小儿呼吸道疾病CVB、CMV和EBV感染状态的研究

目的：探讨柯萨奇病毒B组（CVB）、巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）在小儿呼吸道感染性疾病中的感染状态及其检测的临床意义。方法：290例患儿,男158例,女132例,年龄6个月－12岁。以ELISA法检测CVB抗原（CVB－Ag) IgM抗体（CVB－IgM),CMV-IgM,EBV-IgM。结果（1）病毒感染率,上呼吸道感染（上感）、支气管炎、肺炎CVB感染率均明显高于同期住院的非感染组（P＜0．01）;肺炎组CMV阳性率高于上感和非感染组（P＜0．05）。各组CVB感染明显高于CMV和EBV的感染率（P＜0．01）。（2）3种病毒交叉感染率;上感、支气管炎和肺炎存在交叉病毒阳性情况,以CVB合并其他病毒感染多见。肺炎患儿交叉病毒感染率高于上感（P＜0．05）。（3）肺炎病毒感染状态与临床病程的关系。单纯CVB感染性肺炎的病程较全部志物阴性的肺炎患儿长（P＜0．01）,但较合并多种标志物阳性的肺炎短（P＜0．01）。多种病毒阳性的肺炎,其年龄相对较小,发热时间和病程均较单纯CXVB感染的肺炎长,结论：CVB感染在小儿呼吸道感染性疾病中最常见。要注意多种病毒阳性的肺炎。     

RSV下呼吸道感染患儿辅助性T细胞亚群Th1／Th2及相关因子的研究

目的：探讨辅助性T淋巴细胞Th1/Th2亚群及其相关细胞因子IFN－γ,IL－4在呼吸道合胞病毒（RSV）下呼吸道感染患儿发病机制中的作用。方法：用单克隆抗体双色免疫荧光FITC／PE双标记,流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞（PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其Th1亚群CD4^ ,CD45RA^ ,Th2亚群CD4^ ,CD45RO^ 的表达,并用ELISA方法同时检测患儿血清中细胞因子IFN－γ,IL－4水平。同期检测15例年龄,性别无差异的健康婴儿为对照。结果：RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4^ 明显低于对照组（P＜0．05）,Th1细胞CD4^ CD45RA^ 明显下降（P＜0．05）,Th2细胞CD4^ ,CD45RO^ 虽有下降,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）,Th1/Th2比值与对照组相比明显降低（P＜0．05）,RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN－γ,IL－4水平均有降低,以IFN－γ水平下降最为明显（P＜0．01）,IFN－γ／IL－4比值降低（P＜0．05）,结论：婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为Th1及其功能下降,Th2及其功能对增强,Th1/Th2的失衡是导致该病发生Th2样反应的重要免疫机制。     

住院儿柯萨奇病毒B组感染状况的分析

目的：分析近3年院内柯萨奇病毒B组感染状况,认识柯萨奇病毒B组与小儿疾病的内在关系。方法：观察了796例病儿,其中上呼吸道感染218例、肺炎179例、哮喘106例、心肌炎155例、紫癜19例,其他疾病89例,采用ELISA方法检测柯萨奇病毒B组（CVB）的抗原（CVB－Ag)和抗体IgM(CVB-IgM)。结果：（1）上呼吸道感染组和肺炎组CVB阳性率分别是47．25％和48．04％,两组间无统计学差异;（2）哮喘、心肌炎和紫癜儿CVB阳性率分别是62．265、61．25％和68．42％,三组间比较无统计学差异,但CVB阳性率均高于上呼吸道感染组和肺炎组（P＜0．05）;（3）其他疾病组和健康儿CVB感染发生率均低（分别是15．73％和3．33％）,两组间无差异。结论：CVB感染与小儿多种疾病相关,尤其应该重视研究CVB感染与哮喘、病毒性心肌炎和过敏性紫癜发病的内在联系。     

哮喘患者白细胞介素—10、γ—干扰素水平与IgE关系的研究

目的：了解哮喘患者白细胞介素－10、γ－干扰素（IFN－γ）水平与IgE生成的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测30例哮喘患者和20例健康人外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液中IL－10和IFN－γ的含量以及血浆中IL－10、IFN－γ和IgE的水平,并进行相关性研究。结果：哮喘组PBMC培养上清液中IL－10与IFN－γ含量显著低于对照组（P＜0．001,P＜0．01）。哮喘组血浆中IL－10、IFN－γ含量显著低于对照组（P＜0．001,P＜0．05）,血浆IgE含量显著高于对照组（P＜0．001）。哮喘组患者血浆中IL－10、IFN－γ含量和IgE浓度呈负相关（r1=-0.31,r2=-0.50）。结论：IL－10、IFN－γ在哮喘患者IgE的产生过程中起抑制作用。     

