环磷酰胺衍生物SLXM-2对小鼠肝癌H_（22）细胞的DNA损伤作用

化合物SLXM-2是一种环磷酰胺衍生物,前期研究已经证实其具有良好的肿瘤抑制作用,并具有较低的毒副作用。但是其作用机制尤其是对细胞DNA的损伤作用仍不清楚。本研究旨在评价SLXM-2对肝癌H22腹水小鼠的生命延长作用与DNA损伤的关系,并探讨可能的分子机制。实验结果证实,SLXM-2能够显著提高肝癌H22腹水小鼠的生命延长率（P〈0.05）。进一步实验表明,SLXM-2能够造成肝癌H22细胞DNA损伤,显著上调γH2AX（Ser139）,p-Chk1（Ser296）,p-Chk2（Thr68）,p-p53（Ser15）,p-p53（Ser20）和p21的蛋白表达,并显著下调p-ATR（Ser428）和p-ATM（Ser1981）的表达（P〈0.05）。总之,SLXM-2对肝癌H22细胞具有显著的抑制作用,分子机制与其能够造成肿瘤细胞DNA损伤有关。     

不同剂量环磷酰胺对小鼠的免疫毒性研究

采用１２,２５,３５ｍｇ／ｋｇｂｗ三个剂量环磷酰胺,经口灌胃给药,连续１８天,测定小鼠的免疫器官的脏体系数,外周血Ｔ淋巴细胞ＡＮＡＥ阳性率,以及碳粒廓清实验的廓清指数。结果表明：ＣＰ在１０ｍｇ／ｋｇｄｗ剂量时,除对ＡＮＡＥ阳性率有明显降低外,对其余两个指标的影响均不明显,而在２５ｍｇ／ｋｇｂｗ,３５ｍｇ／ｋｇｂｗ时,对所试的三个指标有明显降低。     

喜树碱衍生物抗肿瘤活性的初步筛选及部分作用机制探讨

目的：通过体内、外实验筛选喜树碱衍生物的抗肿瘤活性并初步探讨其作用机制。方法：MTT法检测衍生物对肿瘤细胞的抑制率；建立荷瘤小鼠模型测定抑瘤率；采用脾细胞增殖法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的含量，Griess法检测荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞生成NO的含量，放免法测定荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞生成TNF-α的含量，流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期，RT-PCR法检测Grp78和Mrp2 mRNA表达的影响，Western blot检测JNK通路的表达情况。结果：12个衍生物均通过氢谱鉴定，反应线路短，收率较高。衍生物Ⅶ、Ⅷ体外能明显抑制肿瘤细胞增殖，衍生物Ⅷ对荷瘤小鼠具有较强的抑瘤作用，降低荷瘤小鼠NO，升高TNF-α和IL-2，并且呈明显的剂量依赖关系。衍生物Ⅷ能使Grp78，P-JNK mRNA表达明显增加，而CPT组无明显影响，提示衍生物Ⅷ可能激动ER应激反应性凋亡途径。采用血清饥饿法同步化HCTll6细胞，衍生物Ⅷ使细胞周期恢复减慢，引起不可逆的细胞周期阻滞。LLCPK／cMOAT耐药细胞株对CPT产生耐药而对衍生物Ⅷ较敏感。衍生物Ⅷ组能使LLCPK／cMOAT细胞Mrp2 mRNA表达减少，而CPT组对Mrp2表达无明显影响。结论：通过体内外的初步筛选得到的衍生物Ⅷ能高效杀伤肿瘤细胞，可调节机体的免疫功能，诱导ER应激反应性凋亡途径，引起不可逆的细胞周期阻滞，同时增强肿瘤细胞的敏感性，具有进一步研究开发的前景。     

