振源软胶囊的制备工艺及质量标准初步研究

［摘要］目的：研究振源软胶囊的制备工艺和质量控制标准。方法：通过对基质流动性、囊壳变化、吸湿性、崩解时间等的考察,确定软胶囊处方及制备工艺;用薄层色谱法同时鉴别人参皂苷Re和Rg1;用高效液相色谱法测定人参果总皂苷中人参皂苷Re含量。结果：处方组成为人参果总皂苷∶［聚乙二醇6000、甘油、水加入聚乙二醇400的溶液(2∶5∶2∶91)］=1∶4;人参皂苷Re和Rg1样品分离较好,薄层色谱斑点清晰;线性回归方程为：y=200490x+27388,当人参皂苷Re进样量在1592～6368μg范围内,与其峰面积呈线性,r=09999。结论：所确定的处方工艺稳定可靠,重现性好,适合工业生产;建立的质控方法可简便、快速、准确地对振源软胶囊进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。     

人参皂苷Rh2两种差向异构体的HPLC含量测定

目的:建立2种人参皂苷Rh2异构体的高效液相色谱测定方法.方法:采用Merck LichrospherRP-18e C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为CH3CN-CH3OH(65:35),检测波长为203 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果:Rh2线性范围为0.06～1.20 g·L-1,以峰面积(y)对浓度(x,g·L-1)求得线性方程,S构型线性方程为y=2260.9x-12.533,r=0.9999;R构型线性方程为y=2596.1x-7.9654,r=0.9999.结论:本方法简便、准确、可靠,可用于Rh2中的2种差向异构体化合物的鉴别和含量测定.     

高效液相色谱法测定益心口服液中人参皂苷含量

目的建立测定益心口服液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-水（20：80）为流动相,检测波长203nm,进样量20μL。结果人参皂苷Rgt质量浓度线性范围为83．5～1670．0μg／mL,回归方程Y=3007．4x＋1694．4,r=0．9997（n=6）;人参皂苷Re质量浓度线性范围为88．2～1764．0μg／mL,回归方程Y=2956．6X-3148．6,r=0．9999（n=6）。人参皂苷Rg1的平均回收率为100．27％,RSD为1．48％（n=9）;人参皂苷Re的平均回收率为100．79％,RSD为1．72％（n=9）。结论HPLC法测定益心口服液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量,准确度高,重现性好,简便快速。     

丹七片质量标准的研究

目的建立丹七片的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别丹参和三七,采用高效液相色谱法同时测定三七中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。结果薄层色谱法可检出丹参和三七;人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别在0.964~9.64、0.995~9.95、0.245~2.45μg的范围内线性关系良好,相关系数r均为0.999;人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的平均加样回收率分别为101.3%(RSD=1.12%),97.8%(RSD=1.80%),97.5%(RSD=0.68%)。结论本方法操作简单,重现性好,结果稳定,可有效地控制丹七片的质量。     

七连栓质量控制研究

目的 :建立七连栓的质量控制方法。方法 :采用薄层色谱法对主药黄连、三七进行定性鉴别 ;采用反相高效液相色谱法梯度洗脱 ,蒸发光散射器检测三七中人参皂苷Rg1 、Rb1 的含量。结果 :本品薄层色谱特征明显 ,专属性强 ;人参皂苷Rg1 在进样量为1 56μg～3. 74μg 范围内线性关系良好 (r=0. 9993 ,RSD=1. 6 % ) ,回收率为99 .10 % ;人参皂苷Rb1 在进样量为1 .44μg～3 46μg范围内线性关系良好 (r=0. 9981 ,RSD=1 .2 % ) ,回收率为102. 13 %。结论 :本方法简便、灵敏、准确、重现性好 ,可用于七连栓的质量控制。     

UPLC法测定一捻金中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量

目的:建立超高效液相色谱法测定一捻金中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量的方法。方法:色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流速:0.21 ml·min-1;柱温:30℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:203 nm;进样量:1μl。结果:人参皂苷Rg1在浓度为0.020 3~0.303 9 mg·ml-1时线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为99.05%,RSD为1.3%(n=6);人参皂苷Re在浓度为0.020 2~0.302 7 mg·ml-1时线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为101.31%,RSD为1.1%(n=6);人参皂苷Rb1在浓度为0.020 3~0.305 1 mg·ml-1时线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为100.71%,RSD为0.9%(n=6)。结论:该方法简单、准确,可同时测定3种人参皂苷的含量,可作为一捻金的质量控制。     