地塞米松对狼疮性肾炎患者外周全血培养细胞IL-12,IFN-γ分泌水平的影响

目的：探讨狼疮性肾炎（LN）患者外周循环IL－12，IFN－γ分泌水平的变化，以及肾上腺皮质激素对其分泌的影响。方法：选取16例活动性LN患者和10例正常人，采集静脉血标本分空白组，LPS／PHA刺激组及LPS／PHA＋DXM组作体外全血细胞培养，然后应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清IL－12，IFN－γ分泌水平，经扣除血浆基础细胞因子水平后作为该例标本的IL－12或IFN－γ分泌量。结果：LN患者的全分泌水平，经扣除血浆基础细胞因子水平后作为该例标本的IL－12或IFN－γ分泌量。结果：LN患者的全血培养细胞IL－12及IFN－γ的分泌量明显高于正常人（IL－12：P＜0．005，IFN－γ：P＜0．001）；而且两者均与系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLEDIA）呈不同程度的正相关关系；DXM对IL－12及IFN－γ分泌均有显著的抑制作用（均P＜0．01），而且在LN患者抑制作用更明显。结论：IL－12及IFN－γ分泌上调在LN的发病中起重要作用，抑制IL－12及IFN－γ的产生可能是它治疗LN中的机制之一。     

CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的：探讨CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法：将卵巢癌细胞株（A2780)分成两组,实验组采用CD3AK＋A2780,对照组采用LAK＋A2780,分别共育24h并于作用前和作用后每4h收集一次上清液以检测TNF－α和IFN－γ分泌水平。结果：实验组和对照组共育前,后上清液中均有TNF－α和IFN－γ分泌,但共育后TNF－α和IFN－γ分泌水平显著高于共育前（P＜0．01）,且同一效靶比的实验组TNF－α和IFN－γ分泌水平明显高于对照组（P＜0．05）。结论：CD3AK细胞可通过分泌细胞因子TNF－α和IFN－γ杀伤肿瘤细胞。     

SLE患者血清IL—4、IFN—γ水平测定及意义

目的：通过检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE)患血清细胞因子细胞介素－4（interlukin-4,IL-4)，γ－干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定SLE患和健康志愿血清IL－4和IFN－γ水平。结果：（1）SLE活动组血清IL－4水平和IL－4／IFN－γ值明显升高，与非活动组、对照组比较有显性差异（P＜0．001）。（2）血清IFN－γ水平3组（SLE活动组，非活动组和对照组）间比较差异无显意义（P＞0．05）。（3）SLE患激素治疗后血清IL－4水平明显降低。结论：IL－4、IFN－γ作为区分CD4T细胞亚群的指标之一，间接反映了Th1,Th2细胞活化状态；SLE患血清IL－4水平，IL－4／IFN－γ值明显升高，且与病情活动性相关；IFN－γ水平无明显变化，说明活动性SLE患存在Th2细胞优势活化状态，破坏了体人Th1/Th2正常平衡状态。血清IL－4水平可作为SLE病情活动性监测指标之一，并可作为疗效判断指标之一。寻找有效方法调节SLE患血清IL－4水平，从而调节体内Th1-Th2平衡，将为治疗SLE开辟一条新途径。     

结缔组织病患儿B19病毒感染的意义

目的：研究我国小儿常见结缔组织病患B19病毒感染的状况及其临床意义。方法：用巢式PCR法对95例小儿常见结缔组织病患进行B19－DNA检测，对其中50例患同时进行B19主要衣壳蛋白抗IgM(B19-VP2-IgM）检测。结果：病例组95例，B19－DNA阳性34例（36％），健康对照组50例，B19－DNA阳性2例（4％）；病例组B19－DNA阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。病例组B19－VP2－IgM检测50例，阳性11例（22％），健康对照组B19－VP2－IgM均为阴性；B19－VP2－IgM阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。5种疾病间B19－DNA及B19－VP2－IgM阳性率无显差异（P＞0．05）。50例患B19－DNA，B19－VP2－IgM同时检测结果：10例B19－DNA，B19－VP2－IgM均阳性，1例仅B19－VP2－IgM阳性，7例仅B19－DNA阳性。病例组B19阳性率为37％（35／95）。结论：我国结缔组织疾病患儿有较高的B19感染率。B19与小儿结缔组织病密切相关，可能是导致这些疾病的主要病原体之一。     