七叶皂苷钠对小鼠肝癌H22移植瘤的抗肿瘤作用机制

目的:通过体内模型研探讨七叶皂苷钠对H22小鼠肝癌移植瘤的抗肿瘤作用机制。方法:采用ICR小鼠H22荷瘤肝癌模型观察七叶皂苷钠抗肿瘤作用,采用Western Blot分析肿瘤组织中相关蛋白的表达变化,通过免疫组化分析肿瘤组织中CD31变化,评价微血管密度。结果:1.4和2.8 mg.kg-1七叶皂苷钠对H22的抑瘤率分别为19.2%,40.7%。免疫组化结果显示,七叶皂苷钠能够显著降低肿瘤内部微血管密度,低高剂量组可分别达到44.1%和48.5%。Western Blot证实,七叶皂苷钠能不同程度下调cyclinD1、cdk2、cyclinE、VEGF、p-Akt等蛋白的表达,抑制p65的核转位。结论:七叶皂苷钠有一定的抗肿瘤作用,其机制可能与阻滞细胞周期,抑制血管新生以及干扰信号转导有关。     

苦参碱对小鼠H22 细胞抗肿瘤作用及其机制研究

目的观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用,探讨其可能的作用机制。方法 MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H22的体外杀伤作用;通过建立动物肿瘤模型,免疫组化法检测其抑瘤率和肿瘤内血管密度,以及瘤体血管内皮生长因子。结果①体外实验显示,1.0、2.0、4.0mg·mL^-1苦参碱对H22肿瘤细胞的生长均有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性,与对照组相比有显著性差异（P〈0.05）。②体内实验显示,苦参碱高、中、低剂量组对小鼠H22实体瘤均有抑制作用,并呈现一定的剂量效应关系,其中苦参碱高剂量组瘤重明显小于空白对照组,高剂量组的抑制作用明显强于中、低剂量组,P〈0.01;③免疫组化结果显示,苦参碱组和环磷酰胺组瘤组织内的VEGF蛋白表达阳性率和平均染色强度均低予对照组,组间有显著差异（P〈0.05）。苦参碱高剂量组MVD明显低于对照组,组间差异性非常显著（P〈0.01）,较环磷酰胺组无显著性差异（P〉0.05）。结论苦参碱能够提高H22肉瘤小鼠生存质量,具有抑制肿瘤新生血管生成的作用,可能是通过降低VEGF蛋白表达来实现的。     

北豆根总碱对环磷酰胺模型小鼠的免疫调节作用

从非特异性免疫功能及特异性免疫功能方面研究了北豆根总碱对环磷酰胺所致的免疫功能低下模型小鼠的免疫调节作用．实验结果表明,北豆根总碱２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ腹腔注射能显著增强模型小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、迟发型超敏反应及增加其外周血淋巴细胞ＡＮＡＥ阳性百分率;北豆根总碱２５ｍｇ／ｋｇ腹腔注射能显著提高模型鼠血清溶血素生成能力．初步机理研究表明,北豆根总碱５０ｍｇ／ｋｇ腹腔注射能显著拮抗环磷酰胺对小鼠胸腺ＤＮＡ含量的抑制作用,提示北豆根总碱可能通过促进ＤＮＡ合成而达到增强免疫功能的作用．     

环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育的毒性作用

目的探讨环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育的毒性作用。方法将受孕大鼠随机分为对照组和给药组(设4个剂量:5、10、15、20mg·kg-1),自动物受孕d8开始,给药组分别给予环磷酰胺,对照组给予等量生理盐水,每日1次,连续给药3d。受孕d20处死孕鼠观察环磷酰胺对胎鼠体表、四肢形态、骨骼和脑形态发育的影响。结果给予环磷酰胺5mg·kg-1组胎鼠体表、四肢形态、骨骼和脑形态未见明显变化;10mg·kg-1体重组胎鼠中脑导水管和左右脑室增宽,大脑半球、腰椎骨、肋骨、肢掌骨发育不全;15mg·kg-1组胎鼠侧脑室扩大、大脑皮质、颞叶、双侧被盖区及结合臂发育不全,枕骨缺如,脑膨出,椎骨裂开,肋骨骨化不全,四肢远端骨未骨化;20mg·kg-1体重组未见成形胚胎。结论环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育有明显的毒性作用。     

