通路通过调节CYP7A1的活性,调控胆汁酸的合成,进而维持胆汁酸的内平衡。本文就近年来有关胆汁淤积中CYP7A1的调节机制研究进行综述,为探索临床治疗胆汁淤积的靶点提供了参考。     

金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的生物标志物的研究

目的建立金黄地鼠高脂血症模型,并对胆固醇代谢紊乱的分子机制进行探讨。方法金黄地鼠随机分为正常和模型组,正常组饲常规饲料,模型组饲高脂饲料,连续诱导4周。酶法检测血脂水平和CYP7A1活性,荧光实时定量PCR技术探讨金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的分子机制。结果金黄地鼠经高脂饲料诱导后与对照组比较,血清TC、LDL-C和TG明显升高,肝脏TC、TG明显增加。机制研究表明,模型组CYP7A1活性明显降低,肝脏LDL-R、SREBP-2、CYP7A1和LXRα表达下调,肝脏FXR表达上调。结论金黄地鼠经高脂饲料诱导后可形成以TC、LDL-C、TG升高为特征的高脂血症模型,LDL-R、SREBP-2、CYP7A1、FXR和LXRα既是金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的生物标志物,也是抗高胆固醇血症药物的作用靶标。     

中草药对孕烷X受体和组成型雄烷受体等核受体通路影响的研究进展

孕烷X受体（pregnane X receptor,PXR）是核受体亚家族的成员之一,参与大量的外源性和内源性化学物质的生物转化,能被多种中草药激活,调节下游靶基因的表达,在药物代谢酶和转运体的调节中起重要作用。组成型雄烷受体（constitutive androstane receptor,CAR）和PXR一样能与外源性配体结合调节CYP2B6、CYP3A4、CYP2C19、UGT1A1的表达,共同参与CYP药物代谢酶的调节,成为药物作用的靶标。     

胆宁片对高脂模型大鼠脂肪肝及PPARα、CYP7A1表达的影响

目的:研究中成药胆宁片对实验性高脂饮食大鼠脂肪肝的治疗作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、胆固醇7α单加氧酶(CYPTA1)表达的影响。方法:采用高脂饲料9 wk建立大鼠脂肪肝模型,给予模型大鼠胆宁片0.317 g·kg~(-1)·d~(-1)灌服5 wk,检测肝脏三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、过氧化氢酶(CAT),血清丙氨酸转氨酶(ALT)、TG、TC、FFA、CAT、总胆汁酸(TBA)含量,肝脂变面积,检测肝脏PPARα、PPARαmRNA和CYP7A1 mRNA的表达。结果:高脂饮食可引起大鼠肝脏明显脂肪性变,肝脏TG、TC、FFA及血清ALT、TG、TC、FFA含量升高,肝脏及血清CAT活性降低,肝脏PPARα及PPARαmRNA和CYP7A1 mRNA的表达减少。与模型组比较,胆宁片能明显降低肝脏TG、TC、FFA,血清ALT、TG、TC、FFA含量(P<0.01),提高肝脏及血清CAT活性,提高肝细胞PPARα及PPARαmRNA和CYP7A1及CYP7A1 mRNA的表达(P<0.01),且优于阳性对照组熊去氧胆酸。结论:胆宁片对实验性高脂饮食性脂肪肝大鼠具有一定的治疗作用,其作用机制可能与其诱导PPARα及CYP7A1表达,促进肝脏摄取、氧化脂肪酸与胆固醇有关。     

非可兴奋性内皮细胞α7受体与血管新生

烟碱受体α7亚型 (α7nicotinicacetylcholinereceptor,α7nAChR)广泛分布于中枢和外周神经系统 ,是中枢神经系统重要神经递质受体 ,参与神经通路形成、维持和多种生理功能调节。近年来研究发现内皮细胞、血管平滑肌细胞、肺上皮细胞、皮肤角质细胞等非神经元细胞表达α7受体 ,并参与细胞有丝分裂、分化、细胞骨架形成、细胞间联接、运动和迁移等细胞机制调节。体外、体内试验表明α7受体参与内皮细胞多种生物活性物质的分泌和释放 ,参与内皮细胞与其它细胞间信号转导 ,参与内皮细胞血管新生调节。尤其是内皮细胞α7受体与血管新生关系的研究 ,揭示了内皮细胞存在调节血管新生药物作用新靶标。     