HPLC法测定洋参口服液中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量

目的建立高效液相色谱法分离并测定洋参口服液人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。方法采用Zobax SB C18色谱柱(4.6×150mm,5μm),流动相为乙腈及水,采用梯度洗脱,柱温30℃,检测波长203nm,流速1.0mL·min-1。结果本法测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的线性范围分别为20μg~180μg·mL-1(r=0.9994),80~720μg·mL-1(r=0.9990),120μg~1080μg·mL-1(r=0.9995)。平均回收率(n=5)人参皂苷Rg1为97.84%,RSD=1.4%;人参皂苷Re为96.43%,RSD=1.6%;人参皂苷Rb1为96.55%,RSD=1.2%。结论方法简便,结果准确,重现性好,可用于洋参口服液的质量控制。     

消渴降糖片定性定量研究

目的 建立消渴降糖片定性定量研究方法.方法 采用薄层色谱法鉴别黄精、甜菊叶、桑椹、山药;高效液相色谱法测定人参皂苷Rb1、Ro的含量.结果 薄层斑点清晰,阴性样品无干扰;人参皂苷Rb1在19.40～97.00 μg·mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 6),平均加样回收率为101.5％(n=6),RSD =2.3％、人参皂苷Ro在5.98～35.88μg·mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为103.6％ (n=6),RSD=1.7％.结论 本方法快速、简便、准确、专属性强、重现性好,可作为消渴降糖片质量控制的方法.     

HPLC法同时测定三七伤药胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1的含量

目的:建立同时测定三七伤药胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为CAPCELLPAK C18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为203 nm,柱温为35℃,流速为1.0 ml/min,进样量为10μl。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的进样量分别在0.207~4.146、0.515~10.293、0.505~10.093μg范围内与各自峰面积呈良好线性关系(r均为0.999 9);精密度试验的RSD<1.0%,稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为99.40%、101.64%、101.36%,RSD分别为2.89%、2.45%、2.52%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确性高、重复性好,可用于三七伤药胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定人参皂苷Rg1、Rh1的含量

目的同时测定提取三七总皂苷后的母液中人参皂苷Rg1、Rh1的含量.方法采用反相高效液相色谱法测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1,Rh1的含量.色谱柱Merck Li Lichro CART(r)C18(125 mm×4 mm,5μm,德国).流动相乙腈-水(1981、1981、4060、1981和1981)用80min的时间梯度洗脱.流速1 ml/min,检测波长为203 nm,柱温35℃.用外标法计算.结果三七总皂苷母液中人参皂苷Rg1的含量为23.07%,平均回收率为100.03%,RSD为0.49%;人参皂苷Rh1的含量为12.05%,平均回收率为98.718%,RSD 0.42%.结论提取三七总皂苷后剩余的母液中人参皂苷Rg1、Rh1的含量仍然很高,有很好的回收利用价值.     

参草宁心颗粒的薄层鉴别及含量测定研究

目的:建立参草宁心颗粒的薄层鉴别与含量测定方法。方法:鉴别采用薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)法,含量测定采用高效液相色谱(high performance liquid chromatchromatography,HPLC)法。结果:实验建立了方中5味药丹参、苦参、炙甘草、地锦草和仙鹤草的薄层鉴别,所建立的方法均分离良好、斑点清晰、阴性无干扰;建立的含量测定方法同时评价了方中丹参、炙甘草、地锦草3味药中的活性成分丹酚酸B、甘草苷、没食子酸,3种成分分别在0.107~1.070,0.119~1.19,0.15~1.5μg范围内呈现良好的线性,回归方程分别为y=793 255x+133 630,y=489 205x+113 434,y=177 863x+69 444,相关系数r分别为0.999 6,0.999 1,0.999 4。精密度、稳定性、重复性实验的RSD值均<3%,加样回收率分别为99.47%,100.44%,100.04%,RSD分别为2.61%,2.34%,2.45%。结论:实验建立的TLC鉴别方法和HPLC含量测定方法均专属性强、重现性好,可用于参草宁心颗粒的质量控制。     