脑瘤散对G422脑胶质瘤小鼠的抗肿瘤作用

目的:观察脑瘤散对G422脑胶质瘤小鼠的抗肿瘤作用.方法:将70只小鼠接种C422脑胶质瘤瘤株,次日按体重分层随机分配法分为七组,分别为:模型组、脑瘤散高剂量组、脑瘤散中剂量组、脑瘤散低剂量组、阳性药对照组(CTX组)、脑瘤散低剂量 CTX组和脑瘤散高剂量 CTX组,每组1O只.CTX只于第1日给药1次,模型组每日每只给予0.1ml的生理盐水,脑瘤散连续给药11 d.各组小鼠停药后次日处死,取其肿瘤称重,计算抑瘤率,并对瘤组织进行病理学检查,实验共重复3次.结果:脑瘤散中、高剂量组小鼠瘤重均明显低于模型组(P<0.05).脑瘤散与CTX联合用药的两组抑瘤率均高达90%以上,并高于CTX组.结论脑瘤散对小鼠G422脑胶质瘤的生长、浸润具有明显抑制作用,且可增加化疗药物的疗效.     

乌贼墨制剂对环磷酰胺致小鼠毒性损伤的缓解效应

目的本文旨在探讨乌贼墨制剂(SIP)对小鼠大剂量环磷酰胺(CP)化疗损伤的保护功效。方法昆明小鼠(22±3)g随机分组,试验组每天灌胃给予SIP(1.0、1.5和2.0g.mL-1)0.5mL.只-1,共15d,并腹腔注射环磷酰胺0.45g.kg-1,共3次。试验结束后,检测外周血象、脏器指数、骨髓DNA含量、血清过氧化氢酶(CAT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)等活性及尿素氮(BUN)含量,并与模型组比较。结果大剂量环磷酰胺腹腔注射对外周血像、骨髓细胞以及血清中若干酶类造成了严重的影响;SIP却能显著地缓解CP对以上所检测指标所造成的毒性损伤。结论乌贼墨制剂可显著缓解大剂量化疗药物环磷酰胺对小鼠正常组织所造成的毒性损伤。     

牛磺酸对化疗后S_(180)荷瘤小鼠增效减毒作用的研究

目的研究牛磺酸对环磷酰胺化疗后S180荷瘤小鼠的增效减毒作用。方法取健康昆明小鼠50只,将S180肿瘤细胞种植于小鼠右腋窝皮下,建立移植性肿瘤模型。实验分为五组。腹腔注射给药,每日1次,连续8 d。观察不同剂量牛磺酸(Tau)与环磷酰胺(CTX)联合用药的抑瘤率;脾指数和胸腺指数;检测骨髓有核细胞数和外周血白细胞数;MTT法检测NK细胞杀伤活性和脾淋巴细胞增殖活性。结果与模型组比较,CTX组抑瘤率为56.65%,CTX+Tau低、中、高剂量组小鼠的抑瘤率分别为60.10%,72.41%,86.70%,有统计学意义(P<0.01);与CTX组比较,CTX+Tau各剂量组外周血白细胞数,骨髓有核细胞数,脾指数,胸腺指数,NK细胞活性,淋巴细胞增殖活性增高。尤其是CTX+Tau中、高剂量组作用显著(P<0.05)。结论牛磺酸与环磷酰胺联合用药具有增效减毒作用。     

Comparative effects of ASTA Z 7557 (INN mafosfamide) and cyclophosphamide on hematopoiesis in mice