lncRNA HNF4α-AS1参与调控转录因子和细胞色素CYP450表达

目的细胞色素P450酶系(CYP450s)是体内主要的氧化代谢酶系。临床上70%以上的处方药物经由CYP450s催化代谢。研究表明,转录因子参与CYP450s的表达调控,其中转录因子HNF4α在CYP450s的转录调控中发挥重要的作用。近期发现转录因子附近的一些非编码RNA(lnc RNA)参与其邻近基因的调节。lnc-HNF4α(HNF4α-AS1)与HNF4α相邻,是HNF4α基因的互补反义RNA。本文目的是探讨在肝癌细胞Huh7中lnc RNAHNF4α-AS1对转录因子与CYP450s表达的调控作用。方法在肝癌细胞huh7上进行功能缺失实验敲除HNF4α以及功能缺失实验敲除HNF4α-AS1与功能获得实验过表达HNF4α-AS1,q-PCR法检测lnc RNA和代谢酶以及转录因子mRNA的表达。结果在肝癌细胞Huh7中,si RNA有效干扰HNF4α后,HNF4α-AS1表达降低,CYP(1A2,2E1,2B6,2C8,2C9,2C19,3A4)的mRNA的表达以及转录因子(PXR,CAR,AhR)mRNA表达降低。在Huh7细胞中,si RNA有效干扰HNF4α-AS1后,CYP(1A2,2C8,2C9,2C19,3A4)的表达以及核受体PXR的mRNA表达升高,有效过表达HNF4α-AS1后,CYP450s以及核受体PXR的mRNA表达下降。结论 lnc RNAHNF4α-AS1参与调控转录因子与细胞色素CYP450s的表达。     

滇黄芩黄酮的调脂保肝作用及其对肝组织HMGCR、CYP7A1活性影响的研究

目的 研究滇黄芩黄酮(Scutellaria amoena flavonoids,SAF)对高脂血症大鼠的调脂保肝作用及其对肝组织中羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-Co A reductase,HMGCR)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)活性的影响.方法 40...     

荜茇宁衍生物对高脂血症大鼠调脂作用及其机制的研究

目的：探讨荜茇宁（GBN）的衍生物（GBNT）对高脂血症大鼠的调脂作用,并考察其作用机制。方法高脂饲料喂养Wister 大鼠,建立高脂血症模型,造模同时连续灌胃给药8周后,腹主动脉取血,检测各组大鼠血清中总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量;HE 染色检测肝脏病理学形态;Western blot 方法研究低密度脂蛋白受体（LDLR）,卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶（LCAT）,胆固醇7α-羟化酶（CYP7A）蛋白表达的变化。结果GBNT 低、高剂量组均能降低模型大鼠 TC、TG 和 LDL-C 的含量,升高 HDL-C 含量;上调 LDLR,LCAT,CYP7A1蛋白的表达;并减轻肝脏脂肪变性。结论GBNT 具有降低高脂血症模型大鼠血脂水平的作用,其机制可能与调节 LCAT,CYP7A1等脂质代谢酶表达有关。     

CYP3A4、CYP3A5和CYP3A7的基因多态性对中国汉族肾移植患者他克莫司药动学的影响

摘 要 目的：探讨中国汉族肾移植患者中,CYP3A5*3（rs776746）、CYP3A4*1G(rs2242480)、CYP3A4 rs4646437、CYP3A7 rs2257401及CYP3A7 rs10211单核苷酸多态性对免疫抑制药他克莫司（TAC）药动学的影响。方法：采用直接测序法,对85例肾移植的患者进行基因分型。采用酶放大免疫分析法测定患者TAC的谷浓度（C0）。比较不同基因型患者间TAC浓度剂量比值的差异。结果：在85例肾移植患者中,CYP3A5*3 A、CYP3A4*1G T、CYP3A4 rs4646437 T、CYP3A7 rs2257401C及CYP3A7 rs10211 G等位基因的频率分别为29.4%,27.6%,13.5%,26.5%及27.6%。肾移植术后1个月时,CYP3A5*3、CYP3A7 rs2257401及CYP3A7 rs10211影响TAC的谷浓度（P<0.01）。CYP3A5*3 A、CYP3A7 rs2257401 C及CYP3A7 rs10211 G等位基因携带者,TAC剂量校正浓度分别比其相应非携带者剂量校正浓度低约50%左右。而本研究未发现CYP3A4*1G和CYP3A4 rs4646437基因多态性与TAC校正谷浓度相关（P>0.05）。结论：在中国汉族肾移植患者中,CYP3A5*3、CYP3A7 rs2257401及CYP3A7 rs10211的单核苷酸多态性与移植术后1个月内TAC的药代动力学有相关性,但把这种相关性应用在临床上,以优化他克莫司的剂量,尚待进一步的研究。     