乙型病毒性肝炎患者外周血T辅助细胞1，2型细胞因子含量的测定及临床意义

目的：探讨Th1,Th2细胞因子在乙型肝炎发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例急性乙肝患者,35例慢性乙肝患者及12例正常对照者外周血单个核细胞（PBMC）在植物凝血素（PHA）和脂多糖（LPS）刺激下,产生白细胞介素－10（IL－10）,γ-干扰素（IFN－γ）及白细胞介素－12（IL－12）的水平。结果：（1）所有患者在PBMC培养上清液中,3种细胞因子的水平均显著高于正常对照（P均＜0．05）,与慢性乙肝组相比,急性乙肝组IL－10较低（P＜0．01）,而IFN－γ,IL－12较高（P＜0．05）,慢性乙肝轻,中,重度3组间呈现重度＞中度＞轻度,但是差异无显著性（P均＞0．05）,（2）IL－12,IFN－γ水平与血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及总胆红素（TBIL）呈正相关（r=0.6,0.7,p均＜0．01,r=0.6,0.6,P均＜0．05）;而与病毒含量呈负相关（r=-0.75,-0.73,P均＜0．05）,IL－10与ALT,TBIL无相关性（r=0.03,0.05,P均＞0．05）,（3）Th2/Th1比值,与正常相比,慢性患者较高,急性患者较低,差异均有显著性（P＜9．0．05）;急性患者明显低于慢性患者（P＜0．05）,慢性轻度组高于慢性中,重度组（P＜0．05）,而后二组间无明显差别（P＞0．1）。结论。Th2细胞因子与HBV感染的慢性化有关,当Th1型细胞因子占优势时,则倾向于发生急性自限性乙型肝炎,Th1细胞因子与肝组织的炎症活动相关。并且有利于病毒清除。     

拉米夫定对慢性乙型肝炎患者PBMC分泌IFN—γ和IL—10的影响

目的 动态观察在拉米夫定治疗慢性乙型肝炎（CHB）中对患者外周血单核细胞（PBMC）培养上清中IFN－γ、IL－10的影响。方法 选取接受拉米夫定治疗的CHB患者26例，分别在治疗前、治疗后1、3、6、9个月分离外周血单核细胞，在rHBcAg刺激下培养72h，ELISA法检测上清中IFN－γ、IL－10含量。结果 未经治疗的CHB患者IL－10水平明显高于正常对照组（P＜0．01），IFN－γ生成量无显著差异（P＞0．05）。拉米夫定治疗后各时间点，IFN－γ量较正常对照组和治疗前明显升高（P＜0．05），而IL－10量减少，在治疗后第1、9月与正常对照组比较无明显差异（P＞0．05）。完全应答组和部分应答组IFN－γ生成量均较治疗前高（P＜0．05），而IL－10的生成量仅在完全应答组降低明显（P＜0．05）。结论 对拉米夫定治疗发生完全应答的CHB患者，其Th1细胞应答增强，Th2细胞应答减弱。     

呼吸道合胞病毒引起的下呼吸道感染中血清IL-4、IL-12水平的相关性

目的：探讨IL－4和IL－12在呼吸道合胞病毒（RSV）引起的下呼吸道感染中所起的作用。方法：①用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法（APAAP）检测出30例RSV抗原阳性患儿；②应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测患儿和正常儿童血清中IL－4、IL－12水平进行相关分析。结果：治疗前RSV下呼吸道感染患儿血清IL－4水平显著升高，IL－12水平显著降低，与对照组比较有统计学意义（P＜0．05）。②治疗后病情好转患儿的IL－4水平下降IL－12水平升高，与正常对照无显著性差别（P＞0．05）。③血清IL－4、IL－12之间有显著负相关关系（r=-0.432,P＜0．05）。结论：RSV下呼吸道感染存在Th1/Th2功能紊乱，主要表现Th2细胞功能亢进，IL－4、IL－12参与了RSV下呼吸道感染时的免疫病理机制。     

吸烟大鼠肺泡灌洗液白细胞介素—2的研究

目的：动态了解吸烟大鼠肺泡灌洗液白细胞介素－2水平，探讨吸烟大鼠存在细胞免疫受损状况。方法：定量ELISA双抗体夹心法测定连续被动吸烟1月及2月的SD大鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)内白细胞介素－2（IL－2）的水平。结果：A组内吸烟1月大鼠的BALF IL－2水平明显低于对照组B中相应时点大鼠（P＜0．05），A组内吸烟2月大鼠的BALF IL－2水平亦明显低于对照组B中相应时点大鼠（P＜0．01）。且B组内，吸烟2月的大鼠较吸烟1月大鼠IL－2水平下降得更低（Ｐ＜0．05）。结论：吸烟组大鼠存在细胞免疫功能下降的状态，且随着吸烟时间的延长表现得更为显。     