Summary Acute effects of ASTA Z 7557 and Cyclophosphamide (Cy) on pluripotential (CFU-S), granulocytic (CFU-C), early erythroid (BFU-E) and late erythroid (CFU-E) progenitor cells in the bone marrow, as well as on RBC and WBC, were compared in F₁ (CBA × C 57 BL) female mice. Dose-survival curves of both agents for CFU-S and CFU-C were found to be exponential, indicating that the effects of the drugs have no cell cycle dependency. At equimolar doses, marrow CFU-S and CFU-C contents appeared to decrease more rapidly with increasing doses of ASTA Z 7557 than with those of Cy. After a single dose of 200 mg/kg of each drug (= 50% LD₁₀), there was greater initial suppression of CFU-S, CFU-C, BFU-E and CFU-E in the Cy-treated animals than in ASTA Z 7557-treated mice. In both groups, however, the WBC had their nadir on Day 3 after treatment, followed by a return to normal by Day 8. In ASTA Z 7557-treated animals, the recovery of CFU-S, CFU-C and BFU-E was also completed by Day 8 after treatment. In Cy-treated mice, however, complete recovery of these cells was achieved on Day 15. Results indicate quantitative rather than qualitative differences between the marrow toxicities of ASTA Z 7557 and Cy in mice. Quantitative differences could be due to different pharmacokinetic properties of the agents, since Cy is excreted in partially unmetabolized form, and it might be that this inactive part of the agent grew with increasing drug doses.     

氧化苦参碱协同增加环磷酰胺诱导小鼠肝毒性的研究

环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)是治疗多种肿瘤的一线化疗药,但过量应用可引起肝损伤。本文旨在探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)与CPA的联合给药是否会加剧其肝毒性,并初步阐明其机制。小鼠单独给药OMT(100 mg·kg^-1)不同时间后,检测肝组织Cyp2b10 mRNA和CYP2B10蛋白表达。小鼠灌胃(intragastric adminis‐tration,ig)给药不同剂量OMT,同时隔天腹腔注射(intraperitoneal injection,ip)给予CPA(200 mg·kg^-1),10天后,检测血清谷丙/谷草转氨酶(alanine/aspartate aminotransferase,ALT/AST)活力,记录小鼠死亡率,检测肝组织Cyp2b10mRNA水平,并分析ALT/AST活力、死亡率和Cyp2b10 mRNA水平间的相关性。本文中动物福利和实验过程均遵循上海中医药大学实验动物伦理委员会的规定。结果发现,OMT单独给药可以显著提高小鼠肝组织中Cyp2b10mRNA和CYP2B10蛋白表...     

左归丸对环磷酰胺诱导小鼠白细胞降低的保护作用及其机制

目的探讨左归丸对环磷酰胺诱导小鼠白细胞降低的保护作用及其可能机制。方法♂昆明种小白鼠120只,随机分为5组,每组24只。空白对照组和模型组给予NS,治疗组分别给予左归丸1.8、3.65、.4 g.kg-1(Ⅰ~Ⅲ组),ig,连续10 d;于d 4~6空白对照组给予NS,模型组和Ⅰ~Ⅲ组给予环磷酰胺50 mg.kg-1,ip,qd。各组小鼠中的12只于给药前1 d及d 71、1、15尾静脉取血计数WBC,其余12只小鼠于d 11检测骨髓有核细胞计数(BMC)、脾脏指数和胸腺指数、脾集落形成单位(CFU-S)、血清粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和白细胞介素6(IL-6)活性。结果试验d 7时各组小鼠的WBC均明显低于空白对照组,在d 11、15时,治疗的WBC最高比模型组分别提高93%和40%(P<0.01)。d 11时,治疗组的BMC、脾脏指数、CFU-S、G-CSF最高比模型组分别提高92%、83%、85%、45%和45%(P<0.01)。结论左归丸对环磷酰胺所致的白细胞降低具有保护作用,该作用可能与升高血清G-CSF活性有关。     

原花青素对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 探究原花青素（PC）对环磷酰胺（Cy）致免疫抑制小鼠的免疫调节作用及其对白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 选用40只ICR小鼠,随机均分为正常对照组、Cy模型组、PC高剂量组（100 mg/kg）和PC低剂量组（80 mg/kg）。灌胃给药,7 d后测定各组小鼠胸腺（脾脏）指数、血清溶血素水平、迟发型超敏反应性;酶联免疫吸附测定（ELISA）检测外周血IL-10和TNF-α的表达;RT-qPCR测定小鼠脾脏TNF-α和IL-10 mRNA的表达。结果 PC能够提高小鼠胸腺、脾脏指数,一定程度恢复免疫抑制小鼠的迟发型超敏反应能力,提高血清溶血素含量;同时PC也可降低外周血IL-10的表达,升高TNF-α的表达;降低脾细胞IL-10 mRNA的水平,升高TNF-α mRNA的水平。结论 原花青素可以提升机体免疫功能,其调节机制可能是通过对细胞因子TNF-α和IL-10的调节来完成的。     