薄层扫描法同时测定Vc银翘片中的3组分含量

目的建立Vc银翘片中扑热息痛、扑尔敏、Vc 3种成分同时定量的分析方法。方法用超声提取 ,以乙酸乙酯∶冰醋酸∶水 (7∶2∶3,V∶V∶V)为展开剂 ,通过双薄层扫描法对Vc银翘片中扑热息痛、扑尔敏和Vc进行同时定量。结果扑热息痛点样量在 10～ 30 μg,扑尔敏在 1～ 3μg,Vc在2 5～ 75 μg呈现良好的线性关系。在此线性范围内它们的回归方程分别是 :y =5 6 0 6× 10 3 x +1 92 9× 10 3 ,r =0 995 8;y =8 0 5 2× 10 3 x - 2 4 76× 10 3 ,r =0 9985 ;y =9 773× 10 3 x +7 6 79×10 2 ,r =0 9992。扑热息痛、扑尔敏、Vc 3种成分的含量分别为 :99 4 % ,10 0 2 % ,98 7%。RSD分别为 4 0 % ,2 4 % ,3 8% ,回收率分别为 99 4 % ,99 1% ,98 4 % ,RSD值分别为 2 8% ,3 2 % ,1 6 %。结论本方法用于Vc银翘片中扑热息痛、扑尔敏、Vc 3种成分的含量测定     

人参皂甙Rb1的肠内菌代谢

通过离体及整体实验观察了人和大鼠肠内菌对人参皂甙Rb₁（G-Rb₁）的代谢。方法：采用薄层色谱（TLC）和电喷雾质谱（ESI-MS）检测G-Rb₁及其代谢产物。结果：离体实验表明,G-Rb₁容易被大鼠和人消化道菌群代谢,随着代谢时间的延长,相继出现Rd, Rg₃/F₂, Rh₂/C-K和Ppd 4种代谢产物。给大鼠ig G-Rb₁ 500 mg.kg^-1后收集4 h和6 h粪,提取G-Rb₁的代谢产物,证明粪中存在Rd和Rg₃/F₂两种代谢产物。结论：G-Rb₁可被人和大鼠肠内菌代谢,其代谢模式为G-Rb₁→Rd→F₂→compound K（C-K）→20（S）protopanaxadiol（Ppd）。     

人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg_3和Rh_2的工艺考察

目的研究人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg3、Rh2的最佳工艺,以适应工业化生产的需要。方法用均匀设计法优化降解工艺条件,采用HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh2的含量。结果最佳降解工艺条件为体积分数60%的乙酸、55℃降解1 h。结论该工艺合理、可行,适用于工业化大生产。     

筋骨胶囊质量标准研究

目的建立筋骨胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对筋骨胶囊中的桂枝、当归、川芎进行了定性鉴别;用HPLC测定制剂中肉桂酸的含量。结果定性鉴别方法专属性强。在16．64～149．76mg·ml^-1范围内进样量与峰面积积分值有良好线性关系．回归方程为Y=2436490．4x＋53730．2,R=0．9995（n=5）。结论本研究建立的TLC和HPLC方法专属性强、灵敏度高、重现性好,可用于筋骨胶囊的质量控制。     

人体食指长、中指长与身高相关关系的研究

目的:探讨人体食指长、中指长与身高的相关关系。方法:对489名男女青年进行了食指长、中指长与身高的测量,并记录相关数据,将测量数据输入计算机中进行回归分析,得出食指长、中指长推测身高的直线回归方程。结果:利用食指长推测身高:男性:y=108.61+8.76x。女性:y=142.13+2.72x;利用中指长推测身高:男性:y=94.85+9.47x;女性:y=129.89+4.08x。结论:人体食指长、中指长与身高存在一定的线性关系。     