口服抑毒高干产液对慢性乙型肝炎患者Th1／Th2细胞因子的调节作用

目的：研究抑毒调平液对慢性乙型肝患者Th1/Th2细胞因子的影响。方法：60例慢性乙型肝炎（中度）患者按随机双盲原则分为治疗组、对照组（每组30例）。两组分别口服抑素调平液或安慰剂。收集治疗前，治疗后停药时及停药3月末空腹血清标本，用酶联免疫吸附法检测细胞因子白细胞介素－2、白细胞介素－4、白细胞介素IL－2、IFN－γ、IL－12的水平及IFN－γ／IL－4明显低于正常人（P＜0．05），IL－4的含明明显于正常人（P＜0．05），治疗组与对照组患者间上述各项指标比较均无明显差异（P＞0．05）；治疗后停药时，停药3月末治疗组IL－2、IL－12、IFN－γ、IFN－γ／IL－4的值持续增加（P＜0．05），IL－4持续下降（P＜0．05），而对照组无明显变化（P＞0．05）。结论：抑毒调平流上调血清中IL－2、IL－12、IFN－γ的含量及IFN－γ／IL－4的比值，调IL－4的代名词，促使Th1/Th2分泌的细胞因子比值恢复平衡，至少维持治疗结后3个月。     

肺炎支原体特异性抗体的检测及临床应用

目的 对呼吸道感染患者进行肺炎支原体（Mp）检测，以期协助临床早诊断、早治疗。方法 对490例呼吸道感染者同时作冷凝集试验并用间接免疫荧光法检测抗－Mp－特异性抗体（IgG、IgM）。结果 490例呼吸道感染者，检出Mp特异性抗体阳性90例，阳性率18．4％。＜3岁、－6岁、－14岁、＞14岁4个年龄组Mp特异性抗体阳性率分别为8．1％（12／148）、23．6％（44／186）、31．0％（31／100）、5．3％（3／56）。在93例临床诊断为Mp感染的病例中，抗－Mp－IgG阳性59例，敏感性63．4％，抗－Mp－IgM阳性80例，敏感性86．0％，冷凝集试验阳性43例，敏感性46．2％，抗－Mp－IgM敏感性较冷凝集试验高（P＜0．05）。结论 间接免疫荧光法检测血清Mp抗体可作为早期诊断Mp感染的指标之一。     

先天性心脏病与柯萨奇病毒B3,B4感染的关系

采用配对病例对照研究，探讨先心病与柯萨奇病毒B3、B4感染的关系，结果显示：病例组与对照组患儿CVB3、CVB4．IgG抗体阳性率分别为59．3％、54．3％和53．6％、45．7％，差异天显著性（P值均＞0．05）；经单因素和多因素回归分析均未发现CVB3、CVB4感染与先心病有病因学联系（P＞0．05）     

活动性肺结核患者肺泡灌洗液中细胞因子的水平变化及意义

目的：探讨活动性肺结核患者肺泡灌洗液（ BALF）中细胞因子的水平变化及其临床意义。方法所有患者采用抗结核标准化方案治疗,86例活动性肺结核患者根据临床疗效分为治愈组（51例）和未治愈组（35例）。分别于治疗前后行肺泡灌洗术（ BAL）,采用酶联免疫吸附法（ ELISA）检测86例活动性肺结核患者（活动组）、30例非活动性肺结核患者（非活动组） BALF中γ干扰素（ IFN－γ）、白细胞介素（ IL）－10、IL－12、IL－35水平,比较不同病情、痰菌情况及临床疗效者细胞因子水平的变化。结果活动组BALF中IFN－γ、IL－10、IL－12、IL－35水平明显高于非活动组（P＜0．05）。活动组菌阴、菌阳各细胞因子水平均显著高于非活动组（P＜0．05）,且菌阳患者IFN－γ、IL－12、IL－35水平均明显高于菌阴患者（ P＜0．05）。治疗后,治愈组患者IFN－γ、IL－12、IL－35水平均明显低于未治愈组（P＜0．05）,两组IL－10水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论活动性肺结核患者BALF中IFN－γ、IL－12、IL－35水平明显升高,与病灶的活动性、病情及疗效密切相关。     