利妥昔单抗联合环磷酰胺治疗特发性膜性肾病疗效及对免疫功能的影响

目的 探讨利妥昔单抗联合环磷酰胺对特发性膜性肾病（IMN）患者的临床疗效。方法 选取2018年8月—2020年8月石家庄市人民医院129例IMN患者作为研究对象,根据纳入患者的治疗方案将患者分为环磷酰胺组、利妥昔单抗组和利妥昔单抗与环磷酰胺联用组（简称联用组）,环磷酰胺组予以注射用环磷酰胺治疗,静脉滴注,每次0.8～1.0 g,每月1次;治疗6个月后达到临床完全缓解或部分缓解,继续治疗3个月（累积剂量＜10 g）,治疗6个月无效者停用。利妥昔单抗组予以利妥昔单抗注射液,静脉滴注,375 mg·m^-2,每周1次。联用组予以利妥昔单抗注射液及注射用环磷酰胺治疗,用法用量分别同单用组。3组均持续治疗6个月。比较3组疾病缓解率、IMN相关指标［24 h尿蛋白定量、抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体、血肌酐］、T淋巴细胞亚群分布、尿中攻膜复合物（C5b-9）、免疫球蛋白G4（IgG4）、复发率及感染并发症发生率。结果 联用组总有效率（81.40%）较环磷酰胺组、利妥昔单抗组（53.49%、60.47%）显著升高（P＜0.05）。治疗后,3组24 h尿蛋白定量、抗PLA2R抗体、尿C5b-9、IgG4水平均较本组治疗前显著下降（P＜0.05）;且治疗后联用组24 h尿蛋白定量、抗PLA2R抗体、尿C5b-9、IgG4水平较环磷酰胺组、利妥昔单抗组显著降低（P＜0.05）。治疗后,3组CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均较本组治疗前显著下降（P＜0.05）,CD8⁺显著升高（P＜0.05）,且治疗后联用组CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺较环磷酰胺组、利妥昔单抗组显著降低（P＜0.05）,CD8⁺较环磷酰胺组、利妥昔单抗组显著升高（P＜0.05）。联用组12个月复发率（2.33%）较环磷酰胺组、利妥昔单抗组（20.93%、18.60%）显著降低（P＜0.05）;3组感染并发症比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 利妥昔单抗联合环磷酰胺可有效缓解IMN病情,并改善患者肾功能、免疫功能,且安全可靠。     

榄香烯联合氟尿嘧啶对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的观察榄香烯联合氟尿嘧啶（5-FU）对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法小鼠左腋窝下皮下种瘤造实体瘤模型。将35只荷瘤小鼠等分为5组,分别以榄香烯高剂量（100mg·kg^-1）、榄香烯低剂量（50mg·kg^-1）、5．FU（20mg·kg^-1）、榄香烯低剂量（50mg·kg^-1）联合5．FU（20mg·k^-1）及生理盐水（0．2mE）处置10d,记录各组小鼠治疗期间体质量及移植瘤的体积并计算抑制率,HE染色法观察各切片中瘤组织的差异。结果荷瘤小鼠经药物处置5d后,各用药组瘤体积较生理盐水对照组均有缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）,联合组优于单独用药组;对小鼠体质量影响,联合组及5-FU组均大于榄香烯组及对照组;组织切片中可见各用药组对瘤组织不同程度的破坏。结论榄香烯能有效地抑制H22肿瘤的生长,可以作为化疗药5-Fu的辅助药物。