孕烷X受体(PXR)对药物代谢途径的调控

目的 从孕烷X受体（PXR）对药物代谢途径的调控入手,在代谢性药物相互作用、PXR在CYP3A4调控中的作用及其调控机制等方面作分析和阐述。方法 结合近年来国内外相关文献进行评述。结果 PXR是CYP3A4的主要转录调控因子,药物通过PXR介导的信号通路调节CYP3A4的表达是影响药物体内代谢变化的重要途径。结论 就临床药物而言,由PXR介导的CYP3A4酶蛋白表达的改变可造成合用药物药效的减弱甚至丧失,因此必须引起广大临床药师的足够重视。     

细胞色素氧化酶CYP 1A2基因多态性与物质代谢和癌症发生相关性的研究进展

细胞色素氧化酶CYP 1A2亚家族是近年来药物代谢研究领域较受关注的热点之一。该酶具有高度的个体间差异,并参与多种临床药物以及环境致癌物质的代谢,与癌症、炎症、心肌梗塞等疾病的发病易感性相关。CYP 1A2具有抗氧化作用;CYP 1A2基因多态性和表型差异的研究,可用于评价临床药物治疗效果;探针药物的应用是研究CYP 1A2活性的主要方法;人源化CYP 1A2转基因动物模型,是癌症发生研究中、新的研究手段。     

CYP450酶特性及其应用研究进展

细胞色素P450（CYP450）是药物和其他内、外源物的主要代谢酶,本文综述了人体内参与药物代谢的几种主要代谢酶CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP1A2和CYP2A6的分子生物学特征,中药对药物代谢酶的影响及药物代谢酶在临床药物治疗和新药研究过程中的应用。     

贝母、乌头合用对大鼠肝脏CYP450的调控作用

目的:研究乌头、贝母合用对主要药物代谢酶和蛋白质水平的影响,阐明中药产生相互作用的机制。方法:采用高效液相色谱法测定CYP1A2、CYP2E1活性;采用紫外-可见分光光度法测定CYP3A1/2活性;分别采用RT-PCR和Western Blot方法评价药物对CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA及蛋白水平的影响。结果:乌头、贝母合用后CYP1A2、CYP2E1的酶活性均有下降;Western Blot检测显示CYP1A2、CYP2E1、CYP3A2的蛋白质表达水平下降;CYP3A1的蛋白质表达水平上升。RT-PCR检测显示CYP1A2、CYP2E1的mRNA水平下降;CYP3A1、CYP3A2的mRNA水平上升。结论:乌头、贝母合用后抑制CYP1A2、CYP2E1的酶活性,酶活性下降可能主要通过影响基因转录进而影响其蛋白水平来实现。     

以α7 nAChR为靶点的药物研究进展

α7 nAChR属于烟碱型乙酰胆碱受体,是由5个α7单体组成的配体门控离子通道。α7 nAChR的配体结合位点主要有两种,即激动剂(拮抗剂)结合位点以及变构调节位点。α7 nAChR是精神分裂症认知障碍以及阿尔茨海默病药物研究的一个重要靶点,现已有多个治疗药物处在临床试验阶段。本文主要综述了α7 nAChR激动剂以及变构调节剂药物的研究进展。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。     