小儿咳嗽变异性哮喘与肺炎支原体感染关系研究

目的：探讨小儿咳嗽变异性哮喘与肺炎支原体感染之间的关系。方法：将64例咳嗽变异性哮喘患儿,随机分为观察A组与B组,并选择32例普通呼吸道感染患儿作对照（C组）,全部患儿均予以MP—IgM检查,比较三组患儿的MP阳性率;A组、B组均常规应用止咳解痉药治疗,但A组同时加用红霉素及阿奇霉素,1月后评价两组疗效。结果：咳嗽变异性哮喘患儿组的MP-IgM阳性率35．9％（23／64）明显高于普通呼吸道感染患儿组的12．5％（4／32）,差异显著（P〈0．05）;应用抗支原体感染药物的A组l临床有效率90．6％明显优于B。组的68．8％,差异显著（P〈0．05）。结论：肺炎支原体感染可诱发小儿咳嗽变异性哮喘的发生,MP—IgM检测可常规应用,加用抗肺炎支原体药物治疗可显著提高临床疗效。     

特发性肺纤维化患者血清CC16和γ干扰素水平的变化及意义

目的：探讨特发性肺纤维化（ IPF）患者血清CC16、γ干扰素（ IFN－γ）水平的变化及意义。方法选取经临床确诊的IPF患者30例作为观察组，另取30例健康体检者作为对照组。用酶联免疫吸附试验法检测观察组和对照组血清CC16、IFN－γ水平，同时对观察组患者行肺功能检查。比较两组血清CC16、IFN－γ水平，观察观察组血清CC16水平与IFN－γ水平的相关性，以及血清CC16、IFN－γ水平与肺功能指标的相关性。结果观察组血清CC16水平明显低于对照组（ P＝0．000），血清IFN－γ水平明显高于对照组（ P＝0．000）；观察组血清CC16水平与IFN－γ水平呈显著负相关（rs ＝－0．998，P＝0．000），血清CC16水平与肺活量占预计值百分比（VC％pred）、一氧化碳弥散量占预计值百分比（DLCO％）均呈显著正相关（rs ＝0．880，P＝0．000；rs ＝0．922，P＝0．000），血清IFN－γ水平与VC％pred、DLCO％无显著相关性（rs＝0．337，P＝0．069；rs ＝0．286，P＝0．125）。结论CC16可能通过调控IFN－γ参与IPF发病，检测血清CC16、IFN－γ可用于IPF的辅助诊断，且血清CC16水平可作为判断肺纤维化程度的生物标志物。     

轻度慢性乙肝患者拉米夫定治疗前后细胞因子的临床研究

目的：探讨拉米夫定治疗前后轻度慢性乙肝患者血清白介素－2（IL－2）、γ－干扰素（IFN－γ）、白介素－4（IL－4）、白介素－10（IL－10）水平变化及其临床意义。方法：应用ELISA法检测20例经拉米夫定治疗的轻度慢性乙肝患者血清中的IL－2、IFN－γ、IL-4、IL－10水平，并对治疗前后进行比较。结果：拉米夫定治疗前后患者血清IL－2、IFN－γ、IL－4、IL－10水平差异均无统计学意义（P＞0.05)。中、低拷贝的HBV－DNA与高拷贝的HBV－DNA两组患者血清IL－2、IFN－γ、IL－4、IL－10水平差异均无统计学意义（P＞0.05)。IL－2与IFN－γ水平呈正相关（P＜0.001)。结论：轻度慢性乙肝患者血清IL－2、IFN－γ、IL－4、IL－10水平经拉米夫定治疗前后无明显变化。轻度慢性乙肝患者血清IL－2、IFN－γ、IL－4、IL－10的表达与病毒复制消长无相关关系。     

ELISA法检测IgM抗体诊断小儿肺炎支原体感染的价值

目的：探讨IgM抗体检测诊断小儿肺炎支原体感染的价值。方法：对以呼吸道感染收治的102例临床诊断MP感染住院患儿,随机选取临床诊断非MP感染住院呼吸道感染患儿102例作对照,采用酶联免疫吸附试验进行血清MP—IgM抗体检测。结果：MP感染组MP—IgM阳性率（81．4％）明显高于非感染组（8．8％）,P〈0．05,差异有显著性。3个月～1岁组呼吸道感染MP—IgM阳性率低于另外3个年龄组,P〈0．05,差异有显著性;1～3岁组、3～6岁组及6-12岁组的MP—IgM阳性率相当,均无统计学意义（P〉0．05）。结论：ELISA法检测MP—IgM的结果有较高的灵敏性和特异性,可以MP感染的早期诊断;且MP感染的发病有低龄化趋势。