人参皂苷Rh2提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶诱导凋亡的敏感性

目的探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)能否提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的敏感性,通过协同作用扩大细胞凋亡信号。方法先用MTT法确定G-Rh2的无毒增敏质量浓度,随后将对数生长的人乳腺癌细胞MCF-7分为4组:control(不加药),G-Rh2(加入10 mg.L-1 G-Rh2),5-FU(加入25 mg.L-1 5-FU),G-Rh2+5-FU组(加入10 mg.L-1 G-Rh2和25 mg.L-15-FU),通过MTT计算联合作用指数,激光共聚焦观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymer-ase,PARP)的剪切情况。结果 MTT结果显示,G-Rh2可导致5-FU诱导的人乳腺癌细胞MCF-7死亡率增加,形态学、细胞周期检测、caspase-3和PARP凋亡蛋白免疫荧光染色结果都显示,G-Rh2+5-FU组可显著提高人乳腺癌细胞MCF-7死亡率,且引起的细胞死亡为细胞凋亡作用。结论 G-Rh2可以提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-FU的敏感性,通过协同作用诱导细胞凋亡。     

人体脚长、脚掌宽与身高相关关系的研究

对489名男女青年进行了脚长、脚掌宽与身高的测量,并记录相关数据,将测量数据输入计算机中进行回归分析,得出脚长、脚掌宽推测身高的直线回归方程,利用脚长推测身高:男性:y=93.55+3.26x,女性:y=130.53+1.41x;利用脚掌宽推测身高:男性:y=130.79+4.18x,女性:y=137.99+2.72x。结果表明,人体脚长、脚掌宽与身高存在一定的线性关系。     

高效液相色谱法测定复方肝泰乐胶囊中维生素B_1、维生素B_2、烟酰胺和苯巴比妥含量

目的建立HPLC同时测定复方肝泰乐胶囊中维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥含量的方法。方法色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相（150mm×4.6mm,4.6μm）。流动相A为乙腈-水-三乙胺（100：900：1,含0.01mol/L庚烷磺酸钠,用冰醋酸调pH值为3.6）,流动相B为乙腈。洗脱程序为0～12min,A100%～70%;12～200min,A70%;流速为1mL/min,检测波长为272nm。结果维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥的保留时间分别约为4.7、10.1、12.4和14.2min,与各自相邻峰的分离度均大于1.5。以峰面积对进样量（μg）线性回归,维生素B1回归方程为y=186.83x＋17.85,线性范围为0.05332～0.34440μg,r=0.9999;维生素B2回归方程为y=402.47x＋12.54,线性范围为0.02511～0.19980μg,r=0.9999;烟酰胺回归方程为y=58.3141x＋206.8,线性范围为0.1641～1.265μg,r=0.9991;苯巴比妥回归方程为y=165.4x＋181.2,线性范围为0.5221～2.0030μg,r=0.9995。维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥回收率分别为100.2%、100.1%、100.2%和100.2%,RSD分别为0.09%、0.09%、0.09%和0.08%。结论本方法精密度、准确度好,操作简便,可用于复方肝泰乐胶囊中维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥含量测定。     

Improvement of Memory in Mice and Increase of Hippocampal Excitability in Rats by Ginsenoside Rg1’s Metabolites Ginsenoside Rh1 and Protopanaxatriol

Ginsenoside Rg1 has been reported to improve cognitive function in many memory-impaired animal models. However, little is known about the bioactivity of its metabolites in the central nervous system in vivo. In the present study, we employed the step through test and electrophysiological approach to investigate the effects of ginsenoside Rg1’s primary metabolite ginsenoside Rh1 and end metabolite protopanaxatriol (Ppt) on learning and memory as well as hippocampal excitability. The behavioral study showed that both ginsenoside Rh1 and Ppt significantly ameliorated memory-impaired models induced by scopolamine in mice. Consistently, the electrophysiological work revealed that ginsenoside Rh1 and Ppt as well as their precursor ginsenoside Rg1 all increased hippocampal excitability in the dentate gyrus of anesthetized rats. These results demonstrated that both ginsenoside Rh1 and Ppt had similar but more potent actions than ginsenoside Rg1 in improving memory and hippocampal excitability, suggesting the role of ginsenoside’s sugar moieties in biological activities is not as necessary as traditionally considered.