血脂平胶囊对高血脂模型金黄地鼠血脂水平的影响及机制研究

目的:研究血脂平胶囊对高血脂模型金黄地鼠血脂水平的影响及其可能机制。方法:将金黄地鼠随机分为正常对照组、模型组、阿托伐他汀组(3 mg/kg)、联用组(血脂平胶囊1.3 g/kg+阿托伐他汀1.5 mg/kg)和血脂平胶囊低、中、高剂量组(血脂平胶囊1.3、2.6、5.2 g/kg),每组10只。正常对照组地鼠给予普通饲料,其他组地鼠给予高脂饲料建立高血脂模型,2周后同时ig给予相应药物,正常对照组和模型组地鼠ig等体积的蒸馏水,每日1次,连续给药4周。末次给药后,检测各组地鼠血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)],肝组织中脂质代谢相关基因(PPAR-α、CYP7A1、ACOX、SREBP-1c、ACC1)m RNA及蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组地鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA含量增加,HDL-C含量降低,PPAR-α、CYP7A1、ACOX m RNA及蛋白表达减弱,SREBP-1c、ACC1 m RNA及蛋白表达增强(P<0.05)。与模型组比较,血脂平胶囊高剂量组、阿托伐他汀组和联用组地鼠上述指标均明显改善(血脂平高剂量组HDL-C除外)(P<0.05);血脂平胶囊中剂量组地鼠TC、TG、FFA含量和PPAR-α、CYP7A1、ACOX、ACC1 m RNA及CYP7A1、SREBP-1c、ACC1蛋白表达均明显改善(P<0.05);血脂平胶囊低剂量组地鼠TC、TG含量和PPAR-αm RNA及CYP7A1、SREBP-1c蛋白表达均明显改善(P<0.05)。结论:血脂平胶囊具有降血脂作用,其机制可能与激活PPAR-α和抑制SREBP-1c信号通路有关。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。     

利福平对小鼠的肝毒性及胆酸代谢基因的影响

目的观察利福平长期给药引起小鼠的肝损伤及其对胆汁酸代谢通路相关基因的影响。方法 1 d 1次灌胃给予♂昆明种小鼠180 mg·kg~(-1)利福平连续30 d与90 mg·kg~(-1)利福平连续90 d;麻醉取血、肝脏,称肝重,检测血清谷丙转氨酶(ALT),观察肝脏组织的病理变化;提取肝脏总RNA并采用RT-PCR法检测胆汁酸代谢相关基因mRNA的表达情况,提取肝脏总蛋白并采用Western blot法检测相关蛋白的表达。结果连续给予利福平180 mg·kg~(-1)30 d和90 mg·kg~(-1)90 d,小鼠肝重系数增加,肝脏发生明显病理改变,表现为肝细胞水肿、羽毛样变性与脂肪变性,且利福平180 mg·kg~(-1)30 d病理改变较严重;连续给药180 mg·kg~(-1)利福平30 d可使胆酸代谢基因胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、法尼醇受体(FXR)、小分子异源二聚体伴侣(SHP)表达增加,胆盐输出泵(BSEP)的表达降低;连续给药90 mg·kg~(-1)利福平90 d,仅可发现胆酸代谢基因胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)表达增加。结论利福平对小鼠具有明显肝毒性,引起胆汁淤积性肝损伤;其影响CYP7A1与BSEP的基因表达可能是其导致胆汁淤积性肝损伤的机制之一。     

肠道细胞色素P450代谢酶研究进展

细胞色素P450(CYP450s)为肠道主要I相代谢酶,目前发现有CYP1A1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2J2、CYP2D6、CYP3A4、CYP3A5 7种同工酶。肠道CYP在药物代谢及药物相互作用中发挥重要作用,与药物疗效及不良反应密切相关。基因多态性及个体差异均影响药物代谢,导致临床疗效差别。该文就肠道CYP各亚型相关研究进展做一综述。     

甲基原薯蓣皂苷对人肝微粒体中7种CYP450酶活性的影响

目的研究甲基原薯蓣皂苷对CYP450酶的7种亚型酶活性的影响。方法将MPD和CYP450酶7种亚型的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、右美沙芬(CYP2D6)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、s-美芬妥因(CYP2C19)、氯唑沙宗(CYP2E1)、香豆素(CYP2A6)及咪达唑仑(CYP3A4)与人肝微粒体进行孵化反应,采用HPLC和LC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物(1,7-二甲基黄嘌呤、去甲右美沙芬、4-羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、6-羟基氯唑沙宗、7-羟基香豆素和1-羟基咪达唑仑)的浓度,通过与对照组比较,确定MPD对以上7种酶活性的影响。结果MPD在1~10μmol.L-1时对7种酶均无明显抑制作用,在100μmol.L-1时对CYP2D6有抑制趋势,但对其他6种酶无抑制作用,均无统计学意义(P>0.05)。结论MPD在与以上6种酶(CYP1A2、CYP2E1、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9和CYP2A6)代谢的药物联合用药时,发生药物相互作用的可能性较小。